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Hsa-miR-186在结肠癌细胞中的表达及作用

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南方医科大学学报 2013年第5期33卷 654-660页

作者：陈芳周畅陆艳霞袁理彭皤莉郑林李学农南方医科大学基础医学院病理学系//广东省分子肿瘤病理学重点实验室广东广州510515

目的检测hsa-miR-186在结肠癌组织及细胞中的表达,探讨hsa-mir-186对结肠癌细胞生物学特性的影响及作用。方法应用实时荧光定量PCR检测了miR-186在12对配对的结肠癌组织、癌旁组织和5株结肠癌细胞中的表达情况;扩增包含miR-186前体序列... 详细信息

目的检测hsa-miR-186在结肠癌组织及细胞中的表达,探讨hsa-mir-186对结肠癌细胞生物学特性的影响及作用。方法应用实时荧光定量PCR检测了miR-186在12对配对的结肠癌组织、癌旁组织和5株结肠癌细胞中的表达情况;扩增包含miR-186前体序列在内的基因片段,并将其克隆至PLVYHM载体,将PLVTHM-miR186质粒转染SW620细胞,流式分选慢病毒感染的SW620细胞;CCK-8法、划痕实验和Transwell检测细胞检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力。Western Blot检测靶基因YY1蛋白水平的表达。结果与癌组织相比,12例癌组织中miR-186的平均表达量为0.0024±0.0027-显著低于癌旁组织的0-066±0.068,P=0.008;miR-186在高转移潜能的人结肠癌细胞SW620和LOVO相对表达量分别为0.118±0.138和0.157±0.001,与在低转移潜能HT-29细胞中表达量1.000±0.00,差异具有统计学意义P<0.05;质粒双酶切及测序鉴定PLVTHM-hsa-miRl86重组质粒构建成功;荧光定量PCR表明稳定过表达miR-186的结肠癌细胞株SW620构建成功,且过表达miR-186后降低了细胞的增殖、迁移及侵袭能力,差异均具有统计学意义P<0.05。稳定过表达miR-186的细胞中,miR-186的表达明显高于对照组和未处理组,YY1蛋白质水平有所下降。结论 hsa-miR-186在结肠癌组织以及在高转移潜能的人结肠癌细胞SW620、L0VO中低表达,具有类似抑癌基因的作用;成功构建PLVTHM-miR186慢病毒重组质粒,并稳定转染结肠癌细胞SW620,抑制了细胞的增殖、迁移和侵袭能力。miR-186调控YY1表达可能是抑制结直肠癌生物特性的重要机制之一。

关键词：结肠癌细胞 hsa miR 186 慢病毒增殖迁移侵袭

SAFB通过调节Wnt信号通路活性促进结直肠癌增殖

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临床与实验病理学杂志 2022年第4期38卷 385-391页

作者：焦红丽王珺娆胡敏萱黄元丁彦青冶亚平南方医科大学南方医院病理科广州510515 南方医科大学基础医学院病理学系广州510515 广东省分子肿瘤病理重点实验室广州510515

目的探讨SAFB在结直肠癌增殖过程中的作用及相关分子机制。方法采用免疫组化、Western blot和RT-PCR检测结直肠癌石蜡组织和新鲜配对组织中SAFB的表达,分析SAFB表达与肿瘤分期的关系;采用MTT、平板克隆及裸鼠皮下成瘤等实验检测SAFB对... 详细信息

目的探讨SAFB在结直肠癌增殖过程中的作用及相关分子机制。方法采用免疫组化、Western blot和RT-PCR检测结直肠癌石蜡组织和新鲜配对组织中SAFB的表达,分析SAFB表达与肿瘤分期的关系;采用MTT、平板克隆及裸鼠皮下成瘤等实验检测SAFB对结直肠癌细胞增殖能力的影响;利用公共数据库(GEO数据库等),通过基因富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)检测SAFB基因表达相关信号通路的富集情况;采用双荧光素酶报告基因实验、Western blot法及免疫荧光实验检测Wnt信号通路的活性。结果Oncomine及TCGA在线数据库分析结果显示,结直肠癌组织中SAFB表达水平降低(P实验结果显示,SAFB高表达在体内外均能显著抑制肿瘤细胞的增殖。GSEA及双荧光素酶报告基因实验结果显示,SAFB低表达与Wnt通路激活密切相关。结论SAFB在结直肠癌中低表达,并与Wnt信号通路激活密切相关,可能通过Wnt信号通路调节肿瘤细胞的增殖能力。

关键词：结直肠肿瘤细胞增殖 SAFB Wnt信号通路

结直肠癌离心性表达Cdc42伴E-cadherin缺失的预后分析

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临床与实验病理学杂志 2022年第4期38卷 392-396页

作者：罗金风刘广龙徐东艳李小清邓永键南方医科大学基础医学院病理学系广州510515 南方医科大学南方医院病理科广州510515 广东省分子肿瘤病理重点实验室广州510515

目的探讨Cdc42在结直肠癌中离心性表达伴E-cadherin缺失的临床意义。方法采用免疫荧光和免疫组化法检测Cdc42和E-cadherin在结直肠癌组织中的表达,分析Cdc42表达与临床病理特征和预后的关系;采用实时荧光定量PCR和Western blot法检测上... 详细信息

目的探讨Cdc42在结直肠癌中离心性表达伴E-cadherin缺失的临床意义。方法采用免疫荧光和免疫组化法检测Cdc42和E-cadherin在结直肠癌组织中的表达,分析Cdc42表达与临床病理特征和预后的关系;采用实时荧光定量PCR和Western blot法检测上调Cdc42表达后E-cadherin的表达变化。结果45.96%的病例伴Cdc42的离心性表达,与组织浸润、淋巴结转移和远处转移(P<0.05)密切相关,且提示预后更差(P<0.001);Cdc42离心性表达的病例中有73.63%伴E-cadherin表达缺失,E-cadherin表达缺失与组织浸润密切相关(P<0.05),患者预后更差(P<0.001);过表达Cdc42后,E-cadherin表达明显下调。结论Cdc42的离心性表达伴E-cadherin表达缺失,提示结直肠癌的进展和预后不良。

关键词：结直肠肿瘤 Cdc42 E-cadherin 预后

人结肠癌细胞Dickkopf-1的表达水平及意义

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南方医科大学学报 2013年第6期33卷 923-925,933页

作者：于倩杨磊丁彦青赵震刘会平南方医科大学南方医院病理科南方医科大学基础医学院病理学系//广东省分子肿瘤病理学重点实验室广东广州510515

目的检测六株结肠癌细胞中Dickkopf-1(DKK1)的表达并探讨其意义。方法在6株结肠癌细胞(SW480、SW620、HT29、LS174T、LOVO、HCT116)分别应用qPCR方法检测DKK1的mRNA表达水平。用Western blot方法和细胞免疫组化方法检测DKK1的蛋白表达... 详细信息

目的检测六株结肠癌细胞中Dickkopf-1(DKK1)的表达并探讨其意义。方法在6株结肠癌细胞(SW480、SW620、HT29、LS174T、LOVO、HCT116)分别应用qPCR方法检测DKK1的mRNA表达水平。用Western blot方法和细胞免疫组化方法检测DKK1的蛋白表达情况。结果荧光定量分析显示,DKK1在HT29、HCT116中的表达高于其他四株细胞(P<0.05);Western blot显示,DKK1在HCT116、HT29中的表达同样高于其他四株细胞;细胞免疫组化染色显示,DKK1在六株结肠癌细胞株中呈阳性表达。结论 DKK1在6株人结肠癌细胞系中的表达具有差异性。

关键词：人结肠癌细胞株 Dickkopf-1 时实定量PCR Western blotting 细胞免疫组织化学

多配体聚糖结合蛋白在大肠癌组织中的表达及其对预后的影响

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南方医科大学学报 2015年第7期35卷 1003-1007页

作者：刘会平杨磊丁彦青赵震于倩南方医科大学南方医院病理科广东广州510515 南方医科大学基础医学院病理学系//广东省分子肿瘤病理学重点实验室广东广州510515

目的通过对109例结肠癌患者中多配体聚糖结合蛋白(SDCBP)表达的分析,探讨其临床意义及对患者预后的影响。方法免疫组织化学法检测109例有10年随访资料,诊断为原发性结直肠癌患者中SDCBP的表达,分析其表达与结直肠癌患者各临床因素之间... 详细信息

目的通过对109例结肠癌患者中多配体聚糖结合蛋白(SDCBP)表达的分析,探讨其临床意义及对患者预后的影响。方法免疫组织化学法检测109例有10年随访资料,诊断为原发性结直肠癌患者中SDCBP的表达,分析其表达与结直肠癌患者各临床因素之间的关系,生存分析采用Kaplan-Meier和Cox回归分析法。结果 SDCBP的表达对结直肠肠癌患者的淋巴结转移、TNM分期及术后的生存期均有显著影响(P=0.001)、(P=0.033)、(P=0.004),但与患者的年龄,性别,肿瘤浸润深度,组织分化以及病理类型没有关系。Kaplan-Meier法检验,结果显示,109例结直肠癌患者中SDCBP高低表达组患者术后平均生存期及7年累计生存率分别为:52.300±6.508(月)、86.184±5.358(月);38.6±6.4(%)、61.5±6.7(%),整体水平及各组间水平的差异经Log-rank法分析均有统计学意义(χ2=10.585,P=0.001);Cox回归分析法发现:SDCBP的高表达和发生淋巴结转移是患者死亡的主要影响因素(B=0.605,P=0.034;B=0.677,P=0.013)。结论 SDCBP可作为提示大肠癌淋巴结转移、TNM分期及预后的一项指标。

关键词：免疫组织化学大肠癌预后

miR-101对结直肠癌细胞SW620生物学特性的影响

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南方医科大学学报 2016年第7期36卷 990-996页

作者：刘燕陆滟霞周敏郑林李学农川北医学院病理学系四川南充637000 南方医科大学病理学系//广东省分子肿瘤病理学重点实验室广东广州510515

目的探讨miR-101对结直肠癌细胞SW620增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法利用CCK8法、平板克隆形成实验、细胞周期、细胞凋亡方法分别检测SW620、GV209-SW620、mir101-SW620 3组细胞的生物学特性。结果 CCK8比色法结果显示SW620各组细胞... 详细信息

目的探讨miR-101对结直肠癌细胞SW620增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法利用CCK8法、平板克隆形成实验、细胞周期、细胞凋亡方法分别检测SW620、GV209-SW620、mir101-SW620 3组细胞的生物学特性。结果 CCK8比色法结果显示SW620各组细胞生长时间水平差异具有显著性(F=4152,P实验的结果为SW620空白对照组、GV209-SW620对照组和mir101-SW620组的克隆形成率分别为:44.33%、48.17%、35.17%。SW620 3组细胞间的克隆形成能力差异具有统计学意义(F=73.015,P实验发现SW620细胞各组细胞凋亡率差异有统计学意义(F=6115,P<0.001),各组进行两两比较,均有统计学差异(P<0.01)。与SW620空白细胞组、GV209-SW620对照组相比,mi R-101过表达组细胞凋亡率增加(P<0.05)。结论 mi R-101能够抑制结直肠癌细胞SW620的增殖,细胞G1和G2/M期周期阻滞及促进细胞凋亡。

关键词：结直肠癌 miR-101 SW620 增殖凋亡细胞周期生物学特性

DLL3通过调节MAPK通路促进前列腺癌进展

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中国病理生理杂志 2023年第12期39卷 2165-2175页

作者：李雨璇于莉娜张韦洋齐婧汝赵卓扬华兴暨南大学基础医学与公共卫生学院病理学系广东广州510632 暨南大学附属广州市红十字会医院病理科广东广州510220 南方医科大学基础医学院病理学系广东广州510515 南方医院病理科广东广州510515 广东省分子肿瘤病理学重点实验室广东广州510515

目的:探讨Delta样配体3(Delta-like ligand 3,DLL3)对前列腺癌进展的影响,并阐明其潜在的分子机制。方法:构建DLL3基因的过表达质粒和干扰质粒,通过功能实验评估DLL3对前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。采用裸鼠成瘤实验检测DLL... 详细信息

目的:探讨Delta样配体3(Delta-like ligand 3,DLL3)对前列腺癌进展的影响,并阐明其潜在的分子机制。方法:构建DLL3基因的过表达质粒和干扰质粒,通过功能实验评估DLL3对前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。采用裸鼠成瘤实验检测DLL3在体内对前列腺癌细胞PC-3增殖的影响。RNA测序检测过表达DLL3产生的差异基因并对其进行富集分析。Western blot检测DLL3对上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)和丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路相关蛋白的影响。结果:与空载体组和空白对照组相比,DLL3过表达显著增强前列腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭和EMT过程(P肿瘤生长(P<0.05)。进一步研究表明,DLL3上调导致MAPK信号通路中相关蛋白水平升高。有趣的是,MAPK抑制剂能够抑制由DLL3过表达引起的前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭(P<0.05)。结论:DLL3通过调节MAPK通路促进前列腺癌的增殖、迁移和侵袭。

关键词：前列腺癌 Delta样配体3 上皮-间充质转化 MAPK通路

肝细胞癌中GPC3和Notch1表达的关系

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南方医科大学学报 2013年第4期33卷 590-592,597页

作者：彭璠莉吴自勍李学农南方医科大学南方医院病理科//广东省分子肿瘤病理学重点实验室广东广州510515 南方医科大学基础医学院病理系//广东省分子肿瘤病理学重点实验室广东广州510515

目的通过观察肝细胞癌组织中磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)与Notch1的表达情况,探讨两者在肝细胞癌中表达的相互关系。方法应用免疫组化方法、计算机图像分析等技术检测30例肝细胞癌组织中GPC3和Notch1的表达情况,并用SPSS软件系统进行统... 详细信息

目的通过观察肝细胞癌组织中磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)与Notch1的表达情况,探讨两者在肝细胞癌中表达的相互关系。方法应用免疫组化方法、计算机图像分析等技术检测30例肝细胞癌组织中GPC3和Notch1的表达情况,并用SPSS软件系统进行统计学分析。结果肝细胞癌组织分化程度越高,GPC3表达越低;分化程度越低,GPC3表达越高,差异有显著性(P<0.05)或高度显著性(P<0.01)。肝细胞癌组织分化程度越高,Notch1表达越高;分化程度越低,Notch1表达越低,差异有显著性(P<0.05)或高度显著性(P<0.01)。GPC3与Notch1的表达呈高度显著性负相关(rp=-0.607,P=0.000;r=-0.692,P=0.000)。结论在肝细胞癌中,GPC3与Notch1的表达呈现负相关性,提示两者间可能存在相互调节的机制,共同影响肝细胞癌的发生发展。

关键词：癌,肝细胞磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 Notch1 免疫组化

肝细胞膜表面相关抗原与非小细胞肺癌临床病理特征和预后的关系

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中华病理学杂志 2012年第3期41卷 151-155页

作者：徐小艳郅程李玉梅齐文娟梅娟娟严智敏申洪南方医科大学附属南方医院病理科基础医学院病理学系及广东省分子肿瘤病理学重点实验室广州510515

目的探讨肝细胞膜表面相关抗原（HAb18G）表达与非小细胞肺癌的侵袭、转移及预后的关系。方法用免疫组织化学sP法检On,0144例非小细胞肺癌组织、19例肺良性病变和41例正常肺组织中HAb18G蛋白的表达，用图像分析软件对HAb18G蛋白表达的... 详细信息

目的探讨肝细胞膜表面相关抗原（HAb18G）表达与非小细胞肺癌的侵袭、转移及预后的关系。方法用免疫组织化学sP法检On,0144例非小细胞肺癌组织、19例肺良性病变和41例正常肺组织中HAb18G蛋白的表达，用图像分析软件对HAb18G蛋白表达的阳性单位（PU）进行定量测试。结果HAb18G在非小细胞肺癌组织中的表达主要定位于肺癌细胞膜或胞质，其在肺良性病变及正常肺组织中几乎不表达。在非小细胞肺癌患者中，25例低表达（17．4％），119例高表达（82．6％）；59例膜表达为主（41．0％），81例胞质表达为主（56．3％），4例无阳性着色（2．8％）。HAb18G蛋白表达的PU值在非小细胞肺癌组织中显著高于非肺癌肺组织（P=0．000）；高分化肺鳞癌和腺癌低于中至低分化肺鳞癌和腺癌（P=0．001）；HAb18G蛋白在TNMI期、Ⅱ～Ⅲ期、Ⅳ期中依次升高（P=0．000），非小细胞肺癌伴淋巴结转移的原发灶高于无转移的原发灶（P=0．045）；蛋白Pu值在最大直径〉5cm的非小细胞肺癌组织中的表达大于最大直径≤5em的肺癌组织（P：0．000），男性患者高于女性患者（P=0．046），与非小细胞肺癌患者年龄、吸烟史、大体类型及原发灶和相应转移灶的情况均无关（P〉0．05）。HAb18G低表达患者的5年生存率大于HAb18G高表达患者（P=0．006）；单因素分析结果表明HAb18G高表达的非小细胞肺癌患者预后差（P=0．007）；Cox分析结果显示HAb18G表达是非小细胞肺癌患者的独立预后因素（P=0．032，相对危险度为3．962）。结论HAb18G蛋白在肺癌组织中的表达与非小细胞肺癌的发生发展、浸润转移和预后密切相关．可作为预测浸润转移和估计预后的一个参考指标。

关键词：肺肿瘤癌非小细胞肺抗原 cd147