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雷帕霉素对过氧化氢诱导血管内皮细胞衰老的干预研究

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中国病理生理杂志 2019年第7期35卷 1226-1231页

作者：宋仕聪阮云军吴赛珠王玉筵南方医科大学南方医院老年病科

目的:探讨雷帕霉素(Rapa)对过氧化氢(H2O2)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)衰老的影响及其可能的机制。方法:把HUVECs分为空白组、衰老组(H2O2诱导)、Rapa+H2O2组和3-甲基腺嘌呤(3-MA)+H2O2组。噻唑蓝(MTT)比色法检测各组细胞活力;衰老... 详细信息

目的:探讨雷帕霉素(Rapa)对过氧化氢(H2O2)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)衰老的影响及其可能的机制。方法:把HUVECs分为空白组、衰老组(H2O2诱导)、Rapa+H2O2组和3-甲基腺嘌呤(3-MA)+H2O2组。噻唑蓝(MTT)比色法检测各组细胞活力;衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测细胞衰老情况;透射电子显微镜观察细胞超微结构改变;Western blot检测Rb、磷酸化Rb(p-Rb)、p21、LC-3II和beclin-1的表达变化。结果:与空白组相比,衰老组细胞活力下降,SA-β-Gal染色阳性率增高,细胞结构紊乱,并伴有衰老蛋白表达显著增加(P<0.01);与衰老组相比,Rapa+H2O2组细胞活力增强,细胞衰老染色减少,p-Rb和p21表达显著减少(P<0.05),电镜下细胞结构趋于正常,并可见自噬小体,beclin-1和LC3-II表达显著增多(P<0.01);与衰老组相比,给予自噬抑制剂3-MA的细胞则表现为细胞活力进一步下降,SA-β-Gal染色阳性率进一步增高,p-Rb和p21表达增多,细胞结构破坏明显,beclin-1和LC3-II几乎不表达(P<0.05)。结论:Rapa可延缓H2O2诱导的血管内皮细胞衰老,这种抗衰老作用可能与促进自噬有关。

关键词：雷帕霉素过氧化氢血管内皮细胞细胞衰老自噬

血清甲状腺转录因子-1蛋白的变化特点及在肺癌诊断中的意义分析

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南方医科大学学报 2011年第9期31卷 1592-1596页

作者：李笑万里燕申洪白晓燕南方医科大学南方医院急诊科广东广州510515 南方医科大学南方医院病理科广东广州510515 南方医科大学南方医院广东省肾脏病研究所广东广州510515

目的检测血清中甲状腺转录因子-1(TTF-1)蛋白的变化特点,探讨其在肺癌诊断中的意义。方法应用免疫酶斑点法结合Leica Q500MC图像分析系统定量检测正常成年人、肺良性病变、肺癌及肺外肿瘤(甲状腺癌和非甲状腺来源癌)血清标本中TTF-1蛋... 详细信息

目的检测血清中甲状腺转录因子-1(TTF-1)蛋白的变化特点,探讨其在肺癌诊断中的意义。方法应用免疫酶斑点法结合Leica Q500MC图像分析系统定量检测正常成年人、肺良性病变、肺癌及肺外肿瘤(甲状腺癌和非甲状腺来源癌)血清标本中TTF-1蛋白的表达强度。结果本试验方法的灵敏度、特异度、标准化阳性预告值、标准化阴性预告值、标准化准确度和标准化错诊率(SWDR)分别为90.91%、82.22%、83.64%、90.04%、86.57%和13.43%;健康成年人血清TTF-1蛋白PU值的正常截断值为36.39,此时ROC值为0.95。肺腺癌、肺鳞癌和甲状腺癌患者血清TTF-1蛋白的PU值均大于正常成年人、肺良性病变和非甲状腺来源癌(P=0.000);肺腺癌、肺小细胞癌、肺大细胞癌和甲状腺癌血清TTF-1蛋白的PU值基本相同(P=0.744,P=0.677,P=0.333);肺腺癌、肺鳞癌、肺小细胞癌、肺大细胞癌和甲状腺癌血清TTF-1蛋白的PU值均大于其癌组织匀浆(P=0.000);肺癌组织匀浆和血清TTF-1蛋白的PU值与肺癌患者TNM分期有关(P=0.000),与性别、肿瘤大体类型、分化程度和有无淋巴结转移均无关。结论免疫酶斑点法结合图像定量分析技术敏感、特异、可靠,适于血清中TTF-1蛋白的检测。血清TTF-1蛋白的PU值若高于36.39,则提示可能为肺腺癌、肺鳞癌或甲状腺癌;血清TTF-1对于区分肺癌类型及甲状腺癌无意义,在排除甲状腺癌后,血清TTF-1对于肺癌的检测具有辅助作用;不同类型肺癌和甲状腺癌患者血清TTF-1蛋白的表达均高于其癌组织匀浆;肺癌患者血清及组织匀浆TTF-1蛋白的表达随肺癌患者TNM分期的进展而升高。

关键词：血清甲状腺转录因子-1 免疫酶斑点法肺癌

高性能且环保的组织细胞保存材料的生物学性能评价

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南方医科大学学报 2012年第9期32卷 1319-1321页

作者：李笑万里燕耿舰白晓燕南方医科大学南方医院急诊科广东广州510515 南方医科大学南方医院病理科广东广州510515 南方医科大学南方医院广东省肾脏病研究所广东广州510515

目的探讨新型高性能、绿色环保组织细胞保存材料对胸腹水细胞形态和性状保存的价值,评价其生物学性能。方法应用常规HE染色和Western blotting分别检测经新型高性能、绿色环保组织细胞保存材料和95%乙醇常规固定液固定保存的56例胸腹腔... 详细信息

目的探讨新型高性能、绿色环保组织细胞保存材料对胸腹水细胞形态和性状保存的价值,评价其生物学性能。方法应用常规HE染色和Western blotting分别检测经新型高性能、绿色环保组织细胞保存材料和95%乙醇常规固定液固定保存的56例胸腹腔积液组织细胞CK、CEA和P53的形态学特点和蛋白表达水平。结果经新型高性能、绿色环保组织细胞保存材料固定保存的胸腹腔积液组织细胞形态保存较完整,细胞核与细胞浆饱满,杂质较少;应用95%乙醇常规液固定的细胞可不同程度损坏细胞结构,尤其损坏细胞浆的结构,杂质相对较多。经新型高性能、绿色环保组织细胞保存材料固定保存的胸腹腔积液组织细胞CK、CEA和P53的蛋白表达水平分别是91%、86%和88%,由95%乙醇常规固定液保存的组织细胞CK、CEA和P53的蛋白表达水平分别是46%、38%和31%,两种保存方法相比具有显著性差异(P<0.05)。结论新型高性能、绿色环保组织细胞保存材料高效、环保、性能优良,能较好保存胸腹水组织细胞的形态学特征,对胸腹腔积液组织细胞蛋白质的固定效果较好,可广泛推广应用于组织细胞的固定和保存。

关键词：高性能组织细胞保存材料生物学性能胸腹水细胞

磷脂酰丝氨酸外翻和磷脂氧化在凋亡细胞被吞噬细胞清除过程中的协作效应

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生物物理学报 2006年第2期22卷 125-130页

作者：王燕群刘尚喜侯凡凡李忠海南方医科大学南方医院肾脏病研究所广州510515

为探讨磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,PS)外翻和磷脂氧化在凋亡细胞被吞噬细胞清除中的作用,用脂质体整合的方法将不同的磷脂整合到红细胞上或用N-乙酰马来酰胺(N-ethylmaleimide,NEM)预处理红细胞然后整合磷脂,制备含不同凋亡信号... 详细信息

为探讨磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,PS)外翻和磷脂氧化在凋亡细胞被吞噬细胞清除中的作用,用脂质体整合的方法将不同的磷脂整合到红细胞上或用N-乙酰马来酰胺(N-ethylmaleimide,NEM)预处理红细胞然后整合磷脂,制备含不同凋亡信号的红细胞模型,测定巨噬细胞对整合不同磷脂信号红细胞的结合率和吞噬率。结果表明,单独整合PS或用NEM处理造成PS外翻,可显著性提高巨噬细胞对红细胞的结合率,但对吞噬率没有影响;同时整合PS和氧化磷脂(氧化PS或氧化磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine,PC)),或用NEM处理造成PS外翻后再整合氧化PS或氧化PC,不仅可显著提高巨噬细胞对红细胞的结合率,而且可显著性提高吞噬率。这些结果提示PS外翻可能参与了巨噬细胞对凋亡细胞的结合,而磷脂氧化可能启动了巨噬细胞对凋亡细胞的吞噬,二者协作才可能完成巨噬细胞对凋亡细胞的清除。

关键词：磷脂酰丝氨酸氧化磷脂凋亡细胞吞噬

抗肿瘤药物在金属有机骨架中的装载及体外释放

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高等学校化学学报 2012年第1期33卷 26-31页

作者：杨宝春姜耀东秦雪娟陈志良任非南方医科大学南方医院药学部广州510515 南方医科大学南方医院泌尿外科广州510515

以三乙胺直接加入法制备金属-有机骨架MOF-5,采用X射线粉末衍射(XRD)、红外光谱(IR)和热重分析(TG)对所得样品进行表征.分别以辣椒素和5-氟尿嘧啶(5-Fluouourail,5-FU)为模型药物,研究了MOF-5对2种药物的载药及体外释药性能.通过将所得... 详细信息

以三乙胺直接加入法制备金属-有机骨架MOF-5,采用X射线粉末衍射(XRD)、红外光谱(IR)和热重分析(TG)对所得样品进行表征.分别以辣椒素和5-氟尿嘧啶(5-Fluouourail,5-FU)为模型药物,研究了MOF-5对2种药物的载药及体外释药性能.通过将所得样品的XRD和IR谱图与标准谱图比对确定了样品的结构.TG结果表明,所制备的MOF-5热稳定性良好.MOF-5对辣椒素的最高载入量达0.592 g/g载体,对5-FU的最高载入量为0.315 g/g载体,两种载药体系的体外释药均为明显的两相模式.体外细胞毒性实验结果表明,MOF-5具有良好的生物相容性.

关键词：金属-有机骨架辣椒素 5-氟尿嘧啶载药量药物缓释细胞毒性

人PRL-3基因启动子的克隆及转录因子Snail结合位点的初步鉴定

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生物化学与生物物理进展 2008年第2期35卷 187-194页

作者：周军李建明杨发达柳玉红丁彦青南方医科大学南方医院病理科

促肝细胞再生磷酸酶-3(PRL-3)是重要的肿瘤转移相关基因,其转录调控机制一直未被阐明.应用TRED在线分析系统共获得3种可能的人PRL-3基因启动子区域.通过与人基因组序列进行比对,发现其中3号启动子序列距离人PRL-3基因距离最近,位于该基... 详细信息

促肝细胞再生磷酸酶-3(PRL-3)是重要的肿瘤转移相关基因,其转录调控机制一直未被阐明.应用TRED在线分析系统共获得3种可能的人PRL-3基因启动子区域.通过与人基因组序列进行比对,发现其中3号启动子序列距离人PRL-3基因距离最近,位于该基因上游约1kb的DNA区域,与5′端非翻译区域邻接.在线Consite分析系统发现,-500bp至-451bp之间存在Snail结合的核心寡核苷酸序列CACCTG.运用分子克隆的方法获得PRL-3基因启动子2段区域-699bp至299bp及-642bp至-383bp区域,后者具有Snail结合位点核心寡核苷酸序列CACCTG.构建具有荧光素酶报告基因的pGL3载体并检测其启动子活性.-699～299bp区域与-642～-383bp区域的DNA片段在SW480、SW620、CNE2、293A细胞中均具有启动子活性,其中含有Snail结合位点核心寡核苷酸序列CACCTG的短片段活性强于较完整的序列.染色质免疫沉淀结合PCR扩增技术及凝胶迁移阻滞实验确定PRL-3基因启动子区域具有Snail结合位点.研究确定,PRL-3基因的启动子位于转录起始位点上游700bp与下游300bp的DNA区域,PRL-3基因启动子存在转录因子Snail结合元件.

关键词： PRL-3 启动子 Snail 转录调控

SD大鼠慢性肾脏病主动脉钙化模型的优化及效果评价

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实验动物与比较医学 2025年

作者：潘颐聪蒋汶洪胡明覃晓广西医科大学第一附属医院

目的通过不同的手术方法建立SD大鼠慢性肾功能不全主动脉钙化模型，并进行各方面比较，从而探索更优化的建模方法。方法（1）慢性肾功能不全手术模型优化探索：根据不同手术方式将大鼠分为A（腹腔入路先切左2/3肾后，二期右全肾切除）... 详细信息

目的通过不同的手术方法建立SD大鼠慢性肾功能不全主动脉钙化模型，并进行各方面比较，从而探索更优化的建模方法。方法（1）慢性肾功能不全手术模型优化探索：根据不同手术方式将大鼠分为A（腹腔入路先切左2/3肾后，二期右全肾切除）、B（腹腔入路左2/3肾及右肾同时切除）、C（背入路先切右全肾后二期切除左2/3肾）、D（背入路先切除左2/3肾再二期切除右全肾）四组，比较腹腔入路及背入路以及分期手术一次性手术的肾脏切除术的大鼠生存曲线，手术时间，及死亡原因分析。（2）慢性肾功能不全主动脉钙化模型建立：确定最优的肾脏切除手术方式后，选取24只大鼠进行肾脏切除钙化诱导，实验组大鼠12只，行5/6肾切除术，再以骨化三醇溶液腹腔注射3个月进行主动脉钙化诱导；对照组12只行假手术，即暴露肾脏后还纳后腹腔，后腹腔注射含DMSO的生理盐水3个月。（3）模型验证，主动脉切片进行茜素红S及Von Kossa染色验以及qPCR检测Sm22,Runx2,OPN表达情况对模型建模效果进行评价。结果（1）CKD模型优化探索实验中D组大鼠存活率最高。（2）实验组血清钙离子明显低于对照组（P肾脏HE染色可见器质性改变，实验组肾小球计数明显减少，提示肾脏衰竭模型成功建立;茜素红S染色可见实验组明显色素沉积，硝酸银染色可见动脉中膜层明显硝酸银沉积，符合肾衰竭主动脉钙化的表现;qPCR表明实验组Sm22表达下降，OPN,Runx2表达上升，提示主动脉平滑肌细胞由平滑肌表型向骨样表型转变，提示主动脉钙化诱导成功。结论采用背入路先切除左2/3肾再进行右侧全肾切除联合高剂量骨化三醇摄入的SD大鼠慢性肾脏病主动脉钙化模型能优化手术时间，模型成功率及动物存活率。

关键词：血管钙化慢性肾脏病动物模型大鼠

35例治疗相关血液肿瘤患者的临床特征及预后分析

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同方期刊数据库

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中华血液学杂志 2016年第3期37卷 221-226页

作者：卢绮思许娜周璇蔡耿喜李琳李玉玲陆紫媛黄继贤刘启发刘晓力南方医科大学南方医院血液科 510515 南方医科大学南方医院乳腺科 510515

目的探讨治疗相关血液肿瘤的临床特征及预后。方法采用细胞形态学、流式细胞术、间期荧光原位杂交技术（I-FISH）、染色体核型分析对35例治疗相关血液肿瘤患者进行诊断和分型并回顾性分析其临床特征及预后。结果35例患者中，治疗相关急... 详细信息

目的探讨治疗相关血液肿瘤的临床特征及预后。方法采用细胞形态学、流式细胞术、间期荧光原位杂交技术（I-FISH）、染色体核型分析对35例治疗相关血液肿瘤患者进行诊断和分型并回顾性分析其临床特征及预后。结果35例患者中，治疗相关急性髓系白血病（t-AML ）20例，治疗相关急性淋巴细胞白血病（t-ALL ）4例，治疗相关急性混合细胞白血病1例，治疗相关非霍奇金淋巴瘤（t-NHL） 8例，治疗相关骨髓增生异常综合征（t-MDS ）2例。第一肿瘤至治疗相关恶性血液肿瘤的中位发病间隔期为29（16-90）个月，中位生存时间14（1-60）个月，3年累积生存率为17.1%。在25例治疗相关性急性白血病患者中，40.0%（10/25）合并复杂核型，36.0%（9/25）合并MLL断裂基因重排，12.0% （3/25）合并AML-ETO融合基因阳性，1例合并NPM1点突变，1例合并P16基因缺失。结论治疗相关血液肿瘤患者的预后差。

关键词：肿瘤继发原发性血液肿瘤疾病特征预后

采用房间隔封堵器经静脉端栓塞高流量特发性肾动静脉瘘一例

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中华放射学杂志 2019年第5期53卷 399-401页

作者：陈晓茂曾庆乐叶鹏缪洪飞邓黎严琰刘文亚罗永竞陈勇南方医科大学南方医院介入诊疗科广州510515

笔者报道1例应用房间隔封堵器,经静脉端治疗高流量特发性肾动静脉瘘的方法。通过肾静脉途径成功将1枚直径为26mm的房间隔封堵器放置在瘘口的静脉端,然后在封堵器的近心端置放3枚直径为16mm的血管塞和1枚直径14mm长度40cm可控弹簧圈,进... 详细信息

笔者报道1例应用房间隔封堵器,经静脉端治疗高流量特发性肾动静脉瘘的方法。通过肾静脉途径成功将1枚直径为26mm的房间隔封堵器放置在瘘口的静脉端,然后在封堵器的近心端置放3枚直径为16mm的血管塞和1枚直径14mm长度40cm可控弹簧圈,进一步行致密栓塞。术后肾动脉造影示肾动脉血流通畅,原动静脉瘘血流停滞,分流现象消失。术后84d复查肾动脉CTA示封堵器位置良好、肾动脉通畅、肾灌注良好,原动静脉瘘消失。随访2年,未见并发症。

关键词：肾动静脉瘘放射学,介入性