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噪声对SPF级金黄地鼠繁殖性能的影响

黑龙江畜牧兽医 2024年第11期 107-112,121,122页

作者：高明魏娟鹏张楠吕铭谢澎兰州生物制品研究所有限责任公司实验动物室兰州730046

为了检测噪声对SPF级金黄地鼠繁殖性能的影响,试验首先将48只饲养在≤60 dB(A)噪声环境中的10周龄金黄地鼠随机分为60 dB(A)以下组、60~70 dB(A)组、80~90 dB(A)组、100~110 dB(A)组,每组雄鼠和雌鼠各6只并按1∶1比例合笼直到分娩,每天0... 详细信息

为了检测噪声对SPF级金黄地鼠繁殖性能的影响,试验首先将48只饲养在≤60 dB(A)噪声环境中的10周龄金黄地鼠随机分为60 dB(A)以下组、60~70 dB(A)组、80~90 dB(A)组、100~110 dB(A)组,每组雄鼠和雌鼠各6只并按1∶1比例合笼直到分娩,每天08:30—11:30在相应的噪声环境中暴露3 h,连续25 d,计算各组妊娠率、单只孕鼠平均产崽数和幼崽5日龄存活率。然后将20只饲养在≤60 dB(A)噪声环境中距分娩还有1~3 d的金黄地鼠随机分为60 dB(A)以下组、60~70 dB(A)组、80~90 dB(A)组、100~110 dB(A)组,每组5只,幼崽从出生到10周龄每天08:30—11:30分别置于相应的噪声环境中暴露3 h,计算幼崽存活率;幼崽10周龄时,摘除眼球采血并采用ELISA法检测血清抗缪勒管激素、抑制素B含量,采用计算机辅助精子分析系统检测雄鼠精子活力和精子的曲线速度、直线速度和平均路径速度,计算睾丸指数和卵巢指数,制作睾丸和卵巢的石蜡切片并进行H.E.染色,观察睾丸和卵巢的组织病理学变化;在每组幼崽中选取非近亲关系的雄鼠和雌鼠各5只,按1∶1比例进行组内交配,计算各组妊娠率、单只孕鼠平均产崽数和幼崽5日龄存活率。结果表明:从雄雌合笼到分娩,各组妊娠率、单只孕鼠平均产崽数和幼崽存活率均差异不显著(P>0.05)。幼崽从出生到10周龄,80~90 dB(A)组、100~110 dB(A)组的幼崽存活率均显著低于60 dB(A)以下组(P0.05);100~110 dB(A)组精子活力极显著低于其他组(P0.05)。说明金黄地鼠从出生开始每天08:30—11:30暴露于噪声环境中3 h,噪声超过80 dB(A)会影响睾丸和卵巢的组织形态结构,噪声超过100 dB(A)会显著降低精子活力。

关键词：噪声金黄地鼠激素水平精液质量繁殖

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mRNA疫苗生产工艺及质量控制的研究进展

中国新药杂志 2024年第11期33卷 1109-1114页

作者：唐琪施金荣邢沛东聂希霖杨晓明武汉生物制品研究所有限责任公司病毒性疫苗研究二室武汉430207 武汉生物制品研究所有限责任公司质量控制室武汉430207 武汉生物制品研究所有限责任公司质量保证部武汉430207 中国生物技术股份有限公司北京100029

由于mRNA疫苗具有结构简单、构建快速及保护效果好等特点,在应对病原体变异及新发传染病方面表现出了明显优势,作为疫苗研发的新一代技术引起了各方的广泛关注,但是其在生产工艺和质量控制方面还缺乏系统的研究和报道。本综述对mRNA疫... 详细信息

由于mRNA疫苗具有结构简单、构建快速及保护效果好等特点,在应对病原体变异及新发传染病方面表现出了明显优势,作为疫苗研发的新一代技术引起了各方的广泛关注,但是其在生产工艺和质量控制方面还缺乏系统的研究和报道。本综述对mRNA疫苗制备工艺的主要流程、工艺特征进行了阐述,根据各国指南文件及相关研究,对其制备工艺中起始材料、原液、中间制剂及成品的关键质量控制要素进行梳理,并对其检测方法进行总结归纳,为mRNA疫苗的研发与制备提供参考。

关键词： mRNA疫苗生产工艺质量控制检测方法

猪肺炎支原体通过抑制SPLUNC1功能破坏呼吸道炎性反应平衡

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中国农业科学 2024年第1期57卷 216-226页

作者：王海燕张珍珍倪博刘蓓蓓冯志新江苏省农业科学院兽医研究所/农业农村部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心

【背景】猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)通过定植猪呼吸道黏膜层，破坏呼吸道炎性反应平衡，引起炎性损伤和持续性感染。短的上腭、肺及鼻咽上皮克隆1蛋白(short palate lung and nasal epithelial clone1,SPLUNC1)是呼吸... 详细信息

【背景】猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)通过定植猪呼吸道黏膜层，破坏呼吸道炎性反应平衡，引起炎性损伤和持续性感染。短的上腭、肺及鼻咽上皮克隆1蛋白(short palate lung and nasal epithelial clone1,SPLUNC1)是呼吸道黏膜分泌的具有重要抗菌和抗炎功能的蛋白，被认为是呼吸道黏膜面对危险信号时的“信号传感器”。【目的】从Mhp和SPLUNC1相互作用入手，分析Mhp感染对SPLUNC1表达的影响以及SPLUNC1对Mhp引起的炎性反应的调控作用，揭示Mhp引起炎性损伤的新机制，为解决Mhp持续性感染问题提供参考。【方法】利用猪肺炎支原体对猪支气管上皮细胞（porcine bronchial epithelial cells,PBECs）感染模型和猪体感染模型，通过荧光定量PCR、间接免疫荧光和Western-blotting等方法，分别检测Mhp感染后对肺脏中SPLUNC1以及体外PBECs中SPLUNC1转录和表达的影响。克隆并扩增猪源SPLUNC1基因通过酶切鉴定，构建成功SPLUNC1真核和原核表达重组质粒pCDNA3.1-SPLUNC1以及pET28a-SPLUNC1。与此同时，设计靶向SPLUNC1的siRNA干扰片段。利用体外SPLUNC1蛋白孵育、体内呼吸道黏膜SPLUNC1抗体封闭，通过Mhp CCU50检测明确SPLUNC1对Mhp体内外生长的影响。在猪支气管上皮细胞中，通过过表达或siRNA干扰SPLUNC1基因，后感染Mhp，利用Western-blotting、间接免疫荧光以及酶联免疫吸附方法，明确SPLUNC1对Mhp的黏附作用、诱导炎性因子表达以及MAPK信号通路活化的影响。【结果】Mhp感染猪后可引起肺脏实变，主要组织病理表现为肺脏炎性损伤，同时显著上调肺泡灌洗液中趋化因子CXCL8和炎性因子TNFα和IL-1β分泌。Mhp体内外感染后，体内肺脏和体外猪支气管上皮细胞中SPLUNC1的转录和表达均显著下调。以上研究表明，Mhp可诱导肺脏炎性反应，抑制SPLUNC1表达。另一方面，体外PBECs中过表达SPLUNC1后，Mhp感染引起的CXCL8表达显著减少；siRNA干扰SPLUNC1后，Mhp感染引起的CXCL8表达显著增加，表明SPLUNC1负调控Mhp感染引起的CXCL8表达。基于Mhp感染入侵呼吸道过程，本研究进一步解析SPLUNC1负调控CXCL8表达的机制。结果表明：无论是SPLUNC1和Mhp体外孵育，还是SPLUNC1抗体体内封闭，Mhp的体内外生长均未受影响；SPLUNC1的过表达或siRNA干扰对Mhp体外黏附PBECs的能力也无显著影响；过表达SPLUNC1可抑制pERK和IκBα的激活，相反SPLUNC1 siRNA干扰后，可促进pERK和IκBα的激活。以上研究证明SPLUNC1不是通过调控Mhp的生长和黏附，而是通过负调控MAPK-ERK通路的活化来调控CXCL8的表达。【结论】SPLUNC1可通过MAPK-ERK信号通路来调控炎性因子的过度表达，维护宿主炎性平衡；与此同时，Mhp感染后可通过抑制SPLUNC1的表达来破坏宿主炎性反应的平衡调控，进而引起炎性损伤。本研究为解析Mhp感染损伤机制提供依据。

关键词：猪肺炎支原体支原体-宿主相互作用炎性反应 SPLUNC1

重组戊型肝炎疫苗宿主细胞残余DNA荧光染色法检测方法的建立和验证

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国际生物制品学杂志 2024年第4期47卷 203-206页

作者：张巧玲张志豪秦海艳杨林鹏杨俊杰兰州生物制品研究所有限责任公司第四研究室兰州730030 兰州生物制品研究所有限责任公司中试研究室兰州730030

目的建立检测重组戊型肝炎疫苗宿主DNA残留量的荧光染色法,并进行方法验证。方法采用λDNA作为标准品建立标准曲线,重组戊型肝炎疫苗纯化后原液作为样品,进行线性、准确度以及精密度的验证。结果该方法在1.250~80.000 ng/ml范围内有良... 详细信息

目的建立检测重组戊型肝炎疫苗宿主DNA残留量的荧光染色法,并进行方法验证。方法采用λDNA作为标准品建立标准曲线,重组戊型肝炎疫苗纯化后原液作为样品,进行线性、准确度以及精密度的验证。结果该方法在1.250~80.000 ng/ml范围内有良好的线性,决定系数大于0.99;准确性验证中DNA残留量加标回收率在90.00%~110.00%之间,且加标回收率相对标准偏差均小于15.00%。重复性验证和中间精密度验证的相对标准偏差分别为6.62%和10.30%,均小于15.00%。结论该方法快速、灵敏、准确,可以检测重组戊型肝炎疫苗宿主DNA残留量。

关键词：重组戊型肝炎疫苗荧光染色法残余DNA

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海洋微塑料污染监测生物指示种的筛选

海洋科学进展 2024年

作者：孙承君丁金凤李景喜自然资源部第一海洋研究所海洋生物资源与环境研究中心崂山实验室海洋药物与生物制品功能实验室

微塑料在海洋环境中广泛存在，其引起的生物和生态环境问题备受关注。选择合适的物种监测海洋微塑料污染对准确评估微塑料的生态影响至关重要。以往研究根据不同的标准选择不同的候选物种作为微塑料污染指示生物，尚缺乏深入的筛选和评... 详细信息

微塑料在海洋环境中广泛存在，其引起的生物和生态环境问题备受关注。选择合适的物种监测海洋微塑料污染对准确评估微塑料的生态影响至关重要。以往研究根据不同的标准选择不同的候选物种作为微塑料污染指示生物，尚缺乏深入的筛选和评估，导致目前仍缺少长期、连续的海洋微塑料污染监测数据。本文通过分析实验室数据和文献数据，系统地概述了双壳贝类作为海洋微塑料污染监测生物指示种的可行依据，建议使用贻贝和蛤蜊分别作为海水和沉积物中微塑料污染监测的生物指示种。由于目前以双壳贝类为指示的海洋微塑料污染监测受到研究方法不统一等因素的影响，本文进一步讨论了影响双壳贝类中微塑料检出的方法学因素，为建立双壳贝类作为微塑料污染监测指示生物的标准方法提供方法学指导。未来的研究仍需深入评估双壳贝类作为微塑料污染生物指示种的适用性，同时进一步筛选其他合适的生物指示种，以制定合理的海洋微塑料污染生物监测计划。

关键词：微塑料监测双壳贝类生物指示种

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不同肥胖指标与非酒精性脂肪肝的关系

现代预防医学 2024年第17期51卷 3108-3113页

作者：刘映廖梦凡钟利玲张吉凯陈青松广东药科大学公共卫生学院广东省生物制品与药物研究所

目的探索不同肥胖指标与非酒精性脂肪肝（nonalcoholic atty liver disease,NAFLD）的关系，并探讨其对NAFLD的预测价值。方法选取2023年4-8月在广州市白云区新市街社区卫生服务中心和佛山市顺德区均安社区卫生服务中心参加体检的3 10... 详细信息

目的探索不同肥胖指标与非酒精性脂肪肝（nonalcoholic atty liver disease,NAFLD）的关系，并探讨其对NAFLD的预测价值。方法选取2023年4-8月在广州市白云区新市街社区卫生服务中心和佛山市顺德区均安社区卫生服务中心参加体检的3 102例受试者，分为NAFLD组和非NAFLD组。采用logistic回归分析身体质量指数（body mass index,BMI）、体重调整腰围指数（weight-adjusted waist index,WWI）、腰高比、腰围与NAFLD的关系，采用ROC曲线来评估单独和联合肥胖指标对NAFLD的预测能力。结果本调查中患NAFLD的比例为34.9%。NAFLD组各肥胖指标均高于非NAFLD组（均P0.5）。女性人群中BMI的预测效力最优（P0.05）；相比传统的肥胖指标，WWI未体现出更好的预测效力（P0.05）。结论 BMI、腰围、腰高比、WWI与NAFLD患病相关。女性人群中预测能力最好的肥胖指标是BMI。与传统肥胖指标相比，三个人群中新指标WWI均未表现出更好的预测能力。联合指标比单一指标具有更好的预测效力。

关键词：肥胖指标体质量指数腰围腰身比体重调整腰围指数

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预防性及治疗性乙型肝炎疫苗的研究进展

微生物学免疫学进展 2024年第2期52卷 106-112页

作者：张梦瑶(综述) 毛晓燕(审校) 兰州生物制品研究所有限责任公司第五研究室、甘肃省疫苗工程技术研发中心甘肃兰州730046

乙型病毒性肝炎(viral hepatitis type B,简称乙肝)是一个严重的世界性公共卫生问题,该疾病在健康人群中发病率极高,同时也在慢性乙肝患者中引起极高的死亡率。乙肝是一种可预防的疾病,用于预防的乙肝疫苗经过三代发展,已有安全、有效... 详细信息

乙型病毒性肝炎(viral hepatitis type B,简称乙肝)是一个严重的世界性公共卫生问题,该疾病在健康人群中发病率极高,同时也在慢性乙肝患者中引起极高的死亡率。乙肝是一种可预防的疾病,用于预防的乙肝疫苗经过三代发展,已有安全、有效的疫苗上市,该疫苗的使用使慢性乙肝患者(包括肝细胞性肝癌患者)的发病率急剧下降。但目前尚无清除乙肝患者体内病毒的特效药物,增强机体免疫反应的治疗性疫苗可能是抗病毒药物的替代品。针对乙肝患者的治疗性疫苗正被广泛研究,包含重组蛋白疫苗、DNA疫苗和脂肽疫苗等。现就国内外预防性及治疗性乙肝疫苗的研究进展作一概述。

关键词：乙型病毒性肝炎乙型肝炎病毒预防性疫苗治疗性疫苗乙肝表面抗原病毒样颗粒

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恩诺沙星对鼠疫耶尔森菌L型的诱导作用

中国生物制品学杂志 2024年第9期37卷 1075-1079页

作者：李朋伟王婷张婷婷孙田华蒋保余马维民王彩霞吴智远焦磊兰州生物制品研究所有限责任公司第三研究室甘肃兰州730046

目的探讨恩诺沙星对鼠疫耶尔森菌(简称鼠疫菌)L型的诱导作用,以期了解更多鼠疫菌L型的形成条件和生物学特性。方法将鼠疫菌EV株分别接种于含0、0.5、5、10、50、100、500、1000 ng/mL恩诺沙星的赫氏培养基中培养。将含50 ng/mL恩诺沙星... 详细信息

目的探讨恩诺沙星对鼠疫耶尔森菌(简称鼠疫菌)L型的诱导作用,以期了解更多鼠疫菌L型的形成条件和生物学特性。方法将鼠疫菌EV株分别接种于含0、0.5、5、10、50、100、500、1000 ng/mL恩诺沙星的赫氏培养基中培养。将含50 ng/mL恩诺沙星的培养物接种于不含恩诺沙星的赫氏培养基中进行返祖培养。观察各样品菌落形态,通过革兰染色和细胞壁染色观察细菌形态,透射电镜观察细胞壁状态。对鼠疫菌EV株和鼠疫菌L型进行16S rDNA鉴定,并进行同源性分析及构建系统发育树。结果赫氏培养基中含0.5 ng/mL恩诺沙星可引起鼠疫菌形态改变,由典型短杆菌变为长杆菌。恩诺沙星浓度为50 ng/mL时鼠疫菌细胞壁缺失,细菌无法正常分裂增殖而呈长杆状,盘绕成团,菌落呈油煎蛋样。恩诺沙星诱导鼠疫菌L型在正常赫氏培养基中可返祖,并表现为短小杆状的典型鼠疫菌形态。16S rDNA鉴定诱导菌与诱导前亲本EV株同源性为100%。结论恩诺沙星可诱导鼠疫菌形成L型。

关键词：鼠疫耶尔森菌 L型细菌恩诺沙星细胞壁

半固体培养法制备非洲猪瘟病毒pA104R蛋白的单克隆抗体

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江苏农业学报 2024年第4期40卷 682-689页

作者：刘蓓蓓韦艳娜陈蓉谢星倪博郝飞张珍珍白昀袁厅冯志新江苏省农业科学院兽医研究所/农业农村部兽用生物制品工程重点实验室江苏南京210014 兽用生物制品<泰州>国泰技术创新中心江苏泰州225300

为了快速、高效制备非洲猪瘟病毒(ASFV)单克隆抗体,本研究通过大肠杆菌系统表达并纯化了ASFV重组蛋白pA104R。以ASFV重组蛋白pA104R为抗原,分别比较了CpG ODN联合氢氧化铝佐剂和常规弗氏佐剂两种免疫策略,并重点比较半固体培养法和常规... 详细信息

为了快速、高效制备非洲猪瘟病毒(ASFV)单克隆抗体,本研究通过大肠杆菌系统表达并纯化了ASFV重组蛋白pA104R。以ASFV重组蛋白pA104R为抗原,分别比较了CpG ODN联合氢氧化铝佐剂和常规弗氏佐剂两种免疫策略,并重点比较半固体培养法和常规有限稀释法来制备ASFV pA104R单克隆抗体的效率。结果显示,本研究获得了相对分子质量为3.5×104的ASFV重组可溶性蛋白pA104R,通过其与CpG ODN联合氢氧化铝佐剂免疫小鼠,在第21 d即可达到融合要求,本试验方法(重组蛋白pA104R与CpG ODN联合氢氧化铝佐剂免疫)较重组蛋白pA104R与常规弗氏佐剂免疫节省14 d时间。通过半固体培养法筛选单克隆的试验周期比有限稀释法缩短28 d,并减少了亚克隆的工作量。半固体培养法获得5株阳性杂交瘤细胞,挑选效价较高的3株(9A4、9H6、11F5)进行鉴定,重链均为IgG,轻链均为KAPPA。纯化后的3株单克隆抗体针对pA104蛋白和全病毒蛋白质的效价分别达1∶160000~1∶320000和1∶200~1∶400。本研究优选了CpG ODN联合氢氧化铝佐剂结合半固体培养法筛选pA104R的单克隆抗体,为单克隆抗体制备提供了快速高效的新策略。

关键词：非洲猪瘟病毒 pA104蛋白单克隆抗体半固体培养法