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抗真菌肽对真菌作用机制研究进展

生物化学与生物物理进展 2005年第1期32卷 13-17页

作者：张杰张双全南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室南京210097

20世纪90年代初,Iijima等从麻蝇幼虫血淋巴分离出一种具有抗真菌活性、能抑制***生长的蛋白质. 到目前为止,已发现150多种肽具有抗真菌的特性,随着被发现的抗真菌肽数目不断增多,人们对抗真菌肽的抗真菌机理也进行了大量的研究,抗真菌... 详细信息

20世纪90年代初,Iijima等从麻蝇幼虫血淋巴分离出一种具有抗真菌活性、能抑制***生长的蛋白质. 到目前为止,已发现150多种肽具有抗真菌的特性,随着被发现的抗真菌肽数目不断增多,人们对抗真菌肽的抗真菌机理也进行了大量的研究,抗真菌肽对真菌的作用方式主要有:阻止、破坏真菌细胞壁的合成;与膜作用,在质膜上形成孔洞,使重要的内容物外泄;与真菌细胞内线粒体、核酸大分子等重要细胞器相互作用;最终导致真菌的死亡.

关键词：抗真菌肽真菌作用机理

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抗菌肽对细菌杀伤作用的分子机制

生物化学与生物物理进展 2005年第12期32卷 1109-1113页

作者：吴希张双全南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室南京210097

抗菌肽是一类新型的抗菌物质,从最低等的生物病毒、细菌到高等的动植物都有广泛分布.以往的研究主要集中于抗菌肽对细菌细胞膜的作用机制,已经构建了三种作用模式.但近几年的研究表明,很多抗菌肽都能有效地穿过细菌的细胞膜,直接与胞内... 详细信息

抗菌肽是一类新型的抗菌物质,从最低等的生物病毒、细菌到高等的动植物都有广泛分布.以往的研究主要集中于抗菌肽对细菌细胞膜的作用机制,已经构建了三种作用模式.但近几年的研究表明,很多抗菌肽都能有效地穿过细菌的细胞膜,直接与胞内分子相互作用,并不引起膜的破裂.抗菌肽根据其结构特点有着多种杀菌穿膜的机制,其后分别与胞内的靶分子如核酸,蛋白质,信号转导通路等互相作用,最终实现对细菌的杀伤作用.

关键词：抗菌肽杀菌穿膜机制生物分子

RTN4-C基因在肝癌组织中的表达及其对SMMC7721细胞生长和凋亡的影响(英文)

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Acta Genetica Sinica 2005年第9期32卷 891-897页

作者：陈益存陆东东曹祥荣张锡然南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室南京210097

RTN4-C属于编码内质网蛋白的基因家族(RTNs)。为研究RTN4-C在肝癌及其癌旁组织中的表达情况及其对SMMC7721肝癌细胞株的影响,利用RT-PCR检测RTN4-C在肝癌及其癌旁组织中的表达。构建RTN4-C-pcDNA3.1真核表达重组质粒,用脂质体介导转染SM... 详细信息

RTN4-C属于编码内质网蛋白的基因家族(RTNs)。为研究RTN4-C在肝癌及其癌旁组织中的表达情况及其对SMMC7721肝癌细胞株的影响,利用RT-PCR检测RTN4-C在肝癌及其癌旁组织中的表达。构建RTN4-C-pcDNA3.1真核表达重组质粒,用脂质体介导转染SMMC7721肝癌细胞,通过G418稳定筛选,建立转染RTN4-C/SMMC7721稳定细胞株。MTT法测定转染前后细胞生长改变、吖啶橙染色检测细胞凋亡改变、免疫细胞化学检测肿瘤相关蛋白p53、Hsp70和c-Fos表达改变。结果表明,RTN4-C/SMMC7721细胞生长减慢,与对照组相比,第2、3、4d细胞生长抑制率分别为33·8%±0·026、56·2%±0·094、34·8%±0·077;凋亡明显增多。突变型p53蛋白从核内转移到细胞质且表达减弱,c-Fos、Hsp70蛋白表达量明显减弱。提示RTN4-C基因在肝癌组织中存在表达差异,促进突变型p53的核转移并减少其表达量、抑制癌基因c-Fos和Hsp70的表达,从而抑制SMMC7721细胞的生长,促进其凋亡。

关键词： RTN4-C SMMC7721 细胞凋亡细胞生长肝癌细胞基因家族癌组织 C-Fos表达真核表达重组质粒 Hsp70

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昼夜节律在生殖过程中的调节作用（英文）

生理学报 2016年第6期68卷 799-808页

作者：张雯翔陈思禹刘畅南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室南京210023

昼夜节律是生物机体的许多功能活动为适应所在环境白昼和黑夜交替而发生的规律性变化。这种昼夜节律由位于下丘脑视交叉上核神经元(hypothalamic suprachiasmatic nucleus,SCN)相关的中枢性生物时钟和分布于各种组织的外周性生物时钟控... 详细信息

昼夜节律是生物机体的许多功能活动为适应所在环境白昼和黑夜交替而发生的规律性变化。这种昼夜节律由位于下丘脑视交叉上核神经元(hypothalamic suprachiasmatic nucleus,SCN)相关的中枢性生物时钟和分布于各种组织的外周性生物时钟控制。中枢生物时钟能整合外界环境中的光/非光信号,产生节律性输出,经神经内分泌和体液循环影响外周组织的生理进程,同时也影响外周性生物时钟的活动。人体的生殖功能与其他许多功能活动一样都受到体内生物时钟的调控。越来越多的流行病学和遗传调查分析表明,生物时钟紊乱与不育不孕的发生有关。本文重点讨论了生殖器官中生物时钟的存在及时钟元件在动物发情周期、卵巢卵泡发育与排卵、睾丸精子发生、受精和胚胎着床中的作用。当今社会非常普遍的轮班工作以及临床上用于不育不孕治疗的辅助生殖技术都可能干扰正常的生物节律进而影响生殖功能,因而研究昼夜节律在生殖过程中的调节作用具有重要意义。

关键词：昼夜节律生殖生育

甲基丙烯酸羟乙酯塑料包埋切片技术在小鼠胎脑组织学分析中的应用

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解剖学报 2015年第5期46卷 690-693页

作者：李帅陈宇琛张雪茜童仙杰宋晓彬范春娥陈华群南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室南京210023

目的探索塑料包埋切片法在小鼠胎脑组织学分析中的应用。方法取胚胎期13.5d(E13.5)小鼠,4%多聚甲醛4℃固定过夜,分离胎鼠头部,甲基丙烯酸羟乙酯(HEMA)塑料包埋组织并切片;对切片进行HE染色。结果与石蜡包埋相比,采用HEMA塑料包埋的方法... 详细信息

目的探索塑料包埋切片法在小鼠胎脑组织学分析中的应用。方法取胚胎期13.5d(E13.5)小鼠,4%多聚甲醛4℃固定过夜,分离胎鼠头部,甲基丙烯酸羟乙酯(HEMA)塑料包埋组织并切片;对切片进行HE染色。结果与石蜡包埋相比,采用HEMA塑料包埋的方法进行胎鼠脑组织学分析,形态结构保存较完整、HE染色效果较清晰。结论利用塑料包埋技术进行小鼠胎脑组织学分析,优于石蜡包埋方法。

关键词：塑料包埋甲基丙烯酸羟乙酯胚胎脑组织 HE染色小鼠

中国家蚕抗菌肽ABP-CM4在***中的融合表达及活性分析

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分子细胞生物学报 2007年第2期40卷 98-102页

作者：李保存陈玉清刘平张双全南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室南京210097

参照天然抗菌肽CM4(ABP-CM4)氨基酸序列和大肠杆菌偏爱密码子,采用rPCR法获得CM4基因后重组到表达载体pET32a上,在***中融合表达。表达产物以可溶性存在,经Ni2+-NTA琼脂糖亲和层析获得融合蛋白,再经甲酸切割、亲和层析和阳离子交换层析... 详细信息

参照天然抗菌肽CM4(ABP-CM4)氨基酸序列和大肠杆菌偏爱密码子,采用rPCR法获得CM4基因后重组到表达载体pET32a上,在***中融合表达。表达产物以可溶性存在,经Ni2+-NTA琼脂糖亲和层析获得融合蛋白,再经甲酸切割、亲和层析和阳离子交换层析,得到纯化的重组抗菌肽。琼脂糖扩散法和液相测定法证明了纯化的抗菌肽具有抗菌活性。

关键词：抗菌肽CM4 融合表达 E.coli

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小鼠胚胎心脏发育期T型钙离子通道的表达

解剖学报 2010年第3期41卷 469-472页

作者：钱辉张沙沙袁秀杰赵钟钟石洁郭佳刘金旭朱中华张朝南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室南京210046

目的检测哺乳动物心脏中T型钙离子通道α1亚基在小鼠胚胎心脏发育过程中表达部位和时间的分布特征。方法对小鼠胚胎心脏发育关键时期(E9.5至胚胎E18.5共9d)的胚胎进行连续切片,用RT-PCR和免疫组织化学的方法对α1G和α1H蛋白进行阳性检... 详细信息

目的检测哺乳动物心脏中T型钙离子通道α1亚基在小鼠胚胎心脏发育过程中表达部位和时间的分布特征。方法对小鼠胚胎心脏发育关键时期(E9.5至胚胎E18.5共9d)的胚胎进行连续切片,用RT-PCR和免疫组织化学的方法对α1G和α1H蛋白进行阳性检测。结果α1H从胚胎期10.5d左右开始表达并一直延续到发育晚期(E18.5),而α1G则从E11.5d延续到E18.5;免疫组织化学的结果显示,T型钙离子通道主要在心肌层以及左右传导束支稳定表达,而在心内膜垫以及心室肌小梁的心内膜内皮和间充质细胞中不表达。结论 T型钙离子通道对于心肌细胞以及心脏传导组织的形成起到了一定的作用。

关键词：心脏发育 T型钙离子通道免疫组织化学反转录-聚合酶链式反应小鼠

镉对人肝细胞WRL-68离体线粒体结构及功能的影响

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中华医学杂志 2008年第19期88卷 1350-1353页

作者：张娜娜毛伟平魏传静周雷刘洪云冯娟南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室南京210046

目的研究氯化镉（CdCl2）对离体肝细胞线粒体结构及功能的影响。方法从培养肝细胞（WRL-68）中提取线粒体，各组分别用0、1、5、10μmol／LCdCl2进行处理。采用分光光度法检测线粒体膜通透性转运孔（MPTP）的开放程度；电镜下观察线粒... 详细信息

目的研究氯化镉（CdCl2）对离体肝细胞线粒体结构及功能的影响。方法从培养肝细胞（WRL-68）中提取线粒体，各组分别用0、1、5、10μmol／LCdCl2进行处理。采用分光光度法检测线粒体膜通透性转运孔（MPTP）的开放程度；电镜下观察线粒体的形态改变；罗丹明123检测线粒体膜电位（MMP）的变化；测定线粒体内ATP酶LDH、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）的活性以及丙二醛（MDA）的含量。结果随着CdCl2浓度的增加MPTP开放程度增加，并且MPTP的开放可被环孢霉素A（CsA）所抑制；电镜观察发现，线粒体经CdCl2处理后出现不同程度的肿胀变形；CdCl2诱导MMP显著降低；同时引起SOD、GSH-Px、Na^＋．K^＋-ATP酶、Ca^＋-Mg^＋-ATP酶LDH活性趋于下降，5、10μmol／L CdCl2显著下调了各种酶的活性（P〈0．05）；CdCl2处理组MDA含量升高，10μmol／LCdCl2处理组与对照组比较有统计学意义（P〈0．05）。结论CdCl2能引起离体肝细胞线粒体结构的破坏，并致MPTP开放、MMP下降、线粒体酶活性的改变等与细胞凋亡相关过程的发生。

关键词：镉线粒体膜电位腺苷三磷酸酶抗氧化酶

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肽类抗生素对细胞选择性作用研究进展

中国抗生素杂志 2006年第5期31卷 257-260,266页

作者：陈玉清文少卿张双全南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室南京210097

抗菌肽是一种广泛存在于生物界的抵抗病原微生物入侵的重要防御分子。抗菌肽具有广谱抗细菌、真菌、肿瘤细胞等活性,具有自身随着物种适应环境而产生的结构多样性以及具有区别于传统抗生素的杀菌机理的独特性,是一类极有潜力的肽类抗生... 详细信息

抗菌肽是一种广泛存在于生物界的抵抗病原微生物入侵的重要防御分子。抗菌肽具有广谱抗细菌、真菌、肿瘤细胞等活性,具有自身随着物种适应环境而产生的结构多样性以及具有区别于传统抗生素的杀菌机理的独特性,是一类极有潜力的肽类抗生素。不同抗菌肽对不同类型靶细胞表现出活性上的巨大差异,即是抗菌肽作用的选择性,这种作用的选择性受到多种因素的影响。探讨抗菌肽作用细胞的机理,特别是选择性作用的机理将有助于设计出活性更高的新型肽类抗生素。本文主要从细胞表面结构特异性、抗菌肽自身结构特点阐述近年来抗菌肽活性与选择性作用研究的新进展。

关键词：肽类抗生素抗菌肽细菌真菌肿瘤细胞选择性作用结构