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甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶1对肝癌细胞增殖和迁移的作用及机制研究

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中华消化杂志 2024年第6期44卷 398-405页

作者：任琪琪黄伟马韬陆翠华南通大学附属医院消化内科南通226001

目的探究甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶1(MASP1)对肝癌细胞生物学行为的影响及可能分子机制。方法选取2022年1月10日至10月25日在南通大学附属医院行肝癌切除手术患者的20对新鲜肝癌组织和癌旁(距癌组织3 cm)正常组织标本并分析MASP... 详细信息

目的探究甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶1(MASP1)对肝癌细胞生物学行为的影响及可能分子机制。方法选取2022年1月10日至10月25日在南通大学附属医院行肝癌切除手术患者的20对新鲜肝癌组织和癌旁(距癌组织3 cm)正常组织标本并分析MASP1的表达情况。收集2012年3月1日至2017年5月20日南通大学附属医院病理科组织标本库中67例肝癌患者的癌组织及对应的癌旁(距癌组织3 cm)正常组织,分析MASP1的表达水平与肝癌患者临床资料的相关性。培养人肝癌细胞系SK-Hep1、Hep3B并构建MASP1过表达和MASP1敲减细胞株,设立SK-Hep1阴性对照、SK-Hep1 MASP1过表达组与Hep3B阴性对照和Hep3B MASP1敲减组。通过裸鼠皮下移植瘤实验分析MASP1对肝癌细胞增殖的影响。通过蛋白质印迹法检测MASP1对上皮-间质转化相关蛋白质[神经钙黏素、基质金属蛋白酶9(MMP9)、上皮钙黏素]表达的影响,以及MASP1对磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白质的表达及其磷酸化水平的影响。统计学方法采用独立样本t检验、配对t检验和卡方检验。结果20对新鲜组织标本的免疫组织化学染色结果显示,MASP1在肝癌组织中的表达低于癌旁正常组织(3.73±1.03比6.76±1.46),差异有统计学意义(t=16.97,P<0.001)。67例肝癌患者的临床资料与MASP1的表达水平相关性分析显示,MASP1的表达水平与肿瘤有无侵犯血管有关,差异有统计学意义(χ^(2)=5.20,P=0.023)。裸鼠皮下移植瘤实验显示,SK-Hep1 MASP1过表达组小鼠的皮下肿瘤比SK-Hep1阴性对照组体积更小、重量更轻[(165.42±149.08)mm^(3)比(260.42±179.78)mm^(3)、(0.13±0.12)g比(0.18±0.12)g],差异均有统计学意义(t=5.15、3.89,均P<0.05)。蛋白质印迹法显示,SK-Hep1 MASP1过表达组神经钙黏素和MMP9表达低于SK-Hep1阴性对照组,上皮钙黏素表达高于SK-Hep1阴性对照组(0.73±0.01比1.02±0.02、0.40±0.01比0.69±0.01、0.91±0.02比0.78±0.02),差异均有统计学意义(t=24.23、36.87、9.27,均P<0.001)。Hep3B MASP1敲减组神经钙黏素和MMP9表达高于Hep3B阴性对照组,上皮钙黏素表达低于Hep3B阴性对照组(1.04±0.01比0.31±0.01、0.54±0.02比0.04±0.01、0.56±0.01比0.93±0.01),差异均有统计学意义(t=163.20、53.16、60.74,均P<0.001)。SK-Hep1 MASP1过表达组的磷酸化PI3K、磷酸化Akt、磷酸化mTOR的表达低于SK-Hep1阴性对照组(0.59±0.01比1.02±0.01、0.64±0.01比1.12±0.02、0.10±0.01比1.05±0.02),Hep3B MASP1敲减组的磷酸化PI3K、磷酸化Akt、磷酸化mTOR的表达高于Hep3B阴性对照组(0.96±0.01比0.55±0.01、0.99±0.01比0.38±0.01、0.93±0.02比0.06±0.01),差异均有统计学意义(t=40.87、40.91、87.30、44.17、107.50、67.28,均P<0.001)。结论MASP1在肝癌组织中低表达,并且与肝癌患者的不良预后及肿瘤血管侵袭的发生显著相关,其可能通过调控PI3K/Akt/mTOR信号通路影响肝癌细胞的增殖和迁移能力,提示MASP1有望成为治疗肝癌的关键基因。

关键词：肝细胞癌甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶1 细胞增殖迁移

一种简易牵引装置在结肠内镜黏膜下剥离术中的临床应用(含视频)

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中华消化内镜杂志 2024年第5期41卷 405-407页

作者：王文平冷霞仓慧刘华敏刘鹏飞孙岳军王芳军南通大学附属江阴医院消化内科江阴214400

评估在结肠内镜黏膜下剥离术(endoscopic submucosal dissection,ESD)中,金属夹联合丝线和橡皮圈作为简易内牵引装置的临床应用价值。以2021年1月至2022年7月间,在南通大学附属江阴医院进行ESD治疗的56例早期结肠癌和癌前病变患者为研... 详细信息

评估在结肠内镜黏膜下剥离术(endoscopic submucosal dissection,ESD)中,金属夹联合丝线和橡皮圈作为简易内牵引装置的临床应用价值。以2021年1月至2022年7月间,在南通大学附属江阴医院进行ESD治疗的56例早期结肠癌和癌前病变患者为研究对象,采用计算机软件随机分配,分为常规ESD治疗的对照组(n=28)和金属夹联合丝线及橡皮圈牵引的牵引组(n=28)。对两组患者的ESD手术总时间、黏膜剥离时间、黏膜下注射次数、完整切除病灶率、手术并发症等情况进行综合比较。结果牵引组手术总时间较对照组短[(74.64±33.25)min比(117.18±35.75)min,t=4.61,P0.05)。可见,金属夹联合丝线及橡皮圈的作为牵引辅助装置,可以降低结肠ESD的技术难度,缩短手术时间。

关键词：结肠肿瘤牵引内镜黏膜下剥离术金属夹

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免疫治疗在胃癌中的应用研究进展

中国肿瘤临床 2024年第7期51卷 359-365页

作者：熊德君丁晓凌周晓荣南通大学医学院免疫系教研室江苏省南通市226001 南通大学附属医院消化内科

胃癌是全球最常见的恶性肿瘤之一,由于胃癌筛查率低和早期症状轻微,多数患者在晚期才被确诊,影响预后。近年来,随着研究深入,胃癌的免疫治疗取得显著进展,尤其对不可切除和转移性病例效果显著,使其成为继手术、化疗、放疗和靶向治疗后... 详细信息

胃癌是全球最常见的恶性肿瘤之一,由于胃癌筛查率低和早期症状轻微,多数患者在晚期才被确诊,影响预后。近年来,随着研究深入,胃癌的免疫治疗取得显著进展,尤其对不可切除和转移性病例效果显著,使其成为继手术、化疗、放疗和靶向治疗后的有效治疗方法。免疫治疗通过人为调控免疫系统生效,包括过继细胞疗法、免疫检查点抑制剂和肿瘤疫苗等。目前,免疫治疗虽然前景广阔,但在临床应用中仍面临诸多挑战和问题。本文就胃癌免疫治疗的临床应用以及存在的问题进行综述。

关键词：胃癌免疫治疗过继细胞疗法免疫检查点抑制剂肿瘤疫苗

白细胞介素-34对人外周血单核细胞来源的巨噬细胞极化和迁移能力的影响

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新乡医学院学报 2024年第1期41卷 8-12页

作者：陈伟杰程苕莼刘一村卞兆连南通大学医学院江苏南通226000 南通大学附属南通第三医院消化内科江苏南通226000

目的探讨白细胞介素(IL)-34对人外周血单核细胞来源的巨噬细胞极化和迁移能力的影响。方法采用免疫磁珠分选法从人外周血单核细胞中分选CD14+单核细胞,并使用流式细胞仪检测CD14+单核细胞纯度。将CD14+单核细胞分为M1型组、IL-34-M1型组... 详细信息

目的探讨白细胞介素(IL)-34对人外周血单核细胞来源的巨噬细胞极化和迁移能力的影响。方法采用免疫磁珠分选法从人外周血单核细胞中分选CD14+单核细胞,并使用流式细胞仪检测CD14+单核细胞纯度。将CD14+单核细胞分为M1型组、IL-34-M1型组、M2型组、IL-34-M2型组,M1型组和IL-34-M1型组细胞加入粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)诱导5 d后,半量换液,加入干扰素-γ、脂多糖、IL-6和GM-CSF继续诱导4 d;M2型组和IL-34-M2型组细胞加入巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)诱导5 d后,半量换液,加入M-CSF、IL-4、IL-6和IL-13继续诱导4 d。IL-34-M1型组和IL-34-M2型组细胞于诱导开始和诱导第5天加入IL-34进行共诱导。诱导第9天,采用流式细胞术检测各组细胞中CD14+CD86+细胞(M1型巨噬细胞)和CD14+CD163+细胞(M2型巨噬细胞)比例,采用Transwell小室实验检测M2型组、IL-34-M2型组细胞迁移能力。结果通过磁珠分选法获得了高纯度的CD14+单核细胞,CD14阳性率为(96.77±2.72)%,可用于巨噬细胞的诱导。M1型组、IL-34-M1型组中CD14+CD86+细胞比例分别为(43.20±7.59)%、(27.87±2.06)%,M2型组、IL-34-M2型组中CD14+CD163+细胞比例分别为(47.70±4.49)%、(58.95±3.65)%;IL-34-M1型组中CD14+CD86+细胞比例显著低于M1型组(P<0.05),IL-34-M2型组中CD14+CD163+细胞比例显著高于M2型组(P<0.05)。M2型组、IL-34-M2型组巨噬细胞迁移数分别为(97.8±9.0)、(205.6±21.9)个;IL-34-M2型组巨噬细胞迁移数显著多于M2型组(P<0.05)。结论IL-34可抑制人单核细胞来源的巨噬细胞向M1型极化,促进巨噬细胞向M2型极化,并可增强M2型巨噬细胞的迁移能力。

关键词：白细胞介素-34 巨噬细胞极化迁移能力

槲皮素提高人结直肠癌细胞SW480和SW620对顺铂的敏感性

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西安交通大学学报(医学版) 2024年

作者：周锋沙德胜卢瑗瑗陈维南通大学附属如皋医院/如皋市人民医院普通外科空军军医大学西京消化病医院消化内科南通大学附属如皋医院/如皋市人民医院肿瘤内科

目的本研究旨在探究槲皮素对顺铂耐药人结直肠癌（colorectalcancer，CRC）细胞SW480和SW620的抑制作用及其可能的机制。方法培养SW480和SW620细胞的顺铂耐药亚型，并用MTT法测定槲皮素对细胞增殖和化疗敏感性的影响。流式细胞术用于... 详细信息

目的本研究旨在探究槲皮素对顺铂耐药人结直肠癌（colorectalcancer，CRC）细胞SW480和SW620的抑制作用及其可能的机制。方法培养SW480和SW620细胞的顺铂耐药亚型，并用MTT法测定槲皮素对细胞增殖和化疗敏感性的影响。流式细胞术用于检测细胞凋亡，蛋白质印迹法用于检测相关蛋白质的表达。结果MTT实验显示，80μmol/L和160μmol/L浓度的槲皮素显著抑制了SW480和SW620细胞的增殖。流式细胞术结果表明，顺铂联合槲皮素组的细胞凋亡率明显高于其他3组。蛋白质印迹法结果显示，顺铂联合槲皮素组的裂解型半胱天冬酶-3（cleaved-caspase-3）和半胱天冬酶-9（caspase-9）表达显著增加。化疗药物敏感性检测结果表明，耐药细胞的IC50升高，而在槲皮素给药后显著下降（P均＜0.05）。结论本研究明确了槲皮素能够提高人CRC细胞对顺铂的敏感性。这种效应可能与其影响细胞增殖、凋亡和自噬等方面的作用机制有关。

关键词：槲皮素 SW480细胞 SW620细胞结直肠癌顺铂

下调PDCD4抑制MAP2K3和p38 MAPK的表达减轻LPS诱导的肾小管上皮细胞炎症和凋亡

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中国急救医学 2024年第4期44卷 305-313页

作者：蒋伟张益楠张健锋黄中伟南通大学附属医院急诊内科江苏南通226001 南通大学附属医院皮肤科江苏南通226001 南通大学附属医院消化内科江苏南通226001

目的研究程序性细胞死亡蛋白4(programmed cell death protein 4,PDCD4)在脓毒症诱导的急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)中的作用机制,以及调控PDCD4表达通过丝裂原活化蛋白激酶3(mitogen-activated protein kinase 3,MAP2K3)和p38蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)对脓毒症AKI起到潜在治疗作用。方法用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激人肾小管上皮细胞(HK-2)构建脓毒症AKI细胞模型。进一步用腺病毒介导siRNA和过表达载体抑制和上调AKI细胞模型中PDCD4的表达;CCK-8法检测细胞增殖;用DCFH-DA及激光共聚焦显微镜检测细胞中ROS水平,用总SOD活性检测试剂和MDA检测试剂盒检测细胞中SOD和MDA水平;免疫共沉淀验证PDCD4和MAP2K3之间的蛋白相互作用;TUNEL染色法检测细胞凋亡;RT-qPCR和Western blot检测PDCD4及相关基因的mRNA和蛋白表达水平;ELISA法检测患者血清中炎症相关因子水平。结果LPS诱导可以促进HK-2细胞中PDCD4表达,下调PDCD4可抑制LPS诱导的HK-2细胞的炎症、氧化应激及细胞凋亡。数据库预测及免疫共沉淀证实PDCD4可以与MAP2K3相互作用,且在LPS诱导的HK-2细胞中,MAP2K3表达水平显著增强。MAP2K3过表达和p38 MAPK激动剂可以减轻PDCD4下调对LPS诱导的细胞炎症和氧化应激的影响并抑制细胞凋亡。结论下调PDCD4可以通过抑制MAP2K3和p38 MAPK从而抑制LPS诱导的肾小管上皮细胞的炎症和凋亡。

关键词：急性肾损伤脓毒症程序性细胞死亡蛋白4 丝裂原活化蛋白激酶3 p38蛋白激酶活性氧超氧化物歧化酶丙二醛

乙型肝炎病毒相关肝癌釉丛蛋白和KLF-5过表达及其临床病理特征

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中华肝脏病杂志 2024年第2期32卷 148-154页

作者：杨君伶方蓉菲谢群邰伯军姚登福姚敏南通大学附属医院临床医学研究中心和医学院免疫学系南通226001 南通大学附属医院消化内科南通226001 海安市人民医院感染性疾病科海安226600 南通大学附属医院感染性疾病科南通226001

目的分析乙型肝炎病毒(HBV)相关肝细胞癌(HCC)组织中釉丛蛋白(TUFT1)和锌指蛋白家族Krüppel样因子5(KLF5)表达,评估其对HCC的临床价值。方法依据The Cancer Genome Atlas(TCGA)数据库资料,比较癌及非癌组KLF5 mRNA及TUFT1 mRNA转录状态... 详细信息

目的分析乙型肝炎病毒(HBV)相关肝细胞癌(HCC)组织中釉丛蛋白(TUFT1)和锌指蛋白家族Krüppel样因子5(KLF5)表达,评估其对HCC的临床价值。方法依据The Cancer Genome Atlas(TCGA)数据库资料,比较癌及非癌组KLF5 mRNA及TUFT1 mRNA转录状态,分析组间差异及其预后价值;经伦理委员会批准,收集术后肝癌及其配对癌周组织制作组织芯片,以免疫组织化学法验证KLF5和TUFT1表达及其细胞内定位;以免疫印迹法分析组织中表达及其临床病理学特征;以SPSS软件行单/多因素分析其与患者预后的关系。结果依据TCGA资料,HCC组TUFT1或KLF5 mRNA转录水平均显著高于非癌组(P<0.001)。免疫组织化学检查和蛋白质印迹法证实人HCC组织TUFT1和KLF5过表达,主要定位于细胞质和细胞膜。HCC组织中TUFT1阳性率为87.1%(χ^(2)=18.563,P<0.001),KLF5阳性率为95.2%(χ^(2)=96.435,P<0.001),二者均显著高于癌旁组;在国际抗癌联盟的标准III~IV期其表达强度均高于I~II期(P<0.01)。临床病理特征显示,二者异常均与患者HBV感染、瘤体大小、伴肝外转移、TNM分期及伴腹水显著相关。单因素分析均与瘤体大小、HBV感染和患者生存率相关;多因素分析均是HCC患者的独立预后因素。结论TUFT1和KLF5可能均为HBV相关HCC诊断和预后具有临床价值的新标志物。

关键词：肝细胞癌乙型肝炎病毒 TUFT1 KLF5 临床病理学特征预后

构建诺模图模型预测肝硬化食管胃底静脉曲张出血的风险

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中华消化病与影像杂志（电子版） 2024年第4期14卷 330-335页

作者：秦相清朱陈张海银南通大学附属南通第三医院消化内科江苏省226000

目的评估HBV相关肝硬化患者食管胃底静脉曲张出血(EVGB)的风险因素,以构建预测EVGB风险的诺模图模型。方法以2019年1月至2022年1月南通大学附属南通第三医院收治的300例HBV相关肝硬化患者为研究对象,采用单、多变量Logistic回归分析筛选... 详细信息

目的评估HBV相关肝硬化患者食管胃底静脉曲张出血(EVGB)的风险因素,以构建预测EVGB风险的诺模图模型。方法以2019年1月至2022年1月南通大学附属南通第三医院收治的300例HBV相关肝硬化患者为研究对象,采用单、多变量Logistic回归分析筛选EVGB的风险因素并构建诺模图。通过受试者特征(ROC)的曲线下面积(AUC),评估模型对EVGB风险的识别能力。绘制校准曲线衡量模型预测风险与实际观测风险之间的一致性。结果共131例(43.7%)患者有EVGB史,单、多变量Logistic回归分析显示,腹水(OR=6.186,95%CI 3.286~11.644,P<0.001)、血小板计数(OR=0.983,95%CI 0.978~0.989,P<0.001)、血清白蛋白值(OR=0.963,95%CI 0.928~0.999,P=0.042)以及血糖水平(OR=1.093,95%CI 1.003~1.190,P=0.042)是EVGB的独立风险因素。基于以上变量构建预测肝硬化患者EVGB风险的诺模图,该模型AUC值为0.826(95%CI 0.780~0.872),提示判别能力良好。校准曲线显示模型预测风险与发生EGVB的实际风险之间具有高度一致性。结论腹水、血小板计数、血清白蛋白和血糖水平与肝硬化EGVB显著相关,基于这些变量构建的诺模图模型对EGVB风险具有良好的预测能力,可能有助于指导医护人员开展精准预防和临床干预。

关键词：肝硬化食管胃底静脉曲张出血风险因素预测诺模图

血清BNP、HCY水平与高脂血症性急性胰腺炎患者病情程度相关性及预后评估价值分析

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中国科技期刊数据库医药 2024年第1期 0033-0035页

作者：冯海娟丁益宏陈恳南通大学附属如皋医院消化内科江苏如皋226500

分析血清脑钠肽(BNP)、同型半胱氨酸(HCY)水平与高脂血症性急性胰腺炎(HLAP)患者的病情程度相关性以及预后评估价值。方法收集2022年1月至2023年6月之间就诊于我院的68例高脂血症性急性胰腺炎患者,采用酶联免疫ELISA法检测每个患者的血... 详细信息

分析血清脑钠肽(BNP)、同型半胱氨酸(HCY)水平与高脂血症性急性胰腺炎(HLAP)患者的病情程度相关性以及预后评估价值。方法收集2022年1月至2023年6月之间就诊于我院的68例高脂血症性急性胰腺炎患者,采用酶联免疫ELISA法检测每个患者的血清BNP以及HCY水平,并依据病情的严重程度将其分为轻症(n=19)、中度重症(n=22)以及重症(n=27)三组,分析血清BNP以及HCY水平与高脂性急性胰腺炎病情程度的相关性;与此同时,依据患者治疗的病情转归将其分为重症转上级医院组(n=16)以及康复出院组(n=52)这两组,基于logistic回归分析血清BNP、HCY水平对于高脂血症性急性胰腺炎的预后评估价值,在此基础上通过ROC曲线分析血清BNP以及HCY水平在该病预后评估中的价值。结果按病情严重程度分类的三个轻症、中度重症以及重症三个组别中的患者血BNP以及HCY水平随着病情的程度逐步升高(P<0.05),并且基于logistic回归分析两个指标与病情专柜的分析中,二者也存在显著的相关性(P<0.05),而且存在良好的评估效价(P<0.05)。结论血BNP、HCY水平在高脂血症性急性胰腺炎患者中随着病情程度的加重显著升高,并且与患者的预后显著相关,值得作为高脂血症性急性胰腺炎治疗过程中病情评估以及疗效预测生化指标进行推广。

关键词：高脂血症性急性胰腺炎脑钠肽同型半胱氨酸病情程度预后