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芦荟蒽醌对高脂血症小鼠脂代谢及LPL、MTTP基因mRNA表达的影响

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中国食品学报 2018年第12期18卷 13-21页

作者：杨武英吴磊燕洪艳平王学渊柯法钧罗秋水江西农业大学食品科学与工程学院江西省天然产物与功能食品重点实验室南昌330045

目的:研究芦荟蒽醌对高脂血症小鼠脂代谢及脂蛋白酯酶(LPL)、微粒体甘油三酯转运蛋白(MTTP)基因表达的影响。方法:采用灌胃高胆固醇乳剂的方法建立高脂血症的模型,用精制芦荟蒽醌对高脂血症小鼠进行干预,持续4周后测定血清中总胆固醇(TC... 详细信息

目的:研究芦荟蒽醌对高脂血症小鼠脂代谢及脂蛋白酯酶(LPL)、微粒体甘油三酯转运蛋白(MTTP)基因表达的影响。方法:采用灌胃高胆固醇乳剂的方法建立高脂血症的模型,用精制芦荟蒽醌对高脂血症小鼠进行干预,持续4周后测定血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)等生化指标,以此评定芦荟蒽醌对高脂血症小鼠的降血脂作用;采用实时荧光定量RT-PCR法测定小鼠心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏等组织中LPL和MTTP mRNA的表达水平,从分子水平探讨芦荟蒽醌的降血脂机制。结果:芦荟蒽醌具有良好的降血脂作用,能够显著降低高脂血症小鼠血清中的TC、TG和LDL-C水平(P<0.01),显著升高HDL-C水平(P<0.05或P<0.01);芦荟蒽醌可以显著提高心脏、肺脏及肾脏中LPL基因m RNA表达量(P<0.05或P<0.01),显著降低肝脏中MTTP基因mRNA表达量(P<0.01)。结论:芦荟蒽醌具有调节高脂血症小鼠LPL和MTTP基因表达的作用,进而起到缓解高脂血症的功效。

关键词：芦荟蒽醌类化合物降血脂作用 LPL基因表达 MTTP基因表达

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响应面法优化纳豆菌糖肽超声提取工艺

中国食品学报 2014年第7期14卷 110-117页

作者：沈柱英黄占旺吴少福康小斐曹靖文江西农业大学食品科学与工程学院江西省天然产物与功能食品重点实验室南昌330045

采用响应面分析法优化超声辅助提取纳豆菌糖肽工艺。在单因素试验的基础上,研究液料比、NaCl浓度、超声时间对纳豆菌糖肽提取得率的影响。通过Box-Behnken试验设计和响应面分析法确定提取BNP的最佳工艺条件。试验结果表明,超声辅助提取... 详细信息

采用响应面分析法优化超声辅助提取纳豆菌糖肽工艺。在单因素试验的基础上,研究液料比、NaCl浓度、超声时间对纳豆菌糖肽提取得率的影响。通过Box-Behnken试验设计和响应面分析法确定提取BNP的最佳工艺条件。试验结果表明,超声辅助提取纳豆菌糖肽的最佳工艺条件是:液料比24∶1 mL/g,NaCl浓度0.15mol/L,提取时间41 min。在此条件下,BNP最高提取得率为1.89%。

关键词：纳豆糖肽超声辅助提取响应面法分析

丙酮酸和乙酰-CoA协同促进L-亮氨酸的合成

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微生物学报 2021年第9期61卷 2891-2906页

作者：徐建中刘洁王颖妤张伟国刘立明江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室江苏无锡214122 江南大学食品科学与技术国家重点实验室江苏无锡214122

【目的】通过理性改造柠檬酸合酶(citrate synthase,CS)、丙酮酸脱氢酶系E1p(pyruvate dehydrogenase complex,PDHC,编码基因aceE)和ATP-柠檬酸裂解酶(ATP-Citrate lyase,ACL),有效供应胞内丙酮酸和乙酰-CoA,以提高L-亮氨酸产量。【方法】以谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)为底盘细胞,分析不同CS和PDHC酶活水平对L-亮氨酸合成的影响。随后,考查协同改造CS和PDHC或引入绿硫菌(Chlorobium tepidum)中ACL对L-亮氨酸合成的影响。【结果】低强度的CS酶活(即重组菌XL-3 P_(dapA-R2)gltA)有利于L-亮氨酸的合成,L-亮氨酸产量达到17.5±0.6 g/L。而改变PDHC酶活水平不利于L-亮氨酸的合成。此外,以启动子P_(dapA-R2)控制CS表达,而以启动子P_(gapA)控制PDHC表达时(即重组菌XL-4),可实现胞内丙酮酸和乙酰-CoA的有效供给,L-亮氨酸产量达到20.2±1.7 g/L,且显著降低副产物产量。若在重组菌XL-4中引入***,ACL会显著抑制菌体生长而不利于L-亮氨酸合成,而引入到出发菌XL-3中因胞内丙酮酸和乙酰-CoA得到有效供给,目标重组菌XL-5 L-亮氨酸产量达到18.5±1.2 g/L,比出发菌株XL-3增加了14.2%。【结论】重组菌XL-4中因协同控制CS和PDHC酶活,从而实现胞内丙酮酸和乙酰-CoA有效供给,促进L-亮氨酸的合成。该研究结果对后续利用代谢工程技术强化微生物合成L-亮氨酸等支链氨基酸具有重要的参考价值。

关键词：谷氨酸棒杆菌 L-亮氨酸合成丙酮酸乙酰-CoA 协同作用代谢工程

保鲜剂OAA-7与Nisin对常见革兰氏阳性菌抑制效果对比

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江西食品工业 2008年第1期 28-30,27页

作者：杨水兵梁瑞红刘成梅刘伟钟业俊南昌大学食品科学与技术国家重点实验室

本文以常见革兰氏阳性菌嗜热脂肪芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌以及枯草芽孢杆菌为对象,对比OAA-7与Nisin的抑菌性能,研究发现:OAA-7可在短时间内杀灭嗜热芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌,在实验的120h内可完全抑制三种菌的生长,而N... 详细信息

本文以常见革兰氏阳性菌嗜热脂肪芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌以及枯草芽孢杆菌为对象,对比OAA-7与Nisin的抑菌性能,研究发现:OAA-7可在短时间内杀灭嗜热芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌,在实验的120h内可完全抑制三种菌的生长,而Nisin在整个实验过程中未能完全抑制三种菌的生长繁殖,实验72h后抑菌能力下降;相同浓度的OAA-7与Nisin相比抑菌效果更好,活力更为持久。

关键词：有机酸保鲜剂 Nisin OAA-7 革兰氏阳性菌抑制效果

利用游离型表达质粒强化毕赤酵母表达木聚糖酶

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生物工程学报 2018年第5期34卷 712-721页

作者：潘阳吴丹吴敬江南大学食品科学与技术国家重点实验室江苏无锡214122 江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室江苏无锡214122

巴斯德毕赤酵母是用途广泛的蛋白表达系统。目前用于毕赤酵母的质粒主要以整合型质粒为主,很少见到游离的质粒用于外源基因的表达。文中通过将来源于酵母自身的自主复制序列连接到酵母整合型表达载体pGAP中构成自主复制的游离型表达载体... 详细信息

巴斯德毕赤酵母是用途广泛的蛋白表达系统。目前用于毕赤酵母的质粒主要以整合型质粒为主,很少见到游离的质粒用于外源基因的表达。文中通过将来源于酵母自身的自主复制序列连接到酵母整合型表达载体pGAP中构成自主复制的游离型表达载体pGAPZαA-PARS,将该载体用于表达木聚糖酶基因。转化毕赤酵母后同传统的整合型表达菌株相比,以甘油为碳源时最高酶活达到343 U/mL,比整合型表达提高了45.9%。同时游离载体表达重组酶比活相对整合表达提高了81.2%。为了节约发酵成本,进一步研究了分别以甘油、葡萄糖、蔗糖、混合碳源(蔗糖︰甘油=1︰2)等不同碳源下游离型重组菌株的表达水平。发现甘油表达水平最高,蔗糖最低,但是以工业葡萄糖为碳源时产酶成本最低。由于pGAP载体不需要以甲醇为碳源,因而文中所构建的游离载体pGAPZαA-PARS极大促进了毕赤酵母在食品行业中的应用。同时,游离型载体可大幅度提高表达水平,为进一步研究提高GAP启动子的高效表达奠定了基础。

关键词：毕赤酵母游离型载体木聚糖酶 GAP启动子蛋白质表达

分散泛菌蔗糖异构酶在大肠杆菌中的表达及发酵优化

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生物工程学报 2016年第8期32卷 1070-1080页

作者：刘军彤吴敬陈晟江南大学食品科学与技术国家重点实验室江苏无锡214122 江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室江苏无锡214122

为了提高分散泛菌Pantoea dispersa UQ68J来源的蔗糖异构酶产量,研究了不同信号肽及发酵条件对蔗糖异构酶在大肠杆菌中重组表达的影响。将携带天然信号肽的蔗糖异构酶基因优化后,转入大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)构建重组表达菌... 详细信息

为了提高分散泛菌Pantoea dispersa UQ68J来源的蔗糖异构酶产量,研究了不同信号肽及发酵条件对蔗糖异构酶在大肠杆菌中重组表达的影响。将携带天然信号肽的蔗糖异构酶基因优化后,转入大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)构建重组表达菌株——ORI菌株,摇瓶发酵总酶活和胞外酶活分别为85 U/m L、65 U/m L。从天然信号肽开始第22位氨基酸作为成熟蛋白的起始,连接Pel B或Omp A信号肽构建P22和O22菌株,其中P22菌株发酵总酶活提高至138 U/m L,是ORI菌株总酶活的1.6倍;而O22菌株发酵总酶活和ORI菌株无明显差别。采用3.0 g/L的乳糖诱导,P22菌株的蔗糖异构酶总酶活提高至168 U/m L。在3 L发酵罐中,研究甘氨酸浓度和诱导时间对蔗糖异构酶分泌的影响,当补加0.5%甘氨酸,DCW为18 g/L(OD_(600)=30)开始诱导,P22菌株的蔗糖异构酶胞外酶活最高达1 981 U/m L,同时蔗糖异构酶总酶活达到2 640 U/m L,是已报道大肠杆菌重组表达蔗糖异构酶的最高水平。

关键词：蔗糖异构酶信号肽发酵优化

草鱼潜在过敏原α-烯醇化酶原核表达条件的优化

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食品安全质量检测学报 2023年第23期14卷 148-154页

作者：孙耀斌骆叶晴陈娇刘鑫谢彦海高金燕南昌大学食品科学与资源挖掘全国重点实验室南昌330047 南昌大学中德联合研究院南昌330047 南昌大学食品学院南昌330047

目的通过对草鱼α-烯醇化酶(α-Enolase)原核表达的条件进行优化,分别从表达的上清液与包涵体中纯化获得重组α-Enolase。方法本研究基于前期克隆的草鱼α-Enolase基因序列设计表达引物,将草鱼α-Enolase基因克隆至pET-30a质粒中,得到pE... 详细信息

目的通过对草鱼α-烯醇化酶(α-Enolase)原核表达的条件进行优化,分别从表达的上清液与包涵体中纯化获得重组α-Enolase。方法本研究基于前期克隆的草鱼α-Enolase基因序列设计表达引物,将草鱼α-Enolase基因克隆至pET-30a质粒中,得到pET-30a-α-Enolase重组质粒。然后,将重组质粒转入大肠杆菌Origami2(DE3)感受态细胞中,并用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)进行体外诱导表达。采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺电泳方法分析重组蛋白的可溶性,并对表达条件进行优化。利用亲合层析法纯化目的蛋白。结果在20℃诱导15 h得到的重组蛋白以两种形式存在:一部分为可溶性蛋白存在于上清液中,一部分以包涵体形式存在于沉淀中;在37℃诱导4h得到的重组蛋白则只有包涵体形式。包涵体蛋白表达量最大的优化条件为:诱导温度为37℃,IPTG终浓度1.0 mmol/L,诱导时间4 h。采用亲合层析法分别纯化上清液(20℃诱导15 h)和包涵体中(37℃诱导4 h)的重组蛋白,得率分别为3.5 mg/100 mL和4.9mg/100mL菌液。结论利用原核表达从上清液与包涵体中均可纯化得到重组α-Enolase。但这两种α-Enolase在生物活性与免疫原性是否存在差异性,以及通过重组α-Enolase是否可以代替天然蛋白用于鱼类过敏原的研究,有待进一步研究。

关键词：草鱼烯醇化酶原核表达包涵体重组蛋白

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响应曲面法优化微波萃取化橘红多糖

中国食品学报 2013年第3期13卷 101-109页

作者：侯秀娟沈勇根徐明生吴少福王雯江西农业大学食品科学与工程学院江西省天然产物与功能食品重点实验室南昌330045

目的:研究微波萃取技术在化橘红多糖提取中的应用。方法:选取工艺参数液料比、微波功率、微波温度、微波时间4个因素,分析其对多糖得率的影响,按试验设计做上述工艺参数的优化试验,采用Design-Expert软件对试验数据进行二次响应面分析... 详细信息

目的:研究微波萃取技术在化橘红多糖提取中的应用。方法:选取工艺参数液料比、微波功率、微波温度、微波时间4个因素,分析其对多糖得率的影响,按试验设计做上述工艺参数的优化试验,采用Design-Expert软件对试验数据进行二次响应面分析。结果:优化的微波萃取化橘红多糖的最佳工艺条件:液料比70,微波功率546.56W,微波温度100℃,微波时间22.32min,在该条件下化橘红多糖得率24.64%。结论:微波萃取技术适用于化橘红多糖的提取,拟合的统计模型可信度高。本研究结果对微波萃取多糖技术的研究具有较好的借鉴意义。

关键词：化橘红多糖微波萃取响应面分析

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我国大宗非粮型饲料蛋白资源现状及高效利用

饲料工业 2015年第5期36卷 51-55页

作者：阮征米书梅印遇龙南昌大学食品学院食品科学与技术国家重点实验室江西南昌330047 中国科学院亚热带农业生态研究所湖南长沙410125

目前,饲用蛋白质资源短缺与资源综合利用率偏低等因素成为制约我国饲料和畜牧业健康发展的瓶颈。因此,高效开发或利用大宗非粮型饲用蛋白资源显得尤为重要。文章对目前我国的非粮型蛋白资源与加工现状进行总结,介绍资源与农副产物高值... 详细信息

目前,饲用蛋白质资源短缺与资源综合利用率偏低等因素成为制约我国饲料和畜牧业健康发展的瓶颈。因此,高效开发或利用大宗非粮型饲用蛋白资源显得尤为重要。文章对目前我国的非粮型蛋白资源与加工现状进行总结,介绍资源与农副产物高值化的新技术,并对大宗非粮型饲料蛋白资源高效利用前景进行了展望。

关键词：资源饲料蛋白质高效利用高新技术