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QsvR对副溶血弧菌Ⅵ型分泌系统1相关基因的转录调控

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微生物学报 2024年第2期64卷 597-606页

作者：吴燕仇越吴齐敏张苗苗李雪张义全陆仁飞南通大学医学院江苏南通226019 南通市第三人民医院、南通大学附属南通第三医院检验科江苏南通226006 南京医科大学附属常州第二人民医院检验科江苏常州213000

【目的】研究调控蛋白QsvR对副溶血弧菌Ⅵ型分泌系统1(typeⅥsecretion system 1,T6SS1)相关基因的转录调控关系。【方法】提取野生株(wild type,WT)和qsvR突变株(ΔqsvR)的总RNA,采用实时定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)研究QsvR对靶基因的调控关系;进而采用引物延伸法定位靶基因的转录起始位点和核心启动子区,并根据引物延伸产物丰度判断QsvR对靶基因的调控关系;将靶基因的调控区DNA序列克隆入pHRP309质粒中的β-半乳糖苷酶基因上游(LacZ重组质粒),并将重组质粒转化入WT和ΔqsvR中,通过LacZ报告基因融合试验研究QsvR对靶基因的调控关系;将LacZ重组质粒分别转化入含有pBAD33或pBAD33-qsvR的大肠杆菌100λpir中,进一步采用LacZ报告基因融合试验研究在异体宿主中QsvR对靶基因的调控关系;PCR扩增靶基因调控区DNA序列,同时表达并纯化His-QsvR重组蛋白,采用凝胶阻滞试验(electrophoresis mobility shift assay,EMSA)研究His-QsvR对靶基因调控区DNA序列是否具有直接的结合作用。【结果】qPCR结果显示,与WT相比,ΔqsvR中T6SS1相关基因VP1388(操纵子VP1388-1390首基因)和hcp1(操纵子VP1393-1406首基因)的转录水平显著性升高,表明QsvR抑制VP1388和hcp1的转录;引物延伸结果显示VP1388和hcp1各有一个转录起始位点,分别为C(-64)和T(-62),且它们的转录活性受QsvR的抑制;LacZ报告基因融合试验结果显示QsvR可以抑制副溶血弧菌和EC100λpir中VP1388和hcp1的启动子区转录活性;EMSA结果显示His-QsvR对VP1388和hcp1的启动子区DNA序列具有直接的结合活性。【结论】QsvR对T6SS1相关操纵子VP1388-1390和VP1393-1406的转录具有直接的抑制作用。

关键词：副溶血弧菌 QsvR Ⅵ型分泌系统1(T6SS1) 转录调控

着丝粒蛋白U在结直肠癌患者肠组织中的表达情况及临床意义

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中国现代医生 2024年第11期62卷 1-6页

作者：王若淳黄伟葛思佳陈婧宣晗颜杨姜佳炜肖明兵陆翠华刘肇修南通大学附属医院消化内科江苏南通226001 南通大学附属医院临床医学研究中心江苏南通226001

目的旨在探讨着丝粒蛋白U(centromere protein U,CENPU)在结直肠癌患者肠组织中的表达情况,并结合生物信息学分析其表达水平对结直肠癌患者预后的影响。方法通过实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real time polymerase chain reac... 详细信息

目的旨在探讨着丝粒蛋白U(centromere protein U,CENPU)在结直肠癌患者肠组织中的表达情况,并结合生物信息学分析其表达水平对结直肠癌患者预后的影响。方法通过实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)、蛋白质免疫印迹(Western blot,WB)法以及免疫组织化学染色(immunohistochemistry,IHC)实验验证CENPU在组织中的表达情况。结合患者临床病例资料,通过单因素和多因素Cox回归分析CENPU的表达与结直肠癌患者临床病例参数的相关性;然后通过绘制受试操作者操作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线和Kaplan-Meier生存曲线,探究CENPU的表达对结直肠癌患者预后的预测作用。最后,通过生物信息学分析CENPU的表达对结直肠癌疾病进展影响的可能分子机制。结果通过qRT-PCR、WB法以及IHC实验均发现,与正常组织比较,CENPU在结直肠癌患者癌组织中表达显著升高。Cox回归分析表明CENPU的表达与患者的年龄和TNM分期显著相关,是影响患者预后的危险因素。Kaplan-Meier生存曲线分析表明:CENPU高表达的结直肠癌患者的生存率显著降低。ROC曲线结果表明:基于CENPU的表达建立的模型具有较高的预测结直肠癌患者预后的能力。生物信息学分析结果表明:CENPI、CENPN、CENPD、CENPK、CENPP、CENPM、CENPQ、CENPH、NDC80以及ITGB3BP这10个基因与CENPU基因具有相互作用关系;CENPU参与DNA修复、MYC/TARGETS/V1以及PI3K/AKT/MTOR等信号通路。结论结直肠癌患者癌组织中高表达的CENPU与患者的不良预后显著相关,提示CENPU有望成为结直肠癌患者早期诊断及预测预后的潜在靶点。

关键词：结直肠癌着丝粒蛋白U 富集分析

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14例肠道神经鞘瘤的影像学表现

复旦学报（医学版） 2024年第1期51卷 62-68页

作者：于泳龚沈初王睿婷侯凯陆秀良刘立恒周建军丁玉芹南通大学第二附属医院/南通市第一人民医院影像科南通226001 复旦大学附属中山医院放射科上海200032 上海市影像医学研究所上海200032 复旦大学附属中山医院厦门医院放射科厦门361015

目的研究肠道神经鞘瘤(intestinal schwannoma,IS)的影像学表现,以提高对该病的诊断水平。方法回顾性分析14例经手术病理证实的IS患者的临床和影像学资料,评估包括肿瘤的部位、大小、形态、性质、生长方式、CT密度、MRI信号、PET/CT代... 详细信息

目的研究肠道神经鞘瘤(intestinal schwannoma,IS)的影像学表现,以提高对该病的诊断水平。方法回顾性分析14例经手术病理证实的IS患者的临床和影像学资料,评估包括肿瘤的部位、大小、形态、性质、生长方式、CT密度、MRI信号、PET/CT代谢等特征。结果14例IS中,病灶位于十二指肠3例,盲肠2例,结肠8例,直肠1例。病灶均为类圆形或椭圆形,最大径平均(2.4±1.1)cm。病灶为实性13例,肠腔外生长型10例,囊变1例,黏液变性1例。9例病变肠周可见慢性炎性淋巴结,其中6例淋巴结短径>5 mm。14例IS的CT平扫均为低密度,增强后均为渐进性强化,其中轻度强化1例,中度强化2例,明显强化11例。2例IS在MRI上均表现为T1WI低信号,T2WI稍高信号,DWI明显高信号,增强后明显渐进性强化。2例IS在^(18)F-FDG-PET/CT上均表现为高代谢,病灶SUVmax分别为9.4和8.8。结论IS的影像学表现具有一定的特征性,主要表现为肠道黏膜下来源的实质性结节或肿块,密度或信号均匀,增强后明显渐进性强化,^(18)F-FDG-PET/CT上肿瘤明显高代谢,灶周常见均质稍大淋巴结。

关键词：肠道神经鞘瘤(IS) 体层摄影术 X线计算机磁共振成像正电子发射断层显像术

基于患者报告结局的结构化随访在早期胃癌内镜黏膜下剥离术患者中的应用

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中国临床研究 2024年第2期37卷 307-311页

作者：滕玉芳杨华徐桂芳曹燕平于铃南京大学医学院附属鼓楼医院消化内科江苏南京210008

目的探究基于患者报告结局(PRO)的结构化随访在早期胃癌内镜黏膜下剥离术(ESD)患者中的应用效果。方法纳入2022年1月至12月南京大学医学院附属鼓楼医院消化内科收治的198例早期胃癌ESD治疗患者为研究对象,将2022年6月前收治的患者纳入... 详细信息

目的探究基于患者报告结局(PRO)的结构化随访在早期胃癌内镜黏膜下剥离术(ESD)患者中的应用效果。方法纳入2022年1月至12月南京大学医学院附属鼓楼医院消化内科收治的198例早期胃癌ESD治疗患者为研究对象,将2022年6月前收治的患者纳入对照组,实施常规随访,将2022年6月后收治的患者纳入观察组,实施基于PRO的结构化随访。比较分析两组患者的PRO情况,术后半年内内镜复查率、Hp阳性根除率,患者满意度及观察组医务人员PRO态度。结果观察组患者的健康生活习惯养成报告表单(74.07%vs 19.66%)、内镜复查报告表单(61.73%vs 29.91%)及Hp根除治疗报告表单(72.72%vs 24.14%)的完成情况优于对照组(P<0.05)。观察组半年内内镜按时复查率高于对照组(69.14%vs 45.30%,P<0.05),Hp阳性患者Hp根除治疗的依从性高于对照组(81.82%vs 27.59%,P<0.05)。观察组患者满意度高于对照组(P<0.05)。观察组医务人员PRO态度处于中上水平。结论基于PRO的结构化随访系统可有效提升早期胃癌ESD术后患者的PRO情况、术后半年内镜复查率、Hp阳性根除率、患者满意度,得到大部分医务人员的支持。

关键词：胃癌内镜黏膜下剥离术患者报告结局结构化随访健康管理

过表达lncRNAHEM2M改善非酒精性脂肪肝病小鼠的肝脏损伤

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南方医科大学学报 2024年第1期44卷 1-8页

作者：孔祥张腾张妍高灵犀汪文汪梦燕王国栋吕坤皖南医学院非编码RNA基础与临床转化安徽省重点实验室安徽芜湖241001 皖南医学院弋矶山医院中心实验室安徽芜湖241001 皖南医学院弋矶山医院内分泌科安徽芜湖241001 皖南医学院弋矶山医院消化内科安徽芜湖241001 皖南医学院药学院//安徽省多糖药物工程技术研究中心安徽芜湖241002

目的探讨过表达长链非编码RNA(lncRNA)HEM2M对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)小鼠肝损伤的影响。方法野生型C57BL/6(WT)和条件性髓系细胞lncRNAHEM2M过表达(MYKI)小鼠分别喂饲普通饮食(ND)和高脂饮食(HFD),即为WT+ND、MYKI+ND、WT+HFD和MYKI+HFD组。12周后行腹腔糖耐量及胰岛素耐量试验后处死小鼠,检测小鼠血清和肝脏组织的肝功能指标,制备肝脏组织切片后行HE染色和F4/80免疫组化染色,ELISA法检测肝脏组织中IL-6、IL-1β和TNF-α水平,qRT-PCR检测M1型(TNF-α、iNOS和IL-6)和M2型(Arg-1、YM-1和IL-10)巨噬细胞标志物mRNA表达,免疫印迹检测肝脏组织中P-AKT、T-AKT、NLRC4、caspase-1和GSDMD蛋白表达,比色法和免疫荧光测定肝脏组织caspase-1活性。结果与HFD喂饲的WT小鼠相比,MYKI+HFD小鼠肝功能损伤减轻(P<0.01),肝脏脂肪变缓解,肝脏巨噬细胞浸润减少,糖耐量损伤及胰岛素抵抗改善(P<0.01);MYKI+HFD小鼠肝脏组织IL-6、IL-1β和TNF-α水平降低(P<0.01),M1型巨噬细胞标志物mRNA表达减少(P<0.01),M2型mRNA表达增加(P<0.01);MYKI+HFD小鼠肝脏组织NLRC4炎症小体活性降低(P<0.01),活性caspase-1减少,GSDMD-N蛋白表达降低(P<0.05)。结论过表达lncRNAHEM2M降低NAFLD小鼠肝脏炎症因子水平,进而改善胰岛素抵抗并抑制肝脏NLRC4炎症小体激活,减少肝细胞焦亡,最终改善NAFLD小鼠肝脏损伤。

关键词： lncRNAHEM2M 巨噬细胞非酒精性脂肪肝细胞焦亡

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宫颈癌前病变患者焦虑、抑郁与二元应对的关系

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当代护士（中旬刊） 2024年第1期31卷 151-157页

作者：唐荣荣顾丹丹刘小琴谢娟南通大学医学院南通226001 南通大学附属医院妇科南通226001

目的本研究旨在观察宫颈癌前病变患者的焦虑、抑郁现状及其与二元应对的关系。方法2022年1月-2022年4月选取江苏省1所三级甲等医院宫颈门诊就诊的146例宫颈癌前病变患者作为调查对象,采用一般资料和临床资料问卷、广泛性焦虑障碍量表、... 详细信息

目的本研究旨在观察宫颈癌前病变患者的焦虑、抑郁现状及其与二元应对的关系。方法2022年1月-2022年4月选取江苏省1所三级甲等医院宫颈门诊就诊的146例宫颈癌前病变患者作为调查对象,采用一般资料和临床资料问卷、广泛性焦虑障碍量表、患者健康问卷抑郁量表、二元应对量表进行调查。结果146例宫颈癌前病变患者中,41例(28.1%)有焦虑症状,26例(17.8%)有抑郁症状,二元应对量表的平均得分为93分。宫颈癌家族史、疾病知识、液基细胞学检查结果、阴道镜活检结果和二元应对量表评分是宫颈癌前病变患者焦虑的预测因子;居住地、阴道镜活检结果和二元应对量表得分是宫颈癌前病变患者抑郁的独立预测因子。同时,二元应对与焦虑、抑郁呈负相关。结论二元应对与宫颈癌前病变患者的焦虑和抑郁密切相关。伴侣在宫颈癌前病变患者的心理干预中起着至关重要的作用。因此,伴侣应积极参与患者的疾病管理,加强夫妻沟通,并为患者提供足够的情感支持,以改善患者的心理健康。

关键词：宫颈癌前病变横断面研究二元应对焦虑抑郁

结肠癌组织微小RNA-452和微小RNA-762表达及与患者预后的关系

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中国医药 2024年第3期19卷 410-414页

作者：孙玮螺刘素英李思锦周龙妹何培元承德医学院附属医院消化内科承德067000

目的探究结肠癌组织微小RNA(miR)-452、miR-762表达及与患者预后的关系。方法选取2019年4月至2020年4月承德医学院附属医院收治的90例结肠癌患者作为研究对象,术中取肿瘤组织及癌旁组织,并根据3年随访预后情况分为预后良好组与预后不良... 详细信息

目的探究结肠癌组织微小RNA(miR)-452、miR-762表达及与患者预后的关系。方法选取2019年4月至2020年4月承德医学院附属医院收治的90例结肠癌患者作为研究对象,术中取肿瘤组织及癌旁组织,并根据3年随访预后情况分为预后良好组与预后不良组。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测组织中miR-452、miR-762的表达。Pearson相关分析法分析miR-452与miR-762表达的相关性。多因素Logistic回归法分析结肠癌患者预后的影响因素。受试者工作特征曲线分析结肠癌患者肿瘤组织中miR-452、miR-762表达水平对预后的预测价值。结果结肠癌患者肿瘤组织中miR-452、miR-762表达水平均高于癌旁组织[(2.23±0.24)比(1.00±0.00)、(1.86±0.20)比(1.01±0.13)],差异均有统计学意义(t=48.620、33.805,均P<0.001)。miR-452、miR-762表达水平与患者肿瘤分化程度、TNM分期有关(均P<0.05)。随访3年预后不良的发生率为27.8%(25/90)。预后不良组患者肿瘤组织中miR-452、miR-762表达水平均高于预后良好组[(2.56±0.30)比(2.10±0.22)、(2.15±0.30)比(1.75±0.16)](t=7.997、8.181,均P<0.001)。Pearson相关性分析结果显示,结肠癌患者肿瘤组织中miR-452与miR-762表达水平呈正相关(r=0.560,P<0.001)。多因素Logistic回归分析结果显示,miR-452、miR-762均是结肠癌患者发生不良预后的危险因素(均P<0.05)。miR-452、miR-762联合预测结肠癌患者预后的受试者工作特征曲线下面积优于miR-452单独预测(Z=2.745,P=0.006)。结论结肠癌患者肿瘤组织中miR-452、miR-762表达上调,其与结肠癌患者预后有关,可能是结肠癌预后评估的生物标志物。

关键词：结肠癌微小RNA-452 微小RNA-762 预后

消化性溃疡合并幽门螺杆菌感染患者血清微小RNA-155和135b-5p表达变化及临床意义

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中国医师进修杂志 2024年第3期47卷 237-241页

作者：艾宽宽胡瑞瑞薛原王岩济宁医学院附属医院消化内科济宁272000

目的探讨消化性溃疡合并幽门螺杆菌(Hp)感染患者血清微小RNA(miR)-155和miR-135b-5p表达水平及其临床意义。方法采用前瞻性研究的方法,连续选取济宁医学院附属医院2021年7月至2023年2月消化性溃疡患者263例。其中,经14C呼气试验确定为H... 详细信息

目的探讨消化性溃疡合并幽门螺杆菌(Hp)感染患者血清微小RNA(miR)-155和miR-135b-5p表达水平及其临床意义。方法采用前瞻性研究的方法,连续选取济宁医学院附属医院2021年7月至2023年2月消化性溃疡患者263例。其中,经14C呼气试验确定为Hp感染146例(Hp感染组),未合并Hp感染117例(非Hp感染组);免疫印迹法确定Ⅰ型Hp感染110例,Ⅱ型Hp感染36例。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测血清miR-155和miR-135b-5p表达水平,放射免疫法检测血清胃泌素水平,酶联免疫吸附法检测血清胃蛋白酶原(PG)Ⅰ和PGⅡ水平;记录患者基本临床资料。采用多因素Logistic回归分析影响消化性溃疡患者发生Hp感染的独立危险因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-155和miR-135b-5p对消化性溃疡患者发生Hp感染的诊断价值。结果Hp感染组胃泌素、PGⅠ、PGⅡ、溃疡出血率和复发比例明显高于非Hp感染组[(108.47±15.35)ng/L比(79.63±10.58)ng/L、(295.41±37.26)pg/L比(236.75±29.17)pg/L、(44.08±8.52)pg/L比(39.29±6.74)pg/L、25.34%(37/146)比15.38%(18/117)和21.92%(32/146)比11.97%(14/117)],差异有统计学意义(P消化性溃疡患者发生Hp感染的独立危险因素(OR=1.443、1.436、1.452和1.438,95%CI 1.165~1.787、1.146~1.799、1.187~1.777和1.150~1.798,P消化性溃疡患者发生Hp感染的曲线下面积明显大于血清miR-155和miR-135b-5p单独诊断(0.907比0.839和0.836,Z=2.57和2.81,P=0.010和0.005)。结论消化性溃疡合并Hp感染患者血清miR-155和miR-135b-5p水平较高,两者联合检测对消化性溃疡患者发生Hp感染具有较高的诊断价值。

关键词：消化性溃疡幽门螺杆菌微RNAs 诊断

基于超声内镜影像组学和机器学习的胃肠道间质瘤与非胃肠道间质瘤鉴别方法

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海军军医大学学报 2024年第1期45卷 21-28页

作者：王卓然张贤达曹羽成张玲龚婷婷马烨波段晓倩郭康丽李军陈媛张健涛叶本功丁进朱建伟刘枫胡端敏周春华邹多武李庆利陈建刚华东师范大学上海市多维度信息处理重点实验室上海200241 上海交通大学医学院附属瑞金医院消化内科上海200025 苏州大学附属第二医院消化内科苏州215004 同济大学附属上海市第十人民医院消化内镜中心上海200072 浙江大学医学院附属金华医院消化内科金华321000 安康市汉滨区第一医院消化内科安康725000 上海中医药大学中医智能康复教育部工程研究中心上海201203

目的建立并验证基于超声内镜影像组学和机器学习的胃肠道间质瘤与非胃肠道间质瘤的鉴别方法。方法纳入符合标准的患者435例,采集胃肠道间质瘤(257例)与非胃肠道间质瘤(包括胃平滑肌瘤145例、神经鞘瘤33例)超声内镜图像共3279张,按患者比... 详细信息

目的建立并验证基于超声内镜影像组学和机器学习的胃肠道间质瘤与非胃肠道间质瘤的鉴别方法。方法纳入符合标准的患者435例,采集胃肠道间质瘤(257例)与非胃肠道间质瘤(包括胃平滑肌瘤145例、神经鞘瘤33例)超声内镜图像共3279张,按患者比7∶3分为训练集和测试集。采用Pyradiomics软件提取肿瘤影像组学特征,并应用主成分分析(PCA)、最小绝对收缩和选择算子(LASSO)、极致梯度提升树(XGBoost)、随机森林、递归式特征消除(RFE)算法设计特征筛选方案,基于所选特征通过支持向量机分类器建立模型。通过ROC曲线评估各模型对胃肠道间质瘤与非胃肠道间质瘤的预测效能。结果由最终筛选得到的超声内镜影像组学特征建立影像组学模型,基于5种特征筛选方案(PCA、PCA+LASSO、PCA+XGBoost、PCA+随机森林、PCA+RFE)建立的预测模型的AUC分别为0.581、0.870、0.874、0.860、0.661。结论PCA+XGBoost的特征筛选方案效果最佳,基于上述影像组学和机器学习方法鉴别胃肠道间质瘤与非胃肠道间质瘤的模型可用于患者的术前预测。

关键词：胃肠道间质瘤超声内镜影像组学机器学习主成分分析极致梯度提升树