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BASP1功能与人类疾病的研究进展

中国动脉硬化杂志 2024年第5期32卷 444-450页

作者：伍晓棋王丹玲南华大学衡阳医学院基础医学院细胞与遗传研究所湖南省衡阳市421001 南华大学衡阳医学院附属长沙中心医院湖南省长沙市410004

脑膜黏附信号蛋白1(BASP1)最初在大鼠的大脑中被发现,广泛表达于大脑、心脏、口腔、皮肤、胃、肾脏等多个人体器官。BASP1蛋白序列在进化上保守,以固有无序蛋白(IDP)的形式参与了生物体内细胞信号传递、细胞迁移、细胞凋亡、基因转录等... 详细信息

脑膜黏附信号蛋白1(BASP1)最初在大鼠的大脑中被发现,广泛表达于大脑、心脏、口腔、皮肤、胃、肾脏等多个人体器官。BASP1蛋白序列在进化上保守,以固有无序蛋白(IDP)的形式参与了生物体内细胞信号传递、细胞迁移、细胞凋亡、基因转录等进程,与神经发育、肾脏发育、生殖细胞形成等一系列病理生理过程密切相关,在糖脂代谢疾病和肿瘤类疾病中BASP1发挥了极其重要的作用,被认为是极具潜力的疾病治疗靶点及分子诊断标志物。

关键词：脑膜黏附信号蛋白1 固有无序蛋白糖脂代谢疾病肿瘤

牛磺熊去氧胆酸和熊胆粉对神经炎症的保护效果评价

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中国生物工程杂志 2024年

作者：葛紫霏李瑞莲未金花张毓宸杜昱光王倬王冰广西大学医学院中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室生物药制备与递送重点实验室(中国科学院)

熊胆粉是从黑熊胆囊中提取的一种传统中药，牛磺熊去氧胆酸（TUDCA）被认为是熊胆粉中发挥活性的主要成分及重要药物质量标准。另一方面，TUDCA在熊胆粉中的含量大约只占20%～30%，这引起了对熊胆粉其他成分功能活性以及其与TUDCA在生... 详细信息

熊胆粉是从黑熊胆囊中提取的一种传统中药，牛磺熊去氧胆酸（TUDCA）被认为是熊胆粉中发挥活性的主要成分及重要药物质量标准。另一方面，TUDCA在熊胆粉中的含量大约只占20%～30%，这引起了对熊胆粉其他成分功能活性以及其与TUDCA在生物活性上是否存在差异的疑问。本研究将探讨熊胆粉和TUDCA对神经炎症的改善作用。分别用不同浓度的TUDCA和熊胆粉对小胶质细胞BV-2进行预处理，再通过LPS诱导BV-2的炎症反应，通过qRT-PCR和Western Blot检测BV-2细胞中炎症因子和相关炎症通路中关键蛋白表达的变化。在动物实验中，分别用TUDCA和熊胆粉连续灌胃处理C57BL/6J小鼠21天，用LPS连续腹腔注射7天，通过对小鼠脑组织病理切片和炎症因子表达水平的检测评价TUDCA和熊胆粉对小鼠神经炎症的抑制作用。实验结果显示，TUDCA和熊胆粉都能有效抑制神经炎症。在相同剂量作用下，TUDCA和熊胆粉在抑制神经炎症的效力没有显著差异，这表明熊胆粉的其他活性成分可能与TUDCA共同在抑制神经炎症过程中发挥了不可替代的作用。因此，熊胆粉中不同成分的具体功效以及它们之间的协同作用关系，值得进一步深入研究。此项研究不仅拓展了我们对熊胆粉作用机制的认识，也为开发新型抗神经炎症药物提供了有价值的参考。

关键词：熊胆粉牛磺熊去氧胆酸脂多糖神经炎症

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磁性纳米材料与磁场效应加速骨损伤修复

中国组织工程研究 2025年第4期29卷 827-838页

作者：肖放黄雷王琳华中科技大学同济医学院附属协和医院组织工程与再生医学研究中心湖北省武汉市430022 华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科湖北省武汉市430022

背景:磁性纳米材料具有促进干细胞成骨分化和抑制破骨细胞形成等生物活性,并在磁场协同下有效促进损伤骨组织愈合,在骨损伤修复中具有广阔的应用前景。目的:综述磁性纳米材料与磁场促进骨修复的作用机制,及其在骨损伤修复领域的研究进... 详细信息

背景:磁性纳米材料具有促进干细胞成骨分化和抑制破骨细胞形成等生物活性,并在磁场协同下有效促进损伤骨组织愈合,在骨损伤修复中具有广阔的应用前景。目的:综述磁性纳米材料与磁场促进骨修复的作用机制,及其在骨损伤修复领域的研究进展。方法:在PubMed和Web of Science数据库中进行相关文献检索,检索词为“magnetic nanomaterials,magnetic field,bone repair,bone tissue engineering,stem cell,osteoblast,osteoclast”。检索文献时限为2003-2023年,将其进行筛选和分析,最终纳入98篇文献进行分析。结果与结论:①磁性纳米材料具有促成骨细胞分化、抑制破骨细胞形成和调节免疫微环境等生物效应;此外,磁性纳米材料可调节组织工程支架的机械性能和表面形貌等理化性质,并赋予其磁性,有利于调控干细胞的黏附、增殖与成骨分化。②磁场具有调控细胞内多条信号通路发挥促成骨细胞分化、抑制破骨细胞形成和刺激血管生成等生物学效应,从而加速损伤的骨组织愈合。③磁性纳米材料与磁场的联合应用,通过激活机械转导、增加细胞内磁性纳米粒子含量、增强微磁场效应等加速骨损伤修复,为骨组织工程的研究提供了新的思路。④磁场在临床骨折、骨质疏松症和骨关节炎疾病的治疗中展现出确切疗效,促进骨组织生长、减轻骨质流失和缓解疼痛,改善患者的生活质量。⑤磁性纳米材料与磁场在骨损伤修复与再生中应用潜力大,但磁性纳米材料、磁场和细胞之间的相互作用机制尚未完全阐明,而且磁场调控细胞内分子事件的关键参数,包括磁场类型、强度、频率、作用时间和作用方式等,以及特定磁场对骨细胞的精确生物效应和潜在机制仍有待明确。⑥未来需要进一步关注其对损伤组织微环境中的破骨细胞、神经、血管和免疫细胞的影响,而关于磁性材料用于人体安全性问题,有待系统性研究其分布、代谢以及急性和慢性毒性等。

关键词：磁性纳米材料磁场骨修复骨组织工程干细胞成骨细胞破骨细胞

不同转染方式用于modRNA转染人脂肪干细胞的初步研究

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组织工程与重建外科 2024年第3期20卷 275-284页

作者：李凯祥罗润娇于新迪刘明璐卢婷婷王湘莹王会景付炜王伟上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心胸心外科上海市200127 上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心儿科转化医学研究所上海市200127 上海市组织工程研究重点实验室上海市200011

目的筛选更优的转染方式,探讨其用于modRNA转染人脂肪干细胞(Human adipose-derived stem cell,hADSC)并表达特定蛋白的可行性。方法分别采用2种电转染方式Optimization4及Optimization6和脂质体转染试剂RNAiMAX,将modGFP转染到hADSC中去。应用流式细胞分析仪和荧光显微镜分析,比较不同转染方式的转染效率和蛋白表达情况;通过细胞死活染色,评估转染后24 h细胞的存活情况;将更优的电转方式与RNAiMAX用于modVEGFA转染hADSC,收集其培养24 h的上清用于人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,hUVECs)成管和transwell迁移实验,并与基质胶混合后注射于裸鼠皮下,通过大体观、HE染色及免疫荧光染色,分析其在体内促进血管再生的情况。结果Optimization6电转转染hADSC的效率为87.75%±1.52%,高于Optimization4转染组(80.85%±1.48%)和RNAiMAX转染组(81.80%±1.08%),且荧光显微镜观察及流式分析均表明电转染方式的蛋白表达优于RNAiMAX脂质体转染。3种转染方式对细胞的毒性均较小,无统计学差异。与RNAiMAX相比,Optimization6电转能更高效地介导modVEGFA转染hADSC,能更好地促进体外hUVECs成管和迁移,皮下血管再生的效果也更佳。结论相比于RNAiMAX和Optimization4电转染,Optimization6电转方式转染hADSC的效率更高,蛋白表达高效,且能在体内外快速高效促进血管再生。

关键词：化学合成修饰信使核糖核酸基因表达电转染脂质体人脂肪干细胞

S波段和X波段微波单一和复合暴露致雄性大鼠生殖损伤差异及机制研究

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军事医学 2024年第8期 565-571页

作者：李艳阳庞悦悦赵黎王浩宇门俊琦姚斌伟彭瑞云南华大学衡阳医学院军事医学研究院研究生协作培养基地军事科学院军事医学研究院

目的研究2.856和9.375 GHz微波单一和复合暴露对雄性大鼠生殖器官的损伤差异和机制。方法 40只雄性Wistar大鼠随机分为sham组、S10组、X10组和SX5组。S10组和X10组分别采用2.856和9.375 GHz微波平均功率密度10 mW/cm2暴露大鼠6 min,SX... 详细信息

目的研究2.856和9.375 GHz微波单一和复合暴露对雄性大鼠生殖器官的损伤差异和机制。方法 40只雄性Wistar大鼠随机分为sham组、S10组、X10组和SX5组。S10组和X10组分别采用2.856和9.375 GHz微波平均功率密度10 mW/cm2暴露大鼠6 min,SX5组采用2.856和9.375 GHz微波平均功率密度5 mW/cm2先后暴露大鼠6 min。暴露后1和7 d检测精子活力、血清性激素，光镜和电镜观察睾丸组织结构及检测氧化应激和能量代谢水平。结果 S10组和X10组暴露后1和7 d，精子活力、睾酮（T）、促卵泡生成激素（FSH）和抑制素B（INHB）下降（P组织生精上皮疏松、生精细胞水肿空化，染色质凝集边移，S10组、X10组较SX5组损伤显著。S10组暴露后1和7 d，睾丸组织超氧化物歧化酶（SOD）活性下降、脂质过氧化物丙二醛（MDA）含量升高（P组织乳酸脱氢酶（LDH）、琥珀酸脱氢酶（SDH）活性和三磷酸腺苷（ATP）含量下降（P<0.05）;SX5组暴露后1 d,LDH和SDH下降（P<0.05）。结论 S波段及X波段微波单一和复合暴露均可致雄性生殖器官损伤；S波段较X波段损伤显著；单频微波高强度暴露比多频微波长时间复合暴露损伤显著；该损伤与氧化应激和能量代谢密切相关。

关键词：微波雄性生殖复合暴露氧化应激能量代谢

双膦酸盐修饰生长分化因子5促进MC3T3-E1细胞的成骨分化

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中国组织工程研究 2024年第3期28卷 373-379页

作者：李立斯张成栋李小龙叶姿妤蒲超杨在君匙峰肖东琴西华师范大学组织修复材料工程技术协同创新中心四川省南充市637000 川北医学院第二临床学院·南充市中心医院组织工程与干细胞研究所四川省南充市637000 西华师范大学生命科学学院四川省南充市637000

背景:生长分化因子5作为骨形态发生蛋白的一员在软骨及骨组织修复领域表现出良好的应用潜力,增强生长分化因子5与骨组织的亲和力是提高蛋白使用效率的关键,因而开发具有骨靶向性的生长分化因子5蛋白具有重要意义。目的:利用双膦酸盐修... 详细信息

背景:生长分化因子5作为骨形态发生蛋白的一员在软骨及骨组织修复领域表现出良好的应用潜力,增强生长分化因子5与骨组织的亲和力是提高蛋白使用效率的关键,因而开发具有骨靶向性的生长分化因子5蛋白具有重要意义。目的:利用双膦酸盐修饰生长分化因子5并探讨改性后蛋白对小鼠成骨前体细胞生长分化的影响。方法:采用化学交联法将生长分化因子5与帕米膦酸钠偶联,得到偶联帕米膦酸钠的生长分化因子5,采用傅里叶变换红外光谱、圆二色谱对其基团及结构进行表征,利用ELISA试剂盒测定生长分化因子5与磷酸钙的结合量以及生长分化因子5的体外释放量,用于表征其体外骨靶向性。将生长分化因子5(对照组)、偶联帕米膦酸钠的生长分化因子5(实验组)分别与成骨前体细胞MC3T3-E1共培养,以单独培养的细胞为空白对照,评价复合物对细胞增殖及分化等的影响。结果与结论:①红外光谱及圆二色谱结果表明,实验成功制备了双膦酸盐/生长分化因子5复合物且蛋白二级结构无显著变化;体外磷酸钙吸附结果表明,偶联帕米膦酸钠后,生长分化因子5与磷酸钙的吸附率增加了约1倍;在半胱氨酸存在条件下,偶联帕米膦酸钠的生长分化因子5的蛋白可释放出来;②CCK-8实验结果显示,实验组培养4,7 d的吸光度值高于对照组、空白对照组(P<0.0001);培养7 d后,实验组碱性磷酸酶表达明显高于对照组、空白对照组(P<0.0001);培养13 d后,实验组钙结节含量明显高于对照组、空白对照组(P<0.0001);qRT-PCR结果检测结果显示,培养7 d后,实验组碱性磷酸酶、骨钙素及Runx2的mRNA表达高于对照组、空白对照组(P<0.01,P<0.001,P<0.0001);③结果表明,双膦酸盐修饰有利于增强生长分化因子5与磷酸钙的结合能力,同时有利于增强其生物活性。

关键词：生长分化因子5 双膦酸盐释放 MC3T3-E1细胞增殖分化

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CD133在胰腺癌组织中的表达及其临床意义

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中国肿瘤生物治疗杂志 2024年

作者：嵇心悦蒋敬庭扬州大学医学院江苏省肿瘤免疫治疗工程技术研究中心苏州大学细胞治疗研究院

目的：探讨CD133（PROM1）在胰腺癌（pancreatic cancer，PC）组织中的表达及其与PC患者临床病理特征和预后的关系。方法：利用GEPIA网站分析TCGA数据库中胰腺癌患者CD133的表达情况。基于TCGA数据库分析人PC组织中PROM1mRNA表达与肿瘤... 详细信息

目的：探讨CD133（PROM1）在胰腺癌（pancreatic cancer，PC）组织中的表达及其与PC患者临床病理特征和预后的关系。方法：利用GEPIA网站分析TCGA数据库中胰腺癌患者CD133的表达情况。基于TCGA数据库分析人PC组织中PROM1mRNA表达与肿瘤干细胞家族基因的相关性，利用免疫组织化学（immunohistochemistry，IHC）染色技术研究CD133在PC组织中的表达及其临床意义。用Wilcoxon秩和检验分析PC组织及其癌旁组织中CD133表达水平的差异，用卡方检验分析PC组织中CD133的表达与临床病理特征之间的关系，用Kaplan-Meier法及Log-rank检验分析CD133不同表达水平的生存差异，拟合Cox模型评价不同指标的预后价值。用风险比（hazard ratio，HR）及95%置信区间（95%CI）评估CD133表达水平与胰腺癌患者死亡风险的关联强度。结果：TCGA数据库分析显示，与癌旁组织相比，CD133在胰腺癌组织中的表达显著上调（P组织中PROM1mRNA表达水平与肿瘤干细胞家族EPCAM、POU5F1、CD24、CD44和CXCR4相关；PC组织中CD133的表达水平与胰腺肿瘤分化程度、TNM分期和淋巴结转移有相关性（P组织中CD133高表达。CD133表达与PC患者的预后显著相关，是PC免疫治疗的潜在新靶点。

关键词：胰腺癌 CD133 免疫组织化学

氧化纳米铈清除活性氧改善DSS诱导的小鼠结肠炎疾病活动度的研究

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上海交通大学学报（医学版） 2024年第1期44卷 35-42页

作者：卢雨涵石亚红龙满美王子吴颖为上海交通大学医学院附属第九人民医院放射科上海200011 上海交通大学医学院附属第九人民医院病理科上海200011 上海核工程研究设计院股份有限公司上海200233

目的·探究氧化纳米铈-聚乙二醇(ceria nanoparticles-polyethylene glycol,CeNP-PEG)清除活性氧(reactive oxygen species,ROS)、改善葡聚糖硫酸钠(dextran sulphate sodium,DSS)诱导的小鼠结肠炎疾病活动度的效果。方法·首先应用醋酸铈的水合物、油胺与二甲苯等合成氧化纳米铈,经聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(mPEG-DPSE)修饰并提纯后得到纯化的CeNP-PEG。应用透射电子显微镜(transmission electron microscopy,TEM)和动态光散射(dynamic light scattering,DLS)观察测定CeNP-PEG粒径和zeta电位等。体外培养小鼠巨噬细胞(Raw264.7)并诱导成为促炎表型(M1表型)。采用0.5μg/mL和1.0μg/mL CeNP-PEG分别处理M1表型巨噬细胞后应用Western blotting检测核因子-κB(nuclear factors-κB,NF-κB)信号通路相关蛋白表达的变化。构建DSS诱导的小鼠结肠炎模型并在造模期间予以尾静脉注射CeNP-PEG(1.0 mg/mL)3次,同时监测正常对照组(Normal组)、模型组(DSS组)和CeNP-PEG治疗组小鼠体质量、粪便性状与便血次数等,计算肠道炎症的疾病活动指数(disease activity index,DAI)。应用二氢乙啶(dihydroethidine,DHE)染色法检测小鼠肠道组织的ROS水平并通过实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RTqPCR)检测肠道组织炎症细胞因子γ干扰素(interferon-γ,Ifn-γ)、白细胞介素-6(interleukin-6,Il-6)、Il-1β和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,Tnf-α)等基因的表达水平。结果·TEM和DLS结果显示合成的CeNP-PEG水合粒径为(6.96±0.27)nm,平均zeta电位为(−6.02±1.31)mV。Western blotting结果显示促炎表型巨噬细胞较对照组细胞p-P65表达增多,核因子-κB抑制蛋白α(NF-κB inhibitor-α,IκB-α)表达减少,经不同浓度CeNP-PEG干预后p-P65和IκB-α表达又趋于恢复。在小鼠结肠炎模型中,CeNP-PEG治疗组小鼠较DSS组体质量减轻更少(P=0.000),DAI评分更低(P=0.000)。肠道组织RT-qPCR结果显示,DSS组小鼠的Ifn-γ、Il-1β、Il-6和Tnf-α的mRNA水平较Normal组显著上调(均P=0.000),CeNP-PEG治疗后均显著回落。DHE染色结果显示,DSS组肠道组织的荧光强度较Normal组显著增强,CeNP-PEG治疗后荧光强度减弱。结论·CeNP-PEG可抑制肠道炎症因子的表达及促炎巨噬细胞NF-κB炎症通路的活化,消除肠道ROS,改善肠道炎症微环境并缓解DSS诱导的小鼠结肠炎的疾病活动度。

关键词：炎症性肠病氧化纳米铈活性氧克罗恩病溃疡性结肠炎

氯马斯汀对慢性疼痛模型小鼠抑郁样行为改善作用及神经机制研究

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中华行为医学与脑科学杂志 2024年第4期33卷 289-294页

作者：梁玥黄艳梅刘雪琴曹文宇陈玲钟小林南华大学附属第一医院临床医学检验科衡阳421001 南华大学附属第一医院内分泌与代谢疾病研究所衡阳421001 南华大学应用解剖与生殖医学研究所衡阳421001

目的:探讨氯马斯汀(clemastine,CLE)对完全弗氏佐剂(complete Freund's adjuvant,CFA)诱导的慢性疼痛模型小鼠抑郁样行为的影响和可能的机制。方法:30只雄性C57BL/6J小鼠按照随机数字表法分为生理盐水对照组(NS组)、疼痛模型组(CFA组)... 详细信息

目的:探讨氯马斯汀(clemastine,CLE)对完全弗氏佐剂(complete Freund's adjuvant,CFA)诱导的慢性疼痛模型小鼠抑郁样行为的影响和可能的机制。方法:30只雄性C57BL/6J小鼠按照随机数字表法分为生理盐水对照组(NS组)、疼痛模型组(CFA组)、疼痛模型+CLE干预组(CFA-CLE组),每组10只。CFA组、CFA-CLE组小鼠在右后足足底中部皮下注射10μL CFA建立慢性炎性疼痛模型,CFA-CLE组小鼠在CFA注射第7天腹腔注射CLE(10 mg/kg),1次/d,持续14 d,CFA组和NS组小鼠注射等体积0.9%氯化钠溶液。采用von Frey纤维丝检测3组小鼠机械缩足阈值(paw withdrawal mechanical threshold,PWMT);采用旷场实验检测小鼠的活动度,采用糖水偏爱实验、悬尾实验、强迫游泳实验检测小鼠抑郁样行为;采用免疫组织化学染色方法检测小鼠海马区少突胶质细胞标志物髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)、新生神经元标志物双皮质素(doublecortin,DCX)和成熟神经元标志物微管相关蛋白2(microtubule-associated protein 2,MAP2)的表达情况。采用GraphPad Prism 8.0软件进行统计分析,3组间比较采用单因素方差分析,PWMT结果采用重复测量方差分析。结果:痛阈检测结果显示,时间和组别对PWMT影响的交互效应是显著的(F=4.390,P0.05)。3组小鼠旷场实验中的运动总距离差异无统计学意义(F=1.15,P>0.05)。3组小鼠的糖水偏爱率、悬尾不动时间和强迫游泳不动时间均差异有统计学意义(F=5.46,13.44,14.29,均P细胞的吸光度均差异有统计学意义(F=11.92,6.55,9.31,均P细胞的吸光度均低于NS组(均P细胞的吸光度均高于CFA组(均P细胞再髓鞘化和提高神经元可塑性改善CFA慢性疼痛模型小鼠的抑郁样行为。

关键词：慢性疼痛氯马斯汀少突胶质细胞髓鞘碱性蛋白神经元可塑性抑郁样行为小鼠