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一株高效溶磷菌株的筛选及对亚麻促生效应的研究

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微生物学杂志 2025年第1期45卷 59-67页

作者：胡云龙陈文晶徐伟慧王志刚齐齐哈尔大学生命科学与农林学院黑龙江齐齐哈尔161006 黑龙江省农业微生物制剂产业化技术创新中心黑龙江齐齐哈尔161006 寒区麻及制品教育部工程研究中心黑龙江齐齐哈尔161006

溶磷菌能够显著提升土壤中可溶性磷含量,促进作物生长,增加肥力。从工业大麻根际土壤中进行溶磷菌筛选,通过测定溶磷量、发芽率、发芽势筛选出一株高效溶磷菌并对其进行鉴定,同时对其吲哚乙酸(indole acetic acid,IAA)分泌量以及对亚麻... 详细信息

溶磷菌能够显著提升土壤中可溶性磷含量,促进作物生长,增加肥力。从工业大麻根际土壤中进行溶磷菌筛选,通过测定溶磷量、发芽率、发芽势筛选出一株高效溶磷菌并对其进行鉴定,同时对其吲哚乙酸(indole acetic acid,IAA)分泌量以及对亚麻生长的影响进行测定。结果显示,筛选得到的JX1菌株经鉴定为Klebsiella sp.,其溶磷能力较强且具有功能多样性,最大溶磷量为181.70 mg/L,能显著提高亚麻种子发芽势与亚麻幼苗总根长,具有IAA分泌能力,其最大分泌量为49.94 mg/L,亚麻经JX1菌株浇灌后,能显著提升其株高、地下部干鲜重、总根长、根表面积、根体积与直径部具有较好促生效果。本研究通过筛选得到的菌株JX1(Klebsiella sp.)具有较好的溶磷以及分泌IAA的能力,能够有效促进亚麻根系生长,优化根系的形态与组成,提高亚麻根系对水分和营养的吸收利用,丰富了亚麻专用微生物肥料的高效菌株资源。

关键词：溶磷亚麻根系吲哚乙酸(IAA) 促生效应

大麻二酚对脂多糖诱导的小鼠乳腺上皮细胞炎症反应和凋亡的抑制作用

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中国畜牧兽医 2025年第1期52卷 60-69页

作者：常欣欣黄鑫范港杨佳欣张伟伟杨清竹田哲齐齐哈尔大学生命科学与农林学院齐齐哈尔161006 齐齐哈尔大学寒区麻及制品教育部工程研究中心齐齐哈尔161006 黑龙江省农用生物制剂产业化协同创新中心齐齐哈尔161006

[目的]研究大麻二酚(CBD)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠乳腺上皮细胞(HC11)炎症反应及细胞凋亡的影响。[方法]试验将HC11细胞分为对照组、LPS组和不同浓度CBD+LPS共处理组(CBD浓度分别为2、4、6μmol/L)。对照组细胞仅加入培养液,LPS组加入LP... 详细信息

[目的]研究大麻二酚(CBD)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠乳腺上皮细胞(HC11)炎症反应及细胞凋亡的影响。[方法]试验将HC11细胞分为对照组、LPS组和不同浓度CBD+LPS共处理组(CBD浓度分别为2、4、6μmol/L)。对照组细胞仅加入培养液,LPS组加入LPS处理,CBD+LPS共处理组用不同浓度CBD预处理1 h后加入LPS,24 h后收集各组细胞样品。利用ELISA法检测细胞中炎症因子含量;使用实时荧光定量PCR、Western blotting分别检测细胞炎症因子及核因子κB(NF-κB)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路相关基因mRNA和蛋白的表达水平;通过AnnexinV-FITC/碘化丙啶(PI)和JC-1染色法分别检测细胞凋亡率和线粒体膜电位水平。[结果]与对照组相比,LPS组细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6含量及mRNA表达水平均极显著或显著升高(P能抑制NF-κB和MAPK信号通路的激活,从而抑制炎症因子的释放来缓解炎症反应;同时能降低LPS诱导的HC11细胞凋亡率、上调细胞线粒体膜电位,从而抑制细胞凋亡发生。

关键词：大麻二酚脂多糖小鼠乳腺上皮细胞炎症反应细胞凋亡

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茶叶不同添加方式对太平猴魁绿茶啤酒风味影响

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食品与发酵工业 2025年第1期51卷 81-89页

作者：林睿吴殿辉彭政聪谢广发陆健工业生物技术教育部重点实验室粮食发酵与食品生物制造国家工程研究中心江苏省生物活性制品加工工程技术研究中心江南大学生物工程学院江苏无锡214122 浙江省污染暴露与健康干预重点实验室浙江树人学院生物与环境工程学院浙江杭州310015

绿茶作为辅料增添啤酒风味已被众多研究者们广泛关注,但绿茶的添加方式对啤酒风味的影响鲜有研究。该文将太平猴魁以3种不同投料方式加入到啤酒的发酵中,来研究清香型绿茶投料方式对啤酒挥发性风味物质的影响。采用GC-MS对不同组啤酒的... 详细信息

绿茶作为辅料增添啤酒风味已被众多研究者们广泛关注,但绿茶的添加方式对啤酒风味的影响鲜有研究。该文将太平猴魁以3种不同投料方式加入到啤酒的发酵中,来研究清香型绿茶投料方式对啤酒挥发性风味物质的影响。采用GC-MS对不同组啤酒的风味物进行鉴定分析,通过对多种风味物质的香味活性值(odor activity values,OAV)筛选以及偏最小二乘-判别分析(partial least squares-discriminant analysis,PLS-DA),研究不同工艺下绿茶啤酒的香气组分差异和关键香气组分标记物。结果表明,不同工艺下太平猴魁绿茶啤酒的挥发性成分差异显著(P能更多保留这类风味成分,使得啤酒具有更加丰富的风味属性。根据PLS-DA模型进一步筛选得到了9种变量投影重要性值大于1的物质,其中月桂酸乙酯、乙酸苯乙酯、月桂醇、正癸醛和壬醛这类香气化合物对啤酒的清香和花香风味属性具有重要贡献,可作为区分不同工艺下太平猴魁绿茶啤酒的香气组分标记物。

关键词：绿茶啤酒太平猴魁气相色谱-质谱联用挥发性成分偏最小二乘-判别分析

运动发酵单胞菌益生拮抗效应的研究现状及展望

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四川师范大学学报(自然科学版) 2025年第1期48卷 15-27+149页

作者：何明雄庄勇陈茂李建婷吴波龚贵平秦晗刘林培谭芙蓉农业农村部成都沼气科学研究所生物质能技术研究中心农业农村部成都农村可再生能源开发与利用重点实验室

运动发酵单胞菌(Zymomonas mobilis)是一种唯一通过ED途径兼性厌氧发酵葡萄糖的微生物食品安全级菌株(GRAS),具有许多独特的生理特征与优良的工业生产特性.基于合成生物学方法和代谢工程改造，综述运动发酵单胞菌独特的生理特性及其在... 详细信息

运动发酵单胞菌(Zymomonas mobilis)是一种唯一通过ED途径兼性厌氧发酵葡萄糖的微生物食品安全级菌株(GRAS),具有许多独特的生理特征与优良的工业生产特性.基于合成生物学方法和代谢工程改造，综述运动发酵单胞菌独特的生理特性及其在食品、医药等不同领域的应用，重点介绍运动发酵单胞菌益生效应因子及其涉及的拮抗效应、群体感应等方面的研究进展及瓶颈.同时探讨持续开发、完善高效精准的基因编辑技术、理性和非理性设计代谢途径定向调控方法及高通量筛选手段，在运动发酵单胞菌益生特性的发现以及生物治疗与固氮等方面的突破，推动合成生物学理论研究和实践生产的发展.

关键词：运动发酵单胞菌益生效应群体感应底盘细胞合成生物学

来源：博看期刊

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畜禽杂种优势形成机制与预测方法研究进展

中国农业科学 2025年第05期 1017-1031页

作者：孙研研倪爱心杨涵涵袁经纬陈继兰中国农业科学院北京畜牧兽医研究所/畜禽生物育种全国重点实验室瓦赫宁根大学及研究中心

杂种优势是遗传结构不同群体的杂交后代在生活力、繁殖力以及适应力等方面优于亲本群体的平均值或者超过亲本群体的现象，是一种重要的遗传资源。杂种优势在现代农业中发挥着重要作用，有助于提高畜禽和农作物的产量和品质、快速改良性... 详细信息

杂种优势是遗传结构不同群体的杂交后代在生活力、繁殖力以及适应力等方面优于亲本群体的平均值或者超过亲本群体的现象，是一种重要的遗传资源。杂种优势在现代农业中发挥着重要作用，有助于提高畜禽和农作物的产量和品质、快速改良性状、加速培育新品种和增加遗传多样性等，进而高效提升畜牧业和种植业的生产效率，降低成本。虽然杂种优势的发现已逾百年，但其遗传基础的解析远远落后于其在农业生产中的应用。杂种优势复杂形成机制的研究是遗传育种领域的一个经典话题和活跃前沿，但得到明确的结论却十分有限。针对杂种优势的表现特点，科学家先后提出显性学说、超显性学说和上位学说等多种杂种优势形成的假说，揭示杂种优势的遗传基础是非加性遗传效应，但是这些假说均是基于单基因效应而言，过于理想化和简单化；DNA、RNA和蛋白质等不同水平上的探索陆续发现多效应并存的现象。尤其在水稻和玉米等杂交育种作物上陆续开展的相关研究挖掘了杂种优势效应位点，丰富了对作物杂种优势形成机制的认知，推动了精准分子设计育种等作物育种技术的变革。杂种优势在猪、鸡等畜禽的育种中也广泛应用，畜牧业发达国家80%以上的商品猪肉、鸡肉和鸡蛋均通过杂交品种获得。高效应用杂种优势服务于生产，提前评估杂种优势是必要的。群间和群内表型方差比预测法、杂种遗传力预测法、分子标记预测法，这些新方法有助于解决通过传统的杂交试验的方法来预测杂种优势的周期长、易受环境影响和人力财力消耗大等问题，但是预测的准确性具有局限性。杂种优势涉及多个层面的相互作用，而且畜禽遗传背景复杂，育种周期长，使得畜禽杂种优势形成的机制研究和准确的预测方法依然面临挑战。近年来，测序技术的逐步应用，为理解畜禽杂种优势的分子调控网络提供了新的视角。QTL定位和全基因组关联分析从基因组水平上揭示杂种优势的分子机制，筛选相关的分子标记应用于畜禽品种的选择和选配。结合多组学研究，如转录组和代谢组，影响杂种优势的关键功能基因、变异及其代谢物能被更精确地定位，有助于杂交改良。本综述系统阐述了畜禽领域杂种优势形成机制和预测方法方面的研究进展，展望未来的研究会将通过结合多组学测序数据和生信分析来逐步阐明杂种优势的复杂机理，鉴定与杂种优势相关的基因、分子标记，并创新杂种优势的预测方法，为杂种优势利用提供更准确的方向。

关键词：杂种优势畜禽育种分子机制预测方法

东北早晚熟菜豆根际与根瘤微生物差异及根瘤菌固氮能力

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微生物学报 2025年第2期65卷 567-581页

作者：石晴汪芳芳徐伟慧陈文晶常春玲胡云龙王志刚齐齐哈尔大学生命科学与农林学院黑龙江齐齐哈尔黑龙江省农业微生物制剂产业化技术创新中心黑龙江齐齐哈尔黑龙江省农用生物制剂产业化协同创新中心黑龙江齐齐哈尔

菜豆(Phaseolus vulgaris L.)是全球最为重要的食用豆类之一,根际微生物与植物互惠互利,同时也是促进作物生长及健康的重要因素,然而,如何利用豆类植物微生物组促进作物生长的探索尚显不足。【目的】分析紫冠与巨冠菜豆的根际与根瘤细... 详细信息

菜豆(Phaseolus vulgaris L.)是全球最为重要的食用豆类之一,根际微生物与植物互惠互利,同时也是促进作物生长及健康的重要因素,然而,如何利用豆类植物微生物组促进作物生长的探索尚显不足。【目的】分析紫冠与巨冠菜豆的根际与根瘤细菌群落结构与功能的差异;筛选根瘤菌并探究其固氮和促生性能。【方法】利用16S rRNA基因测序技术,分析2种菜豆根际与根瘤细菌的差异;采用平板划线法筛选根瘤菌,利用无氮蛭石盆栽试验对11株根瘤菌的固氮性能及促生效果进行评估。【结果】巨冠菜豆的根际土壤细菌群落多样性显著低于紫冠菜豆,同时2种菜豆根际样品中细菌多样性显著高于根瘤样品。此外,菜豆根际富集了根瘤菌属(Rhizobium)、鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas)、伯克霍尔德氏菌属(Burkholderia)等有益菌属。其中,Rhizobium是2种菜豆根瘤中的优势菌属。Gephi网络分析表明,根际与根瘤细菌群落呈正相关,占比分别为75.52%和86.67%;PICRUSt2功能预测结果表明,菜豆根际细菌群落中碳水化合物、氨基酸和脂质代谢等功能丰度较高,且具有较高的氮代谢功能基因丰度。无氮蛭石盆栽试验表明,Rhizobiumlusitanum NZ5和*** GLJ10显著增加了紫冠菜豆地下干重,分别增加了43.21%和48.15%;*** NZ5、*** GLZ1和*** GLJ12能显著增加巨冠菜豆地下干重,分别增加了77.37%、68.42%和67.37%。【结论】菜豆能够选择性地从土壤中富集多种微生物,在其根际建立一个紧密协同且功能强大的微生物群落,且接种不同根瘤菌对菜豆的促生效果存在差异。

关键词：菜豆根际微生物根瘤菌固氮微生物群落

京尼平苷对盐碱胁迫下马铃薯试管苗渗透调节和抗氧化能力的影响

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中国蔬菜 2025年第2期 148-153页

作者：潘阳王立春田国奎王海艳李凤云庞泽黑龙江省农业科学院克山分院农业农村部马铃薯生物学与遗传育种重点实验室黑龙江省马铃薯种质资源与遗传改良工程技术研究中心黑龙江齐齐哈尔161600

为明确京尼平苷在盐碱胁迫下对马铃薯生理生化机制的影响,以耐盐碱品种克新1号和盐碱敏感品种夏波蒂为研究对象,采用不同浓度的京尼平苷作用在盐碱胁迫下的马铃薯试管苗中,培育28 d,检测马铃薯试管苗叶片中渗透调节物质含量、细胞膜脂... 详细信息

为明确京尼平苷在盐碱胁迫下对马铃薯生理生化机制的影响,以耐盐碱品种克新1号和盐碱敏感品种夏波蒂为研究对象,采用不同浓度的京尼平苷作用在盐碱胁迫下的马铃薯试管苗中,培育28 d,检测马铃薯试管苗叶片中渗透调节物质含量、细胞膜脂过氧化程度以及抗氧化防御系统中抗氧化酶活性与非酶抗氧化剂含量的变化。结果表明:在一定浓度范围内,京尼平苷处理能有效缓解盐碱胁迫对马铃薯试管苗的抑制程度;提高马铃薯试管苗叶片可溶性蛋白、可溶性糖以及脯氨酸含量,使渗透物质积累保持渗透调节平衡;降低丙二醛含量;提高抗氧化酶活性以及还原型谷胱甘肽含量。京尼平苷能提高马铃薯试管苗的抗盐碱胁迫能力,研究结果为京尼平苷应用于马铃薯抗逆生产提供理论基础。

关键词：盐碱胁迫京尼平苷马铃薯渗透调节抗氧化能力

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山羊肺泡巨噬细胞永生化建立与表型鉴定

微生物学通报 2025年第2期52卷 822-832页

作者：张文鑫丁一格孙嘉媛王欣慧刘真丁家波中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业农村部动物生物安全风险预警及防控重点实验室(北方) 山东农业大学动物科技学院西北农林科技大学动物科技学院动物生物育种国际农业联合研究中心中国农业大学动物医学院

【背景】尽管已有多种人和鼠细胞系可以作为布鲁氏菌（Brucella）的体外侵染模型，但目前仍缺乏能够准确模拟其在体内感染过程的大动物体外细胞模型。【目的】获得具有单一克隆特性的、能稳定传代的山羊肺泡巨噬细胞系，优化布鲁氏菌体... 详细信息

【背景】尽管已有多种人和鼠细胞系可以作为布鲁氏菌（Brucella）的体外侵染模型，但目前仍缺乏能够准确模拟其在体内感染过程的大动物体外细胞模型。【目的】获得具有单一克隆特性的、能稳定传代的山羊肺泡巨噬细胞系，优化布鲁氏菌体外侵染山羊细胞系模型。【方法】在无菌环境下用PBS灌洗山羊肺脏，分离得到原代山羊肺泡巨噬细胞；采用转染SV40大T抗原（SV40 large T antigen, SV40LT）、嘌呤霉素抗性筛选的方法建立了永生化山羊肺泡巨噬细胞系；使用细胞免疫荧光和流式细胞术检测单核巨噬细胞表面特征性标志物分化抗原簇14 (cluster of differentiation antigen 14, CD14)，利用鸡红细胞吞噬实验检测其吞噬能力；随后将布鲁氏菌（Brucella） M5疫苗株侵染该细胞系，在不同时期统计胞内活菌数。【结果】成功分离并构建了山羊肺泡巨噬细胞系，并且具有典型的巨噬细胞形态学特征，呈现不规则形状，有伪足伸出，胞体较大，吞噬能力强；体外培养10d，有95.40%原代细胞特异性表达CD14，永生化后仍有92.4%的细胞特异性表达CD14；相较于另外3种细胞，永生化后的肺泡巨噬细胞对布鲁氏菌敏感性与RAW264.7细胞近似，高于绵羊间质睾丸细胞（sheep testicular interstitial cell, STIC）。【结论】成功建立永生化山羊肺泡巨噬细胞系，该细胞系为研究布鲁氏菌的致病机制及免疫逃逸机制提供了体外试验对象。

关键词： SV40LT 慢病毒布鲁氏菌攻毒模型流式细胞术

猪XCR1/FMDV双特异纳米抗体融合蛋白的制备与鉴定

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中国农业大学学报 2025年第1期30卷 131-141页

作者：杨利杜露平侯立婷张浩明于晓明李兰乔绪稳张元鹏秦竹王义伟郑其升陈瑾程海卫江苏省农业科学院动物免疫工程研究所/国家兽用生物制品工程技术研究中心/江苏省食品质量与安全重点实验室南京210014 兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心江苏泰州225300

为通过将FMDV抗原靶向提呈至猪DC细胞进而提高疫苗免疫效力,本研究利用原核系统表达了猪XCR1目的蛋白,以该蛋白为免疫原免疫羊驼,提取其外周血淋巴细胞的总mRNA并反转录为cDNA,构建噬菌体展示纳米抗体文库,经过3轮亲和筛选获得猪XCR1特... 详细信息

为通过将FMDV抗原靶向提呈至猪DC细胞进而提高疫苗免疫效力,本研究利用原核系统表达了猪XCR1目的蛋白,以该蛋白为免疫原免疫羊驼,提取其外周血淋巴细胞的总mRNA并反转录为cDNA,构建噬菌体展示纳米抗体文库,经过3轮亲和筛选获得猪XCR1特异性纳米抗体;利用SOE-PCR技术将该纳米抗体和猪O型FMDV特异性纳米抗体Nb205连接,构建XCR1/FMDV双特异纳米抗体融合蛋白。结果表明:1)成功原核表达猪XCR1目的蛋白,SDS-PAGE和Western blot结果显示,其相对分子量大小约35 ku,符合预期。2)羊驼血清效价为1∶64000,满足建库要求;构建的噬菌体展示文库库容量约为1.91×10^(8)CFU/mL,插入率为91.3%,多样性好;经3轮亲和筛选成功获得了纳米抗体Nb75,间接ELISA结果显示该纳米抗体能特异性与XCR1结合。3)利用SOE-PCR技术成功构建XCR1/FMDV双特异纳米抗体融合蛋白Nb75-205;SDS-PAGE和Western blot显示,该蛋白在大肠杆菌中可溶性表达,且呈现二聚体结构,间接ELISA结果显示Nb75-205能同时与XCR1目的蛋白和FMDV抗原结合。综上,本研究采用噬菌体展示技术成功获得猪XCR1特异性纳米抗体,并构建XCR1/FMDV双特异纳米抗体融合蛋白Nb75-205,且该蛋白为天然二聚体结构,与XCR1目的蛋白和FMDV抗原均具有较好的结合活性,为进一步开展FMDV抗原的猪XCR1靶向提呈研究奠定基础。

关键词：趋化因子受体1 双特异纳米抗体二聚体 FMDV