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苦参总黄酮改善非酒精性脂肪肝的作用机制及斑马鱼实验验证

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中国组织工程研究 2025年第14期29卷 2969-2978页

作者：古玉凤邓丙英李倪仁曾译萱鲁思凡朱晨陈磊刘怡南方医科大学中医药学院广东省广州市510510 广州中医药大学第二附属医院药学部广东省广州市510120 广东药科大学中药学院广东省广州市510006 广东省中药制剂重点实验室广东省广州市510515 广东省中西医结合防治情志病基础研究卓越中心广东省广州市510515

背景:苦参总黄酮具有抗炎、调节免疫、抗氧化、抗肝损伤等多种药理作用,其对非酒精性脂肪肝的治疗效果和作用机制尚不明确。目的:利用生物信息学、网络药理学方法及斑马鱼实验验证苦参总黄酮治疗非酒精性脂肪肝的作用机制。方法:构建非... 详细信息

背景:苦参总黄酮具有抗炎、调节免疫、抗氧化、抗肝损伤等多种药理作用,其对非酒精性脂肪肝的治疗效果和作用机制尚不明确。目的:利用生物信息学、网络药理学方法及斑马鱼实验验证苦参总黄酮治疗非酒精性脂肪肝的作用机制。方法:构建非酒精性脂肪肝斑马鱼模型,观察苦参总黄酮治疗后斑马鱼肝脏脂质累积情况、病理形态改变,以及脂质累积、炎症基因的表达变化。通过TCMSP、Swiss Target Prediction、Bat-man数据库获取苦参总黄酮活性成分与非酒精性脂肪肝相关靶点;利用STRING数据库进行蛋白互作网络分析,GO功能富集和KEGG通路富集分析。基于GSE33814数据集,筛选出“苦参总黄酮-非酒精性脂肪肝”交集靶点的差异表达基因并运用R4.3.2软件进行相关性分析、受试者操作特征曲线分析,通过验证集GSE89632验证核心基因;RT-qPCR和Western blot实验验证核心通路相关基因和蛋白表达。结果与结论:①苦参总黄酮能够改善非酒精性脂肪肝斑马鱼肝脏脂质累积,显著抑制斑马鱼脂质和转氨酶水平的升高(P生物信息分析共获得59个“苦参总黄酮-非酒精性脂肪肝”差异表达基因,受试者操作特征曲线分析及验证集验证得到6个核心靶点在健康人与非酒精性脂肪肝患者间有显著差异(P实验结果表明苦参总黄酮能够抑制非酒精性脂肪肝斑马鱼JAK2/STAT3信号通路的激活。以上结果表明,苦参总黄酮通过调节JAK2/STAT3信号通路减轻炎性反应,抑制脂质累积从而改善非酒精性脂肪肝。

关键词：苦参总黄酮非酒精性脂肪肝斑马鱼网络药理学生物信息学 JAK2 STAT3

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海洋中药治疗骨质疏松的用药规律及作用机制

中国组织工程研究 2025年第17期29卷 3713-3723页

作者：赖越林轩徐淼刘欢沈剑粦黄文华广东医科大学第一临床医学院广东省湛江市524023 莆田学院环境与生物工程学院福建省莆田市351100 福建医科大学基础医学院福建省福州市350100 西南医科大学附属中医医院骨科四川省泸州市646000 莆田学院附属医院中心实验室福建省莆田市351100 南方医科大学基础医学院人体解剖学国家重点学科广东省数字医学与生物力学重点实验室广东省医学3D打印应用转化工程技术研究中心广东省广州市510515

背景:海洋中药为治疗骨质疏松提供了一种潜在有效且不易产生不良反应的方法。目的:应用数据挖掘和网络药理学方法分析并探讨中医临床治疗骨质疏松的用药规律及作用机制。方法:采用数据挖掘和网络药理学方法,对国家知识产权局批准的治疗... 详细信息

背景:海洋中药为治疗骨质疏松提供了一种潜在有效且不易产生不良反应的方法。目的:应用数据挖掘和网络药理学方法分析并探讨中医临床治疗骨质疏松的用药规律及作用机制。方法:采用数据挖掘和网络药理学方法,对国家知识产权局批准的治疗骨质疏松的海洋中药专利处方进行用药模式和作用机制研究,并特别关注这些处方中的核心中药成分,利用超高效液相色谱串联质谱对牡蛎-续断-淫羊藿组成的复方药组核心成分进行全面的鉴定分析。结果与结论:①从国家知识产权局(SIPO)网站建立到2024-04-01,检索发现381项骨质疏松治疗的授权专利,共鉴定出48首含有海洋中药的中成药处方,这些处方包含183味中药,其中13种海洋中药用药频次共574次,单首专利组方中用药味数2-41种不等;②牡蛎是最常用的海洋中药,续断、淫羊藿、地黄、杜仲是最常用的非海洋中药;关联规则分析确定了牡蛎、续断和淫羊藿为核心药物群;网络药理学分析显示该核心药组治疗骨质疏松的核心靶点包括ALB、AKT1、TP53、PPARG和SRC;核心药组发挥疗效的核心成分为谷甾醇、甘草素、臭山羊碱、木犀草素、山奈酚;③GO与KEGG富集分析显示,Rap1/丝裂原活化蛋白激酶信号通路在核心药物组的骨质疏松作用机制中起着重要作用;④分子对接结果显示核心成分与核心靶点之间存在良好的相互作用;⑤超高效液相色谱串联质谱检测复方药组核心成分为木犀草素、谷甾醇、山奈酚等,与网络药理学鉴定的药物成分相符合;对复方药组成分进行定量分析得出,黄酮类化合物、萜类化合物以及生物碱这3类物质在药物成分占比中较大。

关键词：骨质疏松海洋中药数据挖掘网络药理学分子对接

哈蟆油对D-半乳糖所致雄性衰老大鼠肝组织CyclinD1、CDK6和P15蛋白表达的影响

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南方医科大学学报 2010年第5期30卷 1044-1046,1049页

作者：姚晖王晓娟黄莉萍刁建新邓虹珠南方医科大学中医药学院广东广州510515 南方医科大学南方医院妇产科广东广州510515 南方医科大学中医药学院分子生物学实验室广东广州510515

目的探讨哈蟆油对D-半乳糖所致雄性衰老大鼠肝组织细胞周期素D1(CyclinD1)、周期性依赖性激酶6(CDK6)和细胞周期蛋白D/CDK激酶的抑制因子P15蛋白表达调控的影响。方法 SPF级SD雄性大鼠18只,随机分为模型、维生素E(VE)和哈蟆油组,每组6只... 详细信息

目的探讨哈蟆油对D-半乳糖所致雄性衰老大鼠肝组织细胞周期素D1(CyclinD1)、周期性依赖性激酶6(CDK6)和细胞周期蛋白D/CDK激酶的抑制因子P15蛋白表达调控的影响。方法 SPF级SD雄性大鼠18只,随机分为模型、维生素E(VE)和哈蟆油组,每组6只,D-半乳糖颈背部皮下连续注射6周,另取雄性大鼠6只,同样部位每日注射生理盐水,作为空白组。第3周开始灌胃给药,给药时间30d。给药结束后收集标本采用Western blotting法检测肝组织CyclinD1、CDK6和P15蛋白的表达。结果与空白组比较,模型组大鼠肝脏CyclinD1蛋白、CDK6蛋白、P15蛋白表达明显下调。雄性衰老大鼠口服哈蟆油后,CyclinD1、CDK6和P15蛋白表达量(与内参比较)分别为41.73±0.54、23.29±0.30和21.49±0.30。与模型组相比,哈蟆油组能明显上调肝脏CyclinD1、CDK6、P15蛋白的表达(P<0.01)。结论哈蟆油能不同程度上调CyclinD1和CDK6蛋白表达,促进衰老雄性大鼠肝细胞增殖。同时反馈性上调细胞增殖负性调控蛋白P15表达,防止不必要的过度增殖。哈蟆油延缓雄性衰老作用可能通过调控肝脏有关增殖蛋白表达发挥抗衰老作用,与VE作用有所不同。

关键词：哈蟆油衰老肝脏 D-半乳糖细胞增殖

穗花杉双黄酮通过影响caspase-3和β-catenin表达诱导结肠癌细胞SW480凋亡

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南方医科大学学报 2014年第7期34卷 1035-1038页

作者：杨雨徐文娟彭康孙学刚南方医科大学中医药学院分子生物学实验室广东广州510515

目的观察穗花杉双黄酮对人结肠癌细胞SW480增殖及凋亡相关因子caspase-3、β-catenin的影响,初步探讨其诱导结肠癌细胞凋亡的作用机制。方法 MTT细胞增殖试验检测穗花杉双黄酮对SW480细胞活力的影响,流式细胞术检测其对SW480细胞凋亡的... 详细信息

目的观察穗花杉双黄酮对人结肠癌细胞SW480增殖及凋亡相关因子caspase-3、β-catenin的影响,初步探讨其诱导结肠癌细胞凋亡的作用机制。方法 MTT细胞增殖试验检测穗花杉双黄酮对SW480细胞活力的影响,流式细胞术检测其对SW480细胞凋亡的诱导作用,Western blot法检测穗花杉双黄酮作用细胞后caspase-3、β-catenin蛋白的表达。结果穗花杉双黄酮对SW480细胞生长有抑制作用,具有剂量依赖性。150μmol/L穗花杉双黄酮明显促进其凋亡,凋亡率显著高于对照组(P<0.01)。Western bolt结果表明,穗花杉双黄酮干预可以使caspase-3表达明显增强,β-catenin表达明显减弱。结论穗花杉双黄酮可诱导人结肠癌细胞SW480凋亡,并影响凋亡相关因子caspase-3、β-catenin的表达,从而达到抗肿瘤作用。

关键词：穗花杉双黄酮 SW480 caspase-3 β-catenin

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生物标志物检测方法的研究进展

中国现代应用药学 2020年第3期37卷 378-384页

作者：刘睿轩朱全红南方医科大学中医药学院

生物标志物是目前临床上用于疾病的早期诊断、分类、预后评价的重要指标。近年来,生物标志物检测方法迅猛发展,在抗原抗体结合原理检测方法的基础上,结合光、电等信号变化,使检测方法的特异性及灵敏度大大提高;同时在识别元件方面发展... 详细信息

生物标志物是目前临床上用于疾病的早期诊断、分类、预后评价的重要指标。近年来,生物标志物检测方法迅猛发展,在抗原抗体结合原理检测方法的基础上,结合光、电等信号变化,使检测方法的特异性及灵敏度大大提高;同时在识别元件方面发展了分子印迹、核酸适配体、单域抗体等方法,弥补了传统抗体稳定性、重复性差等不足。本文对目前的生物标志物检测方法做一综述,并对其未来的发展进行了展望。

关键词：生物标志物检测方法早期诊断

高效液相色谱法检测局部用药后塞来昔布在舌组织中的吸收浓度

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南方医科大学学报 2010年第8期30卷 1827-1829页

作者：徐芳李伟忠刁建新南方医科大学南方医院口腔科广东广州510515 南方医科大学中医药学院中医分子生物实验室广东广州510515

目的建立高效液相色谱法(HPLC)检测口腔局部涂抹自制COX-2抑制剂塞来昔布糊剂后舌组织中的药物浓度及吸收率。方法将塞来昔布用混合基质配成糊剂(6%)涂抹于金黄地鼠舌黏膜表面,分别于5、10、15、30、60、90、120min后将舌体组织取下并... 详细信息

目的建立高效液相色谱法(HPLC)检测口腔局部涂抹自制COX-2抑制剂塞来昔布糊剂后舌组织中的药物浓度及吸收率。方法将塞来昔布用混合基质配成糊剂(6%)涂抹于金黄地鼠舌黏膜表面,分别于5、10、15、30、60、90、120min后将舌体组织取下并制成匀浆,采用HPLC检测舌体组织中药物的吸收浓度及吸收率。结果塞来昔布的保留时间是4.4min,塞来昔布的最低检测质量浓度为10μg/L(S/N=3)。舌组织匀浆液中塞来昔布在25~800μg/L范围内线性关系良好,回归方程为Y=24306X+66747,R2=0.9991(n=6);提取回收率为83.75%~90.01%,方法回收率为91.98%~99.07%;日内RSD分别为2.15%、3.16%和3.67%;日间RSD分别为3.40%、4.56%、4.42%,且稳定性良好。局部给药后120min内塞来昔布在金黄地鼠舌组织中的浓度波动于(0.685±0.019)^(3.168±0.143)μg/g之间,在15min时药物吸收达最高浓度。结论舌黏膜局部应用塞来昔布后可迅速通过舌黏膜吸收,在舌组织内达到较高的药物浓度。采用HPLC检测舌组织中药物药物浓度及吸收率,具有方法简便灵敏、干扰小、重复性好等优点,为进一步探索口腔局部应用环氧化酶2抑制剂预防口腔癌及癌前病变提供了依据。

关键词：塞来普布舌高效液相色谱法药代动力学

慢病毒介导LOX-1基因RNA干扰抑制氧化应激诱导心肌细胞凋亡

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南方医科大学学报 2012年第2期32卷 165-168,172页

作者：刘彬黄佳城周迎春孙学刚曾文璧李杏臧书文郝文文南方医科大学南方医院中医科广东广州510515 南方医科大学中医药学院分子生物学实验室广东广州510515

目的构建大鼠凝集素养氧化低密度脂蛋白受体(LOX-1)RNA干扰慢病毒表达载体并观察LOX-1在氧化应激诱导心肌细胞凋亡中的作用。方法设计针对大鼠LOX-1的shRNA序列,将shRNA序列插入到pLentiLox3.7(pLL3.7)慢病毒载体中,构建慢病毒载体pLL3.... 详细信息

目的构建大鼠凝集素养氧化低密度脂蛋白受体(LOX-1)RNA干扰慢病毒表达载体并观察LOX-1在氧化应激诱导心肌细胞凋亡中的作用。方法设计针对大鼠LOX-1的shRNA序列,将shRNA序列插入到pLentiLox3.7(pLL3.7)慢病毒载体中,构建慢病毒载体pLL3.7-LOXl。慢病毒载体及包装载体dR8.9、VSVG共转染293FT细胞包装慢病毒。慢病毒侵染H9C2大鼠心肌细胞,RT-PCR鉴定对LOX-1抑制效率,CCK-8、Hochest33258染色检测LOX-1对H_2O_2诱导H9C2心肌细胞凋亡的影响。结果通过双酶切鉴定,证实shRNA正确插入慢病毒载体,DNA测序证实插入的序列正确,抑制LOX-1能抑制H_2O_2诱导的细胞活力下降,减轻H_2O_2诱导的心肌细胞凋亡,与H_2O_2组比较均有统计学意义(P<0.01)。结论成功构建靶向大鼠LOX-1基因RNAi慢病毒载体,LOX-1激活可能在H_2O_2诱导心肌细胞凋亡中发挥重要作用。

关键词：慢病毒 RNA干扰 LOX-1 氧化应激凋亡

三黄茵赤汤通过调节HMGB1信号通路防治急性小鼠肝损伤

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中国实验方剂学杂志 2019年第6期25卷 58-64页

作者：吴家扬全景羽周燕鑫陈伊梦刁建新南方医科大学中医药学院，广州510515

目的:探究三黄茵赤汤通过调控高迁移率族蛋白B1(HMGB1)信号通路对四氯化碳(CCl4)致小鼠急性肝损伤的防治作用及机制。方法:随机将48只KM小鼠分为正常组,模型组,三黄茵赤汤低、中、高剂量组及促肝细胞生长素组,建立四氯化碳(CCl4)诱导小... 详细信息

目的:探究三黄茵赤汤通过调控高迁移率族蛋白B1(HMGB1)信号通路对四氯化碳(CCl4)致小鼠急性肝损伤的防治作用及机制。方法:随机将48只KM小鼠分为正常组,模型组,三黄茵赤汤低、中、高剂量组及促肝细胞生长素组,建立四氯化碳(CCl4)诱导小鼠急性肝损伤模型。三黄茵赤汤低、中、高剂量组分别以剂量为16,32,48 g·kg^(-1)·d^(-1)的药物灌胃,促肝细胞生长素组给予促肝细胞生长素20 mg·kg^(-1)·d^(-1)腹腔注射。小鼠肝组织切片病理学变化用苏木精-伊红(HE)染色观察;相关酶试剂盒测定小鼠血清中肝功能指标-丙氨酸氨基转移酶(AST)和天冬氨酸氨基转移酶(ALT)的活性;酶联免疫吸附测定(ELISA)测定小鼠血清中白细胞介素6(IL-6)的表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠组织中HMGB1,天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3),凋亡相关分子B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关x蛋白(Bax)和Toll样受体4(TLR4)的蛋白表达情况。结果:与正常组比较,模型组明显升高血清中AST,ALT(P <0. 05)和IL-6的水平(P <0. 05)以及增加肝组织中HMGB1,TLR4和Caspase-3表达(P <0. 05)并下调Bcl-2/Bax(P <0. 05);与模型组比较,三黄茵赤汤各剂量组均能有效减轻小鼠肝脏的病理损害,降低血清中AST,ALT水平和降低IL-6的表达(P <0. 05),不同程度降低降低肝组织匀浆中HMGB1,TLR4和Caspase-3蛋白的表达(P <0. 05),并提高Bcl-2/Bax(P <0. 05),呈剂量依赖性。结论:三黄茵赤汤可能通过调控HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路,减轻细胞炎症反应,抑制细胞凋亡达到防治小鼠急性肝损伤的作用,HMGB1可能成为防治急性肝损伤的新靶点。

关键词：急性肝损伤三黄茵赤汤高迁移率族蛋白B1 (HMGB1) 凋亡茵陈蒿汤

颈椎旋转手法对兔粥样斑块期颈动脉拉伸力学性能的影响

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医用生物力学 2017年第3期32卷 267-273页

作者：张少群祁冀张磊景亚军陈奕力李义凯南方医科大学中医药学院广州510515

目的探讨颈椎旋转手法对兔粥样斑块期颈动脉拉伸力学性能的影响。方法选取30只健康的雄性新西兰大耳兔,随机分为实验组、模型对照组和空白对照组。实验组对兔进行颈动脉粥样硬化斑块造模及颈椎旋转手法干预,模型对照组仅进行颈动脉粥样... 详细信息

目的探讨颈椎旋转手法对兔粥样斑块期颈动脉拉伸力学性能的影响。方法选取30只健康的雄性新西兰大耳兔,随机分为实验组、模型对照组和空白对照组。实验组对兔进行颈动脉粥样硬化斑块造模及颈椎旋转手法干预,模型对照组仅进行颈动脉粥样硬化斑块造模,而空白对照组不进行任何干预。观测3组兔在不同干预后颈动脉各项拉伸力学性能指标的差异。结果实验组与模型对照组以及空白对照组比较,最大应变、最大载荷和生理性弹性模量均有统计学差异(P实验组最大应变比模型对照组、空白对照组分别小24.87%、52.09%;实验组最大载荷分别是模型对照组、空白对照组的2.21、3.47倍;实验组生理性弹性模量分别是模型对照组、空白对照组的1.60、1.89倍。结论相对正常颈动脉而言,颈动脉粥样硬化斑块的存在会降低颈动脉的拉伸力学性能,而对存在颈动脉粥样硬化的兔进行颈椎旋转手法操作,会进一步降低颈动脉的拉伸力学性能。因此,临床上对于存在颈动脉粥样硬化斑块的患者,最好避免进行颈椎旋转手法操作。

关键词：颈椎旋转手法颈动脉粥样斑块期应力应变弹性模量