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抗HPA-3a抗体所致新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜一例并文献复习

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中华血液学杂志 2013年第1期34卷 45-48页

作者：周燕钟周琳李丽兰申卫东刘金莲吴国光南宁中心血站南宁输血医学研究所 530003

目的探讨抗血小板特异性抗原（HPA）-3a抗体所致新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜（NAITP）的诊断和治疗。方法采用多重PCR及基因测序技术检测1例出血伴血小板减少新生儿及其父母HPA-1～21bw系统基因型，采用流式细胞术（FCM）和血小... 详细信息

目的探讨抗血小板特异性抗原（HPA）-3a抗体所致新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜（NAITP）的诊断和治疗。方法采用多重PCR及基因测序技术检测1例出血伴血小板减少新生儿及其父母HPA-1～21bw系统基因型，采用流式细胞术（FCM）和血小板抗原单克隆抗体特异性免疫固定检测技术（MAIPA）检测患儿及其母亲血清血小板特异性抗体并进行特异性鉴定。结果患儿出生后2h出现全身多发皮下出血点、血尿及咖啡色呕吐物。基因分型显示患儿为HPA-3ab、母亲为HPA-3bb、父亲为HPA-3aa；患儿及母亲血清中均含与患儿父亲血小板反应的特异性抗体，经MAIPA技术鉴定为抗HPA-3a抗体。结论发现1例抗HPA-3a抗体所致NAITP患者，通过临床特征分析为该病的诊断和治疗提供借鉴与参考。

关键词：血小板减少,新生儿同种免疫性流式细胞术抗原,人血小板聚合酶链反应

广西壮族人群HLA-A、-B、-C、-DRB1、-DQB1高分辨等位基因多态性和单倍型的研究

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中国实验血液学杂志 2020年第4期28卷 1397-1405页

作者：裴永峰余梅黄惠妮陈洁润李恒聪南宁中心血站南宁输血医学研究所广西南宁530007

目的:分析广西壮族人群人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)-A、-B、-C、-DRB1、-DQB1等位基因和单倍型的特点。方法:采用多聚酶链式反应-基于测序的分型技术(polymerase chain reaction-sequence based typing,PCR-SBT),对广西地区350名壮族非亲缘个体进行HLA-A、-B、-C、-DRB1、-DQB1测序分析,使用Arlequin软件(3.***.2.2)计算HLA等位基因频率、单倍型频率,使用MEGA v6.0软件构建系统发生树和用SPSS软件做主成分分析。结果:该人群5个位点,只有HLA-A和DRB1位点的等位基因分布偏离Hardy-Weinberg平衡(P<0.05)。总共检出19种HLA-A等位基因,42种HLA-B等位基因,22种HLA-C等位基因,25种HLA-DRB1等位基因和15种HLA-DQB1等位基因。等位基因频率最高的分别是A*11:01(28.57%)、B*46:01(14.00%)、C*01:02(18.43%)、DRB1*16:02(15.71%)和DQB1*05:02(35.00%),最常见的5位点单倍型是A*33:03-C*03:02-B*58:01-DRB1*03:01-DQB1*02:01(6.86%),系统发生树结果表明该人群与南方汉族人群亲缘关系较近。结论:广西壮族人群HLA-A、-B、-C、-DRB1、-DQB1等位基因和单倍型有较高的遗传多态性。

关键词：人类白细胞抗原基因频率单倍体型广西壮族多态性

广西地区8例类孟买血型个体的血清学鉴定及FUT1基因突变分析

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中国实验血液学杂志 2021年第4期29卷 1318-1324页

作者：刘金莲刘学军马婷婷陈洁润李丽兰南宁输血医学研究所南宁中心血站广西南宁530007

目的:对广西地区8例类孟买血型个体进行血清学及分子生物学背景分析。方法:采用血型血清学方法对研究标本进行血型鉴定,用分子生物学方法进行基因型分析,包括以PCR-SSP方法进行ABO基因分型和测序,对决定H抗原表达的FUT1基因进行分析。结... 详细信息

目的:对广西地区8例类孟买血型个体进行血清学及分子生物学背景分析。方法:采用血型血清学方法对研究标本进行血型鉴定,用分子生物学方法进行基因型分析,包括以PCR-SSP方法进行ABO基因分型和测序,对决定H抗原表达的FUT1基因进行分析。结果:8例类孟买血型中,4例为B_(m)^(h),4例为A_(m)^(h)。FUT1基因测序结果显示,6例为h3h3突变[c.658C>T(***220Cys)突变纯合子],1例为h^(832)h^(832)突变[c.832G>A(***278Asn)突变纯合子],1例为h^(328)h3突变[c.328G>A(***110Thr)突变杂合子合并c.658C>T(***220Cys)突变杂合子]。结论:类孟买血型存在多种分子遗传机制,在本研究中,广西地区类孟买血型个体中发现导致类孟买血型的FUT1基因突变主要包括h3、h^(328)和h^(832) 3种,其中以h3突变最多见。

关键词：类孟买血型血型血清学 FUT1基因基因突变

国内首例抗HPA-5b引发的新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜的检测、诊断及分析

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中国实验血液学杂志 2014年第2期22卷 399-402页

作者：周燕钟周琳李丽兰申卫东吴国光南宁中心血站南宁输血医学研究所广西南宁530007

本研究旨在探讨抗HPA-5b抗体引发的新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜(NAITP)的实验检测及临床诊断。临床监测患儿血小板计数及其他临床表现;多重PCR及DNA测序检测患儿及其父母HPA-1-21bw系统基因型;流式细胞术(FCM)和血小板抗原单克隆... 详细信息

本研究旨在探讨抗HPA-5b抗体引发的新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜(NAITP)的实验检测及临床诊断。临床监测患儿血小板计数及其他临床表现;多重PCR及DNA测序检测患儿及其父母HPA-1-21bw系统基因型;流式细胞术(FCM)和血小板抗原单克隆抗体特异性免疫固定检测技术(MAIPA)检测及鉴定患儿及其母亲血清中的血小板特异性抗体。结果表明:患儿临床症状较轻,基因分析显示患儿为HPA-5ab,父亲为HPA-5ab,母亲为HPA-5aa;患儿母亲血清中含与父亲血小板反应的血小板特异性抗体为抗HPA-5b抗体。结论:该病例为抗HPA-5b抗体引起的新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜。

关键词： NAITP FCM MAIPA 多重PCR 诊断

汉族、壮族人群人类粒细胞抗原HNA-1~5的基因多态性分布

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免疫学杂志 2015年第1期31卷 47-52页

作者：李丽兰李恒聪申卫东李彬吴国光南宁输血医学研究所 530007 南宁中心血站 530007

目的通过人群的HNA基因多态性的调查,了解人群各HNA抗原的分布情况,推测该人群中可能参与免疫性粒细胞减少症的主要HNA抗原。方法本研究采用序列特异性引物聚合酶链反应（PCR-SSP）方法对无血缘关系的647名健康汉族人和328名健康壮族人... 详细信息

目的通过人群的HNA基因多态性的调查,了解人群各HNA抗原的分布情况,推测该人群中可能参与免疫性粒细胞减少症的主要HNA抗原。方法本研究采用序列特异性引物聚合酶链反应（PCR-SSP）方法对无血缘关系的647名健康汉族人和328名健康壮族人进行HNA-1~5的基因分型和多态性研究,调查了解汉族和壮族人群中HNA-1~5的基因频率多态性分布。结果在HNA-1系统,HNA-1a是汉族（0.6893）和壮族（0.7454）人群的高频率等位基因,与欧洲、南美洲、非洲等以HNA-1b为高频率等位基因的地区人群有着明显的差异,汉族和壮族人群中均未发现HNA-1c等位基因个体存在;在HNA-2 SNP 42C/G中,42C是汉族（0.697 1）和壮族（0.724 1）人群中频率较高的等位基因;在HNA-3,HNA-3a和3b基因频率在汉族和壮族人群中分别为0.687 0/0.313 0和0.739 3/0.260 7,汉、壮族人群的HNA-3等位基因频率分布与德国及土耳其等人群无差异;在HNA-4中,HNA-4b是汉族（0.007 0）和壮族（0.019 8）人群的罕见基因,在这2个人群中均未发现HNA-4bb纯合子基因型个体;在HNA-5中,HNA-5a和5b等位基因频率在汉族和壮族人群分别为0.819 9/0.180 1和0.783 5/0.216 5。汉族与壮族人群HNA各等位基因频率分布比较,除HNA-2,-5的等位基因频率分布无差别外,HNA-1,-3,-4的各等位基因频率分布均不同。结论与其它地区人群比较,汉族、壮族人群HNA基因频率分布均有着各自的独特特征,本研究数据将有助于我们了解汉族和壮族人群中HNA的免疫学特征。

关键词：人类粒细胞抗原(HNA) HNA等位基因 PCR-SSP 汉族壮族

第2胎抗HPA-3a抗体可使新生儿同种免疫血小板减少症患儿病情加重

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临床检验杂志 2014年第10期32卷 753-755页

作者：周燕申卫东刘金莲钟周琳李丽兰吴国光南宁中心血站南宁输血医学研究所南宁530007

目的观察1例第2胎抗HPA-3a抗体致新生儿同种免疫血小板减少症（NAIT）患儿的病情与治疗情况。方法观察患儿症状和体征,并记录血小板（PLT）;筛查并鉴定患儿及其母亲血清中血小板特异性抗体;检测患儿及其父母HPA-1~21bw系统基因分型;... 详细信息

目的观察1例第2胎抗HPA-3a抗体致新生儿同种免疫血小板减少症（NAIT）患儿的病情与治疗情况。方法观察患儿症状和体征,并记录血小板（PLT）;筛查并鉴定患儿及其母亲血清中血小板特异性抗体;检测患儿及其父母HPA-1~21bw系统基因分型;监测患儿体内抗体效价波动情况并筛选配合性血小板给予输注治疗。结果患儿出生后15 min内出现瘀斑、皮下出血点,脑部B超提示左侧室管膜下出血。患儿及母亲血清中均含与患儿父亲血小板反应的特异性抗体,经鉴定为抗HPA-3a抗体。HPA-1~21bw系统基因分析显示患儿与其父母HPA-3不相容：母亲为HPA-3bb、父亲为HPA-3aa、患儿为HPA-3ab。患儿共输注了4次相容血小板（HPA-3bb）,并给予静脉输注γ球蛋白及类固醇激素治疗,于出生后第29天PLT恢复正常后出院。结论第2胎抗HPA-3a抗体致NAIT患儿经对症治疗及输血治疗PLT恢复正常后出院,但临床表现及诊治过程较该产妇上一个患儿严重及复杂。

关键词：新生儿血小板减少新生儿同种免疫血小板减少症人类血小板抗原 HPA-3a

抗-c、抗-E、抗-Jk^(a)和抗-Fy^(a)复杂联合抗体的鉴定

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中国实验血液学杂志 2023年第5期31卷 1475-1480页

作者：马婷婷刘学军黄宝甲周燕莫秋红钟周琳刘金莲南宁输血医学研究所南宁中心血站广西南宁530007

目的:探讨多种血型血清学方法的联合运用在复杂抗体鉴定中的作用。方法:采用盐水法和微柱凝集法检测患者的血型抗原,采用盐水法筛选及鉴定患者血清中的Ig M类抗体,采用凝聚胺法、抗球蛋白法、微柱凝集法、酶法和吸收放散法筛选及鉴定Ig ... 详细信息

目的:探讨多种血型血清学方法的联合运用在复杂抗体鉴定中的作用。方法:采用盐水法和微柱凝集法检测患者的血型抗原,采用盐水法筛选及鉴定患者血清中的Ig M类抗体,采用凝聚胺法、抗球蛋白法、微柱凝集法、酶法和吸收放散法筛选及鉴定Ig G类抗体。结果:检出1例患者血型为B型/CCDee/Jk(a-b+)/Fy(a-b+)。患者血清与谱细胞反应,在盐水介质中呈抗-E格局;在微柱凝集卡中全阳性,但与经木瓜酶处理的谱细胞反应出现2个阴性。参照格局表考虑存在抗-c、E和抗-Jk^(a)抗体,以及1种易被木瓜酶破坏的血型抗原对应的抗体。选用特定表型的红细胞对患者血清进行吸收放散试验,检出Ig G类抗-c、抗-E、抗-Jk^(a)和抗-Fy^(a)抗体。结论:联合运用多种血型血清学方法证实该患者血清中存在Ig M类抗-E和Ig G类抗-c、抗-E、抗-Jk^(a)及抗-Fy^(a)联合抗体。

关键词：血型血清学方法抗体鉴定抗-c 抗-E 抗-Jk^(a) 抗-Fy^(a)

位于CD36基因剪切位点的2个新突变及其导致CD36缺失的分子基础

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中国实验血液学杂志 2020年第6期28卷 2056-2065页

作者：李丽兰陈洁润蒋丽红钟周琳黎海燕周燕卢芳吴国光南宁输血医学研究所广西南宁530003 南宁中心血站广西南宁530003

目的:对在广西人群中发现的2个位于CD36剪切位点的新基因突变,以及它们导致CD36缺失的分子基础和在人群中的发生率进行研究。方法:对在广西人群中发现的2例CD36缺失个体(HHC和WGM)使用DNA测序和cDNA克隆测序,检测他们的CD36外显子序列及... 详细信息

目的:对在广西人群中发现的2个位于CD36剪切位点的新基因突变,以及它们导致CD36缺失的分子基础和在人群中的发生率进行研究。方法:对在广西人群中发现的2例CD36缺失个体(HHC和WGM)使用DNA测序和cDNA克隆测序,检测他们的CD36外显子序列及mRNA蛋白编码区序列,对所发现的CD36 mRNA异常转录本建立真核表达细胞株并用Western blot实验验证异常转录本对CD36表达的影响。对所发现的新突变基因建立DNA PCR-SSP基因分型方法,在广西地区的110名CD36缺失个体群和广西地区随机的296名人群间展开人群分布调查。结果:在HHC和WGM个体中,发现了CD36剪切位点新突变CD36 c.430-1G>C,且在WGM个体中还发现了CD36 c.1006+2T>G的剪切位点新突变。cDNA克隆测序显示,CD36 c.430-1G>C可导致c.429_430ins[430-17_430-2;C](***144fsTer1)和c.430_609del(***144_Pro203del,GenBank注册号:HM217023.1)2种CD36 mRNA异常转录本的产生,而CD36 c.1006+2T>G可导致c.819_1006del(***274GlufsTer16)(GenBank注册号:HM217025.1)CD36 mRNA异常转录本的产生。通过建立的真核表达细胞株及Western blot实验验证了以上3种异常转录本均可导致CD36表达缺失。对所发现的2个剪切位点突变基因展开的人群发生率的研究显示,在110名CD36缺失个体群和随机的296名人群中,CD36 c.430-1G>C突变发生率分别为10.91%(12/110)和1.35%(4/296),而CD36 c.1006+2T>G突变的发生率分别为2.73%(3/110)和0(0/296)。结论:本研究发现了2个位于CD36基因剪切位点的新突变,初步阐明了它们导致CD36缺失的分子基础及在广西人群中的分布特征,为中国人群CD36缺失的分子机制及特征研究提供了实验和理论依据。

关键词： CD36缺失剪切位点突变分子机制及特征人群分布

1例造血干细胞捐献者HLA新等位基因A~*33∶88家系调查及A~*33∶88模拟蛋白质三级空间结构分析

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山东医药 2017年第7期57卷 23-26页

作者：裴永峰李恒聪黄惠妮吴国光南宁中心血站输血医学研究所南宁530007

目的对1例造血干细胞捐献者HLA新等位基因A*33:88进行家系调查,初步分析A*33:88模拟蛋白质三级空间结构。方法 1例造血干细胞捐献者(先证者)及其父母,抽取先证者及父母静脉血5 m L,检测先证者及其父母ABO、Rh红细胞血型。取抗凝全血200... 详细信息

目的对1例造血干细胞捐献者HLA新等位基因A*33:88进行家系调查,初步分析A*33:88模拟蛋白质三级空间结构。方法 1例造血干细胞捐献者(先证者)及其父母,抽取先证者及父母静脉血5 m L,检测先证者及其父母ABO、Rh红细胞血型。取抗凝全血200μL,提取DNA后采用多聚酶链式反应-基于测序的分型技术(PCR-SBT)方法进行HLA分型(HLA-A、HLA-B、HLA-DRB1位点分型)。采用SWISS-MODEL方法,以同源性最高的HLA-A*3α链为模板进行构建,得到模拟的A*33:88蛋白质三级结构并进行分析。结果先证者及其父母血型均为O型,Rh血型均为D/Cc Ee,符合遗传规律。先证者HLA-A位点分别为A*11∶01、A*33∶88,先证者父亲为A*33∶03、A*33∶03,先证者母亲为A*11∶01、A*11∶01,A*33∶88和A*33∶03∶01的差异是在第3外显子475位的G>A,密码子135由GCG变为ACG,编码的氨基酸由丙氨酸(A)转变为苏氨酸(T)。A*33∶88模拟蛋白质三级空间结构与A*33∶03∶01模拟蛋白质三级空间结构相比,编码氨基酸在135位由非极性疏水氨基酸(A)转变为极性亲水氨基酸(T),改变的氨基酸位于抗原肽结合区α-螺旋(132-178)位置,此位置为抗原(多肽)结合凹槽的侧壁。结论 HLA新等位基因A*33:88(HWS10022752)不由先证者母方突变所致,可能由父方产生突变所致,该突变能正常遗传给后代。A*33:88的蛋白质模拟三级空间结构分析,显示替代氨基酸位于抗原肽结合区α-螺旋上。

关键词：人类白细胞抗原等位基因人类白细胞抗原新等位基因 A*33 人类白细胞抗原基因