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连翘配方颗粒与饮片的抗炎、抗肿瘤和抑菌效果的比较研究

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南方医科大学学报 2024年第3期44卷 594-604页

作者：郭新邓郭卓琳孙冬梅邹丽芳区锦莹余林中卢子滨曹惠慧刘俊珊南方医科大学中医药学院中药药理实验室//广东省中药制剂重点实验室//广东省中药制剂技术工程实验室广东广州510515 广东一方制药有限公司广东佛山528244

目的采用斑马鱼体内模型实验和体外抗菌实验比较连翘配方颗粒和饮片的抗炎、抗肿瘤和抑菌的药效差异。方法将斑马鱼胚胎分为空白组、模型对照组、10μg/mL地塞米松处理组、连翘饮片处理组(剂量为400、600、800μg/mL)和连翘配方颗粒处理... 详细信息

目的采用斑马鱼体内模型实验和体外抗菌实验比较连翘配方颗粒和饮片的抗炎、抗肿瘤和抑菌的药效差异。方法将斑马鱼胚胎分为空白组、模型对照组、10μg/mL地塞米松处理组、连翘饮片处理组(剂量为400、600、800μg/mL)和连翘配方颗粒处理组(剂量为400、600、800μg/mL),分别构建硫酸铜、尾鳍横断和LPS显微注射斑马鱼炎症模型,采用中性粒细胞观察、病理组织切片、生存分析和实时定量荧光PCR实验评价连翘配方颗粒与饮片的抗炎药效差异,并从MAPK和NF-κB信号通路角度探讨其抗炎作用机理差异。将斑马鱼胚胎分为模型对照组、250 nmol/L索拉菲尼处理组、连翘饮片处理组(400、600、800μg/mL)和连翘配方颗粒处理组(400、600、800μg/mL),采用斑马鱼异种移植肿瘤细胞模型,通过荧光观察和病理组织切片评价连翘配方颗粒与饮片抗肿瘤的药效差异。将实验分为空白组、连翘饮片处理组(1.95、3.91、7.81、15.63、31.25、62.5、125、250、500 mg/mL)和连翘配方颗粒处理组(1.95、3.91、7.81、15.63、31.25、62.5、125、250、500 mg/mL),采用微量肉汤稀释法评价连翘配方颗粒与饮片的抑菌药效差异。结果与模型对照组比较,连翘配方颗粒及饮片均可抑制中性粒细胞聚集数量(P<0.001)和Tnfα、Il6、P38、Jnk、Erk和P65的mRNA表达(P<0.05或P<0.01或P<0.001),升高斑马鱼的存活率(P<0.01或P<0.001);减少人肺腺癌A549细胞、人结直肠癌HCT116细胞、人胰腺癌PANC-1细胞、人肝癌Hep3B细胞和人宫颈癌Hela细胞在卵黄囊内的聚集(P<0.05或P<0.01或P<0.001);并在15.63 mg/mL时起到抑菌作用。结论连翘配方颗粒及饮片均具有显著抗炎、抗肿瘤和抑菌作用,两者除在低剂量下抑制Il6、P65、Jnk的mRNA表达和HCT116细胞增殖有显著性差异外,其他作用均无明显差异。

关键词：连翘中药配方颗粒药效等效性斑马鱼

基于抗炎作用研究凉膈散及其清上、泄下拆方的配伍机制

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中药药理与临床 2024年

作者：姜丽邹丽芳郑晓婵郭新邓梁芷晴余林中刘俊珊南方医科大学中医药学院广东省中药制剂重点实验室

目的: 基于网络药理学和斑马鱼炎症模型探讨凉膈散及其清上、泄下拆方的抗炎作用及配伍机制。方法: 通过三种斑马鱼炎症模型、生存曲线分析和组织病理切片实验，验证凉膈散及其清上、泄下拆方的抗炎作用。运用TCMSP数据库筛选出凉膈散... 详细信息

目的: 基于网络药理学和斑马鱼炎症模型探讨凉膈散及其清上、泄下拆方的抗炎作用及配伍机制。方法: 通过三种斑马鱼炎症模型、生存曲线分析和组织病理切片实验，验证凉膈散及其清上、泄下拆方的抗炎作用。运用TCMSP数据库筛选出凉膈散及其清上、泄下拆方的有效化学成分及对应靶点，通过GeneCards、DisGeNET等数据库检索炎症相关靶点，将凉膈散及其清上、泄下拆方的有效化学成分靶点与炎症靶点取交集，运用STRING数据库对交集靶点构建蛋白质-蛋白质相互作用(Protein-Protein Interaction，PPI)网络，采用David数据库对潜在靶点进行基因本体论(Gene Ontology，GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG)通路富集分析。采用实时荧光定量PCR检测关键靶点的基因表达情况。结果: 斑马鱼炎症模型实验结果表明，与正常对照组比较，模型对照组斑马鱼中性粒细胞显著向损伤部位迁移聚集，卵黄囊显微注射LPS后存活时间缩短，死亡率显著升高(P＜0.01)；与模型对照组比较，地塞米松、不同浓度凉膈散、清上和泄下方均能显著抑制炎症反应，减少中性粒细胞的迁移，延长卵黄囊显微注射LPS后斑马鱼存活时间，提高其生存率(P＜0.05或P＜0.01)；与凉膈散全方相比，清上、泄下方抑制中性粒细胞迁移的作用减弱(P＜0.05或P＜0.01)，且两拆方表现出协同作用(CI＜1)，清上、泄下方对LPS注射斑马鱼卵黄囊后的生存保护作用减弱(P＜0.01)，凉膈散全方作用最佳。网络药理学分析结果显示，凉膈散全方有176个有效化学成分，如连翘苷、槲皮素、山柰酚、木犀草素等，对应266个靶点；清上方有74个有效化学成分，如栀子苷、槲皮素、汉黄芩素、刺槐素等，对应233个靶点；泄下方有109个有效化学成分，如大黄素、大黄酸、谷甾醇等，对应234个靶点。炎症性疾病相关靶点有10933个。两者交集靶点共168个。通过PPI网络图筛选出核心靶点有蛋白激酶B(AKT1)、肿瘤蛋白p53(TP53)、肿瘤坏死因子(TNF)、白介素-6(IL-6)、血管内皮生长因子(VEGFA)等。GO功能分析结果表明凉膈散及其清上、泄下拆方中的活性成分与RNA聚合酶Ⅱ转录正调节、调控基因表达和药物反应等生物过程，质膜、胞外区域、胞液等细胞组成，蛋白质结合、酶结合等分子功能密切相关。KEGG通路富集分析发现凉膈散及其清上、泄下拆方可通过癌症通路、AGE-RAGE通路、脂质与动脉粥样硬化、流体剪切应力与动脉粥样硬化、化学致癌-受体激活等通路发挥抗炎作用。实时荧光定量PCR结果表明，与正常对照组比较，模型对照组炎症因子Tnfα、Il6 mRNA表达显著上调(P＜0.01)，Akt mRNA表达显著下调(P＜0.01)；与模型对照组比较，凉膈散及其清上、泄下拆方均可显著降低炎症因子Tnfα、Il6 mRNA的表达(P＜0.01)，凉膈散能显著上调Akt mRNA表达(P＜0.05)。结论: 凉膈散及其清上、泄下拆方均具有显著抗炎作用且两拆方表现出协同作用，其作用机制与关键靶点TNF、IL-6、AKT相关。

关键词：凉膈散炎症治法网络药理学斑马鱼

基于斑马鱼模型的三物黄芩汤抗炎活性及机制研究

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中国医院药学杂志 2024年

作者：舒余琪杨小瑜彭颖慧汤庆发曹惠慧谢涛邵萌南方医科大学中医药学院广东省中药制剂重点实验室暨南大学药学院南方医科大学珠江医院肿瘤放疗科

目的：基于斑马鱼炎症模型探讨三物黄芩汤对急性炎症的抑制作用及机制。方法：采用硫酸铜浸泡法、尾部横切法和脂多糖(LPS)卵黄囊显微注射法构建三种斑马鱼急性炎症模型，分为对照组、模型组、阳性药组(10 μg·mL-1地塞米松)、三物黄... 详细信息

目的：基于斑马鱼炎症模型探讨三物黄芩汤对急性炎症的抑制作用及机制。方法：采用硫酸铜浸泡法、尾部横切法和脂多糖(LPS)卵黄囊显微注射法构建三种斑马鱼急性炎症模型，分为对照组、模型组、阳性药组(10 μg·mL-1地塞米松)、三物黄芩汤低、中、高剂量(100、200、300 μg·mL-1)组，荧光观察各组斑马鱼损伤部位中性粒细胞的聚集。在LPS诱导炎症模型中，苏木精-伊红染色(H&E染色)观察斑马鱼体内炎症细胞的数量变化；实时荧光定量PCR(qRT-qPCR)技术测定炎症相关基因的转录水平；乳酸试剂盒检测斑马鱼体内的乳酸浓度。结果：与模型组相比，三物黄芩汤各给药组斑马鱼炎症部位中性粒细胞聚集数量均显著降低。LPS诱导的斑马鱼在给予三物黄芩汤后存活率显著提升，肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和核因子-κB(NF-κB)的mRNA水平显著下调，乳酸脱氢酶A(LDHA)和IL-10的mRNA水平以及乳酸浓度显著上调。结论：三物黄芩汤能够调控LDHA介导的NF-κB信号通路，有效抑制中性粒细胞聚集，进而缓解急性炎症进程。

关键词：三物黄芩汤斑马鱼炎症 NF-κB LDHA

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新疆紫草多糖提取、脱色工艺优化

中成药 2024年第9期46卷 2898-2903页

作者：杨小瑜姜一平舒余琪廖树怡陈祖灿汤庆发邵萌南方医科大学中医药学院广东省中药制剂重点实验室广东广州510515 珠海市人民医院(暨南大学附属珠海医院)药学部广东珠海519000

目的优化新疆紫草多糖提取、脱色工艺。方法以液料比、浸提温度、浸提时间为影响因素,多糖得率为评价指标,Box-Behnken响应面法优化提取工艺。以上样质量浓度、上样体积、洗脱体积流量为影响因素,多糖脱色率、保留率的总评“归一值”(OD... 详细信息

目的优化新疆紫草多糖提取、脱色工艺。方法以液料比、浸提温度、浸提时间为影响因素,多糖得率为评价指标,Box-Behnken响应面法优化提取工艺。以上样质量浓度、上样体积、洗脱体积流量为影响因素,多糖脱色率、保留率的总评“归一值”(OD值)为评价指标,Box-Behnken响应面法优化脱色工艺。结果最佳提取工艺为液料比43∶1,浸提温度79℃,浸提时间134 min,多糖得率为(2.79±0.05)%。最佳脱色工艺为上样质量浓度1.6 mg/mL,上样体积1 mL,洗脱体积流量2 BV/h,OD值为0.56。结论该方法稳定可靠,可用于新疆紫草多糖的提取和脱色。

关键词：新疆紫草多糖提取工艺脱色工艺 Box-Behnken响应面法

苦参总黄酮改善非酒精性脂肪肝的作用机制及斑马鱼实验验证

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中国组织工程研究 2025年第14期29卷 2969-2978页

作者：古玉凤邓丙英李倪仁曾译萱鲁思凡朱晨陈磊刘怡南方医科大学中医药学院广州中医药大学第二附属医院药学部广东药科大学中药学院广东省中药制剂重点实验室广东省中西医结合防治情志病基础研究卓越中心

背景：苦参总黄酮具有抗炎、调节免疫、抗氧化、抗肝损伤等多种药理作用，其对非酒精性脂肪肝的治疗效果和作用机制尚不明确。目的：利用生物信息学、网络药理学方法及斑马鱼实验验证苦参总黄酮治疗非酒精性脂肪肝的作用机制。方法：构... 详细信息

背景：苦参总黄酮具有抗炎、调节免疫、抗氧化、抗肝损伤等多种药理作用，其对非酒精性脂肪肝的治疗效果和作用机制尚不明确。目的：利用生物信息学、网络药理学方法及斑马鱼实验验证苦参总黄酮治疗非酒精性脂肪肝的作用机制。方法：构建非酒精性脂肪肝斑马鱼模型，观察苦参总黄酮治疗后斑马鱼肝脏脂质累积情况、病理形态改变，以及脂质累积、炎症基因的表达变化。通过TCMSP、Swiss Target Prediction、Bat-man数据库获取苦参总黄酮活性成分与非酒精性脂肪肝相关靶点；利用STRING数据库进行蛋白互作网络分析，GO功能富集和KEGG通路富集分析。基于GSE33814数据集，筛选出“苦参总黄酮-非酒精性脂肪肝”交集靶点的差异表达基因并运用R4.3.2软件进行相关性分析、受试者操作特征曲线分析，通过验证集GSE89632验证核心基因；RT-qPCR和Western blot实验验证核心通路相关基因和蛋白表达。结果与结论：(1)苦参总黄酮能够改善非酒精性脂肪肝斑马鱼肝脏脂质累积，显著抑制斑马鱼脂质和转氨酶水平的升高(P 实验结果表明苦参总黄酮能够抑制非酒精性脂肪肝斑马鱼JAK2/STAT3信号通路的激活。以上结果表明，苦参总黄酮通过调节JAK2/STAT3信号通路减轻炎性反应，抑制脂质累积从而改善非酒精性脂肪肝。

关键词：苦参总黄酮非酒精性脂肪肝斑马鱼网络药理学生物信息学 JAK2 STAT3

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基于网络药理学和生物信息学探讨薏苡附子败酱散调节铁死亡治疗溃疡性结肠炎的作用

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基因组学与应用生物学 2024年第8期43卷 1455-1468页

作者：李倪仁曾译萱邓丙英鲁思凡古玉凤朱晨陈磊刘怡南方医科大学中医药学院广东省中药制剂重点实验室广东省中西医结合防治情志病基础研究卓越中心广州中医药大学第二附属医院药学部广东药科大学中药学院

本研究旨在运用生物信息学方法探讨薏苡附子败酱散(Yiyi Fuzi Baijiangsan, YYFZBJS)调节铁死亡治疗溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)的潜在分子机制。运用网络药理学方法获取薏苡附子败酱散的成分与作用靶点，随后获取其与UC疾病... 详细信息

本研究旨在运用生物信息学方法探讨薏苡附子败酱散(Yiyi Fuzi Baijiangsan, YYFZBJS)调节铁死亡治疗溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)的潜在分子机制。运用网络药理学方法获取薏苡附子败酱散的成分与作用靶点，随后获取其与UC疾病基因和铁死亡相关基因的交集，通过GSE206285数据集提取出“YYFZBJS-UC-铁死亡”差异基因的表达情况，并进行相关性分析、 KEGG与GO分析。使用LASSO与SVM机器学习两种方法，进一步筛选关键差异基因，对其进行基因集富集分析(gene set enrichment analysis, GSEA)和基因集变异分析(gene set variation analysis, GSVA),以评价这些基因在不同表达时作用途径的差别。将关键基因进行免疫浸润分析以及相关性分析，建立ceRNA调控图，探究lncRNA-miRNA-mRNA之间的联系，并通过GSE87473验证集验证上述基因的准确性，使用Cytoscape 3.9.1软件进行degree排序；使用分子对接进一步验证相关靶点的可靠性。共获得27个“YYFZBJS-UC-铁死亡”差异基因，筛选发现关键基因与M0巨噬细胞、 M2巨噬细胞、中性粒细胞等具有密切联系；验证集发现其中BRD2、HIF-1A、IDH1、PPARG、PPARA仍然具有显著性差异，degree排序得到前三的基因HIF-1A、PPARG、NQO1,分子对接结果显示YYFZBJS有效成分豆甾醇、苯甲酰乌头原碱、异红草苷与HIF-1A、PPARG具有稳定的结合效应。综上，本研究发现薏苡附子败酱散调节铁死亡治疗UC的机制可能是通过调控HIF-1A、PPARG等基因发挥药效作用，本研究为UC的治疗提供了新的参考。

关键词：薏苡附子败酱散溃疡性结肠炎铁死亡生物信息学网络药理学分子对接

中药药理学贯通性实验的设计及应用——以凉膈散为例

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中国中医药现代远程教育 2024年第8期22卷 149-152页

作者：余景滔姜丽方小川卢子滨余林中陈育尧曹惠慧区锦莹刘俊珊南方医科大学中医药学院广东省中药制剂重点实验室广东广州510515

目的中药药理学是以传统中药学与现代药理学为主体的新兴交叉学科,迄今国内尚未有完善的中药药理学贯通性实验教学方案。方法结合现有基础教学条件及中药药理学教学团队的教学改革实践经验,选择凉膈散(LGS)进行实验设计。结果建立了... 详细信息

目的中药药理学是以传统中药学与现代药理学为主体的新兴交叉学科,迄今国内尚未有完善的中药药理学贯通性实验教学方案。方法结合现有基础教学条件及中药药理学教学团队的教学改革实践经验,选择凉膈散(LGS)进行实验设计。结果建立了完善的贯通性实验教学方案,并选取中药学和中药制药2个专业学生进行教学实践。结论此研究为中医药院校及综合性院校的中药学专业进行实验教学改革提供模板及思路。

关键词：中药药理学贯通性实验设计应用凉膈散

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中药苦味成分的发现策略与方法研究进展

中草药 2024年第5期55卷 1751-1760页

作者：刘惠宋娇林俊芝苏娟柯秀梅仇敏杨明张定堃成都中医药大学药学院西南特色中药资源国家重点实验室四川成都611137 成都中医药大学附属医院代谢性疾病中医药调控四川省重点实验室四川成都610072 重庆医科大学药学院重庆400016 江西中医药大学现代中药制剂教育部重点实验室江西南昌330004

苦味成分不仅是中药主要的呈味物质,也是重要的药效物质。但由于中药苦味成分的多样性与结构相似性,苦味成分的靶向分离与示踪难度大,单一苦味成分与中药整体呈味特征有偏差,使很多中药苦味成分仍有待深入解析。通过对传统的逐级分离与... 详细信息

苦味成分不仅是中药主要的呈味物质,也是重要的药效物质。但由于中药苦味成分的多样性与结构相似性,苦味成分的靶向分离与示踪难度大,单一苦味成分与中药整体呈味特征有偏差,使很多中药苦味成分仍有待深入解析。通过对传统的逐级分离与分析方法进行总结,介绍了推测苦味来源、定位苦味部位、鉴定苦味成分、验证苦味成分等研究方法;梳理了基于本草学知识、基于苦味成分结构相似性、基于苦味受体结合等苦味成分发现策略及数据挖掘、计算机辅助、生物靶向定位等新技术;提出了谱-味关联分析等苦味成分发现新思路,为更加快速、精准地发现中药苦味成分,推动中药苦味成分解析进程。

关键词：中药苦味成分发现策略苦味信息苦味受体技术方法

淫羊藿素调控巨噬细胞极化治疗肝内胆管癌的药效作用及机制初探

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药学学报 2024年第8期59卷 2227-2236页

作者：王婧雯李珍黄秀勤徐子婧耿嘉豪许燕瑜梁天祎湛小燕康利平王伽伯宋鑫华南方医科大学中医药学院广东广州510000 首都医科大学中医药学院北京100071 解放军总医院第五医学中心北京100071 道地药材品质保障与资源持续利用全国重点实验室北京100070

肝内胆管癌(intrahepatic cholangiocarcinoma, ICC)发病率持续攀升,目前尚无有效治疗药物。免疫微环境在ICC发展中扮演重要角色,是当前研究热点。淫羊藿素(icaritin, ICA)是治疗晚期肝细胞癌的创新中药,被认为有潜在的免疫调控抗肿瘤作... 详细信息

肝内胆管癌(intrahepatic cholangiocarcinoma, ICC)发病率持续攀升,目前尚无有效治疗药物。免疫微环境在ICC发展中扮演重要角色,是当前研究热点。淫羊藿素(icaritin, ICA)是治疗晚期肝细胞癌的创新中药,被认为有潜在的免疫调控抗肿瘤作用,与中医“扶正”治疗肿瘤的认识潜在相合。然而, ICA是否可用于ICC治疗尚未见研究报道。为此,本研究选取免疫系统完整的原位ICC小鼠模型sgp19/kRas,首次在体内评估了ICA治疗ICC的药效,并通过流式细胞术分析ICA对ICC小鼠肿瘤免疫微环境的影响[本实验所有动物实验均获得首都医科大学动物伦理委员会(中国北京)批准,批准号:AEEI-2023-138]。本研究应用100 mg·kg^(-1)ICA灌胃治疗sgp19/kRas ICC原位小鼠模型,结果显示, ICA治疗3周后能够显著抑制sgp19/kRas ICC小鼠模型的肿瘤生长及肿瘤细胞增殖。通过流式细胞术分析ICA对ICC小鼠肿瘤免疫微环境的影响,结果表明, ICA治疗后能够显著降低M2型巨噬细胞占比,并且显著增加CD3^(+)CD4^(+)T细胞的数量。体外实验阐明ICA能促进巨噬细胞向M1型巨噬细胞极化,抑制其向M2型巨噬细胞极化。此外,转录组学分析结果提示, ICA能够增强Toll样受体9 (TLR9)的表达,影响巨噬细胞一氧化氮代谢合成途径及膜受体相关活性,发挥其巨噬细胞极化调节功能。综上,本研究发现ICA治疗能显著延缓sgp19/kRas ICC小鼠肿瘤进展。机制上, ICA可能通过上调TLR9受体表达水平,促进巨噬细胞向M1细胞的极化,改变肿瘤免疫微环境,进而达到抗ICC的作用。

关键词：肝内胆管癌淫羊藿素免疫微环境巨噬细胞极化 Toll样受体9