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利用组培技术构建半夏杂交体系

种子 2024年第4期43卷 81-87页

作者：舒福兴王嘉亮陈国广王馨瑶姚朝旭金磊磊汪鑫王栋栋陈集双南京工业大学生物与制药工程学院南京211816 遵义医科大学生物资源健康利用研究中心贵州遵义563000

本研究通过构建半夏品系的杂交体系并研究杂交种苗的扩繁周期,以解决半夏自然杂交成功率低、杂交种苗繁育效率低的问题。对消毒过的半夏花粉和雌蕊以TTC法测定其活力,并通过对比实验确定雌蕊的最佳培养基,对3种新的半夏品系持续培养出F_... 详细信息

本研究通过构建半夏品系的杂交体系并研究杂交种苗的扩繁周期,以解决半夏自然杂交成功率低、杂交种苗繁育效率低的问题。对消毒过的半夏花粉和雌蕊以TTC法测定其活力,并通过对比实验确定雌蕊的最佳培养基,对3种新的半夏品系持续培养出F_(1)代杂交苗,通过杂交苗继代探究转接周期和成苗周期。结果表明,半夏雌蕊和花粉的最佳消毒时间为6 min;雌蕊的最佳培养基配方是半糖无琼脂MS培养基20.00 g/L+蔗糖15.00 g/L+琼脂5.00 g/L+6-BA 1.00 mg/L+NAA 0.01 mg/L,pH=5.8。以此为基础,培育出F_(1)代苗;4种半夏品系的F_(1)代杂交苗与亲本组培苗叶型有明显区别,经过扩繁发现了两个杂交种苗的扩繁周期。本研究建立了基于植物组织培养技术的半夏杂交体系并获得杂交苗,并探明杂交种苗的繁育周期。

关键词：半夏杂交育种植物组培杂交体系叶型比较繁育周期

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头孢托仑对β-内酰胺酶的稳定性

中华医院感染学杂志 2024年 2721-2726页

作者：施琦雪齐怡心郭曼杨佳惠李红艳马菱蔓许亮周长林中国药科大学生命科学与技术学院南京宁和衡信制药有限公司

目的比较头孢托仑与头孢卡品等头孢类抗菌药物及阿莫西林等青霉素类抗菌药物对产β-内酰胺酶菌株稳定性的差异。方法采用头孢硝噻吩颜色反应筛选产β-内酰胺酶临床菌株,超声破碎后离心获得含β-内酰胺酶上清液,进而测定酶与不同抗菌... 详细信息

目的比较头孢托仑与头孢卡品等头孢类抗菌药物及阿莫西林等青霉素类抗菌药物对产β-内酰胺酶菌株稳定性的差异。方法采用头孢硝噻吩颜色反应筛选产β-内酰胺酶临床菌株,超声破碎后离心获得含β-内酰胺酶上清液,进而测定酶与不同抗菌药物底物共孵育后底物特征紫外吸收值的变化,以一代头孢头孢噻吩水解率为100%,计算抗菌药物的相对水解率来评价头孢托仑等抗菌药物对β-内酰胺酶的稳定性。结果头孢托仑对临床分离的常见致病菌的抗菌活性均较高;大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对头孢托仑的平均相对水解率均低于12%,其他两种三代头孢的相对水解率均超过了30%,而对二代头孢如头孢克洛,β-内酰胺酶的相对水解率均在85%以上;β-内酰胺酶标准品对头孢托仑和头孢卡品的反应动力学曲线结果表明β-内酰胺酶与头孢托仑的亲和力相较于头孢卡品弱,稳定性更强;耐药诱导实验显示,相较于头孢呋辛酸、头孢地尼和阿莫西林,头孢托仑对大肠埃希菌及金黄色葡萄球菌的MIC表现出缓慢上升。结论头孢托仑对大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分泌的β-内酰胺酶相对水解率均为所测抗菌药物中最低,且对于金黄色葡萄球菌分泌的β-内酰胺酶相对水解率位于所测抗菌药物前列,表明头孢托仑对产β-内酰胺酶菌株稳定性最强。

关键词：头孢托仑细菌耐药 β-内酰胺酶耐药诱导稳定性

1,6-二磷酸果糖钙对海兰褐蛋鸡生产性能、蛋品质、血清生化指标和免疫指标的影响

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中国家禽 2024年第5期46卷 32-37页

作者：陈晓春汤亦文黄小权张磊南京工业大学生物与制药工程学院江苏南京211816 南京同凯兆业生物技术有限责任公司江苏南京211806

试验旨在研究1,6-二磷酸果糖钙对海兰褐蛋鸡生产性能、蛋品质、血清生化指标和免疫指标的影响。试验选择800只健康、产蛋率相近的380日龄海兰褐蛋鸡,随机分成4组,每组20个重复,每个重复10笼,每笼1只鸡。对照组、低剂量组、中剂量组和高... 详细信息

试验旨在研究1,6-二磷酸果糖钙对海兰褐蛋鸡生产性能、蛋品质、血清生化指标和免疫指标的影响。试验选择800只健康、产蛋率相近的380日龄海兰褐蛋鸡,随机分成4组,每组20个重复,每个重复10笼,每笼1只鸡。对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组分别在基础日粮中添加0mg/kg、100mg/kg、200mg/kg和300mg/kg1,6-二磷酸果糖钙,进行为期9周的试验。结果显示:与对照组相比,中、高剂量组产蛋率显著提高(P<0.05),且与1,6-二磷酸果糖钙的添加量呈二次曲线关系(P<0.05);低、中和高剂量组破蛋率显著降低(P<0.05)。中、高剂量组蛋黄颜色和蛋壳强度显著提高(P<0.05),蛋壳强度与1,6-二磷酸果糖钙添加量呈二次曲线关系(P=0.024);低、中和高剂量组的蛋壳比例显著提高(P<0.05),且随1,6-二磷酸果糖钙添加量的增加呈线性升高(P=0.034)。低、中和高剂量组谷丙转氨酶活性显著降低(P<0.05);低、中剂量组总胆固醇含量显著降低(P<0.05),且总胆固醇含量与1,6-二磷酸果糖钙添加量呈二次曲线关系(P=0.004);中、高剂量组高密度脂蛋白含量显著提高(P<0.05);中剂量组低密度脂蛋白含量显著降低(P<0.05),且低密度脂蛋白含量与1,6-二磷酸果糖钙添加量呈二次曲线关系(P=0.036)。低、中和高剂量组的IgM和IgA含量均显著增加(P<0.05),其中IgA含量随1,6-二磷酸果糖钙添加量的增加呈线性升高(P=0.047)。分别对产蛋率、蛋壳强度、总胆固醇含量和低密度脂蛋白含量进行二次曲线方程拟合表明,当1,6-二磷酸果糖钙添加量分别为179、186、243和268mg/kg时,产蛋率、蛋壳强度、总胆固醇含量和低密度脂蛋白含量分别达到最佳。研究提示:日粮中添加200和300mg/kg1,6-二磷酸果糖钙较佳,基于产蛋率、蛋壳强度、总胆固醇含量和低密度脂蛋白含量考虑,适宜的1,6-二磷酸果糖钙添加量分别为179、186、243和268mg/kg。

关键词：海兰褐蛋鸡 1,6-二磷酸果糖钙生产性能蛋品质血清生化指标免疫指标

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加铁煤气化细渣活性炭高效处理含酚废水

工业水处理 2024年第7期44卷 119-124页

作者：高宇豪段永蓉李鸿王建军魏迎春李强亢福仁任立庆榆林学院能源工程学院陕西榆林719000 南京工业大学能源科学与工程学院江苏南京210000 榆林学院生命科学学院陕西榆林719000

以价格低廉、亟需大规模高值应用的煤气化细渣为载体,采用浸渍-煅烧法制备负载铁的煤气化细渣活性炭(Fe/MAC)催化剂,并以未加铁的煤气化细渣活性炭(MAC)为对照,对模拟苯酚废水进行处理实验研究。用扫描电镜(SEM)、比表面积及微孔分析仪(... 详细信息

以价格低廉、亟需大规模高值应用的煤气化细渣为载体,采用浸渍-煅烧法制备负载铁的煤气化细渣活性炭(Fe/MAC)催化剂,并以未加铁的煤气化细渣活性炭(MAC)为对照,对模拟苯酚废水进行处理实验研究。用扫描电镜(SEM)、比表面积及微孔分析仪(BET)、X射线光电子能谱仪(XPS)对催化剂进行表征,并系统研究了不同反应时间、反应温度以及催化剂投加量对苯酚去除率的影响。结果表明,通过浸渍-煅烧法将铁成功负载到了MAC上,基于Fe/MAC/H_(2)O_(2)非均相Fenton体系去除苯酚最佳条件为Fe/MAC催化剂投加量为0.35 g、反应时长为5 h、温度为70℃。该研究结果为缓解传统Fenton法中铁对废水的二次污染和催化剂分离难的问题提供了新思路,拓展了煤气化细渣的高值应用,为苯酚废水的高效处理提供了新途径。

关键词：煤气化细渣催化剂载体含酚废水活性炭

含吡啶类腈类医药中间体废盐对海洋青鳉鱼胚胎的毒性效应

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环境污染与防治 2024年第3期46卷 339-347页

作者：李乾永梁川马正茁孙哲诚刘怀淇徐炎华刘志英南京工业大学环境科学与工程学院江苏南京211816

工业废盐是化工生产过程中产生的副产结晶盐。农药、医药等精细化工行业的生产中往往伴随着大量废盐的产生,《国家危险废物名录》中明确将多种化学制药、农药生产过程中产生的废盐列为危险废物。然而,由于处理成本高昂和处置能力不足,... 详细信息

工业废盐是化工生产过程中产生的副产结晶盐。农药、医药等精细化工行业的生产中往往伴随着大量废盐的产生,《国家危险废物名录》中明确将多种化学制药、农药生产过程中产生的废盐列为危险废物。然而,由于处理成本高昂和处置能力不足,废盐限制了企业的健康发展。在《危险废物环境管理指南化工废盐》中明确了工业废盐无害化排海的相关要求,但目前仍缺少相关领域的实验研究。海洋青鳉鱼(Oryzias melastigma)具有与斑马鱼类似的研究特征优势,是国际生命科学学会(ILSI)与健康和环境科学研究所(HESI)认定的海洋生态毒理学的重要研究工具。研究了含吡啶类腈类医药中间体废盐和经过实验室处理后的除杂盐对海洋青鳉鱼胚胎的急性毒性、发育毒性以及对抗氧化系统、免疫系统的影响。结果表明,废盐暴露对海洋青鳉鱼胚胎的生存和发育有显著影响并造成系统性损伤,而除杂盐对海洋青鳉鱼胚胎没有较大影响。本研究为废盐排海提供了基础的理论支持,也为后续实验开展提供了良好的思路引导。

关键词：工业废盐海洋青鳉鱼急性毒性发育毒性抗氧化系统

稳定表达PDCoV-S和RBD蛋白的293T细胞系构建与免疫原性评价

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中国兽医学报 2024年第5期44卷 959-965页

作者：肖丽赵淑庆袁雪松范丽原易鑫陈琢琦李彬李基棕主性贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025 江苏省农业科学院兽医研究所农业农村部兽用生物制品工程技术重点实验室江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210095 江苏大学生命科学学院/食品与生物工程学院江苏镇江212013 南京工业大学药学院江苏南京210000

为构建稳定表达猪δ冠状病毒(PDCoV)S和RBD蛋白的293T细胞系,获得PDCoV S和RBD蛋白。本研究将优化合成的PDCoV S蛋白全长基因及其RBD的表达质粒进行双酶切鉴定,将重组质粒pLV-S-Puro、pLV-RBD-Puro、psPRX2、pMD2.G同时转染293T细胞中... 详细信息

为构建稳定表达猪δ冠状病毒(PDCoV)S和RBD蛋白的293T细胞系,获得PDCoV S和RBD蛋白。本研究将优化合成的PDCoV S蛋白全长基因及其RBD的表达质粒进行双酶切鉴定,将重组质粒pLV-S-Puro、pLV-RBD-Puro、psPRX2、pMD2.G同时转染293T细胞中进行慢病毒包装,收集上清感染293T细胞,经嘌呤霉素初筛得到的多细胞克隆,进一步通过终点稀释法筛选获得稳定表达PDCoV S和RBD蛋白的单克隆293T细胞系,通过Western blot检测蛋白表达,用纯化的PDCoV S和RBD蛋白分别免疫BALB/c小鼠,对重组蛋白进行免疫原性检测。结果表明,稳定表达PDCoV S和RBD蛋白的293T细胞系构建成功,获得了重组慢病毒,纯化PDCoV S和RBD重组蛋白均可以诱导小鼠产生较高的IgG抗体(S:1.2;RBD:0.9),中和抗体水平分别达1∶128和1∶64。本研究构建的293T细胞系能稳定表达PDCoV S和RBD蛋白,为进一步研制PDCoV亚单位疫苗奠定了基础。

关键词： 293T细胞系 PDCoV 慢病毒稳定表达

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酵母核苷酸对奶牛生产性能、乳品质、血清指标及经济效益的影响

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饲料研究 2024年第12期47卷 7-11页

作者：陈晓春黄小权汤亦文张磊南京工业大学生物与制药工程学院江苏南京211816 南京同凯兆业生物技术有限责任公司江苏南京211806

试验旨在研究酵母核苷酸对奶牛生产性能、乳品质、血清指标及经济效益的影响。选择体重、胎次、产奶量相近的40头健康荷斯坦奶牛,随机分为4组,每组10个重复,每个重复1头奶牛。对照组饲喂基础饲粮,试验1组、试验2组和试验3组分别在基础... 详细信息

试验旨在研究酵母核苷酸对奶牛生产性能、乳品质、血清指标及经济效益的影响。选择体重、胎次、产奶量相近的40头健康荷斯坦奶牛,随机分为4组,每组10个重复,每个重复1头奶牛。对照组饲喂基础饲粮,试验1组、试验2组和试验3组分别在基础饲粮中添加0.2%、0.4%和0.8%酵母核苷酸。预试期10 d,正式试验期60 d。结果显示,与对照组相比,试验3组奶牛的平均日采食量显著升高(P<0.05)。试验2组和试验3组奶牛的平均日产奶量显著升高(P<0.05),试验2组奶牛的料奶比显著降低(P<0.05)。与对照组相比,试验2组奶牛的鲜奶中乳脂率显著升高(P<0.05);各试验组奶牛的乳总体细胞数显著降低(P<0.05)。试验组奶牛乳房炎发病率为0,与对照组相比显著降低(P<0.05)。试验2组和试验3组奶牛的血清免疫球蛋白G(IgG)含量显著高于对照组(P<0.05)。试验2组奶牛的利润比对照组增加12.07%,经济效益明显提高。研究表明,饲喂酵母核苷酸可以提高奶牛的生产性能和乳品质,改善血清指标,提高经济效益,建议酵母核苷酸添加量为0.4%。

关键词：酵母核苷酸奶牛生产性能乳品质血清指标经济效益

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微生物发酵合成灵菌红素的研究进展

微生物学杂志 2024年第3期44卷 1-11页

作者：章文明羊家辉姜岷信丰学南京工业大学生物与制药工程学院材料化学工程国家重点实验室江苏南京211816

灵菌红素是一种天然的红色三吡咯色素,主要源自于微生物的次级代谢过程,其具有抗菌、抗肿瘤等功能,在医药、环境、染料等领域具有广阔的应用前景。随着合成生物学技术的不断发展,利用微生物发酵法合成灵菌红素是实现灵菌红素工业化生产... 详细信息

灵菌红素是一种天然的红色三吡咯色素,主要源自于微生物的次级代谢过程,其具有抗菌、抗肿瘤等功能,在医药、环境、染料等领域具有广阔的应用前景。随着合成生物学技术的不断发展,利用微生物发酵法合成灵菌红素是实现灵菌红素工业化生产的有效途径之一。目前,生产灵菌红素的微生物主要以粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)为主。本文系统介绍了灵菌红素的结构性质和应用潜力,重点阐述了粘质沙雷氏菌中灵菌红素的合成路径,总结了通过高产菌株选育与改造、发酵工艺优化和转录因子调控等策略提高灵菌红素合成的最新研究进展,分析了不同提取纯化工艺的效率,并对未来灵菌红素的高效合成进行了展望,以进一步提高灵菌红素的工业化生产效率。

关键词：灵菌红素粘质沙雷氏菌生物合成发酵工艺调控因子

核酸功能化纳米探针检测水体中痕量Pb^(2+)的研究

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生物加工过程 2024年第3期22卷 302-308页

作者：张勤姜涵李向玲宋天顺谢婧婧南京工业大学生物与制药工程学院江苏南京211800

铅离子(Pb^(2+))属于三大重金属污染物之一,是一种严重危害环境和人体健康的重金属元素。基于此,本研究建立一种简便、经济的水体中Pb^(2+)的检测方法。将纳米金颗粒(AuNP)作为荧光团标记脱氧核糖核酸酶(DNAzyme)的载体和猝灭剂,两者形... 详细信息

铅离子(Pb^(2+))属于三大重金属污染物之一,是一种严重危害环境和人体健康的重金属元素。基于此,本研究建立一种简便、经济的水体中Pb^(2+)的检测方法。将纳米金颗粒(AuNP)作为荧光团标记脱氧核糖核酸酶(DNAzyme)的载体和猝灭剂,两者形成AuNP DNAzyme纳米探针。利用DNAzyme对目标物Pb^(2+)进行特异性识别,Pb^(2+)催化DNAzyme底物链裂解,实现荧光信号恢复。基于荧光信号的变化,实现了Pb^(2+)在5~125 nmol/L范围内的线性检测,并且Pb^(2+)的检出限为3.41 nmol/L。此外,该传感器对Pb^(2+)有较好的抗干扰性能,对Pb^(2+)加标的河水样品进行检测,回收率为95.90%~100.83%。表明该传感器在环境监测领域具有广阔的应用前景。

关键词：铅离子 DNAzyme 纳米金颗粒 AuNP DNAzyme纳米探针重金属污染