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circLPAR3靶向miR-1238对食管癌细胞放射敏感性的影响

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中华放射肿瘤学杂志 2022年第1期31卷 71-78页

作者：袁小笋张蕾饶石磊张凯马慧利李长生张敬伟任中海南阳市中心医院肿瘤内科二病区南阳473000 南阳市中心医院放疗科南阳473000

目的探讨circLPAR3对食管癌细胞放射敏感性的影响及作用机制。方法收集37例食管癌患者的癌组织和癌旁组织, 体外培养食管癌细胞系Eca-109、EC9706和KYSE30及食管上皮细胞HET-1A, RT-qPCR法检测组织和细胞中circLPAR3和miR-1238的表达水... 详细信息

目的探讨circLPAR3对食管癌细胞放射敏感性的影响及作用机制。方法收集37例食管癌患者的癌组织和癌旁组织, 体外培养食管癌细胞系Eca-109、EC9706和KYSE30及食管上皮细胞HET-1A, RT-qPCR法检测组织和细胞中circLPAR3和miR-1238的表达水平。以Eca-109细胞为研究对象, 转染circLPAR3 siRNA、miR-1238模拟物或共转染circLPAR3 siRNA与miR-1238抑制剂。用细胞克隆实验检测沉默circLPAR3、过表达miR-1238或同时沉默circLPAR3和miR-1238对Eca-109细胞放射敏感性的影响。4 Gy照射沉默circLPAR3、过表达miR-1238或同时沉默circLPAR3和miR-1238的Eca-109细胞, CCK-8法(A值)、流式细胞术、蛋白印迹法分别检测沉默circLPAR3、过表达miR-1238或同时沉默circLPAR3和miR-1238联合4 Gy照射对Eca-109细胞增殖、凋亡及相关蛋白CyclinD1、p21、Bcl-2和Bax表达的影响。双荧光素酶报告基因实验和RNA Pull down实验验证circLPAR3和miR-1238调控关系。结果与癌旁组织比较, 食管癌组织中circLPAR3表达升高(P<0.05), miR-1238表达降低(P<0.05)。与HET-1A细胞比较, Eca-109、EC9706和KYSE30细胞中circLPAR3表达升高(均P<0.05), miR-1238表达降低(均P<0.05)。沉默circLPAR3、过表达miR-1238降低了Eca-109细胞存活分数(均P<0.05), 放射增敏比分别为1.21、1.75。沉默circLPAR3、过表达miR-1238降低了Eca-109细胞A值、CyclinD1和Bcl-2蛋白表达(均P<0.05), 而提高了Eca-109细胞凋亡率、p21和Bax蛋白表达(均P<0.05)。沉默circLPAR3、过表达miR-1238联合4 Gy照射后Eca-109细胞A值、CyclinD1和Bcl-2蛋白表达降低(均P<0.05), Eca-109细胞凋亡率、p21和Bax蛋白表达升高(均P<0.05)。circLPAR3在Eca-109细胞中靶向结合并负调控miR-1238的表达。同时沉默miR-1238、circLPAR3表达后Eca-109细胞存活分数较只沉默circLPAR3时升高, 放射增敏比为0.59。沉默miR-1238逆转了沉默circLPAR3联合4 Gy照射对Eca-109细胞增殖和凋亡的影响。结论 circLPAR3在食管癌组织和细胞系中呈高表达, 沉默其表达可靶向上调miR-1238抑制食管癌Eca-109细胞增殖, 促进其凋亡, 并增强细胞放射敏感性。

关键词： circLPAR3基因 miR-1238基因细胞增殖细胞凋亡放射敏感性食管癌组织食管癌细胞系

circ-SFMBT2通过靶向miR-7-5p/ADAM10轴对非小细胞肺癌细胞生物学行为的影响

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中华医学遗传学杂志 2022年第2期39卷 162-170页

作者：李长生张莞萍任中海南阳市中心医院肿瘤内科二病区河南473009 南阳市中心医院医学检验科河南473009

目的探讨circ-SFMBT2对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞生物学行为的影响以及对miR-7-5p/ADAM10分子轴的调控作用。方法﹑采用qRT-PCR法与Western印迹法分别检测NSCLC与癌旁组织中circ-SFMBT2、miR-7-5p、ADAM10的表达量;用Pearson法分析circ-SFMBT2与miR-7-5p,以及miR-7-5p与ADAM10的相关性;体外培养人支气管上皮样细胞(human bronchial epithelial-like cells,HBE)与肺癌细胞系H1650、H460、A549、H1299。用CCK-8与EdU实验检测细胞的增殖能力。用平板克隆形成实验检测细胞的克隆形成能力。用流式细胞术检测细胞凋亡率。用Transwell小室实验检测细胞侵袭。用双荧光素酶报告实验检测circ-SFMBT2与miR-7-5p、以及miR-7-5p与ADAM10的靶向关系。用裸鼠移植瘤实验检测敲低circ-SFMBT2对移植瘤生长的影响。用免疫组化实验检测移植瘤组织中ADAM10与Ki67蛋白阳性率。结果circ-SFMBT2与ADAM10在NSCLC组织及细胞系中表达升高,而miR-7-5p的表达降低,circ-SFMBT2与miR-7-5p的表达呈负相关,而miR-7-5p与ADAM10的表达呈负相关。沉默circ-SFMBT2及miR-7-5p过表达可抑制细胞增殖、克隆形成及侵袭,还可促进其凋亡。circ-SFMBT2可靶向调控miR-7-5p,而ADAM10是miR-7-5p的靶基因。沉默circ-SFMBT2与抑制miR-7-5p联合作用,以及miR-7-5p过表达与ADAM10过表达联合作用均可促进细胞增殖、克隆形成及侵袭,并抑制其凋亡。沉默circ-SFMBT2可抑制移植瘤的生长。结论︰沉默circ-SFMBT2可通过调控miR-7-5p/ADAM10分子轴而减弱NSCLC细胞增殖、克隆形成,侵袭能力并诱导其凋亡。

关键词： circ-SFMBT2 miR-7-5p ADAM10 非小细胞肺癌增殖侵袭凋亡

不同剂量地塞米松联合硼替佐米和沙利度胺治疗初发多发性骨髓瘤的临床效果及安全性

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中国实验血液学杂志 2018年第3期26卷 836-841页

作者：李长生冀叶张莞萍付莉萍南阳市中心医院肿瘤科二病区河南南阳473000 南阳市中心医院肿瘤二科河南南阳473000 南阳市中心医院检验科河南南阳473000 南阳市中心医院医务科河南南阳473000

目的:评价不同剂量地塞米松联合硼替佐米和沙利度胺治疗初发多发性骨髓瘤患者的临床效果及安全性。方法:选取我医院2013年1月-2014年1月期间的96例多发性骨髓瘤患者,将入组患者分为A(高剂量地塞米松+硼替佐米+沙利度胺,32例)、B(低剂量... 详细信息

目的:评价不同剂量地塞米松联合硼替佐米和沙利度胺治疗初发多发性骨髓瘤患者的临床效果及安全性。方法:选取我医院2013年1月-2014年1月期间的96例多发性骨髓瘤患者,将入组患者分为A(高剂量地塞米松+硼替佐米+沙利度胺,32例)、B(低剂量地塞米松+硼替佐米+沙利度胺,32例)、C(安慰剂+硼替佐米+沙利度胺,32例)3组,比较3组患者临床疗效及安全性指标。结果:A组和B组总缓解率均明显高于C组(P0.05)。治疗后3组患者KPS评分均明显高于治疗前,RNS评分均明显低于治疗前;A、B两组KPS评分明显高于C组,RNS评分明显低于C组(P0.05);治疗后3组患者CD38、CD56、CD138阳性表达率及SRL阳性率均明显低于治疗前,CD19阳性表达率明显高于治疗前;A、B组CD38、CD56、CD138阳性表达率及SRL阳性率均明显低于C组,CD19则明显高于C组,差异均有统计学意义(P0.05);B、C组在乏力、皮疹、周围神经病变、贫血、粒细胞缺乏等方面发生率均明显低于A组(P0.05)。结论:不同剂量地塞米松联合硼替佐米及沙利度胺治疗多发性骨髓瘤患者的疗效相似,可明显提高缓解率,延长生存期,改善生活质量,但低剂量患者不良反应发生率明显降低,安全性更佳。

关键词：多发性骨髓瘤地塞米松硼替佐米沙利度胺

lncRNA BLACAT1通过靶向miR-374b-5p对卵巢癌细胞紫杉醇耐药性的影响及其机制

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中国老年学杂志 2022年第22期42卷 5616-5621页

作者：赵磊王一斐薛国勇南阳市中心医院药剂科河南南阳473000 南阳市中心医院妇科河南南阳473000

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)膀胱癌相关转录本(BLACAT)1靶向miR-374b-5p对卵巢癌细胞紫杉醇(Taxol)耐药性的影响。方法实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测卵巢癌组织、与其对应的癌旁组织、卵巢癌细胞SKOV3及卵巢癌Taxol耐药细... 详细信息

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)膀胱癌相关转录本(BLACAT)1靶向miR-374b-5p对卵巢癌细胞紫杉醇(Taxol)耐药性的影响。方法实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测卵巢癌组织、与其对应的癌旁组织、卵巢癌细胞SKOV3及卵巢癌Taxol耐药细胞SKOV3/Taxol中BLACAT1和miR-374b-5p表达水平。采用不同浓度Taxol处理SKOV3和SKOV3/Taxol细胞,CCK-8法检测细胞增殖抑制率,计算IC50。将si-BLACAT1和miR-374b-5p mimics分别转染SKOV3/Taxol细胞,经Taxol干预处理后,流式细胞术检测细胞凋亡,Western印迹检测细胞周期蛋白(Cyclin)D1、p21、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2蛋白和Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达水平。双荧光素酶报告基因实验和qRT-PCR验证BLACAT1和miR-374b-5p的靶向关系。结果与癌旁组织比较,卵巢癌组织中BLACAT1的表达水平显著升高,miR-374b-5p的表达水平显著降低;与SKOV3细胞相比,SKOV3/Taxol细胞中BLACAT1的表达水平显著升高,miR-374b-5p的表达水平显著降低(P<0.05)。SKOV3/Taxol细胞的IC50显著高于SKOV3细胞(P<0.05)。沉默BLACAT1或过表达miR-374b-5p均可明显抑制SKOV3/Taxol细胞CyclinD1和Bcl-2表达,明显促进p21和Bax表达,明显促进细胞凋亡(P<0.05)。BLACAT1可靶向负性调控miR-374b-5p表达。干扰miR-374b-5p表达可逆转沉默BLACAT1对SKOV3/Taxol细胞Taxol耐药性的影响。结论沉默BLACAT1通过上调miR-374b-5p表达,抑制SKOV3/Taxol细胞增殖,促进细胞凋亡,从而提高卵巢癌耐药细胞SKOV3/Taxol细胞对Taxol敏感性。

关键词：膀胱癌相关转录本卵巢癌 miR-374b-5p 紫杉醇耐药性

微小RNA-590-5p靶向CCNG2对神经胶质瘤细胞增殖、侵袭和干细胞特性的影响

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中华实验外科杂志 2022年第11期39卷 2156-2159页

作者：范展武海博尹玥周汉光郭哲南阳市中心医院河南大学附属南阳市中心医院综合治疗科473000 南阳市中心医院神经内科 473000 南阳市中心医院神经外科 473000 南阳市中心医院妇科 473000

目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-590靶向CCNG2对神经胶质瘤细胞增殖、侵袭和干细胞特性的影响。方法选取2017年3月至2021年3月南阳市中心医院收集的59例神经胶质瘤和癌旁组织作为研究对象,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析分析癌旁组织... 详细信息

目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-590靶向CCNG2对神经胶质瘤细胞增殖、侵袭和干细胞特性的影响。方法选取2017年3月至2021年3月南阳市中心医院收集的59例神经胶质瘤和癌旁组织作为研究对象,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析分析癌旁组织和肺癌组织miR-590表达水平。神经胶质瘤细胞U251分为miRNA对照组、miR-590组和miR-590 KD组,并采用转染试剂转染对照miRNA、miR-590-5p模拟物、miR-590-5p抑制剂,48 h后检测。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和克隆形成实验分析两组细胞增殖能力;采用Transwell实验分析两组细胞的侵袭能力。采用成球实验和流式细胞术分析两组细胞的干细胞特性;采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-590靶基因。采用蛋白质印迹法(Western blot)分析细胞和肿瘤组织靶基因的表达水平。组间比较采用t检验。结果癌旁组织中miR-590-5p表达水平(1.03±0.15)明显低于神经胶质瘤组织(2.25±0.27),差异有统计学意义(t=30.640,P<0.05)。对照组细胞48 h吸光度值(2.01±0.15)明显高于miR-590-5p KD组(1.37±0.11),差异有统计学意义(t=30.640,P<0.05)。克隆形成实验结果显示,对照组细胞克隆形成数量[(81.33±10.78)个]明显高于miR-590-5p KD组[(36.67±6.71)个],差异有统计学意义(t=8.614,P<0.05)。对照组细胞侵袭数量[(122.17±15.13)个]明显高于miR-590-5p KD组[(60.17±7.83)个],差异有统计学意义(t=8.913,P<0.05)。对照组细胞SP亚群比例[(3.67±1.04)个]明显高于miR-590-5p KD组[(0.71±0.32)个],差异有统计学意义(t=6.669,P<0.05)。对照组细胞成球数量[(32.33±8.09)个]明显高于miR-590-5p KD组[(13.33±2.16)个],差异有统计学意义(t=5.557,P<0.05)。CCNG2是miR-590-5p的靶基因。对照组细胞CCNG2蛋白表达水平(0.89±0.08)明显低于miR-590-5p KD组(2.32±0.30),差异有统计学意义(t=11.130,P<0.05)。结论miR-590靶向CCNG2调节神经胶质细胞的增殖、侵袭和干细胞特性等细胞生物学行为。

关键词：微小RNA-590 CCNG2 增殖侵袭干细胞特性

CircMATR3调节miR-129-5p/SOX2轴对鼻咽癌细胞CNE1恶性生物学行为的影响

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现代肿瘤医学 2023年第23期31卷 4311-4318页

作者：曹华琳贾彦召曲莉尹昕南阳市中心医院耳鼻喉头颈外科河南南阳473000 南阳市中心医院放疗科河南南阳473000

目的:探讨CircMATR3调节miR-129-5p/SOX2轴对鼻咽癌细胞恶性生物学行为的影响。方法:以鼻咽癌细胞系CNE1为研究对象,将CNE1细胞分NC组、si-NC组、si-CircMATR3组、miR-NC组、miR-129-5p mimic组、si-CircMATR3+inhibitor NC组、si-CircMATR3+miR-129-5p inhibitor组、si-SOX2组。RT-qPCR检测细胞中CircMATR3、miR-129-5p、SOX2 mRNA的表达;Western blot检测蛋白表达;双荧光素酶报告实验验证CircMATR3与miR-129-5p、miR-129-5p与SOX2之间的靶向关系;克隆形成实验检测细胞克隆形成能力;Hoechst33342实验观察细胞形态学变化;Transwell小室实验检测细胞侵袭能力;流式细胞术检测细胞周期与细胞凋亡。结果:CircMATR3与miR-129-5p、miR-129-5p与SOX2之间存在靶向关系;沉默CircMATR3或过表达miR-129-5p或沉默SOX2可以抑制鼻咽癌细胞CNE1的克隆形成、侵袭和细胞周期转变,促进细胞凋亡和凋亡小体的形成;抑制miR-129-5p表达一定程度可以逆转沉默CircMATR3对于CNE1细胞的抑制作用。结论:沉默CircMATR3可以上调miR-129-5p表达,抑制SOX2表达,进而抑制鼻咽癌细胞CNE1的克隆形成、侵袭,促进细胞凋亡。

关键词：鼻咽癌 CircMATR3 miR-129-5p/SOX2轴恶性生物学行为

血清IL-6及IL-1β水平和基因多态性与2型糖尿病合并肺部感染及其预后的关联

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中华医院感染学杂志 2023年第7期33卷 1030-1034页

作者：林玉玲李杰玉李曾一籍胤玺周小果南阳市中心医院内分泌科河南南阳473000 南阳市中心医院呼吸内科河南南阳473000

目的探讨白血胞介素-6(IL-6)、白血胞介素-1β(IL-1β)水平和基因多态性与2型糖尿病(T2DM)患者合并肺部感染及预后的关系。方法收集2019年8月-2021年4月南阳市中心医院收治的T2DM合并肺部感染患者240例为研究组,其中预后好组176例,预后... 详细信息

目的探讨白血胞介素-6(IL-6)、白血胞介素-1β(IL-1β)水平和基因多态性与2型糖尿病(T2DM)患者合并肺部感染及预后的关系。方法收集2019年8月-2021年4月南阳市中心医院收治的T2DM合并肺部感染患者240例为研究组,其中预后好组176例,预后差组64例;另选取同期诊治的未合并肺部感染的T2DM患者152例设为对照组。收集患者住院期间临床资料;采集外周静脉血,采用酶联免疫吸附法检测血清IL-6、IL-1β水平,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法检测IL-6-597G/A、IL-1β-3954C/T基因多态性。结果240例T2DM合并肺部感染患者共培养分离病原菌264株,以革兰阴性菌株为主(73.48%)。研究组患者血清IL-6、IL-1β水平均高于对照组(P<0.05)。研究组和对照组IL-6-597G/A基因型(GG/GA/AA)和等位基因(G、A)频率均有统计学差异(P<0.05);研究组和对照组IL-1β-3954C/T基因型(CC/CT/TT)无统计学差异,而等位基因(C、T)频率有统计学差异(P<0.05)。240例T2DM合并肺部感染患者中,预后好和预后差患者IL-6-597G/A基因型(GG/GA/AA)和等位基因(G、A)频率均有统计学差异(P<0.05);预后好和预后差患者IL-1β-3954C/T基因型(CC/CT/TT)和等位基因(C、T)频率均无统计学差异。结论IL-6-597G/A基因多态性与T2DM合并肺部感染风险及预后密切相关,携带A等位基因者不良预后风险更高。

关键词： 2型糖尿病肺部感染白细胞介素-6 白血胞介素-1β 基因多态性关联

CircFAT1调节miR-296-3p/MAPRE1轴对鼻咽癌细胞增殖、凋亡和放疗敏感性的影响

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山东大学学报:医学版 2023年第9期61卷 38-46页

作者：曹华琳贾彦召曲莉尹昕南阳市中心医院耳鼻喉头颈外科河南南阳473000 南阳市中心医院放疗科河南南阳473000

目的研究环状RNA脂肪非典型钙黏蛋白1(CircFAT1)调节miR-296-3p/微管关联蛋白RP/EB家族成员1(MAPRE1)轴对鼻咽癌细胞增殖、凋亡和放疗敏感性的影响。方法以实时荧光定量PCR和免疫印迹法检测鼻咽上皮细胞NP69、人鼻咽癌细胞株CNE2及其放... 详细信息

目的研究环状RNA脂肪非典型钙黏蛋白1(CircFAT1)调节miR-296-3p/微管关联蛋白RP/EB家族成员1(MAPRE1)轴对鼻咽癌细胞增殖、凋亡和放疗敏感性的影响。方法以实时荧光定量PCR和免疫印迹法检测鼻咽上皮细胞NP69、人鼻咽癌细胞株CNE2及其放射线抵抗细胞CNE2-RR中CircFAT1、miR-296-3p、MAPRE1表达。将体外培养的CNE2细胞随机分为对照组、CircFAT1敲低组、阴性对照组、CircFAT1敲低+miR-296-3p inhibitor组,分组转染后以实时荧光定量PCR和免疫印迹法检测各组CNE2细胞CircFAT1、miR-296-3p、MAPRE1表达;以CCK-8法、5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(Edu)染色与流式细胞实验检测各组CNE2细胞增殖、凋亡。将体外培养的CNE2-RR细胞随机分为对照组、放射组、放射+阴性对照组、放射+CircFAT1敲低组、放射+CircFAT1敲低+miR-296-3p inhibitor组,分组转染后以实时荧光定量PCR和免疫印迹法检测各组CNE2-RR细胞CircFAT1、miR-296-3p、MAPRE1表达;以CCK-8法、Edu染色与流式细胞实验检测各组CNE2-RR细胞增殖、凋亡。以双荧光素酶报告基因实验检测CNE2-RR中CircFAT1对miR-296-3p的靶向调节与miR-296-3p对MAPRE1的靶向调节。结果与NP69细胞相比,CNE2、CNE2-RR细胞CircFAT1表达、MAPRE1 mRNA与蛋白表达升高(P0.05),miR-296-3p inhibitor可逆转敲低CircFAT1对CNE2细胞各指标的影响。与对照组、放射组分别相比,放射+CircFAT1敲低组CNE2-RR细胞CircFAT1表达、MAPRE1 mRNA与蛋白表达、存活率、增殖率降低(P0.05),miR-296-3p inhibitor可逆转敲低CircFAT1对放射处理下CNE2-RR细胞各指标的影响。CircFAT1可靶向下调CNE2-RR细胞miR-296-3p表达,而miR-296-3p可靶向下调CNE2-RR细胞MAPRE1表达。结论敲低CircFAT1可通过上调miR-296-3p而降低MAPRE1表达,从而抑制鼻咽癌细胞增殖,促进其凋亡并增强其放射敏感性。

关键词：环状RNA脂肪非典型钙黏蛋白1 微管关联蛋白鼻咽癌增殖凋亡放疗敏感性

星状神经节阻滞抑制脑缺血再灌注大鼠神经元变性、神经炎症与NF-κB信号活性

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中国组织化学与细胞化学杂志 2022年第3期31卷 273-278页

作者：常新会司海超徐宏超南阳市中心医院重症医学科南阳473000 南阳市中心医院麻醉科南阳473000

目的探讨星状神经节阻滞(stellate ganglion block,SGB)对脑缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)大鼠神经功能恢复的影响及机制。方法通过改良尼龙线栓法建立大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型来模拟脑缺血/再灌注损伤,并在MCAO术后1 d对大鼠进行SGB术干预。MCAO术后7 d,通过mNSS评分、转棒实验和跑梯实验评估大鼠的神经功能;通过Nissl、Fluro-Jade B和NeuN染色评估海马CA1区神经元形态;通过IBA-1染色评估海马CA1区中小胶质细胞活化情况;通过ELISA法检测海马CA1区中TNF-α、IL-1β和IL-10的水平;通过Western blot检测NF-κB通路相关蛋白表达水平。结果脑I/R大鼠mNSS评分、总失步数和转棒停留时间均明显增加,海马CA1区中神经元明显丢失和变性、IBA-1免疫反应性明显增强,TNF-α和IL-1β水平明显增加,抑炎因子IL-10水平明显降低;SGB对脑I/R的上述效应具有明显抑制作用。结论SGB能改善脑I/R后大鼠的神经功能,这一作用可能与其抑制海马CA1区脑组织中NF-κB信号通路活性并降低神经炎症和神经元变性有关。

关键词：星状神经节阻滞术脑缺血再灌注损伤海马CA1区神经元损伤神经炎症