检索结果-南通市图书馆

斑蝥素诱导HCT116细胞形态改变及脱黏附机制

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国实验方剂学杂志 2019年第10期25卷 20-25页

作者：张鑫赵慧魏洁郭君胡刚林雅军北京医院国家老年医学中心卫生部老年医学重点实验室北京100730

目的:探讨斑蝥素(cantharidin,CTD)引起人结肠癌HCT116细胞形态改变及脱黏附作用的分子机制与抑制肿瘤转移的相关性,为CTD的临床使用提供新依据。方法:将HCT116细胞接种于6孔板后,每孔加入不同浓度CTD (0,2. 5,5,10,15,20μmol·L^(-1)... 详细信息

目的:探讨斑蝥素(cantharidin,CTD)引起人结肠癌HCT116细胞形态改变及脱黏附作用的分子机制与抑制肿瘤转移的相关性,为CTD的临床使用提供新依据。方法:将HCT116细胞接种于6孔板后,每孔加入不同浓度CTD (0,2. 5,5,10,15,20μmol·L^(-1))培养7～10 d,使用结晶紫染色液染色,对形成的克隆进行计数及统计分析,确定CTD对HCT116细胞的抑制效果;使用鬼笔环肽(phalloidin)特异性染色检测10μmol·L^(-1)CTD对HCT116细胞聚合态微丝骨架(F-actin)的影响,间接免疫荧光染色法观察CTD作用后整合素蛋白含量的改变;蛋白免疫印迹法分析10μmol·L^(-1)CTD作用前后Rho家族RhoA,Rho B,Rho C,Cdc42,Rac1/2/3蛋白表达量变化,根据实验结果确定RhoA为研究目标蛋白;使用质粒瞬时转染方法构建过表达RhoA的HCT116结肠癌细胞,观察10μmol·L^(-1)CTD对过表达细胞骨架形态及黏附的影响。结果:CTD可引起HCT116结肠癌细胞微丝骨架重构及整合素含量减少; RhoA蛋白是CTD作用后含量变化最大的Rho酶家族成员,构建的RhoA过表达细胞中带绿色荧光的转染细胞比例约为60%,与野生型细胞相比,目标蛋白含量显著增高(P 部位,从而抑制细胞迁移。

关键词：斑蝥素人结肠癌HCT116细胞细胞骨架黏附 RhoA

银杏内酯B对内皮细胞连接蛋白的影响及其分子机制研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国药理学通报 2014年第5期30卷 646-651页

作者：刘雪青陈北冬鲍利吴伟孙文佳齐若梅卫生部北京医院/老年医学研究所卫生部老年医学重点实验室北京100730

目的探讨银杏内酯B对人脐静脉内皮细胞连接蛋白以及血管渗透性的影响。方法用银杏内酯B(0.2、0.4、0.6 g·L-1)孵育人脐静脉内皮细胞1 h,再用ox-LDL刺激细胞4 h,用Western blot及免疫荧光法检测JAM-A、Cx43的表达。用白细胞迁移实验观察... 详细信息

目的探讨银杏内酯B对人脐静脉内皮细胞连接蛋白以及血管渗透性的影响。方法用银杏内酯B(0.2、0.4、0.6 g·L-1)孵育人脐静脉内皮细胞1 h,再用ox-LDL刺激细胞4 h,用Western blot及免疫荧光法检测JAM-A、Cx43的表达。用白细胞迁移实验观察ox-LDL损伤内皮细胞以及银杏内酯B对单核细胞向内皮细胞下迁移的影响。结果①ox-LDL刺激内皮细胞4 h,JAM-A表达增加了22%,Cx43表达增加了24%,银杏内酯B处理的细胞JAM-A、Cx43表达明显降低。免疫荧光检测获得了同样的结果。②PI3K特异性抑制剂LY294002同样抑制了ox-LDL刺激的JAM-A、Cx43表达,表明银杏内酯B降低JAM-A、Cx43表达与抑制Akt磷酸化相关。③白细胞迁移实验表明,银杏内酯B明显减少ox-LDL诱导的单核细胞向内皮细胞下迁移。结论银杏内酯B能抑制ox-LDL刺激的内皮细胞连接蛋白JAM-A、Cx43表达,从而改善血管渗透性,减少白细胞迁移,分子机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路活化有关。

关键词：银杏内酯B 人脐静脉内皮细胞 JAM-A Cx43 血管渗透性炎症

银杏内酯B抑制高糖诱导内皮细胞TLR4及炎症蛋白表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国药理学通报 2015年第5期31卷 636-640页

作者：孙文佳孙杰陈北冬赵艳阳齐若梅卫生部北京医院/老年医学研究所卫生部老年医学重点实验室北京100730

目的评价银杏内酯B对高糖诱导内皮细胞TLR4表达的影响以及分子机制。方法使用人原代脐静脉内皮细胞,用高糖刺激内皮细胞,用Western blot分析TLR4、炎症蛋白表达以及Akt磷酸化。免疫荧光检测NF-κB核转位。结果高糖(30 mmol·L-1)刺激内... 详细信息

目的评价银杏内酯B对高糖诱导内皮细胞TLR4表达的影响以及分子机制。方法使用人原代脐静脉内皮细胞,用高糖刺激内皮细胞,用Western blot分析TLR4、炎症蛋白表达以及Akt磷酸化。免疫荧光检测NF-κB核转位。结果高糖(30 mmol·L-1)刺激内皮细胞TLR4和PAF受体表达明显增加,PAF受体抑制剂银杏内酯B(0.6 g·L-1)和CV3988(30μmol·L-1)分别抑制了TLR4及PAF受体表达。银杏内酯B有效地抑制了高糖刺激内皮细胞ICAM-1、VCAM-1表达。分子机制的研究表明,银杏内酯B明显抑制了高糖诱导的Akt磷酸化,以及NF-κB p65的核转位。结论高糖刺激内皮细胞TLR4和PAF受体表达增高,银杏内酯B能够抑制高糖刺激TLR4、PAF受体和炎症蛋白表达,分子机制与抑制Akt磷酸化以及NF-κB活化相关。

关键词：银杏内酯B TLR4 PAF 受体内皮细胞高糖 Akt NF-κB

基于智能化分时区间采集技术的液相色谱-串联质谱法测定全血中磷脂酰乙醇及人群水平调查

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

色谱 2023年第2期41卷 131-141页

作者：刘朝阳董军李红霞杨睿悦邵芷钰王思明北京医院国家老年医学中心国家卫生健康委北京老年医学研究所国家卫生健康委老年医学重点实验室中国医学科学院老年医学研究院北京100730

磷脂酰乙醇是具有潜在临床应用价值的酒精摄入生物学标志物,准确测定其含量可以为酒精摄入监测提供客观、量化的重要参考依据。本研究建立了一种基于智能化分时区间采集技术的液相色谱-串联质谱分析方法,能够同时实现对人全血样品中18... 详细信息

磷脂酰乙醇是具有潜在临床应用价值的酒精摄入生物学标志物,准确测定其含量可以为酒精摄入监测提供客观、量化的重要参考依据。本研究建立了一种基于智能化分时区间采集技术的液相色谱-串联质谱分析方法,能够同时实现对人全血样品中18种磷脂酰乙醇的准确测定。采用甲醇-甲基叔丁基醚-水作为萃取体系,选用XBridge C18色谱柱,以2.5 mmol/L乙酸铵异丙醇溶液和2.5 mmol/L乙酸铵水溶液-乙腈(50∶50, v/v)为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾离子源、智能化分时间段-负离子多反应选择离子监测模式。经验证,该方法线性关系良好,相关系数≥0.999 8,线性范围在10~2 500 ng/mL之间,检出限和定量限分别为0.7~2.8 ng/mL、2.2~9.4 ng/mL,加标回收率在91.0%~102.2%之间,日内精密度和日间精密度在0.4%~7.4%之间。该方法简便、快速、精密,智能化分时区间采集方法为每个离子通道分配合适的扫描时间段,增加了每个目标物离子通道的有效采集时长,提高了各目标分析物的信号响应,从而实现了对人全血样本中18种磷脂酰乙醇的有效分析测定。使用本方法测定了359名有规律饮酒习惯的志愿者全血样本,样本中的总磷脂酰乙醇含量范围为51.13 ng/mL~2.89μg/mL,平均为363.16 ng/mL。磷脂酰乙醇16∶0/18∶1、16∶0/18∶2是两个丰度最大的同系物,平均含量分别为74.21和48.75 ng/mL,各约占总量的20.43%和13.42%。Spearman相关性分析结果显示,磷脂酰乙醇之间相关性良好,并与临床现有酒精生物学标志物γ-谷氨酰转肽酶呈正相关;同时磷脂酰乙醇与肝肾功能相关临床生化指标显著相关。所建方法可以准确、精密检测人血磷脂酰乙醇含量,能够客观、可靠、量化反映人体酒精摄入状况,并可为临床酒精摄入监测提供有潜在应用价值的分析手段。

关键词：高效液相色谱-串联质谱智能化分时区间采集模式磷脂酰乙醇酒精摄入监测

同位素稀释质谱法与高效液相色谱法测定胆固醇的方法学比较：JCTLM列表中两个国际公认参考方法的比对研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华检验医学杂志 2017年第10期40卷 780-786页

作者：周伟燕赵海建王冬环张江涛张天娇闫颖曾洁董军王抒陈文祥张传宝北京医院国家老年医学中心卫生部临床检验中心 100730 卫生部老年医学重点实验室

目的对国际检验医学溯源联合委员会（JCTLM）收录的两种胆固醇参考方法进行方法学比对研究，评价两法测定结果的一致性和可比性。方法方法学比对研究。用同位素稀释液相色谱串联质谱法（LC/MS/MS法）和高效液相色谱法（HPLC法）同时测... 详细信息

目的对国际检验医学溯源联合委员会（JCTLM）收录的两种胆固醇参考方法进行方法学比对研究，评价两法测定结果的一致性和可比性。方法方法学比对研究。用同位素稀释液相色谱串联质谱法（LC/MS/MS法）和高效液相色谱法（HPLC法）同时测定52份新鲜冰冻人血清样本中的胆固醇，浓度范围为3 ～ 10 mmol/L。计算两法的精密度和准确度，对测定结果绘制散点图和偏差图，进行离群值检验，并选取最佳拟合模型进行回归分析，计算回归方程及各项参数。将两法测定结果进行统计学分析，计算胆固醇医学决定水平处的预期偏差及95%的可信范围。结果HPLC法仪器测定的CV为0.22%（0～0.49%），测定样本的总CV为0.36%（0.02%～0.83%），分析有证参考物质的平均偏倚－0.37%（－1.31%～0.14%）。LC/MS/MS法仪器测定的CV为0.50%（0～1.51%），测定样本的总CV为0.55%（0.03%～1.17%），分析有证参考物质的平均偏倚－0.24%（－0.53%～0.14%）。经统计分析两法测定结果未出现离群点，可采用线性回归方法进行分析。两法测定新鲜冰冻人血清样品的线性回归参数如下：斜率b＝0.989 5，斜率标准误Sb＝0.003 4，截距a＝0.063 4 mmol/L，截距标准误Sa＝0.019 9 mmol/L，Y估计值的标准误Sy/x＝0.034 8 mmol/L，相关系数r＝0.999 7，n＝52。同LC/MS/MS法相比，HPLC法测定新鲜血清样品的绝对偏差为0.000 mmol/L（－0.083～0.076 mmol/L），相对偏差为0.07%（－1.22%～1.24%）。t检验结果显示两个方法的测定结果没有统计学差异。在胆固醇医学决定水平处的预期偏差均在正负95%的可信区间范围内，且预期偏差远远小于允许误差。结论现有的HPLC法同权威的测量原理LC/MS/MS法测定血清总胆固醇的结果具有较好的一致性和可比性，且HPLC法比LC/MS/MS法价格低廉、技术简单、仪器精密度更高，故HPLC法可望在胆固醇的溯源过程中发挥重要作用。

关键词：胆固醇指示剂稀释技术色谱法,液相串联质谱法色谱法,高压液相同位素

新型口服抗凝药在恶性肿瘤相关静脉血栓栓塞症中的应用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华结核和呼吸杂志 2020年第12期43卷 1108-1111页

作者：袁雪婷许小毛北京医院国家老年医学中心卫生部老年医学重点实验室100730 北京医院国家老年医学中心呼吸与危重症医学科100730

与一般人群相比,恶性肿瘤患者更易发生静脉血栓栓塞症,并且其复发和大出血的风险更高,因此,恶性肿瘤相关静脉血栓栓塞症的预防和治疗具有一定挑战性。新型口服抗凝药能够通过直接抑制凝血酶或Ⅹa因子活性发挥作用,已被证明在一般人群中... 详细信息

与一般人群相比,恶性肿瘤患者更易发生静脉血栓栓塞症,并且其复发和大出血的风险更高,因此,恶性肿瘤相关静脉血栓栓塞症的预防和治疗具有一定挑战性。新型口服抗凝药能够通过直接抑制凝血酶或Ⅹa因子活性发挥作用,已被证明在一般人群中与传统抗凝药一样地安全、有效,但在恶性肿瘤患者中缺乏相关证据。本文回顾了目前恶性肿瘤相关静脉血栓栓塞症患者的管理及新型口服抗凝药在其预防和治疗中的应用现状。

关键词：静脉血栓栓塞症新型口服抗凝药恶性肿瘤凝血酶大出血直接抑制应用现状预防和治疗

银杏内酯B抑制高糖诱导内皮细胞凋亡及机制研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国药理学通报 2017年第3期33卷 378-383页

作者：陈坤张明陈北冬赵艳阳吴伟齐若梅北京医院/北京老年医学研究所国家老年医学中心卫生部老年医学重点实验室北京100730

目的探讨银杏内酯B对高糖诱导的内皮细胞凋亡的影响及相关的分子机制。方法使用脐静脉血管内皮细胞作为细胞模型,分为对照组、高糖组、银杏内酯B处理组。用Transwell实验检测内皮细胞迁移,AnnexinⅤ试剂盒检测细胞凋亡,荧光试剂盒检测... 详细信息

目的探讨银杏内酯B对高糖诱导的内皮细胞凋亡的影响及相关的分子机制。方法使用脐静脉血管内皮细胞作为细胞模型,分为对照组、高糖组、银杏内酯B处理组。用Transwell实验检测内皮细胞迁移,AnnexinⅤ试剂盒检测细胞凋亡,荧光试剂盒检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,Western blot检测Bax,Bcl-2,caspase-3的表达以及p53的磷酸化。结果高糖(30 mmol·L^(-1))处理组内皮细胞迁移数量明显降低,迁移率为(66.6±15.6)%,而银杏内酯B(0.6 g·L^(-1))处理增加了内皮细胞的迁移数量,迁移率为(94.8±11.4)%。高糖处理导致内皮细胞ROS水平增高2.75倍,与高糖处理组比较,0.6 g·L^(-1)银杏内酯B完全抑制了高糖诱导的ROS产生。流式细胞仪分析表明,高糖刺激内皮细胞凋亡率为(53.8±2.6)%,银杏内酯B处理组内皮细胞凋亡率为(44.0±3.1)%。对凋亡相关蛋白的分析表明,高糖组Bax、caspase-3表达增加,Bcl-2表达降低,银杏内酯B处理抑制了Bax、caspase-3表达,并增加了Bcl-2表达。此外,高糖处理增加了内皮细胞p53表达及磷酸化,而银杏内酯B抑制高糖刺激的p53活化。结论银杏内酯B能抑制高糖诱导的内皮细胞凋亡,改善内皮细胞迁移功能,对高糖引起的内皮细胞损伤具有保护作用。

关键词：银杏内酯B 高糖人脐静脉内皮细胞 ROS 细胞凋亡 p53

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

KNDC1功能的研究进展

中国老年学杂志 2020年第9期40卷 1999-2001页

作者：孙靖玉林雅军北京医院国家老年医学中心卫生部老年医学重点实验室北京100730

激酶非催化C-叶结构域蛋白( KNDC)1又称V-KNDC1 ( KIND )、RASGEF2、C10 orf23、Very-KIND、bB439 H18. 3 ,是近年来发现的新基因,在脑的不同区域表达水平不同,尤其在小脑颗粒细胞中表达最高〔1〕.其在许多信号传导通路的蛋白间分子识... 详细信息

激酶非催化C-叶结构域蛋白( KNDC)1又称V-KNDC1 ( KIND )、RASGEF2、C10 orf23、Very-KIND、bB439 H18. 3 ,是近年来发现的新基因,在脑的不同区域表达水平不同,尤其在小脑颗粒细胞中表达最高〔1〕.其在许多信号传导通路的蛋白间分子识别和功能调控中扮演重要角色〔2〕.研究表明, KNDC1与神经元树突的生长、人脐静脉内皮细胞( HUVEC)的衰老及纤维核心蛋白的修饰有关,有望成为新的研究热点.本文将 KNDC1 这一新调控因子的结构特点与其功能作用及其机制进行综述.

关键词： KNDC1 Ras鸟苷酸交换因子神经元树突衰老纤维核心蛋白

银杏内酯B对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国药理学通报 2011年第1期27卷 81-84页

作者：刘熹昀赵革新鲍利陈北冬吴伟齐若梅卫生部北京医院老年医学研究所卫生部老年医学重点实验室北京100730

目的探讨银杏内酯B(ginkgolide B,GB)对ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化的影响。方法 12只8周龄C57BL/6J小鼠为正常组,24只8周龄♂ApoE-/-小鼠为阳性模型组以及药物组;药物组每天给予GB 0.6 mg灌胃。8周后处死小鼠,用病理学方法... 详细信息

目的探讨银杏内酯B(ginkgolide B,GB)对ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化的影响。方法 12只8周龄C57BL/6J小鼠为正常组,24只8周龄♂ApoE-/-小鼠为阳性模型组以及药物组;药物组每天给予GB 0.6 mg灌胃。8周后处死小鼠,用病理学方法观察小鼠动脉斑块、脂质沉积以及巨噬细胞表达。用ELISA方法测定血浆RAN-TES含量。结果电镜结果显示模型组动脉斑块较大,血管内膜损伤明显,而GB组小鼠动脉内表面损伤明显减轻,斑块较小。HE染色显示了同样的结果,模型组斑块较大,GB组斑块较小。血浆RANTES测定正常组为123.81 ng.L-1,模型组为359.16 ng.L-1,GB组为193.36 ng.L-1,各组之间差异存在统计学意义(P<0.01)。结论 GB能有效地减轻ApoE-/-小鼠的动脉粥样硬化损伤,并降低血浆RANTES含量,其药理学机制可能与抑制血小板功能相关。

关键词：银杏内酯B ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化 RANTES PAF受体拮抗剂血小板释放