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纳米酶增强免疫层析法定量检测血液中的降钙素原

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分析化学 2024年第8期52卷 1082-1093页

作者：郑玥林童熊勇华许梦硕严喜鸾郭徐静杨磊郭亮南昌大学食品科学与资源挖掘全国重点实验室南昌大学中德联合研究院南昌大学药学院

建立了一种以金、铂纳米粒子修饰的金属有机框架材料（MAP）为标记物的降钙素原（Procalcitonin,PCT）快速定量免疫层析检测方法。本方法以静电吸附法制备的MAP-抗PCT单克隆抗体偶联物为检测探针，将抗PCT多克隆抗体和羊抗鼠IgG分别喷... 详细信息

建立了一种以金、铂纳米粒子修饰的金属有机框架材料（MAP）为标记物的降钙素原（Procalcitonin,PCT）快速定量免疫层析检测方法。本方法以静电吸附法制备的MAP-抗PCT单克隆抗体偶联物为检测探针，将抗PCT多克隆抗体和羊抗鼠IgG分别喷涂硝酸纤维素（NC）膜构建试纸条的检测线和质控线，采用基于信号放大的夹心免疫法定量检测PCT。结果表明，MAP免疫层析试纸条具有灵敏度高、特异性强和稳定性好等优点，利用其检测PCT的动态检测范围为0.61 pg/mL～320 ng/mL，检出限为0.25 pg/mL，日内和日间精密度（RSD)均小于15%。实际样品检测结果表明，本方法仅需微量样本即可检测全血中PCT的浓度，对于炎症反应的早期诊断、监测治疗及预后判断具有重要意义。

关键词：侧流免疫层析法降钙素原快速检测纳米酶

亚麻籽油中酚类物质对亚麻籽油氧化稳定性的影响

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食品科技 2024年第8期49卷 185-191页

作者：赵爱秀邓泽元南昌大学食品科学与资源挖掘全国重点实验室江西南昌330047

运用高效液相色谱-四级杆飞行时间/质谱联用仪和高效液相色谱分析,对亚麻籽油的酚类提取物进行鉴定,并测定其中酚酸类物质的含量。结果表明,亚麻籽油中共鉴定出14种多酚类化合物,其中酚酸类化合物有9种、类黄酮化合物有5种。将鉴定出的... 详细信息

运用高效液相色谱-四级杆飞行时间/质谱联用仪和高效液相色谱分析,对亚麻籽油的酚类提取物进行鉴定,并测定其中酚酸类物质的含量。结果表明,亚麻籽油中共鉴定出14种多酚类化合物,其中酚酸类化合物有9种、类黄酮化合物有5种。将鉴定出的6种酚酸(没食子酸、绿原酸、芥子酸、短叶苏木酚酸、阿魏酸、咖啡酸)按照其在冷压榨亚麻籽油中的含量,等量回添至精制的亚麻籽油中,采用Schaal烘箱法,研究酚酸对亚麻籽油氧化稳定性的影响。烘箱加速氧化15 d后,回添酚酸的精制亚麻籽油的氧化指标数值显著高于未精制的亚麻籽油(P<0.05),而显著低于精制的亚麻籽油(P<0.05)。研究表明亚麻籽油中的少量酚酸类化合物可提高亚麻籽油的氧化稳定性,但不是主要的抗氧化物质。

关键词：亚麻籽油酚酸高效液相色谱-四级杆飞行时间/质谱联用仪氧化稳定性

一种抗氧化膳食补充剂的增强免疫作用和毒理学评价

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食品工业科技 2024年第13期45卷 300-307页

作者：杨辉章晋武李广焱邓泽元南昌同心紫巢生物工程有限公司江西南昌330200 食品科学与资源挖掘全国重点实验室南昌大学江西南昌330047

研究以雨生红球藻为主要原料复配富硒酵母、蜂花粉提取物和维生素E组成的抗氧化膳食补充剂的免疫作用和安全性。采用低、中、高三个剂量(0.1、0.2、0.4 g/kg bw)每天一次灌胃,连续30 d,观察对小鼠脾脏、胸腺指数、脾淋巴细胞转化活性、... 详细信息

研究以雨生红球藻为主要原料复配富硒酵母、蜂花粉提取物和维生素E组成的抗氧化膳食补充剂的免疫作用和安全性。采用低、中、高三个剂量(0.1、0.2、0.4 g/kg bw)每天一次灌胃,连续30 d,观察对小鼠脾脏、胸腺指数、脾淋巴细胞转化活性、迟发型变态反应、抗体生成细胞水平、半数溶血值(HC_(50))、碳粒廓清速率、巨噬细胞的吞噬作用和自然杀伤细胞活性等指标的影响;通过Ames试验、骨髓细胞微核试验和小鼠精子畸形试验分别评估受试物的致癌潜力,以及对细胞和生殖系统的遗传毒性情况;通过30 d喂养试验考察受试物亚急性毒性。结果发现,与对照组相比,中、高剂量组OD差值分别提高了10.32%(P实验证明,雨生红球藻、富硒酵母、蜂花粉提取物和维生素E复配的抗氧化膳食补充剂食用安全,具有增强免疫力的功能。

关键词：抗氧化膳食补充剂虾青素蜂花粉提取物富硒酵母免疫毒理学评价

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猪笼液蛋白酶消减牛乳蛋白致敏表位的研究

食品工业科技 2024年

作者：李婷婷邱毓李欣陈红兵南昌大学食品科学与资源挖掘全国重点实验室南昌大学食品学院南昌大学江西省食物过敏重点实验室南昌大学中德联合研究院

目的：利用废弃猪笼液中的蛋白酶来消减牛乳主要致敏原蛋白的致敏性。方法：首先采集了米兰达猪笼草（Nepenthes × Miranda）的猪笼液，经过滤、5 kDa膜超滤、真空冷冻干燥和复溶获得酶活为126.276 U/mL的猪笼液蛋白酶液。然后用此酶... 详细信息

目的：利用废弃猪笼液中的蛋白酶来消减牛乳主要致敏原蛋白的致敏性。方法：首先采集了米兰达猪笼草（Nepenthes × Miranda）的猪笼液，经过滤、5 kDa膜超滤、真空冷冻干燥和复溶获得酶活为126.276 U/mL的猪笼液蛋白酶液。然后用此酶对牛乳蛋白进行酶解，通过液相色谱-二级质谱法（LC-MS/MS）鉴定酶解后肽段产物，对比致敏原表位数据库以判断蛋白酶对表位的酶切情况。结果：牛乳主要致敏原蛋白中P1位的K、V、F、R、Y、I、S和L以及P1’位的D、A、V、I、L、F、E、R、Y、N、T、Q、S、W和P的肽键被有效酶解，酶切位点位于相对应的表位内，且位于蛋白表面和内部的表位均有被酶解。其中，来自α-LA的表位Eα-LA1中的K-V以及表位Eα-LA2中的K-V和K-A被酶解频率较高，来自β-LG的被酶解频率高的表位处的肽键为Eβ-LG1和Eβ-LG2中的L-D、V-Y和Y-V，来自αs1-CN的表位Eαs1-CN1中大部分的R-F和F-F被高频酶解，来自αs2-CN的表位Eαs2-CN1中的L-N、R-Y、K-F和K-T和表位Eαs2-CN2中的K-T、K-L和K-I被酶解频率较高，β-CN中被酶解频率较高的表位为Eβ-CN1和Eβ-CN2中的L-Q、S-W、D-V、L-T、T-D和E-N。结论：猪笼液蛋白酶水解对牛乳蛋白致敏原蛋白表位表现出不同程度的破坏作用，猪笼液有望成为新型蛋白酶开发的资源，实现农业废弃物再利用。

关键词：猪笼草猪笼液蛋白酶牛乳蛋白致敏性表位破坏

基于SpyCatcher/SpyTag的ZEN/DON抗独特型纳米抗体的体外自组装

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食品工业科技 2024年

作者：吴箫梁赟钟于红郭原臻黄斌辉何庆华南昌大学食品学院南昌大学食品科学与资源挖掘全国重点实验室南昌大学中德联合研究院

为了提升真菌毒素抗独特型纳米抗体的免疫分析性能，并实现双特异性检测抗原的模拟，本研究以玉米赤霉烯酮(Zearalenone，ZEN)、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol，DON)的抗独特型纳米抗体N28、Z6为研究对象，将SpyCatcher/SpyTag标签... 详细信息

为了提升真菌毒素抗独特型纳米抗体的免疫分析性能，并实现双特异性检测抗原的模拟，本研究以玉米赤霉烯酮(Zearalenone，ZEN)、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol，DON)的抗独特型纳米抗体N28、Z6为研究对象，将SpyCatcher/SpyTag标签与N28、Z6分别进行融合表达，在此基础上基于体外自组装的方式，开展N28、Z6的双价、双特异性抗独特型纳米抗体的构建研究。结果表明，实现了四种SpyCatcher/SpyTag标签融合抗独特型纳米抗体N28-SpyCatcher、N28-SpyTag、Z6-SpyCatcher、Z6-SpyTag的原核可溶表达。基于Z6-SpyCatcher、Z6-SpyTag所建立的竞争抑制标准曲线的IC50分别为0.18ng/mL、0.20ng/mL，其灵敏度高于单体Z6的IC50(0.28 ng/mL)；SpyCatcher标签与N28融合后有利于N28检测灵敏度的提升，IC50值由94.39降低至42.33 ng/mL，而SpyTag标签与N28融合后，则抑制了其与DON抗体的结合。此外，在4℃反应12h的简单反应条件下，基于SpyCatcher/SpyTag的体外自组装特性，成功制备了Z6、N28的双价、双特异性抗独特型纳米抗体Z6-Z6、N28-28与N28-Z6、Z6-N28。ELISA的鉴定结果表明，双价抗独特型纳米抗体均保留了与对应抗体的结合特性，其中N28-Z6还实现了同时与ZEN、DON抗体的结合活性，由于SpyTag标签与N28结合会阻碍其与DON抗体的结合，因此Z6-N28仅保留了与ZEN抗体结合的活性。综上，本研究基于SpyCatcher/SpyTag实现了ZEN/DON双价、双特异性抗独特型纳米抗体的简便快速制备，同时提示SpyCatcher标签对于ZEN/DON抗独特型纳米抗体的免疫分析性能提升具有促进作用。

关键词：抗独特型纳米抗体 SpyCatcher/SpyTag 真菌毒素玉米赤霉烯酮脱氧雪腐镰刀菌烯醇

云南中甸地区斑岩体锆石微量元素与Hf-O同位素特征及其对成岩成矿的启示

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岩石学报 2024年第4期40卷 1163-1184页

作者：莫雷冷成彪陈喜连李凯旋东华理工大学核资源与环境国家重点实验室南昌330013 东华理工大学地球科学学院南昌330013

中甸铜多金属成矿带位于义敦岛弧南缘,被分为东、西两个斑岩带。本文以东斑岩带的普朗、地苏嘎岩体,西斑岩带的雪鸡坪岩体为研究对象,通过锆石微量元素和Hf-O同位素特征研究,结合所收集到的这些岩体的全岩地球化学数据,来揭示两个斑岩... 详细信息

中甸铜多金属成矿带位于义敦岛弧南缘,被分为东、西两个斑岩带。本文以东斑岩带的普朗、地苏嘎岩体,西斑岩带的雪鸡坪岩体为研究对象,通过锆石微量元素和Hf-O同位素特征研究,结合所收集到的这些岩体的全岩地球化学数据,来揭示两个斑岩带的岩浆来源与演化过程、构造背景,并探讨造成其成矿差异的控制因素。结果表明,3个岩体所含锆石都亏损轻稀土、富集重稀土,具有明显的Ce正异常和Eu负异常,Th/U平均值分别为0.19、0.27、0.13,均为岩浆锆石。普朗、地苏嘎和雪鸡坪岩体锆石ε_(Hf)(t)值分别为-0.31±0.6、0.0±0.6、1.71±0.7,锆石δ^(18)O值分别为6.2±0.3‰、6.2±0.4‰、6.1±0.4‰;3个岩体的源区相差不大,均为壳幔岩浆混合,但普朗和地苏嘎岩体地壳物质贡献更多。全岩主微量元素变化特征与锆石Nb/Yb和Th/Nb与Eu/Eu^(*)的相关性显示东斑岩带的普朗和地苏嘎岩体比西斑岩带的雪鸡坪岩体的结晶分异程度更高。在锆石微量元素构造判别图解中,这些岩体均落在火山弧或与弧相关的造山环境范围。结合全岩的Nb-Y和Rb-(Y+Nb)判别图解,以及中甸地区成岩年龄的统计,进一步判定东、西斑岩带岩体均形成于与晚三叠世甘孜-理塘洋壳西向俯冲相关的大陆弧背景。采用锆石氧逸度计估算的普朗、地苏嘎和雪鸡坪岩体的氧逸度分别为ΔFMQ+1.58、ΔFMQ+1.42、ΔFMQ+1.91(QFM为石英-铁橄榄石-磁铁矿缓冲剂)。结合Eu/Eu^(*)值和全岩V/Sc比值分析,发现3个岩体均有较高氧逸度,但普朗和地苏嘎的岩浆氧逸度略低于雪鸡坪,说明在相对较高氧逸条件下,氧逸度高低与成矿规模不成比例。3个岩体的锆石结晶温度分别为769±34℃、783±36℃、819±40℃。结合全岩Sr/Y比值,发现普朗和地苏嘎岩浆含水量高于雪鸡坪。由此推断,更高的水含量和岩浆分异度可能是东部斑岩带比西部斑岩带发育更多斑岩矿床的重要原因,这也暗示东斑岩带具有更大的找矿潜力。

关键词：锆石微量元素 Hf-O同位素岩石成因成矿作用中甸斑岩带

基于纳米抗体识别元件的生物发光共振能量转移体系检测免疫球蛋白G

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分析试验室 2024年

作者：李小江李燕萍何庆华帅文苑曾俊杰涂追南昌大学食品科学与资源挖掘全国重点实验室南昌大学食品学院南昌大学中德联合研究院

为建立一种基于纳米抗体和生物发光共振能量转移(BRET)的均相免疫检测方法，实现免疫球蛋白G (IgG)快速定量检测，本研究以纳米荧光素酶(Nluc)为供体，以与IgG特异性结合的纳米抗体T9和蛋白L (proL) 为识别元件，构建了检测IgG的BRET传... 详细信息

为建立一种基于纳米抗体和生物发光共振能量转移(BRET)的均相免疫检测方法，实现免疫球蛋白G (IgG)快速定量检测，本研究以纳米荧光素酶(Nluc)为供体，以与IgG特异性结合的纳米抗体T9和蛋白L (proL) 为识别元件，构建了检测IgG的BRET传感器，研究了辅助结构域和不同类型受体荧光蛋白对检测体系的影响，并对传感器的IgG响应性能进行了探究。结果表明，在添加辅助结构域、受体为绿色荧光蛋白(GFP)的情况下，BRET转移效果最好，能量转移效率近0.8，而其他2种体系均约为0.6。该体系具有较好的IgG响应能力，线性范围在0.195～0.775 mg/mL之间，检测限为0.068 mg/mL。本方法可以实现IgG的快速均相检测。

关键词：免疫球蛋白G (IgG) 生物发光共振能量转移(BRET) 纳米抗体

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灰葡萄孢霉菌产脱落酸发酵工艺优化

食品与发酵工业 2024年第2期50卷 232-238页

作者：张俊左建英景飞江陈钢南昌大学食品科学与技术国家重点实验室江西南昌330047 四川龙蟒福生科技有限责任公司四川眉山620020

脱落酸(S-abscisic acid,S-ABA)是五大植物生长调节剂之一,现代农业广泛使用于农业生产,具有增强植物抗逆胁迫,保花保果,促进果实转色、增糖降酸等诸多功能。多种植物病原真菌可以合成,现广泛应用于生产的为灰葡萄孢霉菌(Botrytis ciner... 详细信息

脱落酸(S-abscisic acid,S-ABA)是五大植物生长调节剂之一,现代农业广泛使用于农业生产,具有增强植物抗逆胁迫,保花保果,促进果实转色、增糖降酸等诸多功能。多种植物病原真菌可以合成,现广泛应用于生产的为灰葡萄孢霉菌(Botrytis cinerea),该文以使用响应面分析方法,考察碳氮比、初始pH、CaCO 3质量浓度、搅拌转速、通气条件、接种量等关键营养条件和工艺条件对Botrytis cinerea菌体形态和产S-ABA的影响。确定最佳发酵条件为:碳氮比25、搅拌强度535 r/min、初始pH 5.1、接种量11%、通气量1.0 vvm,最佳菌丝球尺寸0.95 mm。此条件下S-ABA产量提升了约8.23%。

关键词：灰葡萄孢霉菌液态深层发酵形态学工程

不同亲水胶体对挤压重组米理化性质、食用品质和消化性的影响

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食品科学 2024年第15期45卷 40-48页

作者：张裕聪杨月月周童童金征宇焦爱权食品科学与资源挖掘全国重点实验室(江南大学) 江苏无锡214122 江南大学食品学院江苏无锡214122

本研究比较了可得然胶(curdlan gum,CG)、魔芋胶(konjac gum,KGM)、海藻酸钠(sodium alginate,SA)、黄原胶(xanthan gum,XG)对挤压重组米理化性质、食用品质和消化性的影响。结果表明:添加CG的重组米外观规整有光泽,糊化黏度降低,消化... 详细信息

本研究比较了可得然胶(curdlan gum,CG)、魔芋胶(konjac gum,KGM)、海藻酸钠(sodium alginate,SA)、黄原胶(xanthan gum,XG)对挤压重组米理化性质、食用品质和消化性的影响。结果表明:添加CG的重组米外观规整有光泽,糊化黏度降低,消化性降低,短程有序度和结晶度最低,具有较好的抗回生能力,蒸煮后软硬适中,不黏牙,感官评分最高;添加KGM的重组米表面光滑,具有最好的抗消化性和适中的抗回生能力,但糊化黏度变化不显著且蒸煮后米饭偏软,感官评分次之;添加SA的重组米糊化黏度略有升高,消化率降低,但抗回生能力一般且重组米表面粗糙,蒸煮后米饭偏软偏黏,口感最差;XG的加入赋予重组米最高的弹性和糊化黏度,但米粒外观不规整,表面粗糙,抗消化性和抗回生能力也较差,且蒸煮后米饭偏黏,感官评分不高。此外,亲水胶体的加入可以有效提高重组米的水分稳定性,降低蒸煮损失率,但蒸煮后吸水率和膨胀率较低且颜色白中带黄,本研究结果可为进一步开发高品质挤压重组米提供理论参考。

关键词：挤压重组米亲水胶体食用品质消化性理化特性