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橘皮素调控PI3K/Akt信号通路介导的自噬对脑缺血/再灌注损伤大鼠神经细胞焦亡的影响

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中国药学杂志 2024年第6期59卷 511-521页

作者：孙军温昌明张丽阳高军张在行陈笛时彩丽兰端云张保朝河南省南阳市中心医院神经内科河南南阳473009 河南省南阳市中心医院优诊室门诊河南南阳473009 河南省南阳市中心医院护理部河南南阳473009 河南省南阳市中心医院内分泌科河南南阳473009

目的探究橘皮素(tangeretin,TAN)对脑缺血/再灌注损伤(cerebral ischemia-reperfusion injury,CIRI)大鼠神经元细胞焦亡的影响及作用机制。方法采用线栓法阻塞大鼠大脑中动脉2 h后再灌注复制CIRI模型。实验1:将SD大鼠随机分为假手术组(s... 详细信息

目的探究橘皮素(tangeretin,TAN)对脑缺血/再灌注损伤(cerebral ischemia-reperfusion injury,CIRI)大鼠神经元细胞焦亡的影响及作用机制。方法采用线栓法阻塞大鼠大脑中动脉2 h后再灌注复制CIRI模型。实验1:将SD大鼠随机分为假手术组(sham)、CIRI组、TAN-5 mg·kg^(-1)组、TAN-10 mg·kg^(-1)组、TAN-20 mg·kg^(-1)组、阳性对照药依达拉奉组(EDA-10 mg·kg^(-1)),每组各10只,各组大鼠于再灌注24 h后进行指标检测及病理取材。Zea-Longa法进行神经功能缺失评分;2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)法检测脑梗死比率;苏木素-伊红(HE)染色观察脑组织形态结构,筛选出TAN最佳给药剂量;碘化丙啶染色(PI)检测神经元焦亡比率;免疫荧光双染检测神经元微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(microtubule-associated proteins light chain 3-Ⅱ,LC3-Ⅱ)阳性表达率;Western blot检测脑组织焦亡相关蛋白、磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B,PI3K/Akt)通路相关蛋白和自噬相关蛋白(LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p62)表达。实验2:将SD大鼠随机分为sham组、CIRI组、TAN组、TAN+PI3K抑制剂组(LY294002),每组各10只,各组大鼠于再灌注24 h后进行指标检测及病理取材。Zea-Longa法进行神经功能缺失评分;TTC染色法检测脑梗死比率;Western blot检测脑组织焦亡相关蛋白和自噬相关蛋白表达。结果与CIRI组相比,各给药剂量组大鼠神经功能缺失评分降低、脑梗死体积比率降低、脑组织病理性损伤减轻,筛选得到TAN-20 mg·kg^(-1)为最佳给药剂量组。与CIRI组相比,TAN-20 mg·kg^(-1)组大鼠神经元细胞焦亡率降低,且焦亡相关蛋白表达下调,神经元LC3-Ⅱ阳性细胞率和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达均降低,p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p62表达升高。与TAN-20 mg·kg^(-1)组相比,PI3K抑制剂LY294002能够抑制上述指标变化,逆转TAN对CIRI大鼠的神经功能保护作用。结论TAN能够通过调控PI3K/Akt介导的细胞自噬,抑制脑缺血再灌注诱导的神经元细胞焦亡。

关键词：脑缺血/再灌注损伤橘皮素细胞焦亡自噬磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B通路

枸杞多糖调节PPARγ/MAPK/NF-κB信号通路对脑梗死大鼠神经元凋亡的影响

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中国老年学杂志 2024年第10期44卷 2455-2462页

作者：陈笛温昌明李祥欣孙军高军张在行张保朝南阳市中心医院

目的探讨枸杞多糖(LBP)调节过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/核因子(NF)-κB信号通路对脑梗死大鼠神经元凋亡的影响。方法 SD大鼠随机分为假手术(Sham)组、大脑中动脉闭塞/再灌注(MCAO/R)组、LBP-低(L)、... 详细信息

目的探讨枸杞多糖(LBP)调节过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/核因子(NF)-κB信号通路对脑梗死大鼠神经元凋亡的影响。方法 SD大鼠随机分为假手术(Sham)组、大脑中动脉闭塞/再灌注(MCAO/R)组、LBP-低(L)、中(M)、高(H)+MCAO/R组。MCAO/R手术前14 d, LBP-L、M、H+MCAO/R组分别口服超纯水溶解LBP 100、200、300 mg/kg, 1次/d,连续14 d,而Sham组和MCAO/R组给予等量超纯水。第14天给药后30 min,进行MCAO/R手术。评估MCAO/R损伤后24 h脑组织神经功能、脑梗死体积、脑组织病理学、脑损伤和炎症相关指标及PPARγ/MAPK/NF-κB信号通路蛋白表达。结果与MCAO/R组比较，LBP预处理神经功能评分、脑梗死体积、血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)和中枢神经特异蛋白(S100β)水平、脑组织中伊文思蓝(EB)含量及炎症细胞因子水平明显降低(均P<0.05);此外，LBP预处理抑制CD44、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达并促进神经元核蛋白(NeuN)表达，上调PPARγ蛋白表达，下调磷酸化核因子抑制蛋白(p-IκBα)、p-p65、p-p38、p-c-Jun氨基末端激酶(JNK)和p-细胞外调节蛋白激酶(ERK)蛋白表达，提高B细胞淋巴瘤(Bcl)-2/Bcl-2相关X蛋白(Bax)水平，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 LBP预处理可通过增加PPARγ水平调节MAPK/NF-κB通路，减少神经元凋亡，在脑梗死大鼠中发挥神经保护作用。

关键词：枸杞多糖过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/核因子(NF)-κB信号通路脑梗死神经元凋亡

基于TLR4/NLRP3信号通路探讨化浊行血汤促进高血压脑出血患者术后神经功能恢复的作用

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辽宁中医杂志 2024年

作者：胡昱月张晓冬范晶晶南阳市中心医院

目的探究化浊行血汤促进高血压脑出血（HICH）患者术后神经功能恢复的作用及对Toll样受体4（TLR4）/NOD样受体蛋白3（NLRP3）信号通路的影响。方法研究对象为2021年1月至2023年7月本院收治的120例HICH患者，按随机数字表法分成对照组... 详细信息

目的探究化浊行血汤促进高血压脑出血（HICH）患者术后神经功能恢复的作用及对Toll样受体4（TLR4）/NOD样受体蛋白3（NLRP3）信号通路的影响。方法研究对象为2021年1月至2023年7月本院收治的120例HICH患者，按随机数字表法分成对照组（60例）和实验组（60例）。对照组予以常规术后治疗，实验组予以化浊行血汤+常规术后治疗，时长均为1个月。比较两组疗效、美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）、改良Barthel指数（MBI）评分、脑血流动力学（脑血管平均流速、平均流量、血管外周阻力）、氧化应激及炎性因子指标[基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）]水平、TLR4/NLRP3炎性小体表达水平和用药安全性。结果实验组治疗总有效率高于对照组（P＜0.05）；实验组治疗后NIHSS评分低于对照组，MBI评分高于对照组（P＜0.05）；实验组治疗后血管外周阻力低于对照组，脑血管平均流速、平均流量高于对照组（P＜0.05）；实验组治疗后MMP-9、TNF-α、MDA、TLR4、NLRP3mRNA表达水平低于对照组，SOD高于对照组（P＜0.05）；两组不良反应发生率无明显差异（P>0.05）。结论化浊行血汤可能通过抑制TLR4/NLRP3信号通路的活化降低炎症及氧化应激反应，改善脑血流动力学，促进HICH患者术后神经功能恢复。

关键词：化浊行血汤高血压脑出血 Toll样受体4 NOD样受体蛋白3 神经功能

灵宝护心丹治疗原发性微血管性心绞痛的疗效观察

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现代药物与临床 2024年第5期39卷 1210-1215页

作者：王海洋杨侃白翠萍张晋玮张志良乔崇范春晖南阳市中心医院河南南阳473000

目的观察研究灵宝护心丹治疗原发性微血管性心绞痛的临床疗效及安全性。方法选取2019年12月—2022年6月就诊于南阳市中心医院的原发性微血管性心绞痛患者76例,按随机数字表法分为对照组(38例)和治疗组(38例)。对照组患者给予冠状动脉... 详细信息

目的观察研究灵宝护心丹治疗原发性微血管性心绞痛的临床疗效及安全性。方法选取2019年12月—2022年6月就诊于南阳市中心医院的原发性微血管性心绞痛患者76例,按随机数字表法分为对照组(38例)和治疗组(38例)。对照组患者给予冠状动脉粥样硬化性心脏病二级预防常规治疗,治疗组在上述治疗基础上口服灵宝护心丹,4粒/次,3次/d。两组患者均连续治疗4周。观察两组患者临床疗效,比较治疗前后两组患者西雅图心绞痛调查量表(SQA)评分、运动平板结果和冠脉血流储备(CFR)。结果治疗后,治疗组总有效率为92.11%,明显高于对照组(71.05%,P<0.05)。治疗后,两组SAQ评分在各方面均高于治疗前(P<0.05),且治疗组显著高于对照组(P<0.05)。治疗后,两组患者运动平板总运动时间明显升高,而ST段最大压低程度明显下降(P<0.05),且治疗组患者运动平板结果改善均显著优于对照组(P<0.05)。治疗后,两组CFR指标比治疗前明显升高(P<0.05),且治疗组患者冠脉血流储备情况显著高于对照组(P<0.05)。结论灵宝护心丹能够改善微血管心绞痛患者的临床症状,提高冠脉血流储备,增强运动耐量并改善患者生活质量。

关键词：灵宝护心丹微血管心绞痛西雅图心绞痛调查量表运动平板试验冠状动脉血流储备

LncRNA CASC9靶向调节miR-195-5p/VEGFA轴对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡和迁移的影响

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中国老年学杂志 2024年第1期44卷 96-103页

作者：黄文博杜申钊曾静谷耀东南阳市中心医院口腔科河南南阳473000

目的探讨长链非编码RNA癌易感性候选基因(LncRNA CASC)9对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、凋亡和迁移的影响及作用机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测人OSCC组织与细胞中LncRNA CASC9表达,筛选最佳细胞系。体外培养OSCC细... 详细信息

目的探讨长链非编码RNA癌易感性候选基因(LncRNA CASC)9对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、凋亡和迁移的影响及作用机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测人OSCC组织与细胞中LncRNA CASC9表达,筛选最佳细胞系。体外培养OSCC细胞SCC15,将细胞分为空白对照(Control)组、si-CASC9组、si-NC组、miR-195-5p mimic组、miR-NC组、si-CASC9+NC inhibitor组、si-CASC9+miR-195-5p inhibitor组、miR-195-5p mimics+pcDNA组、miR-195-5p mimics+VEGFA组,qRT-PCR检测LncRNA CASC9、miR-195-5p表达,CCK-8法检测SCC15细胞增殖,流式细胞仪检测SCC15细胞凋亡,Transwell实验检测SCC15细胞迁移;Western印迹法检测SCC15细胞中血管内皮生长因子(VEGF)A、增殖细胞核抗原(PCNA)、半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3、基质金属蛋白酶(MMP)-9蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证miR-195-5p与LncRNA CASC9、VEGFA的靶向关系。结果LncRNA CASC9在OSCC组织与细胞中表达较癌旁组织显著上调(P<0.05);抑制LncRNA CASC9表达或过表达miR-195-5p可显著抑制SCC15细胞增殖及迁移,促进细胞凋亡(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验显示,LncRNA CASC9、VEGFA与miR-195-5p存在靶向关系(P<0.05);抑制miR-195-5p表达可显著逆转抑制LncRNA CASC9表达对SCC15细胞增殖、凋亡及迁移的作用(P<0.05);上调VEGFA表达可显著逆转过表达miR-195-5p对SCC15细胞增殖、凋亡及迁移的作用(P<0.05)。结论LncRNA CASC9在OSCC组织与细胞中上调表达,抑制LncRNA CASC9表达可通过调节miR-195-5p/VEGFA轴抑制OSCC细胞增殖与迁移,促进细胞凋亡。

关键词：长链非编码RNA癌易感性候选基因9 微小RNA-195-5p 血管内皮生长因子A 口腔鳞状细胞癌增殖凋亡迁移

卵巢癌患者化疗后骨髓抑制并发肺部感染病原菌特点及与外周血单核细胞Nrf2 mRNA和TLR7 mRNA的相关性

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中国微生态学杂志 2024年第3期36卷 341-345,350页

作者：王英徐燕叶永生南阳市中心医院妇科河南473000

目的观察卵巢癌患者化疗后骨髓抑制并发肺部感染病原菌特点,并分析其与外周血单核细胞(PBMC)Nrf2 mRNA、TLR7 mRNA表达的相关性。方法选取我院30例化疗后骨髓抑制并发肺部感染的卵巢癌患者(并发肺部感染组)及同期30例化疗后骨髓抑制无... 详细信息

目的观察卵巢癌患者化疗后骨髓抑制并发肺部感染病原菌特点,并分析其与外周血单核细胞(PBMC)Nrf2 mRNA、TLR7 mRNA表达的相关性。方法选取我院30例化疗后骨髓抑制并发肺部感染的卵巢癌患者(并发肺部感染组)及同期30例化疗后骨髓抑制无肺部感染的卵巢癌患者(未并发肺部感染组)为研究对象,观察并发肺部感染患者病原菌特点,检测两组患者化疗后PBMC Nrf2 mRNA、TLR7 mRNA的表达水平,分析Nrf2 mRNA、TLR7 mRNA与骨髓抑制的关系及Nrf2 mRNA、TLR7 mRNA对骨髓抑制并发肺部感染的预测价值。结果共检出病原菌30株,其中革兰阳性菌12株(40.00%),革兰阴性菌18株(60.00%),且以铜绿假单胞菌为主(20.00%)。白细胞减少0~Ⅰ度患者、中性粒细胞减少0~Ⅰ度患者Nrf2 mRNA水平显著高于白细胞减少Ⅱ~Ⅲ度患者和中性粒细胞减少Ⅱ~Ⅲ度患者,而TLR7 mRNA水平显著低于白细胞减少Ⅱ~Ⅲ度患者和中性粒细胞减少Ⅱ~Ⅲ度患者(均P<0.05)。白细胞减少、中性粒细胞减少与Nrf2 mRNA表达水平呈负相关,与TLR7 mRNA表达水平呈正相关(均P<0.05)。并发肺部感染组患者Nrf2 mRNA水平显著低于未并发肺部感染组,而TLR7 mRNA水平显著高于未并发肺部感染组(均P<0.05)。Nrf2 mRNA对骨髓抑制并发肺部感染预测的敏感度为80.2%,特异度为71.3%;TLR7 mRNA的敏感度为83.5%,特异度为70.9%;两者联合预测的敏感度为88.4%,特异度为78.6%。结论卵巢癌患者化疗后骨髓抑制与PBMC Nrf2 mRNA、TLR7 mRNA存在显著联系。骨髓抑制并发肺部感染的病原菌以革兰阴性菌为主,患者PBMC Nrf2 mRNA水平显著降低,TLR7 mRNA水平显著升高,两者联合检测对骨髓抑制并发肺部感染具有较高的预测价值。

关键词：卵巢癌骨髓抑制肺部感染核因子E2相关因子2 Toll样受体7

特发性炎性肌病间质性肺炎患者并发肺部感染病原菌及危险因素

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中华医院感染学杂志 2024年第8期34卷 1150-1153页

作者：周小果党强李海剑门翔路尧南阳市中心医院呼吸与危重症医学科河南南阳473005 南阳市中心医院风湿免疫科河南南阳473005

目的探究特发性炎性肌病(IIM)间质性肺炎(IP)患者肺部感染的病原学特征及危险因素。方法将2019年12月-2023年4月南阳市中心医院收治的95例IIMIP患者发生与未发生肺部感染的临床资料分别纳入感染组(n=52)和非感染组(n=43)。统计IIMIP患... 详细信息

目的探究特发性炎性肌病(IIM)间质性肺炎(IP)患者肺部感染的病原学特征及危险因素。方法将2019年12月-2023年4月南阳市中心医院收治的95例IIMIP患者发生与未发生肺部感染的临床资料分别纳入感染组(n=52)和非感染组(n=43)。统计IIMIP患者肺部感染的现况及病原学特征,通过单因素及多因素分析法分析IIMIP患者肺部感染的危险因素。结果95例IIMIP患者有52例发生肺部感染,肺部感染发生率为54.74%;共分离59株病原菌,其中革兰阴性菌、革兰阳性菌、真菌、巨细胞病毒和肺炎支原体占比分别为45.76%、28.81%、20.34%、3.39%、1.69%,革兰阴性菌以铜绿假单胞菌(11株)为主,革兰阳性菌以肺炎链球菌(7株)为主;多因素Logistic回归分析结果显示,外周血淋巴细胞计数、CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)及血清白蛋白、乳酸脱氢酶(LDH)是IIMIP患者肺部感染的危险因素(P<0.05)。结论IIMIP患者肺部感染的发生率高,且病原菌以革兰阴性菌为主;IIMIP患者肺部感染与外周血淋巴细胞计数、CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)、白蛋白、LDH关系密切;临床可据此予以早期针对性防治从而降低IIMIP患者肺部感染的发生风险。

关键词：特发性炎性肌病间质性肺炎肺部感染病原菌危险因素预防措施

二氢杨梅素调节HIF-1α/BNIP3信号通路对脑卒中大鼠神经元自噬和凋亡的影响

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中国老年学杂志 2024年第13期 3249-3253页

作者：陈笛温昌明周静孙军高军张在行张东焕张保朝南阳市中心医院

目的探究二氢杨梅素(DHM)调节低氧诱导因子(HIF)-1α/E1B-19kDa相互作用蛋白(BNIP)3信号通路对脑卒中大鼠神经元自噬和凋亡的影响。方法实验分为假手术(NC)组、模型(model)组、DHM组(4 ml/kg)、HIF-1α/BNIP3抑制剂(BAY)组(4 mg/kg)、... 详细信息

目的探究二氢杨梅素(DHM)调节低氧诱导因子(HIF)-1α/E1B-19kDa相互作用蛋白(BNIP)3信号通路对脑卒中大鼠神经元自噬和凋亡的影响。方法实验分为假手术(NC)组、模型(model)组、DHM组(4 ml/kg)、HIF-1α/BNIP3抑制剂(BAY)组(4 mg/kg)、DHM+BAY组(4 ml/kg+4 mg/kg),每组20只。采用Longa法进行神经功能评分；采用DCFH-DA荧光探针法测定活性氧(ROS)表达水平；试剂盒测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量；2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色计算脑梗死体积百分比；透射电子显微镜检测神经元自噬；TUNEL染色法检测神经元细胞凋亡；Western印迹法检测大鼠脑组织细胞凋亡、自噬及HIF-1α/BNIP3通路相关蛋白表达水平。结果与NC组比较，model组神经元结构缺损且少量自噬小体出现，神经功能评分、ROS水平、MDA含量、脑梗死体积百分比、细胞凋亡率、胱天蛋白酶(caspase)-3、B淋巴细胞瘤(Bcl)-2相关X蛋白(Bax)、苄氯素(Beclin)-1、微管相关蛋白1A/1B-轻链3(LC3B)、HIF-1α、BNIP3蛋白水平升高，SOD活性降低，差异显著(P<0.05);与model组比较，DHM组细胞形态得到改善且自噬小体增多，神经功能评分、ROS水平、MDA含量、脑梗死体积百分比、细胞凋亡率、caspase-3、Bax蛋白水平降低，SOD活性、Beclin-1、LC3B、HIF-1α、BNIP3蛋白水平升高，差异显著(P<0.05);与DHM组比较，DHM+BAY组神经功能评分、ROS水平、MDA含量、脑梗死体积百分比、细胞凋亡率、caspase-3、Bax蛋白水平升高，SOD活性、Beclin-1、LC3B、HIF-1α、BNIP3蛋白水平降低，差异显著(P<0.05);与BAY组比较，DHM+BAY组神经功能评分、ROS水平、MDA含量、脑梗死体积百分比、细胞凋亡率、caspase-3、Bax蛋白水平降低，SOD活性、Beclin-1、LC3B、HIF-1α、BNIP3蛋白水平升高，差异显著(P<0.05)。结论 DHM可能通过激活HIF-1α/BNIP3信号通路，减轻脑卒中大鼠神经元凋亡，增强自噬作用，减轻脑损伤，进而促进神经功能的恢复。

关键词：二氢杨梅素低氧诱导因子-1α/E1B-19kDa相互作用蛋白3信号通路脑卒中神经元

miR-124通过抑制TLR4/NF-κB/CCL2对脑梗死大鼠神经元凋亡的影响

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中国老年学杂志 2024年第1期44卷 122-127页

作者：陈笛温昌明李祥欣孙军高军张在行张东焕张保朝南阳市中心医院河南南阳473000

目的探讨微小RNA(miR)-124通过抑制Toll样受体(TLR)4/核因子(NF)-κB/CC类趋化因子配体(CCL)2对脑梗死(CI)大鼠神经元凋亡的影响。方法通过线栓闭塞大脑中动脉法建立CI大鼠模型60只,以随机数表法平均分为5组:模型组、miR-124激活剂(miR-... 详细信息

目的探讨微小RNA(miR)-124通过抑制Toll样受体(TLR)4/核因子(NF)-κB/CC类趋化因子配体(CCL)2对脑梗死(CI)大鼠神经元凋亡的影响。方法通过线栓闭塞大脑中动脉法建立CI大鼠模型60只,以随机数表法平均分为5组:模型组、miR-124激活剂(miR-124 agomir)组、TLR4过表达质粒组、miR-124 agomir阴性对照+空载质粒组、miR-124 agomir+TLR4过表达质粒组,另取12只大鼠只分离颈动脉,作为假手术组。分组干预后,评测大鼠神经功能缺损情况,比较各组神经功能缺损评分;采用三苯基氯化四氮唑(TTC)染色检测大鼠CI情况,比较各组CI面积;采用TUNEL染色检测海马神经元凋亡情况,比较各组海马神经元凋亡率;采用试剂盒测量各组血清活性氧(ROS)及炎症因子环氧合酶(COX)-2、白细胞介素(IL)-17水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)实验检测各组脑组织miR-124表达;采用Western印迹实验检测各组脑组织凋亡及TLR4/NF-κB/CCL2通路蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组、miR-124 agomir阴性对照+空载质粒组、miR-124 agomir+TLR4过表达质粒组脑组织miR-124与B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)蛋白表达水平显著降低(P0.05)。结论miR-124可通过下调TLR4/NF-κB/CCL2通路蛋白表达,抑制炎症,减轻脑组织梗死及海马神经元凋亡,修复CI大鼠神经功能。

关键词： miR-124 Toll样受体4/核因子κB/CC类趋化因子配体2 脑梗死神经元凋亡