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枞酸在顺铂耐药鼻咽癌细胞增殖、侵袭、迁移中的作用及分子机制

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临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2024年第3期38卷 188-194,199页

作者：袁艳艳蓝苑钊崔毅侯明华唐金勇文浩杰郴州市第一人民医院耳鼻咽喉头颈外科湖南郴州423000 南方医科大学第一临床学院

目的探讨枞酸在顺铂耐药鼻咽癌细胞增殖、侵袭、迁移的作用及分子机制。方法①药物浓度递增法构建顺铂耐药鼻咽癌C666/DDP细胞株。②枞酸对C666/DDP细胞增殖、侵袭及迁移的影响研究:CCK-8法、活性氧(ROS)及线粒体膜电位(MMP)水平检测及... 详细信息

目的探讨枞酸在顺铂耐药鼻咽癌细胞增殖、侵袭、迁移的作用及分子机制。方法①药物浓度递增法构建顺铂耐药鼻咽癌C666/DDP细胞株。②枞酸对C666/DDP细胞增殖、侵袭及迁移的影响研究:CCK-8法、活性氧(ROS)及线粒体膜电位(MMP)水平检测及裸鼠皮下成瘤实验检测枞酸对C666/DDP细胞体外、体内增殖及凋亡能力的影响;Transwell法检测细胞侵袭和迁移能力。③Western blot及IHC法检测PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白的表达情况。结果①顺铂对C666-1细胞毒性IC50约为25μmol/L。RI=25μmol/L/4μmol/L=6.25,获得耐药性,C666-1-DDP耐药株构建成功。②枞酸可促进C666/DDP细胞凋亡,抑制其增殖,且表现为G2/M期阻滞;Transwell显示枞酸抑制C666/DDP细胞迁移及侵袭能力,提高C666/DDP细胞ROS水平并使MMP降低。③动物实验显示枞酸在体内呈浓度梯度抑制顺铂耐药鼻咽癌的增殖,抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白的表达。结论枞酸可抑制顺铂耐药鼻咽癌细胞增殖、侵袭及迁移,其机制与抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路有关。

关键词：枞酸鼻咽肿瘤顺铂耐药分子机制

干扰素刺激因子对脂多糖诱导的小鼠树突状细胞坏死性凋亡的影响

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中国急救医学 2024年第7期44卷 611-617页

作者：李金儒段昱凌花李琼姚咏明戴新贵南方医科大学第一临床医学院广东广州510515 南方医科大学附属郴州医院(郴州市第一人民医院)重症医学科湖南郴州423000 解放军总医院医学创新研究部转化医学研究中心第四医学中心北京100853

目的探讨干扰素刺激因子(STING)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠树突状细胞(DC)坏死性凋亡的影响。方法 LPS 1μg/mL刺激第3~10代对数生长期小鼠DC2.4细胞系,将DC分为对照组、LPS 6 h组、LPS 12 h组、LPS 24 h组和LPS 72 h组,采用蛋白质印迹法... 详细信息

目的探讨干扰素刺激因子(STING)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠树突状细胞(DC)坏死性凋亡的影响。方法 LPS 1μg/mL刺激第3~10代对数生长期小鼠DC2.4细胞系,将DC分为对照组、LPS 6 h组、LPS 12 h组、LPS 24 h组和LPS 72 h组,采用蛋白质印迹法(Western blot)检测磷酸化干扰素刺激因子(P-STING)、STING、磷酸化混合系激酶区域样蛋白(P-MLKL)、MLKL蛋白的表达。将转染含STING基因小干扰RNA序列慢病毒的DC分为敲减STING+磷酸盐缓冲液(PBS)组、敲减STING+LPS组,将转染空载慢病毒的DC分为空载体+PBS组、空载体+LPS组,给予相应刺激并培养12 h,通过流式细胞术检测细胞凋亡率,行核酸染料(SYTOX Green)染色观测细胞凋亡情况并计算凋亡率,Western blot检测P-STING、STING、P-MLKL、MLKL蛋白表达。结果与对照组比较,LPS 12 h组STING蛋白表达显著升高(P<0.05),LPS 12 h组、LPS 24 h组P-MLKL/MLKL比值均显著升高(P<0.05),将12 h作为后续刺激时长。培养12 h,与PBS组比较,LPS组细胞的凋亡率显著上升,且LPS组细胞器普遍肿胀,细胞质中出现大量空泡,细胞膜完整性被破坏,细胞发生崩解。空载体组与敲减STING组细胞转染慢病毒72 h后,Western blot检测提示,sh1-STING敲减组STING蛋白较空载体组、sh2-STING敲减组和sh3-STING敲减组表达显著降低(P<0.05)。培养12 h,流式细胞术检测显示,空载体+PBS组、空载体+LPS组、sh1-STING敲减+PBS组、sh1-STING敲减+LPS组细胞凋亡率分别为(36.34±24.42)%、(52.57±35.77)%、(37.81±28.9)%、(46.45±32.44)%。培养12 h, SYTOX Green染色检测显示,空载体+PBS组、空载体+LPS组、sh1-STING敲减+PBS组、sh1-STING敲减+LPS组细胞凋亡率分别为(13.4±6.3)%、(67.6±24.0)%、(2.0±1.1)%和(7.1±4.2)%。培养12 h,与空载体+LPS组比较,sh1-STING敲减+LPS组细胞凋亡率以及细胞中P-MLKL/MLKL比值均显著降低(P<0.05);与空载体+PBS组比较,空载体+LPS组P-MLKL/MLKL比值明显升高(P=0.011);但与敲减STING+PBS组比较,敲减STING+LPS组P-MLKL/MLKL比值差异不显著(P=0.889)。结论 LPS刺激下小鼠DC中STING蛋白表达增强,并于12 h达到活化高峰,且活化的STING蛋白对细胞坏死性凋亡具有显著的促进效应。

关键词：脓毒症树突细胞坏死性凋亡干扰素刺激因子免疫功能障碍

CaMKⅡγ和CaMKⅡδ通过PI3K/Akt/Erk信号通路减轻小鼠神经元缺血再灌注损伤

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南方医科大学学报 2024年第3期44卷 563-570页

作者：刘昊铭林子诗叶靖南方医科大学南方医院麻醉科广东广州510515 佛山市第一人民医院麻醉科广东佛山528000 南方医科大学珠江医院麻醉科广东广州510260

目的观察钙/钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ(CaMKⅡ)的同工型CaMKⅡγ和CaMKⅡδ对鼠神经元细胞缺血缺氧再灌注损伤的影响,并探究其作用机制。方法分离胚胎期第18天胎鼠大脑用于提取原代神经元,在5%CO_(2)、37℃条件下培养,分为常规培养的对照组... 详细信息

目的观察钙/钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ(CaMKⅡ)的同工型CaMKⅡγ和CaMKⅡδ对鼠神经元细胞缺血缺氧再灌注损伤的影响,并探究其作用机制。方法分离胚胎期第18天胎鼠大脑用于提取原代神经元,在5%CO_(2)、37℃条件下培养,分为常规培养的对照组、空白对照组(si-NT)、CaMKⅡγ敲除组(si-CAMK2G)和CaMKⅡδ敲除组(si-CAMK2D)。研究组神经元转染处理后,更换为无糖培养基,并将其置于缺氧环境中模拟氧糖剥夺(OGD/R)条件,持续1 h,随后复原标准培养环境。通过对神经元裂解物行免疫蛋白印迹检测磷脂酰肌醇-3-激酶/细胞外信号调节激酶(PI3K/Akt/Erk)信号通路构件的表达量,并建立小鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,通过对比假手术组(Sham)(n=25)和MCAO组(n=25)PI3K/Akt/Erk信号通路表达来进行验证。结果si-CAMK2G组的胎鼠神经元细胞在OGD/R 12、24、48、72 h的生存率明显低于si-NT组(P<0.01或0.001),并可逆转OGD/R介导的胎鼠神经元细胞CaMKⅡγ表达上调。si-CAMK2G组和si-CAMK2D组与si-NT组相比,PI3K/Akt/Erk信号通路表达受到明显抑制(P<0.01)。在MCAO模型中,MCAO组小鼠脑CaMKⅡδ和CaMKⅡγ的表达显著增加并激活了PI3K/Akt/Erk信号通路,CaMKⅡδ和CaMKⅡγ,Erk、磷酸化Erk、Akt和磷酸化Akt在MCAO造模成功再灌注后24、48、72和96 h的表达显著高于Sham组再灌注24 h(P<0.05,0.01或0.0001)。结论CaMKⅡγ和CaMKⅡδ在神经元细胞发生缺血缺氧损伤时的神经保护作用可能是通过PI3K/Akt/Erk信号通路介导的。

关键词：脑缺血再灌注损伤钙/钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ 神经保护磷脂酰肌醇-3-激酶细胞外信号调节激酶信号通路

细胞外体积分数联合临床指标构建的列线图预测结直肠癌p53表达

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临床放射学杂志 2024年第5期43卷 776-782页

作者：周兰妮欧阳富盛郭保亮王丽雯潘佳玲陈铭南方医科大学顺德医院(佛山市顺德区第一人民医院) 528308

目的构建基于CT的细胞外体积分数(ECV)结合临床指标预测结直肠癌(CRC)的p53表达状态的列线图模型并进行验证。方法回顾性搜集2019年1月至2022年3月在本院行手术治疗的147例CRC患者的资料,根据病理结果分为p53高危表达组和p53低危表达... 详细信息

目的构建基于CT的细胞外体积分数(ECV)结合临床指标预测结直肠癌(CRC)的p53表达状态的列线图模型并进行验证。方法回顾性搜集2019年1月至2022年3月在本院行手术治疗的147例CRC患者的资料,根据病理结果分为p53高危表达组和p53低危表达组。按照7∶3的比例将所有患者随机分为训练组(n=103)和验证组(n=44)。分别采用Logistic回归和最小绝对收缩和选择算子(LASSO)筛选出预测因子,构建风险预测模型并进行比较,取受试者工作特征曲线(ROC)曲线下面积(AUC)面积大者建立列线图,从区分度、校准度和临床净收益等方面评估列线图的性能和临床效益。结果多因素Logistic回归分析显示性别(OR=2.073,P<0.05)、肿瘤最大径(OR=1.023,P<0.05)、ECV(OR=0.958,P<0.05)是p53高危表达的独立危险因素;LASSO算法筛选出6个预测因子,分别为性别、肿瘤最大径、ECV、平衡期-平扫CT差值(ΔHU_(tumor))、糖类抗原199(CA199)、中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)。ROC分析显示,基于LASSO法构建的列线图模型具有较好的预测效能(AUC=0.752,95%CI:0.605~0.899,P=0.005),校准曲线和决策分析曲线分别验证了模型较好的校准能力和临床净收益。结论联合ECV和临床指标构建的列线图模型具有较好的区分度、校准能力、临床净收益,可应用于无创识别p53高危表达的患者,为临床诊断和治疗方案的制定提供参考。

关键词：结直肠癌细胞外体积分数 p53 列线图计算机断层成像

钆塞酸二钠增强多模态MRI联合临床特征同时预测肝细胞癌CK19表达及微血管侵犯的价值

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放射学实践 2024年第5期39卷 598-604页

作者：刘子蔚杨少民张榕李民安周翠铷李晓虹陈伊凡胡秋根南方医科大学顺德医院(佛山市顺德区第一人民医院)放射科广东528308 南方医科大学顺德医院附属杏坛医院放射科广东528325

目的:探讨钆塞酸二钠多模态MRI联合临床特征构建的列线图模型同时预测肝细胞癌(HCC)中CK19表达及微血管侵犯(MVI)的价值。方法:回顾性搜集经病理诊断为单发性HCC的106例患者的病例资料,术前均行钆塞酸二钠增强多模态MRI检查,且术后病理... 详细信息

目的:探讨钆塞酸二钠多模态MRI联合临床特征构建的列线图模型同时预测肝细胞癌(HCC)中CK19表达及微血管侵犯(MVI)的价值。方法:回顾性搜集经病理诊断为单发性HCC的106例患者的病例资料,术前均行钆塞酸二钠增强多模态MRI检查,且术后病理报告清晰描述CK19及MVI状态。将CK19/MVI双生物学标志物分为双阳组(CK19及MVI均为阳性,19例)与非双阳组(87例),比较两组间临床及影像特征的差异,通过多因素Logistic回归筛选独立预测因子,并通过R软件构建CK19/MVI双阳性表达的列线图模型。结果:临床特征中年龄、AFP、NLR、PLR在双阳组与非双阳组间差异有统计学意义(P0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示PLR、T1rt-20 min、肝胆期瘤周低信号是CK19/MVI双阳表达的独立预测因子,各预测因子的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.729、0.706、0.708。建立的列线图预测模型AUC为0.854,校准预测曲线与标准曲线贴合尚可。结论:钆塞酸二钠增强多模态MRI联合临床特征术前能较好地同时预测CK19表达及微血管侵犯,并通过列线图模型为个体化预测提供参考。

关键词：肝细胞癌钆塞酸二钠磁共振成像细胞角蛋白19 微血管侵犯

COVID-19疫情暴发后急性PACG发作影响因素分析

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中华实验眼科杂志 2024年第6期42卷 532-537页

作者：卢亚楠丁文君陈霄雅李甦雁苗培建赵金巧司沛波徐州医科大学附属徐州市立医院、徐州市第一人民医院眼科、徐州市眼病防治研究所徐州221000

目的分析新型冠状病毒感染(COVID-19)疫情暴发后急性原发性闭角型青光眼(PACG)患者在拟行青光眼手术患者中的构成比及发病的影响因素。方法采用横断面研究,以整群抽样法,通过医院信息化系统收集COVID-19疫情暴发后徐州市第一人民医院202... 详细信息

目的分析新型冠状病毒感染(COVID-19)疫情暴发后急性原发性闭角型青光眼(PACG)患者在拟行青光眼手术患者中的构成比及发病的影响因素。方法采用横断面研究,以整群抽样法,通过医院信息化系统收集COVID-19疫情暴发后徐州市第一人民医院2022年12月16日至2023年1月16日住院拟行青光眼手术的患者141例及2021—2022、2020—2021、2019—2020年同期(12月16日至次年1月16日)住院拟行青光眼手术的患者231例。选取其中疫情暴发后急性PACG患者92例92眼为研究组,2021—2022年同期住院的急性PACG患者21例21眼为对照组。分析观察期内拟行手术的各类型青光眼患者构成比和急性PACG患者在拟行青光眼手术患者中的构成比及其临床特征,包括年龄、性别、视力、眼压、房角关闭程度。通过电话回访形式获得患者COVID-19后抗感冒药物服用情况、生活习惯和心理情绪变化(包括日饮水量和焦虑)等流行病学资料,采用医院抑郁和焦虑量表(HADS)评估研究组患者焦虑程度,分析疫情暴发后急性PACG患者发作的诱发因素。结果疫情暴发后1个月内徐州市第一人民医院急性PACG患者占比较2021—2022、2020—2021及2019—2020年同期显著增加,差异均有统计学意义(χ2=31.066、33.331、20.804,均P研究组与对照组不同等级视力眼数分布情况、眼压、眼压≥30 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)者及不同房角状态眼数分布情况比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。对照组发病期间患者无COVID-19及服用抗感冒药物等病史。研究组发病期间92例(占100%)患者新型冠状病毒核酸检测结果均为阳性,其中57例(占61.96%)有口服抗感冒药物史;同期住院其他类型青光眼患者49例,新型冠状病毒核酸检测结果均为阳性(占100%),20例(占40.82%)有口服抗感冒药物史。研究组急性PACG患者和同期其他类型青光眼患者口服抗感冒药物人数占比比较,差异有统计学意义(χ2=5.764,P=0.016)。研究组在COVID-19疫情暴发期间,诉日饮水量较之前有不同程度增加;研究组焦虑患者76例,占82.6%。多重线性回归分析显示:眼压=19.052+0.009×日饮水量+0.858×HADS评分(R 2=0.780),日饮水量和HADS评分的标准化回归系数分别为0.542和0.452,日饮水量较HADS评分对眼压影响更大。结论COVID-19疫情暴发后急性PACG患者在拟行青光眼手术患者中所占比率显著升高,可能与口服含血管收缩剂或抗组胺成分的抗感冒药物、日饮水量增加、焦虑等生活习惯和心理情绪变化等诱发因素有关。

关键词：新型冠状病毒感染青光眼发病率急性原发性闭角型青光眼影响因素焦虑

蒙特利尔认知量表评分在ICU机械通气患者脱机中的预测价值

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中国康复医学杂志 2024年第6期39卷 804-812,827页

作者：谭金泽张雷庞文君梁桂英叶金群陈尚杰南方医科大学第二临床医学院广州市510080 南方医科大学附属广东省人民医院(广东省医学科学院)康复医学科南方医科大学附属深圳市宝安医院康复医学科

目的:探讨MoCA评分在ICU机械通气患者脱机中的预测价值。方法:选取2022年10月—2023年8月期间收治于广东省人民医院重症监护室的符合纳入标准与排除标准的机械通气患者127例,其中男性85例,女性42例。所有患者在入科后24h内均评估一般资... 详细信息

目的:探讨MoCA评分在ICU机械通气患者脱机中的预测价值。方法:选取2022年10月—2023年8月期间收治于广东省人民医院重症监护室的符合纳入标准与排除标准的机械通气患者127例,其中男性85例,女性42例。所有患者在入科后24h内均评估一般资料以及MoCA评分、每分通气量(MV)、Apache-II评分、潮气量(VT)、浅快呼吸指数(RSBI)、氧合指数(OI)、血气分析等临床资料,评估患者自主呼吸试验前的机械通气时长,最后评估患者的脱机结局。根据患者的脱机结局分成两组并进行病例对照分析,其中脱机成功组92例,脱机失败组35例,采用单因素分析筛查与脱机失败相关的因素;采用二元logistic多因素回归分析判断影响机械通气患者脱机过程的危险因素与保护因素,计算优势比(OR)、95%置信区间(95%CI)以及准确度(Acc),绘制MoCA评分的受试者工作曲线(ROC曲线),计算曲线下面积(AUC)、约尔登指数(YI)、截断值(Cutoff),以分析MoCA评分在机械通气患者脱机中的预测价值。结果:一般资料比较结果显示,两组患者除BMI外差异均无显著性意义(P>0.05);两组患者临床资料比较结果显示,两组患者的Apache-II、MoCA评分、PaO_(2)、VT、MV、机械通气时长差异有显著性意义(P<0.05);多因素分析结果显示,MoCA评分高(OR=0.824,95%CI:0.720—0.944,P=0.005)是影响脱机结局的独立保护因素。每分通气量高(OR=0.600,95%CI:0.416—0.865,P=0.006)是影响脱机结局的独立保护因素。ROC曲线分析结果显示:MoCA评分的ROC曲线下面积(AUC)为0.746,95%CI为0.661—0.819,P=0.001。最佳截断值为20分,对应的敏感度(Se)和特异度(Sp)分别是77.14%、68.48%,预测准确度(Acc)为74.02%。结论:MoCA评分高是影响脱机结局的独立保护因素,当患者MoCA评分≤20分时,患者发生脱机失败的风险增大。MoCA评分高的患者,其脱机成功率高,MoCA评分每提高1分,脱机成功率增加17.6%。

关键词：重症康复脱机机械通气蒙特利尔认知量表评分预测价值

VA-ECMO患者院内死亡风险预测模型的构建及验证:一项多中心、回顾性、病例对照研究

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南方医科大学学报 2024年第3期44卷 491-498页

作者：戈悦李建伟梁宏开侯六生左六二陈珍卢剑海赵新梁静漪彭岚包静娜段佳欣刘俐毛可晴曾振华胡鸿彬陈仲清南方医科大学南方医院重症医学科广东广州510515 南方医科大学护理学院广东广州510515 中山市人民医院重症医学科广东中山528403 南方医科大学顺德医院//顺德第一人民医院重症医学科广东佛山528308

目的分析静脉-动脉体外膜肺氧合技术(VA-ECMO)患者死亡危险因素,构建并验证VA-ECMO患者院内死亡风险预测模型。方法采用便利抽样,选取2015年1月~2022年1月广东省3家三甲综合医院ICU的302例VA-ECMO患者作为研究对象,随机分为建模组201... 详细信息

目的分析静脉-动脉体外膜肺氧合技术(VA-ECMO)患者死亡危险因素,构建并验证VA-ECMO患者院内死亡风险预测模型。方法采用便利抽样,选取2015年1月~2022年1月广东省3家三甲综合医院ICU的302例VA-ECMO患者作为研究对象,随机分为建模组201例,验证组101例。运用单因素及多因素Logistic回归分析VA-ECMO患者死亡危险因素,构建VAECMO患者死亡风险预测模型并以列线图形式呈现。使用受试者工作特征曲线(ROC曲线)、校准曲线和临床决策曲线评价模型区分度、一致性及临床有效性。结果预测VA-ECMO患者院内死亡风险的最终模型包括了高血压(OR=3.694,95%CI 1.582-8.621)、连续性肾脏替代治疗(OR=9.661,95%CI 4.103-22.745)、钠离子(OR=1.048,95%CI 1.003-1.095)、血红蛋白(OR=0.987,95%CI 0.977-0.998)。建模组预测模型的受试者工作特征曲线下面积AUC=0.829(95%CI 0.770-0.889),高于4个单独危险因素(AUC0.05。结论构建的VA-ECMO患者院内死亡风险预测模型区分度、校准度及临床有效性均较好,优于常用疾病严重程度评分系统,对评估重症患者疾病的严重程度及预后的风险水平有重要意义。

关键词：静脉-动脉体外膜肺氧合死亡率危险因素风险预测模型

糖尿病肾病小鼠中前纤维蛋白1的表达和免疫细胞浸润分析

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中国病理生理杂志 2024年第3期40卷 484-492页

作者：麦丽萍黄桂萍邓春玉郑丹琳李晓红何国东南方医科大学附属广东省人民医院(广东省医学科学院)医学研究部广东广州510080

目的:探讨前纤维蛋白1(profilin 1,PFN1)在糖尿病肾病小鼠中的表达及其与免疫细胞浸润的相关性。方法:利用糖尿病肾病患者肾组织芯片转录组表达数据分析PFN1的表达水平和免疫细胞浸润情况,并通过小鼠动物实验进行验证。将16只C57BL/6小... 详细信息

目的:探讨前纤维蛋白1(profilin 1,PFN1)在糖尿病肾病小鼠中的表达及其与免疫细胞浸润的相关性。方法:利用糖尿病肾病患者肾组织芯片转录组表达数据分析PFN1的表达水平和免疫细胞浸润情况,并通过小鼠动物实验进行验证。将16只C57BL/6小鼠随机分为正常组和模型组,每组8只。模型组采用腹腔注射链脲佐菌素法建立糖尿病肾病小鼠模型,造模成功后检测小鼠肾组织中CD11b、F4/80、CC趋化因子受体4(CC chemo kine receptor 4,CCR4)、白细胞介素1受体I型(interleukin-1 receptor type I,IL-1R1)、B细胞淋巴瘤2(B-cell lympho ma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)和胱天蛋白酶3(caspase-3)蛋白的表达水平。另外,在糖尿病肾病细胞模型中过表达PFN1,检测单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)和cas pase-3蛋白的表达情况。结果:糖尿病肾病患者肾组织芯片转录组表达数据集GSE30122中,PFN1基因表达量显著升高(P<0.01),且与巨噬细胞和T细胞有显著相关性。糖尿病肾病小鼠模型组肾脏组织可见明显病理改变,肾脏组织中PFN1表达量显著升高(P<0.01),免疫指标CD11b、F4/80、CCR4、IL-1R1和凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、cas pase-3表达升高(P<0.01)。过表达PFN1可促进MCP-1和caspase-3蛋白的表达。结论:糖尿病肾病小鼠肾组织中可见巨噬细胞和Th17免疫细胞浸润且PFN1表达上调,促进糖尿病肾病细胞凋亡。

关键词：前纤维蛋白1 糖尿病肾病细胞免疫浸润细胞凋亡