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沼泽红假单胞菌重组LH2表达体系的构建及功能评价

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微生物学通报 2024年

作者：黄晓萍罗家福林若欣赵春贵杨素萍华侨大学生物工程与技术系

【背景】外周捕光色素蛋白复合体（peripherallight-harvestingcomplex，LH2）在光合作用中执行光能捕获和传递功能，对于不产氧光合细菌（anoxygenicphototrophicbacteria，APB）的光合生长至关重要。在APB中，LH2的αβ亚基通常是由... 详细信息

【背景】外周捕光色素蛋白复合体（peripherallight-harvestingcomplex，LH2）在光合作用中执行光能捕获和传递功能，对于不产氧光合细菌（anoxygenicphototrophicbacteria，APB）的光合生长至关重要。在APB中，LH2的αβ亚基通常是由多拷贝pucBA基因编码，尤其是红假单胞菌属菌株，可高达5-7拷贝。由于不同pucBA基因合成的异质性LH2彼此之间难以分离纯化，极大限制了LH2结构与功能的深入研究。【目的】构建以沼泽红假单胞菌为宿主菌的重组LH2表达体系，利用该重组表达体系在体内和体外评价LH2的光能传递活性。【方法】以5对pucBA基因全部缺失的沼泽红假单胞菌CGA009（ΔpucBA）为宿主菌，采用基因重组方法，以pucBAd和mrfp（红色荧光蛋白基因）基因共表达产物为检测指标，对表达载体进行遗传改造和启动子筛选；采用光谱法测定重组菌的生物量和基因表达产物光谱特征，以及纯化LH2的光谱特征、光合色素分析和能量传递活性。【结果】T7启动子(PT7)和T7RNA聚合酶基因联合使用，可使pucBAd和mrfp在ΔpucBA宿主菌中共表达。用启动子PbadR、PpckA和Pars替换PT7，启动子活性从高到低依次为PpckA、Pars、PbadR和PT7，并与重组菌mrfp基因表达量、pucBAd表达产物（d-LH2）合成量和光合生长速率呈正相关关系，其中以PpckA启动子构建的重组LH2表达体系ΔpucBA（pucBAd）表达活性最高。在此基础上，以CGA009菌株的pucBAa基因（编码a-LH2）替换ΔpucBA（pucBAd）菌株的pucBAd基因，获得ΔpucBA（pucBAa）重组菌。与ΔpucBA（pucBAa）重组菌相比，低光时ΔpucBA（pucBAd）重组菌生长速率显著升高，高光时有升高趋势，但未呈显著差异。纯化的d-LH2和a-LH2分别呈现典型的B800-only和B800-850特征光谱，d-LH2产生～863 nm荧光的量子效率高于a-LH2，但采用经典法测定的类胡萝卜素（carotenoids， Cars）到细菌叶绿素（bacteriochlorophylls， BChs）的光能传递效率却低于a-LH2，2种结果不一致的原因是“经典法”未考虑不同光谱类型LH2对～863 nm光子吸收的差异。【结论】构建沼泽红假单胞菌的重组LH2表达系统，从基因纯LH2水平和重组菌光合生长水平评价了多拷贝pucBA基因菌株中2种不同光谱类型的LH2能量传递活性，证明异常光谱LH2（d-LH2）能量传递活性高于典型光谱LH2（a-LH2），本研究为多拷贝pucBA菌株光适应过程中LH2形成和组装的分子调控机制的全面理解奠定了基础。

关键词：不产氧光合细菌沼泽红假单胞菌重组LH2 光能传递量子效率

LncRNA 606938抑制结直肠癌细胞增殖

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中国生物化学与分子生物学报 2024年第7期40卷 964-975页

作者：武海丽段冰杜锦娥马佳晶李卓玉山西大学生命科学学院生物工程系太原030006 山西大学生物技术研究所生物工程系化学生物学与分子工程教育部重点实验室生物工程系太原030006

近年来,关于长非编码RNA(long non-coding RNAs,lncRNAs)在疾病中的应用研究被广泛关注。LncRNAs被证实在肿瘤治疗中发挥至关重要的作用,通常作为肿瘤因子或抑癌基因参与调控肿瘤的发生发展。课题组前期通过转录组学发现了在结直肠癌中... 详细信息

近年来,关于长非编码RNA(long non-coding RNAs,lncRNAs)在疾病中的应用研究被广泛关注。LncRNAs被证实在肿瘤治疗中发挥至关重要的作用,通常作为肿瘤因子或抑癌基因参与调控肿瘤的发生发展。课题组前期通过转录组学发现了在结直肠癌中可以作为靶点的新lncRNA 606938,然而关于其在结直肠癌中的功能及作用机制尚不清楚。本研究通过反转录-实时荧光定量PCR(RT-qPCR)实验发现,相比正常结肠上皮细胞,lncRNA 606938在结直肠癌细胞株中低表达。过表达DLD-1与SW620细胞株中lncRNA 606938的表达,结直肠癌细胞的克隆形成能力显著下降(分别下降了97%和54.5%)。流式细胞术的结果显示,lncRNA 606938过表达使细胞周期阻滞在G_(1)期(分别延长了50.5%和63.9%),且促进结直肠癌细胞的凋亡(分别增加了1.9%和3.3%)。Western印迹结果显示,lncRNA 606938过表达之后,结直肠癌细胞中相关癌基因(β-联蛋白、c-Myc、cyclin D1、cyclin D2、cyclin D3、CDK 4、CDK 6)的表达下调,抑癌基因(TRIM33、caspase 2、actived caspase 3)的表达上调。而在沉默lncRNA 606938之后得到相反的结果。在机制方面,通过核糖核酸交互沉降实验(RNA pulldown)、RNA免疫共沉淀(RIP)和功能挽救实验(Rescue)证实,lncRNA 606938可以靶向结合并促进TRIM33的表达,进而促进β-联蛋白的降解,并抑制β-联蛋白及下游的原癌基因c-Myc、cycline D1等的表达,最终抑制结直肠癌的进程。本研究阐明了lncRNA 606938通过靶向TRIM33/β-catenin信号途径抑制结直肠癌细胞增殖与凋亡的分子机制,揭示了lncRNA 606938作为抑癌基因的潜力,为结直肠癌的临床治疗提供了新靶点和新策略。

关键词：长非编码RNA 606938 TRIM33/β-catenin信号结直肠癌细胞增殖细胞凋亡

多功能分子SLPI调节肾缺血再灌注损伤和修复的作用及机制

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生理学报 2024年第3期76卷 475-486页

作者：陈飞吴圆圆杨斌南通-莱斯特联合肾脏病学研究所南通大学附属医院肾内科南通大学医学院南通226001 南通大学医学院病理系南通226001 莱斯特大学生命科学院心血管科学系肾脏研究组莱斯特LE19HN英国

分泌性白细胞蛋白酶抑制因子(secretory leukocyte protease inhibitor,SLPI)主要由免疫细胞及多种上皮细胞产生,受多种细胞因子调节,如转化生长因子β1、白介素1β和肿瘤坏死因子α等。除公认的抗蛋白酶活性外,近年来发现SLPI还具备抗... 详细信息

分泌性白细胞蛋白酶抑制因子(secretory leukocyte protease inhibitor,SLPI)主要由免疫细胞及多种上皮细胞产生,受多种细胞因子调节,如转化生长因子β1、白介素1β和肿瘤坏死因子α等。除公认的抗蛋白酶活性外,近年来发现SLPI还具备抗细胞凋亡、调节细胞周期、促进细胞分化和增殖及抑制炎症反应等多种特性。SLPI亦可增强细胞吞噬功能和免疫系统对病原体/损伤细胞的清除,从而改善组织损伤及启动修复。另外,新近研究表明,血清SLPI水平变化对心血管术后急性肾损伤的发生具有较高的诊断价值,提示SLPI参与肾脏缺血再灌注损伤相关的免疫反应。本文中我们综述了SLPI在不同器官损伤模型中的表达、调控、信号通路机制以及相关生物学事件,并探讨和评价其在缺血再灌注所致急性肾损伤中发挥保护作用及作为生物学标志物的潜力。

关键词：分泌性白细胞蛋白酶抑制因子急性肾损伤缺血再灌注损伤生物标志物

泛素连接酶Cullin3对三阴性乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制探讨

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中华医学杂志 2024年第20期104卷 1868-1878页

作者：何志贤李晶王沁凡程乾倪苏婕南通大学附属医院甲乳外科南通南通大学附属医院心电图室南通南通大学附属医院肿瘤化疗科南通

目的探讨泛素化连接酶E3蛋白(Cullin3, CUL3)对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及其作用机制。方法基于生物信息学方法获取TNBC组织中CUL3基因和蛋白的表达数据, 评估CUL3在TNBC患者肿瘤组织(n=160)中和正常乳腺组织(... 详细信息

目的探讨泛素化连接酶E3蛋白(Cullin3, CUL3)对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及其作用机制。方法基于生物信息学方法获取TNBC组织中CUL3基因和蛋白的表达数据, 评估CUL3在TNBC患者肿瘤组织(n=160)中和正常乳腺组织(NC)(n=572)中的表达及其与临床预后的关系。通过CCK8细胞增殖实验、划痕实验、Transwell实验检测过表达CUL3对TNBC细胞体外增殖、迁移及侵袭能力的影响;通过免疫共沉淀(IP)联合质谱分析筛选出可能与CUL3相互作用的蛋白质, 确定CUL3调控的底物蛋白为谷胱甘肽S-转移酶P1(GSTP1);通过划痕实验、Transwell实验检测过表达GSTP1对TNBC细胞迁移及侵袭能力的影响, 探索过表达CUL3是否可以逆转GSTP1对细胞迁移及侵袭能力的影响;通过Western 印迹和IP检测CUL3对GSTP1蛋白泛素化修饰的影响, 验证CUL3调控GSTP1表达影响TNBC迁移和侵袭的分子机制。结果 CUL3在TNBC中表达量显著增高(P系和468细胞系过表达组穿膜细胞数分别为(74.7±4.0)、(128.0±6.1)个, 而空白对照(NC)组分别为(21.0±2.7)、(70.0±6.6)个, 231和468细胞组t分别为-19.24和-11.23, P均系和468细胞系过表达组48 h细胞增殖率分别为56.6%±4.4%、51.6%±3.7%, 而NC组分别为40.5%±2.9%、32.9%±4.8%, 231细胞组t=-5.26, P=0.006 3;468细胞组t=-5.38, P=0.005 8);GSTP1在TNBC表达中降低, 上调GSTP1可抑制TNBC细胞迁移[231细胞系和468细胞系过表达组穿膜细胞数分别为(16.3±6.5)、(33.0±6.2)个, 而NC组分别为(34.3±2.5)、(77.3±5.0)个, 231细胞组t=5.44, P=0.006;468细胞组t=7.20, P=0.002]和侵袭(231细胞系和468细胞系过表达组48 h细胞增殖率分别为49.6%±1.7%、36.2%±1.4%, 而NC组分别为59.4%±4.7%、53.0%±1.7%, 231细胞组t=3.42, P=0.027;468细胞组t=13.18, P系和468细胞系过表达组穿膜细胞数分别为(37.0±1.0)、(67.0±5.3)个, 231细胞组t=-3.97, P=0.017;468细胞组t=-6.12, P=0.004]、侵袭(231细胞系和468细胞系过表达组48 h细胞增殖率分别为71.9%±3.6%、59.4%±2.1%, 231和468细胞组t值分别为-9.61和-16.01, P均系统降解GSTP1蛋白, 从而降低GSTP1蛋白的稳定性。结论过表达CUL3通过促进GSTP1泛素化降解诱导细胞迁移和侵袭, 从而促进TNBC发生发展。

关键词：乳腺肿瘤 Cullin蛋白质类谷胱甘肽S-转移酶P1 泛素化

盐胁迫下植物根系分泌物的成分分析与生态功能研究进展

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生物技术通报 2024年第1期40卷 12-23页

作者：王雨晴马子奇侯嘉欣宗钰琪郝晗睿刘国元魏辉连博琳陈艳红张健南通大学生命科学学院南通226019 南通市观赏植物遗传育种重点实验室南通226019

盐胁迫是常见的非生物胁迫之一,影响植物的生长发育。根系分泌物是植物与根际环境进行“信息”交换的重要媒介。植物在受到盐胁迫时,根系分泌物的组分和含量会发生改变,对盐胁迫下植物的生长发育产生重要影响。本文综述了根系分泌物的... 详细信息

盐胁迫是常见的非生物胁迫之一,影响植物的生长发育。根系分泌物是植物与根际环境进行“信息”交换的重要媒介。植物在受到盐胁迫时,根系分泌物的组分和含量会发生改变,对盐胁迫下植物的生长发育产生重要影响。本文综述了根系分泌物的成分、检测方式、作用机制及变化调控。其成分主要包括氨基酸、糖类、有机酸和酚酸等。目前对根系分泌物的鉴定和检测方式主要有高效液相色谱、气相色谱-质谱联用、液相色谱-质谱联用以及核磁共振。结合前人研究总结了氨基酸、糖类、有机酸等分泌物在盐胁迫下组成和含量的变化。然后从根际理化环境、根际微生物等方面总结并提出了根系分泌物在盐胁迫下的作用主要包括:(1)作为信号分子调节植物耐盐能力;(2)维持根细胞内稳态;(3)影响根际环境。总结了氨基酸、糖类根系分泌物在盐胁迫下的变化机理,最后指出目前对根系分泌物成分功能的鉴定以及具体作用机制、通路的研究尚有待深入。本综述旨在分析盐胁迫下植物根系分泌物的生态效应,为今后深入挖掘植物响应盐胁迫机理提供参考依据。

关键词：根系分泌物盐胁迫成分鉴定根际环境根际微生物耐盐机制变化机理

木瓜总三萜和吲哚美辛联用对弗氏完全佐剂诱导大鼠类风湿性关节炎的治疗作用研究

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中药药理与临床 2024年第8期40卷 42-50页

作者：贺君宇覃诗颖郑婧琪罗识熊致远余清泉三峡大学基础医学院宜昌443002 南通大学医学院南通226001 三峡大学生物与制药学院宜昌443002

目的:观察木瓜总三萜和吲哚美辛联用对佐剂性关节炎大鼠的治疗作用,并探寻其可能作用机制。方法:将大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、吲哚美辛5 mg/kg组、木瓜总三萜100 mg/kg组、木瓜总三萜100 mg/kg+吲哚美辛5 mg/kg联用组。除正... 详细信息

目的:观察木瓜总三萜和吲哚美辛联用对佐剂性关节炎大鼠的治疗作用,并探寻其可能作用机制。方法:将大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、吲哚美辛5 mg/kg组、木瓜总三萜100 mg/kg组、木瓜总三萜100 mg/kg+吲哚美辛5 mg/kg联用组。除正常对照组外,各组大鼠右后脚底皮下注射弗氏完全佐剂(CFA)。14 d后,灌胃给予相应药物,1次/d,连续28 d,计算足肿胀度及关节炎指数评分。末次给药次日,取血和踝关节滑膜组织,检测血清中活性氧(ROS)、乳酸脱氢酶(LDH)和内源性抗氧化酶活性,踝关节中炎症因子含量、滑膜组织和溶酶体中组织蛋白酶B和D、β-半乳糖苷酶和β-葡萄糖醛酸酶活性及形态学分析;实时定量PCR和Western blot法检测踝关节组织中Toll样受体4/核因子κB/NOD样受体家族3(TLR4/NF-κB/NLRP3)通路相关的mRNA和蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠足肿胀度、关节炎指数评分显著增加(P<0.01),软骨破坏和炎性浸润出现,血清中ROS、丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO)、LDH和踝关节组织中环氧酶(COX-1)、COX-2、前列腺素E2(PGE2)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6、IL-18及踝关节组织蛋白酶B、D、β-半乳糖苷酶、β-葡萄糖醛酸酶和溶酶体细胞器胞质中β-葡萄糖醛酸酶、组织蛋白酶D含量显著升高(P<0.01),血清中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和踝关节组织中IL-4、IL-10含量及细胞器溶酶体中组织蛋白酶D、β-葡萄糖醛酸酶活力或含量显著降低(P<0.01),踝关节组织中Tlr4、髓样分化因子(Myd88)、Nlrp3、凋亡相关的斑点样蛋白(Asc)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase1)、Cox1、Cox2、Pge2mRNA及磷酸化IκB激酶-α(p-IκBα)、磷酸化KB抑制蛋白激酶β(p-IKKβ)、硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)、细胞有丝分裂相关酶(NEK7)、NLRP3、ASC、Pro-caspase-1、Caspase-1、消皮素(GSDMD)、GSDMD的N端结构域(GSDMD-N)、Pro-IL-1β、Pro-IL-18、胞核中NF-κB p65蛋白表达显著上调和p-IκBα/IκBα、p-IKKβ/IKKβ比值显著增加(P<0.01),胞浆中NF-κB p65蛋白表达显著下调(P<0.01);与模型对照组比较,木瓜总三萜100 mg/kg和吲哚美辛5 mg/kg联用组大鼠足肿胀度、关节炎指数评分显著降低(P<0.01),软骨破坏和炎性浸润减少,踝关节组织中COX-1活力和mRNA表达显著上调(P<0.01),血清中ROS、LDH、氧化应激指标、踝关节组织中细胞因子、踝关节组织及溶酶体细胞器和胞质中溶酶体酶活力以及TLR4/NF-κB、NLRP3炎症小体信号通路相关的mRNA和蛋白表达被显著逆转(P<0.01)。结论:木瓜总三萜100 mg/kg和吲哚美辛5 mg/kg联用对模型大鼠有显著的治疗作用,其作用机制可能与抑制CFA诱导AA模型大鼠氧化应激和TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路激活,减轻炎症反应及纠正溶酶体功能障碍有关。

关键词：木瓜总三萜吲哚美辛佐剂性关节炎炎症反应溶酶体功能 Toll样受体4/核因子κB/NOD样受体家族3信号通路

多色免疫组织化学技术在肿瘤标志物分析中的研究进展

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分析化学 2024年第3期52卷 313-322页

作者：杨马骏杨超杰贺月赵灿冀海伟王琦秦玉岭吴丽南通大学公共卫生学院

多色免疫组织化学（Multiplex immunohistochemistry, mIHC）技术是一种新型多靶点病理组织染色、成像及分析技术。该技术通过在单张组织切片上检测多种生物标志物的表达水平及空间分布，实现对细胞的表型、组成、形态及细胞间相互作用... 详细信息

多色免疫组织化学（Multiplex immunohistochemistry, mIHC）技术是一种新型多靶点病理组织染色、成像及分析技术。该技术通过在单张组织切片上检测多种生物标志物的表达水平及空间分布，实现对细胞的表型、组成、形态及细胞间相互作用机理的全面解析。近年来，mIHC技术被成功应用于肿瘤免疫研究领域，为肿瘤的诊断和治疗开辟了新的途径。本文从近年开发的mIHC检测技术出发，针对不同类型mIHC技术的检测原理及其特点进行了详细阐述，重点讨论了新型mIHC检测技术在肿瘤标志物及肿瘤微环境检测等领域中的应用，并对mIHC在肿瘤免疫诊断和治疗领域的应用前景和发展趋势进行了展望。

关键词：多色免疫组织化学荧光多色标记肿瘤诊断循环荧光成像评述

基于Gln/GLS1/α-KG代谢轴和线粒体凋亡信号通路探讨木瓜总三萜抗D-半乳糖诱导GES-1细胞衰老的作用机制

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中国中药杂志 2024年第8期49卷 2230-2246页

作者：贺君宇杨家鑫覃诗颖郑婧琪国怡然马天行三峡大学基础医学院湖北宜昌443002 三峡大学生物与制药学院湖北宜昌443002 南通大学医学院江苏南通226001

木瓜总三萜(total triterpenoids from the fruits of Chaenomeles speciosa,TCS)是防治胃黏膜损伤的活性组分,具有潜在的抗衰老作用。然而,TCS是否改善胃衰老,尤其是对于其抗胃衰老的分子机制目前仍不清楚。基于此,该研究旨在探讨TCS... 详细信息

木瓜总三萜(total triterpenoids from the fruits of Chaenomeles speciosa,TCS)是防治胃黏膜损伤的活性组分,具有潜在的抗衰老作用。然而,TCS是否改善胃衰老,尤其是对于其抗胃衰老的分子机制目前仍不清楚。基于此,该研究旨在探讨TCS对D-半乳糖(D-galactose,D-gal)诱导人胃黏膜上皮细胞GES-1衰老的影响及作用机制,为TCS在临床上用于预防胃衰老提供科学数据。将体外培养的GES-1细胞和转染谷氨酰胺酶1(glutaminase 1,GLS1)过表达(overexpression GLS1,GLS1-OE)质粒的GES-1细胞用D-gal诱导衰老后,给予TCS和谷氨酰胺酶1(glutaminase 1,GLS1)抑制剂bis-2-(5-phenylacetamido-1,2,4-thiadiazol-2-yl)ethyl sulfide(BPTES),考察各组细胞存活率、衰老标志物β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,SA-β-gal)染色阳性细胞比例、线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)和细胞凋亡的变化;采用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)法和比色法检测各组细胞上清液和细胞内GLS1活性、谷氨酰胺(glutamine,Gln)、谷氨酸(glutamate,Glu)、α-酮戊二酸(α-ketoglutarate,α-KG)、尿素和氨水平;采用实时荧光定量PCR和Western blot法检测各组细胞中GLS1、线粒体凋亡信号通路相关基因mRNA和蛋白表达情况。结果显示,与D-gal模型组和GLS1-OE D-gal模型组相比,TCS可显著降低D-gal诱导衰老GES-1细胞和GLS1-OE衰老GES-1细胞SA-β-gal染色阳性细胞率和MMP,抑制衰老细胞存活,促进其细胞凋亡(P<0.01),降低上清液和细胞内GLS1活性和Gln、Glu、α-KG、尿素、氨含量(P<0.01),降低线粒体中细胞色素C(cytochrome C,Cyto C)浓度以及细胞中GLS1、增殖细胞核抗原mRNA和蛋白表达(P<0.01),降低细胞中Bcl-2、Bcl-xl mRNA表达和前体半胱氨酸蛋白酶(pro-caspase)-9、pro-caspase-3蛋白表达以及Bcl-2/Bax和Bcl-xl/Bad比值(P<0.01),升高胞质中Cyto C浓度和细胞中Bax、Bad、凋亡蛋白酶激活因子1(apoptosis protease activating factor 1,Apaf-1)mRNA表达及剪切型半胱氨酸蛋白酶(cleaved-caspase)-9、cleaved-caspase-3、剪切型聚ADP核糖聚合酶-1(cleaved-poly ADP ribose polymerase-1,cleaved-PARP-1)蛋白表达(P<0.01)。以上结果表明,TCS可对抗D-gal诱导GES-1细胞衰老,其作用机制与抑制Gln/GLS1/α-KG代谢轴、激活线粒体凋亡通路,进而促进衰老细胞凋亡、清除衰老细胞密切相关。

关键词：木瓜总三萜 GES-1细胞 D-半乳糖衰老谷氨酰胺/谷氨酰胺酶1/α-酮戊二酸代谢轴线粒体凋亡通路

FLASH结合早幼粒细胞白血病蛋白Ⅳ并增强p53的SUMO修饰

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中国生物化学与分子生物学报 2024年第10期 1426-1440页

作者：王梦妮熊真真王之盈吴建华石晓钟华南理工大学生物科学与工程学院生物技术系南昌大学医学部基础医学院生理系

FLASH/CASP8AP2为基因组中一个独特的基因，参与多个细胞调控过程，包括细胞凋亡、组蛋白基因pre-mRNA的加工、转录调控以及细胞周期进程等。临床医学研究表明，FLASH是急性淋巴细胞白血病的一种预后标志物，还是多种癌细胞存活的关键... 详细信息

FLASH/CASP8AP2为基因组中一个独特的基因，参与多个细胞调控过程，包括细胞凋亡、组蛋白基因pre-mRNA的加工、转录调控以及细胞周期进程等。临床医学研究表明，FLASH是急性淋巴细胞白血病的一种预后标志物，还是多种癌细胞存活的关键因子。因此，对FLASH功能的深入研究有望为相关疾病治疗提供新的视角。我们先前鉴定FLASH为p53的结合因子，并发现其能够增强p53的转录活性。在此基础上，本文阐述了FLASH和p53相互作用的分子机制。研究结果表明，p53 K386突变显著降低其与FLASH(aa 51～200)和FLASH-SIM(aa 1 534～1 806)的结合强度。然而，GST沉降分析仅能检测到SUMO与FLASH-SIM而不是FLASH(aa 51～200)之间的相互作用。在细胞中过量表达FLASH增强了整体性SUMO1修饰以及p53的SUMO1修饰，这可能是FLASH增强p53转录活性的一种作用机制。由于PML NB为细胞内SUMO的亚细胞反应器，而PML Ⅳ亚型能够特异性地增强p53的SUMO修饰，我们在此分析了FLASH与PML Ⅳ之间的相互作用，并鉴定了二者相互作用的结构域基础：FLASH-N3A(aa 501～802)和FLASH-C2(aa 1 807～1 981)均能与PML Ⅳ(aa 228～633)结合。进一步的研究显示，PML Ⅳ能够增强FLASH调控的整体性SUMO修饰和p53的SUMO修饰，即二者在功能上存在协同性。FLASH与肿瘤抑制因子p53和PML Ⅳ之间的相互作用，丰富了对其功能的认识，有望揭示FLASH在肿瘤发生过程中的作用机制，为癌症的诊断和治疗提供新的思路。

关键词： FADD样白细胞介素1β转化酶相关巨蛋白 p53 小泛素样修饰早幼粒细胞白血病蛋白Ⅳ