检索结果-南通市图书馆

食管鳞癌患者血清中lncRNA-TUSC7的表达及与细胞侵袭转移的关系

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

南方医科大学学报 2020年第5期40卷 661-669页

作者：赵珂郭玉刚霍正马国辉张桂邢雨欣徐茜南阳师范学院昆虫生物反应器河南省工程实验室河南南阳473061

目的探究长链非编码lncRNA-TUSC7在食管鳞癌患者血清中表达的临床意义并进一步评估其对食管癌细胞侵袭和转移能力的影响。方法选取2017年1月~2019年5月南阳市第二人民医院和南阳市中心医院收治的60例食管鳞癌患者的血清,同时选取60例年... 详细信息

目的探究长链非编码lncRNA-TUSC7在食管鳞癌患者血清中表达的临床意义并进一步评估其对食管癌细胞侵袭和转移能力的影响。方法选取2017年1月~2019年5月南阳市第二人民医院和南阳市中心医院收治的60例食管鳞癌患者的血清,同时选取60例年龄、性别匹配的健康体检者血清作为对照组。采用RT-qPCR方法检测血清中TUSC7的表达,分析其与临床病理特征的关系。同时以正常食管上皮细胞为对照,检测4种食管鳞癌细胞系中TUSC7的表达,进一步通过体外过表达或抑制TUSC7,进行MTT,划痕实验和细胞侵袭实验分析TUSC7对细胞迁移及侵袭的影响。Western blot检测过表达或抑制TUSC7对食管鳞癌细胞上皮间质转化(EMT)的标志物(MMP-9、E-cadherin、N-cadherin和Vimentin)蛋白表达的影响。结果食管鳞癌患者血清中LncRNATUSC7的表达低于正常健康对照组(P实验组TUSC7表达水平低于对照组(P<0.05);过表达TUSC7可显著抑制食管癌细胞的迁移和侵袭能力(P<0.05);并提高KYSE-30细胞EMT相关蛋白E-cadherin,而降低MMP-9、N-cadherin和Vimentin蛋白表达量(P<0.05);而抑制TUSC7后结果相反。结论TUSC7在ESCC血清和细胞系中表达下调,与食管鳞癌淋巴结转移相关,且具有通过EMT促进肿瘤细胞迁移和侵袭的功能。因此血清中TUSC7具有成为食管鳞癌诊疗和转移监测的分子标记物的可能。

关键词：食管鳞癌长链非编码RNA TUSC7 转移食管鳞癌细胞上皮间质转化

基于基因组挖掘技术的新型谷氨酸脱羧酶基因挖掘及表达鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

食品科学 2021年第10期42卷 79-85页

作者：李祥解玉丽贾园园张闪王红艳刘先吏罗湘艳唐存多南阳师范学院昆虫生物反应器河南省工程实验室河南南阳473061 车用生物燃料技术国家重点实验室河南南阳473061

采用基因组挖掘技术,以来源于Lactobacillus brevis活性较高的谷氨酸脱羧酶(glutamate decarboxylase,GAD)LbGAD为探针,从乳酸菌(Lactococcuslactis、Lactobacillussenmaizukei)和肠球菌(Enterococcus sulfureus)的基因组中挖掘到了3个假定的GAD基因(LlGAD、LsGAD和EsGAD)。借助pET28a质粒分别实现了这4个基因在大肠杆菌BL21中的表达,其中LsGAD和LlGAD的表达产物可溶性较好,相应发酵液中GAD活力分别为34.17、38.91 U/mL。Ls GAD的比活力、温度特性、pH值特性和K_(cat)/K_(m)值也明显优于其他几个酶。此外,初步研究了全细胞催化L-谷氨酸制备γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)的工艺,6 g/L的L-谷氨酸经过24 h转化后,GABA得率最高可达58%。本研究实现了GAD从基因组数据到真实酶的跨越,获得了1个性能优良的GAD,并初步实现了GABA的生物合成,为实现GABA低成本、规模化的生物合成提供了科学依据。

关键词：谷氨酸脱羧酶基因组挖掘表达鉴定生物催化

纤维素降解菌I2的分离及相关降解基因功能验证

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

食品与发酵工业 2025年第1期 47-54页

作者：孙君珂张婉莹邓若竹王娟牛秋红胡凡柯涛南阳师范学院生命科学与农业工程学院河南省生物质资源化高校工程中心自然资源部第三海洋研究所

纤维素是地球上数量最大的可再生能源物质，利用微生物或其产生的酶可将纤维素水解成葡萄糖。筛选高效纤维素降解菌和纤维素酶一直是生物能源等领域研究的热点。该研究筛选分离了1株具有降解纤维素能力的短小芽孢杆菌I2,通过基因组测序... 详细信息

纤维素是地球上数量最大的可再生能源物质，利用微生物或其产生的酶可将纤维素水解成葡萄糖。筛选高效纤维素降解菌和纤维素酶一直是生物能源等领域研究的热点。该研究筛选分离了1株具有降解纤维素能力的短小芽孢杆菌I2,通过基因组测序，分析其参与纤维素降解的基因，并对纤维素酶的功能进行验证。I2分离自河南南阳宝天曼自然保护区落叶及长期堆积小麦秸秆的堆体等样本富集后的混合菌系，具有降解滤纸的能力，48 h内可以降解大部分滤纸。基因组组装分析显示，I2的基因组大小为4.2 Mbp,含有4 635个基因。利用CAZy碳水化合物数据库注释和酶活性测定实验，对数据库检测到的182个基因进行分析，明确I2中4个基因在大肠杆菌表达后具有纤维素酶活性。其中，G2269纤维素内切酶活性最高，在pH 5.0,温度55℃条件下，酶活力可达49.02 U/mL。金属离子Ca2+、Zn2+对于G2269的活性有明显提高作用，Mn2+和Cu2+对G2269活性抑制比较明显，Mg2+、Co2+、K+、Ni2+、NH4+对于G2269的活性无显著影响。此外，G2269还具有良好热稳定性和酸碱稳定性，在65℃保持30 min后仍保留70%的活力，在食品加工和饲料生产等领域显示出较好的应用潜力。

关键词：纤维素降解菌基因克隆原核表达基因组测序

同方期刊数据库

二氧化硅纳米颗粒诱导血管内皮细胞自噬激活的转录组分析及实验验证

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

河南师范大学学报(自然科学版) 2025年

作者：阮晨吴冉王来友杜佳曹敬博南阳理工学院河南省工业微生物资源与发酵技术重点实验室南阳理工学院生物与化学工程学院南阳理工学院信息工程学院辽宁大学数学与统计学院

为寻找二氧化硅纳米颗粒诱导细胞自噬激活的调控蛋白,用20 nm的二氧化硅纳米颗粒处理大鼠血管内皮细胞株,对细胞样品进行转录组测序分析及试验.根据CCK-8方法测定的细胞死亡率及自噬Marker蛋白的表达量确定诱导时长,由此制备细胞样品并... 详细信息

为寻找二氧化硅纳米颗粒诱导细胞自噬激活的调控蛋白,用20 nm的二氧化硅纳米颗粒处理大鼠血管内皮细胞株,对细胞样品进行转录组测序分析及试验.根据CCK-8方法测定的细胞死亡率及自噬Marker蛋白的表达量确定诱导时长,由此制备细胞样品并进行转录组测序及分析预测,通过RNA干扰实验筛选具有自噬调控功能的蛋白质.研究结果表明20 nm二氧化硅纳米颗粒处理细胞的较优诱导时间为24 h,自噬Marker蛋白LC3B-II的表达随着纳米颗粒处理时间的增加而增高;在转录组测序结果中共筛选到295个差异表达基因,差异基因的KEGG富集分析结果显示大部分基因参与多个自噬调控信号通路;通过RNA干扰实验和免疫印迹实验验证,实验结果表明干扰Arrdc4基因的表达可以降低细胞内LC3B-II的表达水平.综合考虑所有实验结果,Arrdc4可能通过KEGG显著富集的信号通路影响二氧化硅纳米颗粒诱导的细胞自噬,其调控机制仍有待深入挖掘.

关键词：二氧化硅纳米颗粒自噬转录组 Arrdc4基因

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

微生物磷脂酶D的克隆表达研究进展

食品工业科技 2021年第15期42卷 396-402页

作者：董自星杨爽爽唐存多姚伦广阚云超南阳师范学院昆虫生物反应器河南省工程实验室和河南省南水北调中线水源区生态安全重点实验室河南南阳473061 南阳师范学院体育学院河南南阳473061

磷脂酶D(Phospholipase D,PLD,EC 3.***.4.4)是催化磷脂的磷酸二酯键水解和转磷脂酰基反应的一类酶的总称。PLD所具有的转磷脂活性使其在食品、医药以及细胞生物学等领域具有广泛的应用价值,但其大规模工业化生产受到诸多因素的限制。利... 详细信息

磷脂酶D(Phospholipase D,PLD,EC 3.***.4.4)是催化磷脂的磷酸二酯键水解和转磷脂酰基反应的一类酶的总称。PLD所具有的转磷脂活性使其在食品、医药以及细胞生物学等领域具有广泛的应用价值,但其大规模工业化生产受到诸多因素的限制。利用基因工程技术对磷脂酶D基因进行克隆表达,开发高产量、高纯度和高转磷脂活性的PLD资源成为当前的研究热点。本文主要对微生物PLD克隆与高效表达方面的研究进展进行分析,以期对微生物PLD的大规模生产及其相关产品的开发利用提供参考。

关键词：微生物磷脂酶 D 转磷脂活性克隆表达大规模工业化生产潜在应用

重组大肠杆菌全细胞催化D,L-扁桃酸对映选择性制备L-苯甘氨酸

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

食品科学 2021年第2期42卷 83-89页

作者：贾园园李祥张振华张闪杨露露唐存多南阳师范学院昆虫生物反应器河南省工程实验室河南省南水北调中线水源区生态安全重点实验室河南南阳473061 车用生物燃料技术国家重点实验室河南南阳473061

借助pACYCDuet-1和pET28a双质粒共表达系统,构建携带Agrobacteriumradiobacter来源扁桃酸消旋酶(Ar mandelate racemase,Ar MR)、Lactobacillus harbinensi来源D-扁桃酸脱氢酶(Lh D-mandelate dehydrogenase,Lh DMDH)和ExiguobacteriumsibiricumDSM17290来源L-亮氨酸脱氢酶(EsL-leucine dehydrogenase,Es LeuDH)编码基因的重组大肠杆菌,将其命名为E. coli BL21(DE3)/pACYCDuet-1-EsLeuDHLhDMDH:pET28a-ArMR。在低温、低浓度诱导剂的诱导下,该重组菌成功表达了具有各自催化活性的3种重组酶,其发酵液中Lh DMDH、Es LeuDH和Ar MR的活性分别为195.8、56.2 U/mL和174.5 U/mL。以诱导后的全细胞为催化剂、D,L-扁桃酸为底物,在D,L-扁桃酸初始浓度50 mmol/L、pH 9.5的500 mmol/L NH4Cl-NH3·H2O缓冲液体系下,180 r/min、30℃反应48 h后,L-苯甘氨酸得率可达77.48%,其对映体过量值大于99%。本研究具有较大的产业化潜力,为实现L-苯甘氨酸规模化的生物合成奠定了坚实的基础。

关键词： L-苯甘氨酸全细胞催化绿色化学共表达级联反应

重组大肠杆菌全细胞用于苯乙酮酸的绿色生物合成

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

化工学报 2018年第6期69卷 2627-2631页

作者：唐存多史红玲和子涵丁朋举焦铸锦阚云超姚伦广南阳师范学院昆虫生物反应器河南省工程实验室和河南省南水北调中线水源区生态安全重点实验室河南南阳473061 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室上海200237

苯乙酮酸是化学合成中重要的合成砌块,可用于合成多种药物中间体,探索苯乙酮酸的绿色合成工艺具有重要的意义。以包含D-扁桃酸脱氢酶Lh DMDH编码基因的重组大肠杆菌全细胞为催化剂,考察了它在无辅酶和辅底物添加的条件下对D-扁桃酸生物... 详细信息

苯乙酮酸是化学合成中重要的合成砌块,可用于合成多种药物中间体,探索苯乙酮酸的绿色合成工艺具有重要的意义。以包含D-扁桃酸脱氢酶Lh DMDH编码基因的重组大肠杆菌全细胞为催化剂,考察了它在无辅酶和辅底物添加的条件下对D-扁桃酸生物转化的效果,并对催化产物进行了纯化和鉴定。结果表明,本研究成功实现了在无辅酶和辅底物添加条件下苯乙酮酸的生物合成,产物的得率和纯度分别为45%和99%左右。成果也为外消旋扁桃酸的手性拆分及苯乙酮酸的生物合成奠定了基础。

关键词：扁桃酸脱氢酶苯乙酮酸全细胞催化绿色化学生物转化

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

新型扁桃酸消旋酶的基因挖掘和性能表征

生物工程学报 2018年第6期34卷 897-905页

作者：周茂志唐存多许建和郁惠蕾华东理工大学生物工程学院生物反应器工程国家重点实验室上海200237 南阳师范学院昆虫生物反应器河南省工程实验室河南南阳473061

消旋酶是实现手性化合物去消旋化制备光学纯化学品的重要工具,来源于恶臭假单胞菌的扁桃酸消旋酶(MR),是目前唯一可以催化两种构型扁桃酸互相转换的消旋酶。通过基因组数据挖掘获得了9个新的扁桃酸消旋酶基因及活性蛋白,其中来源于放射... 详细信息

消旋酶是实现手性化合物去消旋化制备光学纯化学品的重要工具,来源于恶臭假单胞菌的扁桃酸消旋酶(MR),是目前唯一可以催化两种构型扁桃酸互相转换的消旋酶。通过基因组数据挖掘获得了9个新的扁桃酸消旋酶基因及活性蛋白,其中来源于放射性土壤杆菌Agrobacterium radiobacter的Ar MR酶对扁桃酸和邻氯扁桃酸具有较高的催化活力,而且该酶的异源表达水平也较理想。ArMR催化扁桃酸消旋反应的最适温度为50℃,最适pH为7.8。该酶在30℃、40℃和50℃下的半衰期分别为70.7、7.2、0.17 h。ArMR对(R)-和(S)-扁桃酸的K_M值分别为1.44 mmol/L和0.81 mmol/L,k_(cat)值分别为410 s^(–1)和218 s^(–1);对(R)-和(S)-邻氯扁桃酸的KM值分别为6.48 mmol/L和6.37 mmol/L,而k_(cat)值为0.22 s^(–1)和0.23 s^(–1)。Mg^(2+)和Mn^(2+)对该酶的活力有促进作用,而Zn^(2+)使其完全失活。新型扁桃酸消旋酶的发现和表征为今后此类酶的深入研究和开发提供了更多资源和数据参考。

关键词：扁桃酸消旋酶扁桃酸邻氯扁桃酸基因挖掘催化性能动力学常数

家蚕miR-301对化学感受蛋白基因csp9表达的调控

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

昆虫学报 2018年第10期61卷 1145-1152页

作者：杨娟娟王远卓魏博帆邢秋婷阚云超乔惠丽南阳师范学院河南省伏牛山昆虫生物学重点实验室昆虫生物反应器河南省工程实验室河南南阳473061

【目的】探索家蚕Bombyx mori miRNAs对化学感受蛋白基因表达的调控作用,以进一步研究miRNAs及其靶基因在昆虫化学识别中的作用。【方法】利用生物信息学方法预测和筛选可能作用于家蚕化学感受蛋白CSPs基因家族成员的miRNAs;实时荧光定... 详细信息

【目的】探索家蚕Bombyx mori miRNAs对化学感受蛋白基因表达的调控作用,以进一步研究miRNAs及其靶基因在昆虫化学识别中的作用。【方法】利用生物信息学方法预测和筛选可能作用于家蚕化学感受蛋白CSPs基因家族成员的miRNAs;实时荧光定量PCR分析预测获得的候选miR-301和其作用的靶基因在家蚕成虫不同组织中的表达变化;构建miR-301预测靶基因3′-UTR的双荧光素酶报告载体,与合成的miR-301 mimics或阴性对照转染人胚肾细胞HEK293,通过双荧光素酶报告基因检测系统中荧光素酶活性变化检测miR-301对其靶基因表达的调控作用。【结果】生物信息学分析结果发现,家蚕化学感受蛋白基因csp9是miR-301的预测靶基因,二者的结合位点位于csp9的3′-UTR区。实时荧光定量PCR检测结果表明,miR-301在交配后家蚕雌雄成虫触角和雄成虫头部都显著上调表达,靶基因csp9在对应组织中表达则显著下调。二者共转染HEK293细胞后,双荧光素酶检测结果表明,miR-301可以通过与csp9 3′-UTR的互作,显著抑制上游荧光素酶报告基因的表达。【结论】家蚕化学感受蛋白基因csp9是miR-301的靶基因,miR-301通过与靶基因3′-UTR的结合,在翻译水平上抑制csp9的表达。

关键词：家蚕 miRNA 化学感受蛋白靶基因实时荧光定量PCR 双荧光素酶