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创伤性颅脑损伤中神经功能障碍与认知功能损伤的动态变化

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解剖学报 2024年第1期55卷 43-48页

作者：邹成功冯浩陈兵唐辉邵川孙谋杨荣何家全南充市中心医院川北医学院第二临床医学院神经外科四川南充637000

目的探讨创伤性颅脑损伤(TBI)模型小鼠神经功能与认知功能的动态变化及其机制。方法60只12月龄Balb/c小鼠,分为对照组(10只)与TBI模型组(50只),根据模型构建时间将TBI模型小鼠分组为,模型1d组、3d组、7d组、14d组和28d组,共5个亚组,每... 详细信息

目的探讨创伤性颅脑损伤(TBI)模型小鼠神经功能与认知功能的动态变化及其机制。方法60只12月龄Balb/c小鼠,分为对照组(10只)与TBI模型组(50只),根据模型构建时间将TBI模型小鼠分组为,模型1d组、3d组、7d组、14d组和28d组,共5个亚组,每组10只。实验第29天分别开展神经功能评分,跳台测试。测完后处死取材,用于免疫组织化学、炎性细胞因子含量、Western blotting检测。结果与对照组相比,模型组小鼠各个时期神经功能评分明显增加,在第7天达到峰值后降低。然而,各个时期,模型组小鼠跳台错误潜伏期低于对照组,跳台错误次数高于对照组,且没有明显变化。此外,与对照组相比,模型组小鼠各个阶段离子化钙结合适配分子1(IBA1)、趋化因子C-X3-C基元配体1(CX3CL1)、CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、磷酸化核因子(p-NF)-κB表达明显增加,在第7天达到峰值,之后开始降低。与此同时,炎性细胞因子白细胞介素6(IL-6)与肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量先升高达到峰值,随后开始降低。然而,与对照组相比,模型组小鼠各个时期β淀粉样蛋白(Aβ)、p-Tau蛋白表达持续增加。结论TBI致模型鼠小胶质细胞持续活化,与炎症反应一同先升高,再降低,导致小鼠神经功能评分到达峰值后降低。此外,炎症反应可能作为Aβ沉积与Tau蛋白磷酸化的启动子,导致小鼠认知功能损伤。

关键词：创伤性颅脑损伤神经功能障碍认知功能炎症反应免疫印迹法小鼠

经血间充质干细胞外泌体对人卵巢癌细胞A2780生物学行为的影响

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中国医学前沿杂志（电子版） 2024年第2期16卷 50-57页

作者：陆茜林丁娜贺红林袁怡君贺天文冯露田超刘康李均川北医学院第二临床医学院(南充市中心医院)妇科四川南充637000 川北医学院第二临床医学院(南充市中心医院)烧伤整形美容外科四川南充637000 川北医学院第二临床医学院(南充市中心医院)组织工程与干细胞研究所四川南充637000

目的探讨经血源性间充质干细胞(menstrual blood-derived mesenchymal stem cells,MenSCs)来源的外泌体(MenSCs-derived exosomes,MenSCs-Exos)对人卵巢癌细胞A2780增殖、迁移、侵袭能力和细胞周期分布的影响和机制。方法分离纯化MenSCs,流式细胞术鉴定其细胞表型,油红O染色观察其成脂分化能力;超速离心法分离MenSCs-Exos,电子显微镜观察外泌体形态,纳米颗粒追踪分析其大小及分布,蛋白免疫印迹法检测外泌体标志性蛋白分子CD9、TSG101、calnexin的表达。采用CCK-8实验、划痕实验、Transwell细胞体外侵袭实验、流式细胞仪检测MenSCs-Exos对A2780细胞增殖、迁移、侵袭能力和细胞周期分布的影响;蛋白免疫印迹法检测Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白和迁移相关蛋白的表达。结果成功分离具有干细胞表型和成脂分化潜能的MenSCs,同时检测发现MenSCs-Exos为边缘清晰、大小分布均匀的膜性囊泡,粒径为30~150 nm,平均为72.89 nm,膜表面标志性蛋白CD9、TSG101表达呈阳性,calnexin表达呈阴性。与对照组相比,MenSCs-Exos能增强A2780细胞增殖、迁移和侵袭能力,影响其细胞周期分布,并且可上调β-catenin、c-Myc、TCF4、Cyclin D1、Vimentin、N-cadherin的表达,下调E-cadherin的表达。结论 MenSCs-Exos可能是通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进A2780细胞增殖,并通过下调E-cadherin的表达促进A2780细胞的迁移和侵袭。

关键词：外泌体经血源间充质干细胞卵巢癌 Wnt/β-catenin信号通路

转录因子HNF1α基因c.493T>C位点突变对其蛋白质水平的影响

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遗传 2024年第3期46卷 256-262页

作者：梁淑杰彭乙华雷佳红贾艾敏蒋红蔡燕川北医学院附属医院遗传与产前诊断中心南充637000 川北医学院附属医院内分泌科南充637000 川北医学院附属医院风湿免疫研究所南充637000 川北医学院检验医学院南充637000 川北医学院转化医学研究中心南充637000

肝细胞核因子1α(hepatocyte nuclear factor 1α,HNF1α)作为一种转录因子在维持胰腺β细胞功能、肝脏脂质代谢等过程中发挥着重要的调控作用。该基因突变是导致青少年起病的成人型糖尿病(maturity onset diabetes of the young,MODY)... 详细信息

肝细胞核因子1α(hepatocyte nuclear factor 1α,HNF1α)作为一种转录因子在维持胰腺β细胞功能、肝脏脂质代谢等过程中发挥着重要的调控作用。该基因突变是导致青少年起病的成人型糖尿病(maturity onset diabetes of the young,MODY)3型的致病原因,目前已报道的该基因的突变位点众多,如P291fsinsC、P112L等常见的突变位点,但其具体的分子机制尚不清楚。本研究对前期工作中发现的1例携带有HNF1α基因c.493T>C位点突变的MODY3患者,通过应用Mutation Surveyor软件分析突变位点的致病性,构建HNF1α野生型和突变型真核表达质粒,采用Western blot检测两种质粒表达的HNF1α蛋白质的量和稳定性变化,结果发现Mutation Surveyor软件分析提示c.493T>C位点突变可能为致病性变异基因,Western blot显示突变型真核质粒表达的HNF1α蛋白质的量和稳定性均明显降低,差异均具有统计学意义(PC(p.Trp165Arg)变异显著影响HNF1α的表达量及稳定性,可能为其导致疾病发生的原因,为后续深入探究MODY3的分子致病机制提供了新的方向。

关键词： MODY HNF1α 基因突变

氘可来昔替尼治疗中重度斑块状银屑病疗效及安全性Meta分析

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中国麻风皮肤病杂志 2024年第2期40卷 89-94页

作者：胥杨詹纬生赵菊花南充市中心医院·川北医学院第二临床医学院皮肤科四川南充637000 川北医学院四川南充637000

目的:系统评价氘可来昔替尼治疗中重度斑块状银屑病的疗效及安全性。方法:通过检索PubMed、Cochrane Library、Embase、中国知网、维普、万方数据库及临床试验网站clinicaltrials.gov,筛选出符合要求的随机对照试验(RCT),提取数据后行M... 详细信息

目的:系统评价氘可来昔替尼治疗中重度斑块状银屑病的疗效及安全性。方法:通过检索PubMed、Cochrane Library、Embase、中国知网、维普、万方数据库及临床试验网站clinicaltrials.gov,筛选出符合要求的随机对照试验(RCT),提取数据后行Meta分析。结果:共纳入4项RCTs,包括1996例中重度斑块状银屑病患者。Meta分析结果显示:治疗16周或12周后氘可来昔替尼组达到各项疗效指标(PASI 75、sPGA 0/1、PASI 90、PASI 100、DLQI 0/1)的患者比例明显高于安慰剂组及阿普米司特组(P0.05),氘可来昔替尼组严重不良事件发生率与安慰剂组或阿普米司特组无统计学差异(P>0.05)。结论:氘可来昔替尼治疗斑块状银屑病的疗效优于安慰剂和阿普米司特,且耐受性良好。

关键词：氘可来昔替尼斑块状银屑病 Meta分析

钛表面多酚介导铜离子涂层制备及抗菌抗氧化性能

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中国组织工程研究 2024年

作者：官振菊谢永林向守刚张成栋李小龙李兴平蒲超张波罗栩伟肖东琴 1.川北医学院第二临床学院·南充市中心医院组织工程与干细胞研究所 2.川北医学院第二临床学院·南充市中心医院口腔科 3.成飞医院骨科 4.川北医学院第二临床学院·南充市中心医院骨科川北医学院第二临床学院·南充市中心医院组织工程与干细胞研究所川北医学院第二临床学院·南充市中心医院口腔科成飞医院骨科川北医学院第二临床学院·南充市中心医院骨科

背景：钛植入体因比强度高及良好的生物相容性被广泛应用于临床，然而在植入手术过程中，细菌感染及组织受损环境产生大量活性氧物质易导致组织延迟愈合与手术失败，因此开发具有抗菌和抗氧化性能的钛植入体极为重要。目的：鉴于铜离子... 详细信息

背景：钛植入体因比强度高及良好的生物相容性被广泛应用于临床，然而在植入手术过程中，细菌感染及组织受损环境产生大量活性氧物质易导致组织延迟愈合与手术失败，因此开发具有抗菌和抗氧化性能的钛植入体极为重要。目的：鉴于铜离子良好的抗菌性能及多酚类物质优良的抗氧化性能，拟在钛表面制备多酚介导的铜离子涂层，评价其体外抗菌及抗氧化性能。方法：利用碱热法在钛表面制备纳米结构，然后将钛片置于单宁酸及铜离子溶液中，获得多酚介导的铜离子涂层，检测样品的表面形貌与水接触角，利用原子吸收光谱法检测铜离子的携载及释放。将金黄色葡萄球菌分别接种于纯钛片(空白组)、碱热处理钛片(对照组)、多酚介导的铜离子修饰钛片(实验组)表面，观察细菌存活状态。将成骨前体细胞MC3T3-E1分别接种于3组钛片表面，评价材料的抗氧化性能及生物活性。结果与结论：(1)扫描电镜下可见多酚介导的铜离子修饰钛片表面存在棒状纳米结构，并且涂层无裂纹；多酚介导的铜离子修饰钛片表面亲水性接近纯钛片；原子吸收光谱结果显示，多酚介导后钛片表面铜离子的携载量增加了51%，铜离子呈均匀释放。(2)空白组、对照组、实验组钛片的抗菌率为0%,21.65%,93.75%；活死染色与CTC染色显示，空白组钛片表面的活细菌最多，实验组钛片表面的活细菌最少。(3)活死染色与CCK-8检测结果显示，3组钛片均具有良好的细胞相容性，并且实验组钛片更有利于MC3T3-E1细胞增殖；活性氧荧光探针检测显示，相较于其他两组，实验组钛片表面活性氧荧光强度明显减弱；碱性磷酸酶与茜素红S染色结果显示，相较于其他两组，实验组钛片表面MC3T3-E1细胞的成骨分化与细胞外基质矿化能力更强。(4)结果表明，多酚介导的铜离子涂层具有较强的抗菌、抗氧化及促成骨分化性能。

关键词：钛植入体抗菌抗氧化多酚铜离子涂层

熊果酸抑制CXCL12/CXCR4途径减轻糖尿病周围神经病变大鼠的疼痛反应

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中国老年学杂志 2024年第3期44卷 709-712页

作者：任思宏李刚冉栩冯周恒南充市中心医院(川北医学院第二临床医学院)麻醉科四川南充637000

目的探究熊果酸是否能够通过抑制CXC趋化因子配体(CXCL)12/趋化因子CXC基序受体(CXCR)4途径减轻糖尿病周围神经病变(DPN)大鼠的疼痛反应。方法大鼠随机分组:正常组、DPN组、熊果酸低、中、高剂量组、AMD3100组。除正常组外,其他各组... 详细信息

目的探究熊果酸是否能够通过抑制CXC趋化因子配体(CXCL)12/趋化因子CXC基序受体(CXCR)4途径减轻糖尿病周围神经病变(DPN)大鼠的疼痛反应。方法大鼠随机分组:正常组、DPN组、熊果酸低、中、高剂量组、AMD3100组。除正常组外,其他各组采用高糖高脂饲料喂养联合1%链脲佐菌素(STZ)溶液腹腔注射方法构建DPN模型。DPN模型构建完成后进行药物处理,熊果酸低、中、高剂量组分别灌胃15、30、60 mg/kg熊果酸,DPN组和正常组灌胃等体积生理盐水,AMD3100组腹腔注射1 mg/kg AMD3100溶液。每日1次,持续12 w。观察大鼠一般情况;检测大鼠体质量和空腹血糖情况;检测大鼠足底机械痛阈值、热痛阈值;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠坐骨神经病理变化;Western印迹检测大鼠脊髓组织CXCL12和CXCR4蛋白表达情况。结果药物处理12 w后,与正常组比较,DPN组体质量、机械痛阈值、热痛阈值明显降低,空腹血糖、CXCL12、CXCR4蛋白表达明显升高(P<0.05),坐骨神经排列稀疏混乱、无规则,髓鞘宽度增加、分布匀称度变差。与DPN组比较,熊果酸低、中、高剂量组、AMD3100组机械痛阈值、热痛阈值明显升高,CXCL12、CXCR4蛋白表达明显降低(P<0.05),坐骨神经排列稀疏和髓鞘凌乱等现象获得改善。结论熊果酸可能通过抑制CXCL12/CXCR4途径减轻DPN大鼠的疼痛反应。

关键词：熊果酸 CXC趋化因子配体12 趋化因子CXC基序受体4 糖尿病周围神经病变疼痛反应

LAD1在食管鳞癌发生发展中的作用及其分子机制

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基因组学与应用生物学 2024年第5期43卷 890-906页

作者：谭劲松熊黎张若兰孙姗杨航潘英杰冯刚宋桂芹刘康川北医学院基础医学与法医学研究所南充637100 南充市中心医院·川北医学院第二临床医学院组织工程与干细胞研究所南充637000

本研究旨在揭示锚定细丝蛋白基因ladinin-1(LAD1)对食管鳞癌(esophageal squamous carcinoma,ESCC)细胞增殖、迁移、侵袭和细胞凋亡的影响及其可能的作用机制。对ESCC组织及癌旁组织进行转录组测序并结合生物信息学数据库分析,发现LAD1... 详细信息

本研究旨在揭示锚定细丝蛋白基因ladinin-1(LAD1)对食管鳞癌(esophageal squamous carcinoma,ESCC)细胞增殖、迁移、侵袭和细胞凋亡的影响及其可能的作用机制。对ESCC组织及癌旁组织进行转录组测序并结合生物信息学数据库分析,发现LAD1在ESCC组织中高表达,通过RT-qPCR验证LAD1在ESCC细胞系中的表达。收集31例ESCC患者的癌组织和对应癌旁组织标本,用免疫组织化学染色检测LAD1在ESCC组织中的表达并分析LAD1与ESCC组织病理特征的相关性。利用siRNA敲低KYSE-30和KYSE-150细胞中LAD1的表达,通过CCK-8实验、平板克隆实验、划痕愈合实验、Transwell实验、流式细胞术检测ESCC细胞功能的变化。通过UCSC和JASPAR数据库预测可能调控LAD1的上游转录因子(transcription factors,TFs),并通过RT-qPCR和免疫组织化学染色验证其在ESCC细胞和组织中的表达。最后采用RT-qPCR实验和双萤光素酶实验验证转录因子与LAD1的调控关系。结果显示,相比于HET-1A细胞,LAD1在KYSE-30和KYSE-150细胞中高表达(P<0.01或P<0.001),与转录组测序结果一致。免疫组织化学结果显示,LAD1在ESCC中高表达,并与病理分化程度呈负相关(P<0.01或P<0.001)。敲低LAD1能抑制ESCC细胞增殖、迁移、侵袭并促进细胞凋亡(P<0.01或P<0.001)。UCSC和JASPAR数据库预测结合RT-qPCR实验和免疫组织化学染色推测KLF5、EHF、ELF3可能是LAD1的上游转录因子,利用RT-qPCR实验和双萤光素酶实验进一步验证,发现LAD1可能受到KLF5、EHF、ELF3的调控。本研究提示,LAD1在ESCC细胞和组织中高表达,并与病理分化程度相关联;敲低LAD1能抑制ESCC细胞增殖、迁移、侵袭能力,促进细胞凋亡;KLF5、EHF、ELF3是调节LAD1的上游转录因子。

关键词：食管鳞癌 ladinin-1(LAD1) 增殖侵袭凋亡

m6A阅读蛋白IGF2BP1对食管鳞状细胞癌细胞生物学行为的影响及其机制探讨

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基因组学与应用生物学 2024年第6期 1078-1092页

作者：孙姗潘英杰谭劲松杨航彭利红冯刚刘康宋桂芹川北医学院基础医学与法医学研究所南充市中心医院·川北医学院第二临床医学院组织工程与干细胞研究所

本研究旨在探讨胰岛素样生长因子-2 mRNA结合蛋白1（insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 1, IGF2BP1）对食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma, ESCC）细胞体外功能的影响及其作用机制。利用TIMER2.0数据库、免疫组化及实时定量PCR（real-time quantitative PCR, RT-qPCR）分析IGF2BP1在ESCC组织和癌旁组织中的蛋白及mRNA水平。采用siRNA敲低IGF2BP1在KYSE30和TE-1细胞中的表达，利用CCK-8实验、平板集落形成实验、划痕愈合实验、 Transwell实验以及流式细胞术检测敲低IGF2BP1对细胞功能的影响。利用Western blot检测敲低IGF2BP1对上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition, EMT）相关蛋白及PI3K/AKT通路磷酸化水平的影响。利用STRING、 GEPIA数据库筛选出与IGF2BPl蛋白互作的其余N6-甲基腺嘌呤（N6-methyladenosine, m6A）甲基化酶并进行差异表达分析。通过RM2Target、 SRAMP数据库预测下游靶基因及其m6A修饰位点。结果显示，IGF2BP1在ESCC组织和细胞中高表达（P<0.05或P<0.001）;敲低IGF2BP1后KYSE30和TE-1细胞增殖、迁移和侵袭能力减弱（P<0.05或P<0.001）,细胞凋亡增多（P<0.05或P<0.001）,同时促进E-cadherin的表达（P<0.05或P<0.01）,抑制N-cadherin、 Vimentin的表达（P<0.05或P<0.01）以及PI3K/AKT通路的磷酸化（P<0.05或P<0.01）;锌指CCCH结构域蛋白13（zinc finger CCCH domain containing protein 13, ZC3H13）与IGF2BP1蛋白互作且在ESCC中的表达水平与IGF2BP1正相关；ZC3H13和IGF2BP1共同调控的潜在靶基因CNNM2、KIAA1549、SP3均具有高可信度的m6A修饰位点。本研究提示，IGF2BP1可能通过m6A依赖的方式与其余m6A甲基化酶协调作用，激活PI3K/AKT通路的磷酸化而促进ESCC细胞的增殖、迁移、侵袭，抑制细胞凋亡，并促进EMT进程，发挥致癌作用。

关键词：食管鳞状细胞癌胰岛素样生长因子-2 mRNA结合蛋白1(IGF2BP1) N6-甲基腺嘌呤(m6A) 增殖侵袭凋亡

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糖蛋白乙酰基在风湿免疫病中的研究进展

中华风湿病学杂志 2024年第4期28卷 262-265页

作者：陆毅伟李梦兰何馨怡谢青青肖东琴帅世全南充市中心医院(南充市临床医学研究中心)·川北医学院第二临床医学院风湿免疫科南充637000 南充市中心医院(南充市临床医学研究中心)·川北医学院第二临床医学院炎症与免疫南充市重点实验室南充637000 南充市中心医院(南充市临床医学研究中心)·川北医学院第二临床医院组织工程与干细胞研究所南充637000

风湿免疫病患者经常使用超敏CRP、ESR、补体、球蛋白定量等指标来评估疾病活动度及治疗效果。然而,这些传统炎症指标通常会受到诸多因素的影响,导致其灵敏度降低。近年来,大量研究表明,糖蛋白乙酰基(GlycA)作为一种炎症性标志物,受到的... 详细信息

风湿免疫病患者经常使用超敏CRP、ESR、补体、球蛋白定量等指标来评估疾病活动度及治疗效果。然而,这些传统炎症指标通常会受到诸多因素的影响,导致其灵敏度降低。近年来,大量研究表明,糖蛋白乙酰基(GlycA)作为一种炎症性标志物,受到的外界影响因素较低且灵敏度更高。因此,GlycA指标在判断病情严重程度和治疗效果方面,相较于传统炎症指标具有更高的精确性。通过文献综述,我们发现GlycA与类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、银屑病等疾病的活动度和治疗效果均有着密切的联系。

关键词：糖蛋白乙酰基风湿免疫病炎症标志物