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利用MTT比色法建立快速检测化疗后骨肉瘤细胞活性的方法

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南方医科大学学报 2009年第12期29卷 2490-2491页

作者：陈强张进华陈建庭史占军邓永健南方医科大学南方医院脊柱骨病外科广东广州510515 南方医科大学南方医院病理科广东广州510515

目的建立一种以MTT结晶盐的浓度与化疗后骨肉瘤残存活细胞之间的定量关系分析肿瘤坏死率、快速检测化疗后骨肉瘤细胞活性的方法。方法用MTT比色法检测不同浓度(数量)骨肉瘤细胞悬液时OD值的变化,观察及统计分析活细胞数量与OD值关系。... 详细信息

目的建立一种以MTT结晶盐的浓度与化疗后骨肉瘤残存活细胞之间的定量关系分析肿瘤坏死率、快速检测化疗后骨肉瘤细胞活性的方法。方法用MTT比色法检测不同浓度(数量)骨肉瘤细胞悬液时OD值的变化,观察及统计分析活细胞数量与OD值关系。结果骨肉瘤细胞甲月赞产物溶液的吸光值A570与肿瘤细胞数呈线性关系。结论该方法可以用来检测骨肉瘤细胞的活性,具有快速、简便、灵敏的特点,是一种准确的利用定量关系分析化疗后骨肉瘤肿瘤坏死率方法。

关键词：骨肉瘤细胞比色法 MTT

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MTT染色法检测化疗后骨肉瘤细胞的凋亡

南方医科大学学报 2009年第9期29卷 1899-1901页

作者：陈强张进华陈建庭史占军邓永健南方医科大学南方医院脊柱骨病外科广东广州510515 南方医科大学南方医院病理科广东广州510515

目的研究MTT染色法用于检测与区分化疗后活的与凋亡的骨肉瘤细胞可行性。方法以手术切取的骨肉瘤组织的细胞建立凋亡细胞模型,采用MTT染色法检测,直接在光镜下进行形态学观察,并与荧光染色方法的观察结果进行比较。结果MTT染色法可准确... 详细信息

目的研究MTT染色法用于检测与区分化疗后活的与凋亡的骨肉瘤细胞可行性。方法以手术切取的骨肉瘤组织的细胞建立凋亡细胞模型,采用MTT染色法检测,直接在光镜下进行形态学观察,并与荧光染色方法的观察结果进行比较。结果MTT染色法可准确判定化疗后活的与凋亡的骨肉瘤细胞,并可清晰分辨正常细胞、凋亡细胞和死亡细胞。结论MTT染色法是一种简单、可行的检测骨肉瘤细胞凋亡的方法,可用于化疗后肿瘤坏死率的研究。

关键词：骨肉瘤细胞细胞凋亡 MTT染色荧光染色

脊柱胸腰段应力分布与骨折相关性的三维有限元分析

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中国脊柱脊髓杂志 2024年第4期34卷 408-417页

作者：袁飞任杰唐悦峰申小刚郭涛贵州医科大学临床医学院贵阳市550004 贵州省人民医院骨科贵阳市550499

目的:观察脊柱胸腰段骨折与椎体骨性结构及韧带间应力分布的相关性,探索脊柱胸腰段椎体骨折的力学机制。方法:招募8名健康男性青年志愿者,行脊柱全长X线片和CT检查排除脊柱畸形、肿瘤及骨病,对脊柱各椎体及股骨行骨密度测定排除骨质疏... 详细信息

目的:观察脊柱胸腰段骨折与椎体骨性结构及韧带间应力分布的相关性,探索脊柱胸腰段椎体骨折的力学机制。方法:招募8名健康男性青年志愿者,行脊柱全长X线片和CT检查排除脊柱畸形、肿瘤及骨病,对脊柱各椎体及股骨行骨密度测定排除骨质疏松。均行自T11椎体上终板至L2椎体下缘CT薄层扫描,将8名志愿者CT图像参数导入ABAQUS 2016软件中进行标准化,并进行有限元网格化构建。应用MIMICS 17.0、GEOMAGICS 15.0和PRO/ENGINEER 5.0软件处理,建立脊柱胸腰段有限元模型,测量模型相关参数,并验证模型有效性。在T11椎体上终板上加载竖直轴向载荷500N、附加扭矩10N·m模拟垂直压缩、前屈、后伸、左右侧屈、左右旋转7种运动状态,使用ABAQUS软件对有限元模型7种运动状态下的应力分布特点及变化规律进行分析,观察应力分布与脊柱胸腰段骨折的相关性。结果:建立的三维有限元模型共有309583个节点和428760个单元,包括4个椎体、3个椎间盘、前纵韧带、后纵韧带、横突间韧带、棘间韧带等结构。7种运动状态下的数据与文献报道的数据无明显偏差,模型有效。T11~L2椎体椎弓根截面积分别为135mm^(2)、154mm^(2)、105mm^(2)、139.2mm^(2)。应力云图结果显示各运动状态下高应力区存在于椎体的松质骨、椎弓根及其周围骨皮质。在垂直压缩状况下,T12椎体所受应力最大(617.4MPa),前屈状态下T11所受应力最大(200.7MPa),后伸、左右侧屈和左右旋转状态下L1椎体所受应力最大(314.2MPa、574.4MPa、626.2MPa、641.3MPa、527.1MPa),且前屈体位时椎体所能承受的应力最小,左旋转时所能承受的应力最大。垂直压缩状况下T12椎体发生骨折,前屈状态下T11发生骨折伴韧带损伤,后伸、左右侧屈和左右旋转状态下L1椎体发生骨折伴韧带损伤。骨折发生时,前纵韧带在后伸、左右侧屈状态下存在高应力区,后纵韧带在前屈状态下存在高应力区,横突间韧带和棘间韧带在前屈、左右侧屈、左右旋转状态下存在高应力区。结论:在构建包括重要韧带、椎间盘等软组织结构的脊柱胸腰段三维模型中,椎体松质骨、椎弓根及其周围骨皮质、韧带均存在高应力区,不同状态下所受应力最大椎体不同,发生骨折的椎体和韧带损伤也不同;L1椎弓根截面积最小,最易发生骨折。

关键词：椎体骨折胸腰段脊柱三维有限元模型应力分析

大鼠颈椎间盘老化及退变过程中髓核形态变化规律的实验研究

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中国临床解剖学杂志 2005年第4期23卷 413-417页

作者：王卫明金大地瞿东滨南方医科大学附属南方医院脊柱骨病科广州510515

目的:研究颈椎间盘自然老化及退变过程中髓核软骨样细胞的来源和脊索性髓核向纤维软骨性髓核转化的规律及其与颈椎间盘退变的关系。方法:4周龄SD大鼠76只,随机分成两组。实验组40只大鼠通过截除前肢制备双后肢大鼠颈椎间盘退变的动物模... 详细信息

目的:研究颈椎间盘自然老化及退变过程中髓核软骨样细胞的来源和脊索性髓核向纤维软骨性髓核转化的规律及其与颈椎间盘退变的关系。方法:4周龄SD大鼠76只,随机分成两组。实验组40只大鼠通过截除前肢制备双后肢大鼠颈椎间盘退变的动物模型,按术后3、6、9、12个月4个时间段分组,每组10只;对照组36只大鼠未予处置,按实验开始后4、8、12、16个月分4组,每组9只。制备C4～5、C5～6和C6～7椎间盘中矢状面组织学切片,行HE、番红-O染色,研究观察不同老化及退变程度颈椎间盘髓核中软骨样细胞的起源和脊索性髓核向纤维软骨性髓核转化的规律。结果:随着颈椎间盘的不断老化,终板的软骨细胞向髓核迁移,脊索性髓核向心性皱缩并最终完全被纤维软骨性髓核取代,在此过程中,软骨终板的厚度逐渐变薄,进而出现缺损或断裂;在颈椎间盘退变的过程中,这一转化完成的更快、更早。结论:髓核中的软骨样细胞由终板的软骨细胞迁移而来,通过向心性的产生和沉积胶原纤维,脊索性髓核逐渐被纤维软骨性髓核替代,这一过程既是颈椎间盘成熟和老化的自然环节也可能是颈椎间盘退变的启动环节。

关键词：椎间盘髓核终板软骨细胞退变

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第八届全国人工关节学术大会会议纪要

中华骨科杂志 2005年第12期25卷 769-771页

作者：史占军金大地（整理）南方医科大学南方医院脊柱骨病科广州510515 不详

由中华医学会骨科学分会关节外科学组主办、南方医科大学南方医院承办的第八届全国人工关节学术大会于2005年11月3至6日在广州如期举行,会议期间进行了中华医学会骨科学分会人工关节学组的换届改选.会议注册人员461人,特邀嘉宾93人,其... 详细信息

由中华医学会骨科学分会关节外科学组主办、南方医科大学南方医院承办的第八届全国人工关节学术大会于2005年11月3至6日在广州如期举行,会议期间进行了中华医学会骨科学分会人工关节学组的换届改选.会议注册人员461人,特邀嘉宾93人,其中来自德国、新加坡、英国、韩国的嘉宾11人。

关键词：会议期间人工关节学术大会中华医学会纪要南方医科大学关节外科学南方医院新加坡进修班

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腰椎退行性变终板形态影像学表现及临床意义

中国临床解剖学杂志 2010年第3期28卷 299-302页

作者：王飞江建明王凤龙付兆宗张兆飞南方医科大学附属南方医院脊柱骨病科广州510515

目的探讨下腰痛患者的软骨终板形态改变,并进一步研究软骨终板形态与腰椎间盘退变的关系。方法回顾性研究84例下腰痛患者。所有患者均行腰椎普通X线及MRI检查,依据MRI正中位像进行软骨终板形态分类及T2像对腰椎间盘退变分级,在侧位平片... 详细信息

目的探讨下腰痛患者的软骨终板形态改变,并进一步研究软骨终板形态与腰椎间盘退变的关系。方法回顾性研究84例下腰痛患者。所有患者均行腰椎普通X线及MRI检查,依据MRI正中位像进行软骨终板形态分类及T2像对腰椎间盘退变分级,在侧位平片上进行椎间盘高度测量。结果退变腰椎软骨终板形态以扁平型多见。腰椎退行性变其椎间盘退变程度随凹形、扁平形到不规则形逐渐加重,且各型相比有显著性差异;退变椎间盘高度随凹形、扁平形到不规则形逐渐降低,但扁平形与不规则形相比统计学差异不明显。结论腰椎退行性变中扁平型软骨终板患者出现几率较高。凹形、扁平型和不规则形腰椎退行性变患者的腰椎间盘退变程度逐渐加重,扁平型和不规则形椎间隙高度降低明显,这对椎间盘髓核假体置换术具有一定指导意义。

关键词： MRI 终板形态腰椎退行性变

胸、腰椎结核前入路手术疗效及并发症原因分析及对策

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南方医科大学学报 2009年第6期29卷 1229-1231,1237页

作者：付忠泉张忠民金大地陈建庭瞿东滨南方医科大学第三附属医院脊柱外科广东广州510630 南方医科大学南方医院脊柱骨病外科广东广州510515

目的分析我科10年间采用前入路手术治疗胸、腰椎结核疗效及所发生并发症的原因,探讨其相应对策。方法自1996年01月～2005年12月,采用前入路手术治疗胸腰椎结核患者120例,其中初诊115例,外院术后复发5例。结果初诊115例患者,5例复发;4例... 详细信息

目的分析我科10年间采用前入路手术治疗胸、腰椎结核疗效及所发生并发症的原因,探讨其相应对策。方法自1996年01月～2005年12月,采用前入路手术治疗胸腰椎结核患者120例,其中初诊115例,外院术后复发5例。结果初诊115例患者,5例复发;4例术中胸膜破裂,1例髂外静脉撕裂;3例胸12神经根后支损伤;1例下肢静脉栓塞,2例麻痹性肠梗阻,1例假性尿崩症;外院5例术后复发患者中,1例因急性肝功能衰竭而死亡;1例因内固定松动而接受第三次手术,1例为广泛耐药,而再次复发。结论规范化疗是防止结核病灶复发的关键,根据细菌培养和药敏结果调整化疗方案是预防结核耐药的最有效方法。

关键词：胸腰椎结核前入路手术疗效与并发症

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氯化锂联合脐血干细胞移植修复大鼠脊髓损伤

南方医科大学学报 2010年第11期30卷 2436-2439页

作者：邓许勇周荣平鲁凯伍金大地南方医科大学第三附属医院脊柱外科广东广州510630 南方医科大学南方医院脊柱骨病外科广东广州510515

目的观察氯化锂联合脐血干细胞移植对大鼠脊髓全横断损伤的修复效果。方法成年雌性SD大鼠80只,建立胸9脊髓全横断损伤模型,随机分对照组(A组,n=20)、氯化锂组(B组,n=20)、细胞移植组(C组,n=20)和氯化锂+细胞移植组(D组,n=20)。于术后1d... 详细信息

目的观察氯化锂联合脐血干细胞移植对大鼠脊髓全横断损伤的修复效果。方法成年雌性SD大鼠80只,建立胸9脊髓全横断损伤模型,随机分对照组(A组,n=20)、氯化锂组(B组,n=20)、细胞移植组(C组,n=20)和氯化锂+细胞移植组(D组,n=20)。于术后1d、3d及每周的最后1天,应用BBB评分评价大鼠脊髓功能的恢复情况;8周后取材,通过Brdu细胞核标记观察移植细胞的存活、迁移;通过荧光金逆行追踪,观察脊髓神经纤维的再生与分布。结果 4只大鼠死亡。术后8周可观察到Brdu标记的脐血干细胞在体内存活并在脊髓内迁移;细胞移植组和氯化锂+细胞移植组可见少量连续性神经纤维通过损伤区。荧光金逆行脊髓追踪显示C组和D组可见被荧光金标记的神经锥体细胞穿越损伤区。术后8周A、B、C、D四组后肢功能运动BBB评分分别为4.11±0.14、4.50±0.15、8.31±0.11、11.15±0.18。结论氯化锂能促进人脐血间充质干细胞在损伤区的存活并向神经细胞分化,氯化锂联合脐血干细胞与脊髓去细胞支架移植能够促进细胞移植修复大鼠脊髓损伤的效果。

关键词：脊髓损伤氯化锂脐血干细胞移植

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氨等离子体锚定短肽的消旋聚乳酸骨支架研究

中国修复重建外科杂志 2010年第11期24卷 1376-1385页

作者：许子星陈建庭尹诗衡朱青安李涛查丁胜姜晓锐张鑫鑫南方医科大学南方医院脊柱骨病科广州510515 南方医科大学南方医院华南理工大学分析测试中心广州510515 南方医科大学南方医院创伤骨科广州510515

目的运用氨等离子体辅助接枝技术,在消旋聚乳酸(poly-D,L-lactide acid,PDLLA)表面以酰胺键接枝甘氨酸-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-丝氨酸(Gly-Arg-Gly-Asp-Ser,GRGDS)短肽,探讨制备活性骨替代材料的可行性。方法使用溶剂浇铸/颗粒沥析法... 详细信息

目的运用氨等离子体辅助接枝技术,在消旋聚乳酸(poly-D,L-lactide acid,PDLLA)表面以酰胺键接枝甘氨酸-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-丝氨酸(Gly-Arg-Gly-Asp-Ser,GRGDS)短肽,探讨制备活性骨替代材料的可行性。方法使用溶剂浇铸/颗粒沥析法制备圆片状直径8mm、厚1mm的PDLLA三维骨支架,行氨等离子体改性处理制备表面氨基化PDLLA(aminated PDLLA,A/PDLLA),测量未改性(0min对照组)及改性5、10、20min组支架的孔径、孔隙率和表面水接触角。以上各组A/PDLLA放入1mg/mLFITC标记的GRGDS肽溶液[1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐、N-羟基琥珀酰亚胺、活性肽的摩尔比值为1.5:1.5:1.0],室温下低速震荡24h行表面接枝处理,得到接枝肽处理材料(peptides conjugated A/PDLLA,PA/PDLLA)。对未改性(0min对照组)、改性5、10、20min及其后接枝肽处理的材料行X射线光电子能谱(X-rayphotoelectron spectroscopy,XPS)仪检测;对PDLLA和改性0、5、10、20min后接枝肽处理的材料行激光共聚焦显微镜观察及高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)定量分析。全骨髓贴壁法分离、培养SD大鼠BMSCs,取第3～6代细胞接种于以下3组材料:20min氨等离子体改性组(A/PDLLA组)、20min氨等离子体改性后接枝肽组(PA/PDLLA组)及未经处理的PDLLA对照组(PDLLA组)。各组BMSCs-材料复合物培养16h后测定细胞上架数及上架率;培养4、8d行扫描电镜观察。结果 PDLLA孔径和孔隙率不随氨等离子体改性时间变化而变化(P>0.05)。随着氨等离子体改性时间延长,A/PDLLA支架表面水接触角逐渐减小,材料亲水性能逐步改善,各组间比较差异均有统计学意义(P<0.001)。XPS检测示,A/PDLLA支架表面出现N元素,且随改性时间延长,N1s峰渐趋明显,N/C逐渐加大;PA/PDLLA支架N/C相应加大,表面出现S2p峰。激光共聚焦显微镜观察示PA/PDLLA支架荧光强度随改性时间延长而明显增强。HPLC成功测得经10min和20min氨等离子体改性后接枝肽处理的PA/PDLLA接枝肽量,两者比较差异有统计学意义(P<0.001);而PDLLA及经0、5min氨等离子体改性后接枝肽处理的PA/PDLLA接枝肽量未检出。与BMSCs复合培养16h,A/PDLLA组和PA/PDLLA组细胞上架数和上架率均高于PDLLA组,3组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.01)。扫描电镜观察示,A/PDLLA组和PA/PDLLA组比PDLLA组更能促进BMSCs贴附增殖,尤以PA/PDLLA组最明显。结论氨等离子体改性能明显促进PDLLA表面以酰胺键接枝FITC-GRGDS短肽;此仿生人工骨材料生物活性稳定,能明显促进BMSCs贴附和增殖。

关键词：骨组织工程消旋聚乳酸氨等离子体活性肽仿生支架材料