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网膜固定技术在腹盆部肿瘤三维适形放疗中的应用

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中华放射医学与防护杂志 2006年第1期26卷 66-67,81页

作者：李黎军李飞舟朱海军黄井岗宋宏羽张新忠南方医科大学附属深圳宝安医院放疗中心深圳518101

目的探讨用网膜体位固定技术进行腹盆部肿瘤三维适形放疗(3D-CRT)的临床应用价值。方法11例腹盆部肿瘤病人采用拓能网膜体位固定技术完成3D-CRT。通过对患者CT扫描前、后摆位复位验证片以及CT模拟(CT-sim)后射野证实片与计划数字影像重... 详细信息

目的探讨用网膜体位固定技术进行腹盆部肿瘤三维适形放疗(3D-CRT)的临床应用价值。方法11例腹盆部肿瘤病人采用拓能网膜体位固定技术完成3D-CRT。通过对患者CT扫描前、后摆位复位验证片以及CT模拟(CT-sim)后射野证实片与计划数字影像重建DRR图上的相关点的移动情况的测量比较,探讨采用网膜体位固定技术完成3D-CRT过程的误差源及误差范围。结果实验结果和误差分析表明用网膜体位固定技术完成腹盆部肿瘤3D-CRT过程不确定度小于5 mm。结论网膜体位固定技术在腹盆部肿瘤3D-CRT中应用是切实可行的。

关键词：不确定度网膜固定技术三维适形放射治疗腹盆部肿瘤

生物衍生骨复合成骨诱导骨髓间充质干细胞构建组织工程化骨修复兔桡骨-骨膜缺损的血管化进程

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中国组织工程研究与临床康复 2008年第27期12卷 5226-5229页

作者：朱肖奇马雪峰贺用礼郭浩南方医科大学附属深圳宝安医院骨科广东省深圳市518101

背景:移植骨能否血管化是移植成活的关键。目的:验证生物衍生骨复合骨髓间充质干细胞构建组织化工程骨修复兔桡骨-骨膜缺损的血管化进程。设计、时间及地点:随机分组设计的动物对照实验,2007-01/2008-01在南华大学生命科学院实验室完成... 详细信息

背景:移植骨能否血管化是移植成活的关键。目的:验证生物衍生骨复合骨髓间充质干细胞构建组织化工程骨修复兔桡骨-骨膜缺损的血管化进程。设计、时间及地点:随机分组设计的动物对照实验,2007-01/2008-01在南华大学生命科学院实验室完成。材料:健康成年新西兰大白兔25只,双侧桡骨制备成中段1.5cm的桡骨-骨膜缺损。方法:经脱脂、脱蛋白、部分脱钙和冻干等一系列的物理、化学方法处理后制备生物衍生骨支架材料。与自体骨髓间充质干细胞复合制备组织工程骨支架材料。按随机数字表法,20只兔右侧桡骨为实验组植入组织工程骨,左侧为对照组植入单纯生物衍生骨,不做内外固定;另5只兔双侧造成骨缺损后不植入任何材料作为空白组。主要观察指标:植入后2,4,8,12周观察组织工程骨、生物衍生骨与断端的愈合情况;组织学观察骨组织中血管形成情况,并进行血管面积图像分析。结果:25只兔无脱落。大体观察显示实验组植入后8周两断端已融合为一体;植入后12周,已经塑型,外观接近正常。对照组各时间点愈合程度不如实验组。组织学观察显示,实验组和对照组植入后4周均有大量血管生成,植入后8周,实验组修复区的血管网较对照组开始排列规律;植入后12周,实验组血管已达成熟阶段,血管排列方向比对照组均匀、有序,形态结构接近正常皮质骨的血管形态。血管面积图像法测定的血管面积结果表明,植入后2周实验组和对照组血管面积低于正常骨组织,植入后4,8周实验组和对照组血管面积高于正常骨组织,差异均有显著性意义(P实验组血管面积低于对照组,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:生物衍生骨复合成骨诱导的骨髓间充质干细胞可加快骨修复后的血管化进程。

关键词：骨髓间充质干细胞生物衍生骨组织工程化骨血管化

微小RNA-490-3p对人胰腺癌的增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响

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中华实验外科杂志 2020年第4期37卷 673-675页

作者：邓思远贺德马广念李志坚南方医科大学附属深圳宝安医院普通外科 518101

目的观察微小RNA-490-3p(miR-490-3p)对胰腺癌的增殖、迁移、侵袭、凋亡的调控作用。方法选取AsPC-1和SW1990胰腺癌细胞株[均购自美国标准生物品收藏中心(ATCC)细胞库]作为研究对象。将miR-490-3p模拟物(75 pmol)转染至胰腺癌细胞株AsP... 详细信息

目的观察微小RNA-490-3p(miR-490-3p)对胰腺癌的增殖、迁移、侵袭、凋亡的调控作用。方法选取AsPC-1和SW1990胰腺癌细胞株[均购自美国标准生物品收藏中心(ATCC)细胞库]作为研究对象。将miR-490-3p模拟物(75 pmol)转染至胰腺癌细胞株AsPC-1和SW1990中,分别构建miR-490-3p过表达组,空载体作为阴性对照组,48 h后,利用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测miR-490-3p的表达,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测miR-490-3p对细胞增殖的作用,细胞划痕实验检测细胞的迁移能力,Transwell实验检测细胞的侵袭能力,原位缺口末端标记法(TUNEL)实验检测细胞的凋亡能力。此研究时限为4个月。组间数据比较采用独立样本t检验。结果 miR-490-3p在胰腺癌AsPC-1和SW1990细胞中相对表达低于正常胰腺细胞(0.58±0.06、0.40±0.20比1.00±0.11,t=5.886、4.656,P实验结果显示,明显降低AsPC-1和SW1990细胞的增殖(1.63±0.06比2.13±0.02,t=3.333,P实验结果显示,明显抑制AsPC-1和SW1990细胞迁移对照组[(48.16±6.17) μm比(18.34±3.26) μm,t=9.564,P实验显示,明显抑制AsPC-1和SW1990细胞侵袭[(36.00±2.45)个比(15.33±2.94)个,t=13.220,P实验结果显示,(17.75±1.71比6.75±4.03,t=5.025,P<0.01;23.25±3.40比10.25±2.63,t=6.045,P<0.01),差异有统计学意义。结论过表达miR-490-3p后抑制AsPC-1和SW1990细胞株的增殖、迁移、侵袭能力,促进细胞凋亡的作用。

关键词：胰腺癌微小RNA-490-3p 增殖迁移侵袭凋亡

胶质细胞源性神经营养因子联合转化生长因子β1体外诱导大鼠脊髓源性神经干细胞的分化(英文)

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中国组织工程研究与临床康复 2007年第24期11卷 4856-4860页

作者：高明勇肖建德李振宇闫洪印白润涛韩漫夫南方医科大学附属深圳医院脊柱外科广东省深圳市518035 南方医科大学附属深圳医院神经内科广东省深圳市518035

背景:胶质细胞源性神经营养因子与转化生长因子β1同属于转化生长因子β超家族,两者在哺乳动物中枢与外周神经系统发育、分化及细胞周期的调节中扮演重要角色。目的:观察胶质细胞源性神经营养因子联合转化生长因子β1体外诱导脊髓源性... 详细信息

背景:胶质细胞源性神经营养因子与转化生长因子β1同属于转化生长因子β超家族,两者在哺乳动物中枢与外周神经系统发育、分化及细胞周期的调节中扮演重要角色。目的:观察胶质细胞源性神经营养因子联合转化生长因子β1体外诱导脊髓源性神经干细胞的分化,并与单一因子诱导培养液比较。设计:对照观察。单位:南方医科大学附属深圳医院中心实验室。材料:选用10只清洁级孕16d的SD大鼠,由华中科大同济医学院动物中心提供。主要试剂及材料:DMEM/F12,B27(GIBCO);碱性成纤维细胞生长因子,EGF,胶质细胞源性神经营养因子,转化生长因子-β1(PeproTech);胎牛血清(Hyclone);神经巢蛋白(nestin)多抗(武汉博士德);胶质纤维酸性蛋白(GFAP)多抗,神经丝蛋白(NF-200)单抗(Sigma)。方法:实验于2005-10/2006-09在南方医科大学附属深圳医院中心实验室完成。无菌条件下分离大鼠胚胎,进行脊髓源性神经干细胞的分离培养。实验分①基础培养基组:含青霉素、链霉素、两性霉素B及体积分数为0.02 B27添加液的DMEM/F12。原代培养1周后,获取体外稳定增殖的鼠脊髓源性神经干细胞克隆。②对照组:在基础培养基中加入体积分数为0.1的胎牛血清。③碱性成纤维细胞生长因子组。④转化生长因子β1组。⑤胶质细胞源性神经营养因子+转化生长因子β1组。换用诱导培养基,即分别在基础培养基中加入20μg/L碱性成纤维细胞生长因子、2μg/L转化生长因子β1、10μg/L胶质细胞源性神经营养因子+2μg/L转化生长因子β1。①光镜观察在不同因子诱导情况下脊髓源性神经干细胞的分化情况。②免疫细胞化学染色标记检测神经元与星状胶质细胞的表达。③通过荧光激发流式细胞仪分选技术对分化细胞计数,检测不同诱导环境下神经干细胞分化为神经元及星状胶质细胞的阳性百分率。主要观察指标:①各组细胞分化的形态学特点。②各组神经干细胞免疫组织化学检测结果。③各组神经干细胞分化为神经元及星状胶质细胞的阳性百分率。结果:①细胞分化形态:分化早期可见神经球贴壁,大量细胞向四周爬出,1周后迁徙的大部分细胞完全贴壁,完成分化过程。在细胞密度较低区域可辨认出神经元样细胞、星状胶质样细胞、寡突胶质样细胞。②免疫组织化学检测结果:对照组、转化生长因子β1组存在大量胶质纤维酸性蛋白染色阳性的星状胶质细胞;而碱性成纤维细胞生长因子组及胶质细胞源性神经营养因子+转化生长因子β1组分化的神经元细胞数量较多,神经丝蛋白染色阳性。③神经元及星状胶质细胞的阳性百分比:诱导1周后,胶质细胞源性神经营养因子+转化生长因子β1组神经元阳性百分比高于血清对照组、碱性成纤维细胞生长因子组及转化生长因子β1组(χ2=24.15,19.56,25.32,P<0.05～0.01),星状胶质细胞阳性百分比低于血清对照组及转化生长因子β1组(χ2=24.45,23.79,P<0.01)。结论:体外胶质细胞源性神经营养因子与转化生长因子β1的联合诱导有利于脊髓源性神经干细胞向神经元的分化,说明两者具有协同作用。

关键词：神经干细胞分化神经元胶质细胞源性神经营养因子转化生长因子β1

天花粉蛋白对单纯疱疹病毒-1DNA复制的影响

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实用儿科临床杂志 2007年第22期22卷 1693-1694页

作者：陈光福尹飞张红媛黄文革陈凤英单金兰南方医科大学附属深圳医院儿科广东深圳518035 中南大学湘雅医院儿科长沙410008 中山大学动物实验中心广州510000 深圳市东湖医院检验科广东深圳518000

目的探讨天花粉蛋白对体内外单纯疱疹病毒-1(HSV-1)DNA复制的抑制作用。方法昆明小鼠40只随机分为模型对照组和天花粉蛋白治疗组,各20只。模型小鼠颅内接种HSV-1建立病毒性脑炎模型。治疗组于接种HSV-1前30min腹腔注射天花粉蛋白注射液... 详细信息

目的探讨天花粉蛋白对体内外单纯疱疹病毒-1(HSV-1)DNA复制的抑制作用。方法昆明小鼠40只随机分为模型对照组和天花粉蛋白治疗组,各20只。模型小鼠颅内接种HSV-1建立病毒性脑炎模型。治疗组于接种HSV-1前30min腹腔注射天花粉蛋白注射液;对照组予等量9g/L盐水。2组于接种病毒后12、24、48、96h分别测定脑组织HSV-1DNA复制水平。体外培养神经细胞分为病毒对照组和药物预处理组,接种病毒后12、24、48、96h分别测定各组培养神经细胞HSV-1DNA复制水平。结果天花粉蛋白治疗组于小鼠颅内接种HSV-1后12、24、48、96h脑组织HSV-1DNA复制水平分别为(1535±656、1468±608、1657±643、1425±534)×106拷贝/mL,显著低于模型组(4336±1350、5256±1837、5379±1975、5946±2769)×106拷贝/mL(Pa<0.001)。药物预处理组在12、24、48、96h后培养神经细胞HSV-1DNA复制水平分别为(1775±743、1347±687、1254±543、1276±525)×106拷贝/mL,显著低于病毒对照组(4653±1851,5120±2110,5045±1867,4995±2578)×106拷贝/mL(Pa<0.001)。结论天花粉蛋白对体内外HSV-1DNA复制具有抑制作用。

关键词：天花粉蛋白疱疹病毒1型,人 DNA复制脑组织细胞培养神经细胞

MR常规序列及弥散成像对肝癌诊断价值的实验研究

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中国医学影像技术 2008年第7期24卷 989-991页

作者：范义刘静华胡卫东项立梁冰张雪林南方医科大学南方医院影像中心广东广州510515 深圳市龙岗中心医院介入影像科广东深圳518116

目的本研究利用兔VX2肝癌模型不同时间在MRT1WI和T2WI及DWI的表现,从而探讨DWI在肝癌诊断中的价值。方法30只新西兰实验兔在CT引导下,采用经皮瘤组织块注射法进行种植制作VX2肝癌模型。分别在种植后第4天、1、2、3周进行MRT1WI、T2WI、T... 详细信息

目的本研究利用兔VX2肝癌模型不同时间在MRT1WI和T2WI及DWI的表现,从而探讨DWI在肝癌诊断中的价值。方法30只新西兰实验兔在CT引导下,采用经皮瘤组织块注射法进行种植制作VX2肝癌模型。分别在种植后第4天、1、2、3周进行MRT1WI、T2WI、T2WISIR和DWI扫描。观察不同MR检查方法在肿瘤肿植后不同时间对肿瘤的检出率。结果30个实验动物,肿瘤种植成功25例,成功率81.25%。种植后第四天各种检查方法即可显示肿瘤灶,DWI、T1WI、T2WI和T2WISPIR和的检出率为别为80%、60%、72%、72%,经统计学分析无显著性差别。第1、2、3周MR各序列检出率均为100%,在种植4天和1周后各检查方法检查率的比较中,DWI没有显著差别,其它检查方法有显著差别。结论DWI是检查肝癌比较敏感技术,受肿瘤血供的影响很小,在肝脏肿瘤的诊断中将得到越来越广泛的应用。

关键词：肝肿瘤 VX2肿瘤磁共振成像弥散加权成像

肝癌不同组织区域ADC值变化规律的实验研究

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临床放射学杂志 2009年第7期28卷 1010-1012页

作者：范义胡卫东刘静华项立梁冰娄明武张雪林南方医科大学附属南方医院影像中心广州510515 深圳市龙岗中心医院介入影像科

目的比较VX2肝癌模型肿瘤不同病变区域的表观扩散系数(ADC)值,进一步探讨MR扩散加权成像(MR-DWI)在肝癌诊断中的价值。材料与方法在CT引导下,对30只新西兰实验兔采用经皮瘤组织块注射法进行种植,制作VX2肝癌模型。分别在种植后第4天、1... 详细信息

目的比较VX2肝癌模型肿瘤不同病变区域的表观扩散系数(ADC)值,进一步探讨MR扩散加权成像(MR-DWI)在肝癌诊断中的价值。材料与方法在CT引导下,对30只新西兰实验兔采用经皮瘤组织块注射法进行种植,制作VX2肝癌模型。分别在种植后第4天、1、2、3周进行MRT1WI、T2WI和DWI扫描。观察不同时间肿瘤中心区、边缘区ADC值差别和变化规律。结果30只实验动物,肿瘤种植成功25只。种植后第4天各种检查方法即可显示肿瘤灶,中心区和边缘区ADC值差异无统计学意义。第1、2周中心区和和边缘区ADC值差异有统计学意义。第3周中心区和边缘区ADC值差异无统计学意义。中心区ADC值在2周前小于周边区,而在第3周高于周边区。结论MR-DWI速度快、简单易行,ADC值的应用将会提高对肝脏疾病的诊断水平。

关键词：肝癌 VX2肿瘤兔模型磁共振成像表观扩散系数值

角质细胞生长因子对吸入高体积分数氧新生大鼠肺转化生长因子β1表达的影响

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中华实用儿科临床杂志 2015年第14期30卷 1080-1082页

作者：邱其周程贵辉熊伟王斌杜江肖毅广州医科大学附属深圳沙井医院新生儿科深圳518104 南方医科大学珠江医院儿科中心

目的：研究角质细胞生长因子（KGF）对高体积分数氧（高氧）暴露下新生大鼠肺组织及转化生长因子β1（TGF-β1）表达的影响。方法将108只新生 SD 大鼠按随机数字表法机分为空气组、高氧组和 KGF 干预组，每组36只。每组又分为3、7、14 ... 详细信息

目的：研究角质细胞生长因子（KGF）对高体积分数氧（高氧）暴露下新生大鼠肺组织及转化生长因子β1（TGF-β1）表达的影响。方法将108只新生 SD 大鼠按随机数字表法机分为空气组、高氧组和 KGF 干预组，每组36只。每组又分为3、7、14 d 3个亚组，每组12只。高氧组、KGF 干预组大鼠持续暴露于氧体积分数﹥950 mL/ L 氧箱中，KGF 干预组于吸氧同时背部皮下注射重组人 KGF（rhKGF）1 mg/ d，连用3 d 后改为0.5 mg/ d直至实验结束；空气组和高氧组注射等量9 g/ L 盐水。空气组大鼠呼吸空气。3、7、14 d 亚组在相应时间点取肺组织，分别采用 HE 染色和免疫组织化学方法观察各组大鼠肺组织形态变化并检测 TGF-β1蛋白表达水平。结果空气组7 d 出现肺泡化，14 d 肺泡化成熟，高氧组出现肺泡发育阻滞、肺纤维化，KGF 干预组肺纤维化不明显。与空气组比较，高氧组肺组织 TGF-β1蛋白表达在7、14 d 明显升高（9.43±0.64比8.62±0.52，P ﹤0.05；9.97±0.49比8.66±0.48，P ﹤0.01），差异有统计学意义，与空气组比较，KGF 干预组 TGF-β1蛋白表达各时间点差异无统计学意义（8.67±0.55比8.56±0.43，8.77±0.52比8.62±0.52，8.81±0.47比8.66±0.48，P 均﹥0.05）。与高氧组比较，KGF 干预组 TGFβ1蛋白表达在7 d、14 d 明显降低，差异有统计学意义（P 均﹤0.05）。结论 KGF 能抑制高氧暴露大鼠肺组织 TGF-β1蛋白的过度表达，减轻肺纤维化，这可能是 KGF 对高氧肺损伤的保护机制之一。

关键词：角质细胞生长因子转化生长因子 β1 肺损伤

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三氯生暴露通过自噬致雄性生殖损伤的机制研究

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三氯生暴露通过自噬致雄性生殖损伤的机制研究

作者：张进南方医科大学

学位级别：硕士

研究背景不孕不育是社会广泛关注的公共卫生问题,大约影响了全世界8-12%的育龄夫妇,并且有40-50%可能是由于“男性因素”造成的不育,其中精子数量和质量降低是男性不育最主要的原因。研究表明,许多环境内分泌干扰物(EEDs)都能造成人和... 详细信息

研究背景不孕不育是社会广泛关注的公共卫生问题,大约影响了全世界8-12%的育龄夫妇,并且有40-50%可能是由于“男性因素”造成的不育,其中精子数量和质量降低是男性不育最主要的原因。研究表明,许多环境内分泌干扰物(EEDs)都能造成人和动物的生殖系统损伤,并降低男(雄)性的精子质量。三氯生(TCS)是一种广泛用于个人洗护用品和临床消毒的酚类广谱抗菌剂,被认为是潜在的EEDs。精子的产生是一个高度有序的过程,依赖于睾丸生殖细胞增殖、分化和死亡之间的平衡调节,自噬是不同于凋亡的一种细胞死亡形式,适度的自噬能促进精子的分化和成熟,保护生精细胞免受有害条件的侵害,超过细胞承受能力的自噬将诱导细胞Ⅱ型程序性死亡。本课题组选取10对精液质量异常的病例组和正常对照组的精液样本,通过自噬功能基因芯片和相关文献报道,筛选出可能与TCS相关并导致精液质量降低的CXCR4、ESR1、PTEN和LC3B四个自噬基因,目前,TCS是否通过细胞自噬导致生殖损伤尚未见报道,本文旨在探讨TCS暴露通过自噬基因的调控作用导致生殖损伤的可能机制。材料与方法第一部分:自噬基因的筛选及人群验证。研究对象选自2016年6月至2017年9月期间在深圳市某三甲医院生殖中心进行精液检查的男性,收集其精液样本、精液常规结果和问卷信息。方法:1.选取精液质量异常和和精液质量正常的受试对象各10例,进行精液自噬基因芯片检测,并结合文献报道与EEDs作用机制相关的基因,筛选出可能与TCS相关并导致精液质量降低的自噬基因。2.采用成组设计的病例对照的研究方法,选取精液质量异常的病例104例,精液质量正常的对照250例,采用Trizol法提取精液总RNA,逆转录成cDNA,qPCR的对上述差异表达基因进行验证。第二部分:TCS经口暴露的动物实验。用TCS对8周龄的SD大鼠进行经口暴露染毒,以未观察到有害作用水平(NOAEL=50mg/kg/d)为中等暴露剂量,设计暴露剂量梯队。在空白组、玉米油溶剂对照组(1Omg/kg)、低剂量组(10mg/kg)、中剂量组(50mg/kg)和高剂量组(250mg/kg)五个实验组中,观察睾丸组织损伤和相关自噬基因的表达。方法:3.用HE染色,透射电镜方法观察睾丸组织的病理损伤。4.用免疫组织化学、qPCR和蛋白印迹技术对筛选的自噬相关基因进行检测。结果1.自噬基因芯片筛选中,与对照组相比,在84个自噬相关功能基因中,有18个自噬基因表达差异倍数大于2且全部表达下调,结合文献报道,最终筛选出CXCR4、ESR1、PTEN和LC3B四个可能与TCS相关并导致精液质量降低的自噬基因。2.在人群验证中,相对于对照组,ESR1基因在病例组表达显著下降(P<0.05),CXCR4、PTEN和LC3B在病例组均有下降趋势,但无统计学意义。***暴露组中,HE染色结果显示:睾丸曲细精管发生损伤,出现空泡样改变,精子减少,各剂量组具有剂量-反应关系。透射电镜同样发现了 HE染色显示的组织损伤,同时发现成熟的自噬溶酶体结构、线粒体和高尔基体出现肿胀和空泡。4.免疫组化结果显示,LC3B在空白组和溶剂对照组中,只有少量浅黄色颗粒,而在低、中和高剂量组中呈现大量棕黄色颗粒,并随着剂量增加远离曲细精管管腔分布。CXCR4,ESR1和PTEN在各组间没有差异;与对照组相比,qPCR结果显示LC3B基因表达在病例组中表达升高,差异具有统计学意义(p<0.05);蛋白印迹结果显示,LC3B-Ⅱ蛋白和LC3B-Ⅱ/Ⅰ蛋白比值在低剂量组和中剂量组表达升高,差异具有统计学意义(p<0.05)。结论1.自噬相关基因ESR1在人群精液中的低表达,可能与精液质量降低有关。***暴露导致大鼠睾丸曲细精管损伤,生精细胞脱落和减少,表明TCS具有一定的生殖毒性。***暴露使雄性大鼠睾丸组织LC3B基因mRNA水平、LC3B-Ⅱ蛋白和LC3B-Ⅱ/Ⅰ蛋白比值升高,提示自噬可能参与了TCS致大鼠睾丸组织损伤的过程。

关键词：三氯生自噬环境内分泌干扰物生殖损伤精子