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分离富集磷酸化/糖基化蛋白质/肽的磁固相萃取新材料

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分析测试学报 2025年第1期44卷 1-11页

作者：鲁艳张森张锋葛鸿延庄琬月乔俊琴练鸿振生命分析化学国家重点实验室南京大学化学化工学院南京大学现代分析中心江苏南京210023

蛋白质磷酸化和糖基化是蛋白质两种主要的翻译后修饰过程。磷酸化和糖基化蛋白质在细胞的各个生命周期内起着关键的作用,对于临床疾病的早期诊断等也具有重要的意义。但由于它们在实际生物样品中含量低、基质干扰大,选择合适的方法对其... 详细信息

蛋白质磷酸化和糖基化是蛋白质两种主要的翻译后修饰过程。磷酸化和糖基化蛋白质在细胞的各个生命周期内起着关键的作用,对于临床疾病的早期诊断等也具有重要的意义。但由于它们在实际生物样品中含量低、基质干扰大,选择合适的方法对其进行分离富集成为蛋白质组学研究中决定性的步骤之一。磁固相萃取(MSPE)是以磁性纳米颗粒为吸附剂的固相萃取技术(SPE),较之常规SPE具有操作简单、环境友好、材料易于回收利用等优势,因而被广泛应用于磷酸化和糖基化蛋白/肽段等分析前的分离富集。该文对近5年文献中用于磷酸化和糖基化蛋白质分离富集的MSPE材料进行系统的归纳和评述,并对此类分离富集材料的未来发展方向进行了展望和探讨。

关键词：磷酸化蛋白质糖基化蛋白质磁固相萃取磁性纳米颗粒

盐酸达拉他韦片在中国健康受试者中的生物等效性研究

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中国临床药理学与治疗学 2025年

作者：谢晶王小妮闵捷刘敏朱旭胡旺卢畅张冉周焕宫建沈阳药科大学生命科学与生物制药学院药物流行病与临床药物评价课题组蚌埠医科大学第一附属医院临床试验研究中心南京圣和药业股份有限公司

目的：评估受试制剂盐酸达拉他韦片与参比制剂盐酸达拉他韦片(百立泽TM)在中国健康受试者中的生物等效性和安全性。方法：采用单次给药、随机、开放、两周期、双交叉试验设计，入组60例健康受试者，空腹组和餐后组各30例。受试者随机分... 详细信息

目的：评估受试制剂盐酸达拉他韦片与参比制剂盐酸达拉他韦片(百立泽TM)在中国健康受试者中的生物等效性和安全性。方法：采用单次给药、随机、开放、两周期、双交叉试验设计，入组60例健康受试者，空腹组和餐后组各30例。受试者随机分成两组，第一周期单次口服1片（60 mg）受试制剂或参比制剂，第8天交叉服药。结果：空腹组盐酸达拉他韦片受试制剂和参比制剂的主要药代动力学参数：Cmax分别为（1 102.690±311.345）和（1 174.800±361.642）ng/mL；AUC0-t分别为（13 517.051±3 576.349）和（13 503.448±4 022.914）h·ng·mL-1；AUC0-∞分别为（13 672.052±3 626.297）和（13 669.602±4 059.563）h·ng·mL-1。餐后组盐酸达拉他韦片受试制剂和参比制剂的主要药代动力学参数：Cmax分别为（791.733±230.334）和（872.000±303.921）ng/mL；AUC0-t分别为（10 974.708±3 213.564）和（11 217.253±4 060.319）h·ng·mL-1；AUC0-∞分别为（11 140.018±3 261.934）和（11 396.162±4 143.077）h·ng·mL-1。空腹及餐后条件下，受试者口服盐酸达拉他韦片受试制剂与参比制剂60 mg后血浆中的达拉他韦的主要药代动力学参数(Cmax、AUC0-t和AUC0-∞)的几何均值比的90%置信区间均在80.00%-125.00%范围内。两组均无严重不良事件。结论：在空腹或餐后状态下，盐酸达拉他韦片受试制剂与参比制剂具有生物等效性，且安全性良好。

关键词：盐酸达拉他韦片药物动力学生物等效性

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D-谷氨酰胺的制备

有机化学 2006年第4期26卷 514-517页

作者：钱绍松吴晓燕李加友刘毅陈然焦庆才南京大学生命科学院医药生物技术国家重点实验室南京210093

报道了以化学合成和生物转化的方法制备光学纯D-谷氨酰胺.首先在中试规模上用化学方法合成DL-谷氨酰胺.即以廉价的DL-谷氨酸为原料,采用邻苯二甲酰基作为保护基保护L-谷氨酸的α-氨基,醋酐回流15min,使其分子内脱水生成N-邻苯二甲酰-DL... 详细信息

报道了以化学合成和生物转化的方法制备光学纯D-谷氨酰胺.首先在中试规模上用化学方法合成DL-谷氨酰胺.即以廉价的DL-谷氨酸为原料,采用邻苯二甲酰基作为保护基保护L-谷氨酸的α-氨基,醋酐回流15min,使其分子内脱水生成N-邻苯二甲酰-DL-谷氨酸酐,在常温、常压条件下,分别与2mol/L氨水反应生成中间产物N-邻苯二甲酰-DL-谷氨酰胺,中间产物在室温条件下与0.5mol/L水合肼反应48h脱除保护基,以57%总收率得到DL-谷氨酰胺.在37℃,pH4.8的条件下,利用大肠杆菌(***1.505)脱羧酶将底物浓度30g/L的DL-谷氨酰胺中L型对映体在8h内完全转化为4-氨基丁酰胺,分离得到D-谷氨酰胺.

关键词： D-谷氨酰胺 DL-谷氨酸脱羧酶

时间分辨光声量热法研究碳氧血红蛋白的光解反应

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声学学报 2008年第5期33卷 425-429页

作者：渠敏李家璜张淑仪水修基华子春南京大学声学研究所近代声学实验室南京210093 南京大学生命科学院医药生物技术实验室南京210093

为了解血红蛋白与其配合物的结合与解离过程中,各反应分子的结构变化和能量变化的动力学过程以及作用机理,本文利用光声量热法测量了碳氧血红蛋白的光解反应的焓变和结构体积变化。脉冲激光引起碳氧血红蛋白的光解反应,由此激发的声信... 详细信息

为了解血红蛋白与其配合物的结合与解离过程中,各反应分子的结构变化和能量变化的动力学过程以及作用机理,本文利用光声量热法测量了碳氧血红蛋白的光解反应的焓变和结构体积变化。脉冲激光引起碳氧血红蛋白的光解反应,由此激发的声信号即反映光解反应的过程。因此,利用超声换能器测得光解反应产生的声信号,可测定反应过程中的瞬态焓变和结构体积变化等动力学参量。实验中的激发光源为宽度8ns的脉冲激光,光声信号由共振频率为1.5MHz的PZT压电换能器接收。对人、猪、牛、马和兔等哺乳动物的碳氧血红蛋白的光解反应进行了研究,考虑实验系统的时间窗口和碳氧血红蛋白的光解反应中各个过程的弛豫时间,确定实验中检测到的结果对应于寿命为800ns的三级弛豫过程。结果表明,不同物种的血红蛋白在三级弛豫过程中的动力学参量(焓变和结构体积变化)存在明显差异,最后对这种差异的原因进行了分析和讨论。

关键词：碳氧血红蛋白光解反应光声量热法时间分辨动力学参量结构变化体积变化光声信号

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脂氧合酶在炎症相关疾病中作用的研究进展

南京农业大学学报 2025年第1期48卷 27-45页

作者：单锴周姗姗李茜周克茹李春保南京农业大学食品科学技术学院江苏南京210095 南京市江宁医院(南京医科大学附属江宁医院) 江苏南京211100 中科南京生命健康高等研究院江苏南京211135

脂氧合酶(lipoxygenase,LOX)是一类含有非血红素铁的双加氧酶,在人体中广泛表达,并在多种活化的免疫细胞和肿瘤组织中表达上调。LOX催化长链多不饱和脂肪酸形成相应的氢过氧化物。这些代谢物在生理条件下调节血管功能、肾脏功能、生殖... 详细信息

脂氧合酶(lipoxygenase,LOX)是一类含有非血红素铁的双加氧酶,在人体中广泛表达,并在多种活化的免疫细胞和肿瘤组织中表达上调。LOX催化长链多不饱和脂肪酸形成相应的氢过氧化物。这些代谢物在生理条件下调节血管功能、肾脏功能、生殖系统功能和免疫防御,而在病理条件下导致疼痛、发热和炎症,进而在多种急、慢性疾病中起着重要作用。目前已经在人体内发现6个LOX基因,其可以通过可变剪切和蛋白修饰机制形成更多种效应蛋白。6大类LOX分别具有不同的表达谱、底物偏好性和代谢产物,因此也具有不同的功能分工。本文从LOX的分布和代谢特性入手,综述了它们与炎症相关疾病的关系,从生物化学角度介绍了LOX的表达与活性调控机制并展望了靶向LOX功能缓解相关病理损伤的营养学和临床医学策略。

关键词：脂氧合酶炎症多不饱和脂肪酸脂质介质

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突变在基因组进化中的意义

遗传 2006年第5期28卷 631-638页

作者：陈玲玲彭贵子张伟丽田大成南京大学生命科学院医药生物技术国家重点实验室南京210093

在漫长的进化历史中,各物种间和物种内基因组的差异是如何形成、积累乃至保留下来的,不仅是进化生物学中需要解决的核心问题,也是整个生命科学面临的基本问题之一。对该问题的探求必然要通过对突变的深入了解,因为突变不仅是基因组进化... 详细信息

在漫长的进化历史中,各物种间和物种内基因组的差异是如何形成、积累乃至保留下来的,不仅是进化生物学中需要解决的核心问题,也是整个生命科学面临的基本问题之一。对该问题的探求必然要通过对突变的深入了解,因为突变不仅是基因组进化的重要驱动力,还是基因组进化研究的基础。文章围绕突变的性质及其在基因组进化中的深远意义,系统介绍了国际上相关研究的发展历程,所获得的成果和最新动向。

关键词：碱基突变插入/缺失突变基因组进化

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基因重复的研究进展

遗传 2006年第7期28卷 886-892页

作者：彭贵子陈玲玲田大成南京大学生命科学院医药生物技术国家重点实验室南京210093

基因重复是基因通过不等交换、逆转录转座或全基因组重复等途径产生一个与原基因相似的基因或碱基序列。它与生物体基因组大小的进化、新基因的起源、物种的分化以及基因抗突变的能力大小等都密切相关。文章综述了重复基因的产生机制、... 详细信息

基因重复是基因通过不等交换、逆转录转座或全基因组重复等途径产生一个与原基因相似的基因或碱基序列。它与生物体基因组大小的进化、新基因的起源、物种的分化以及基因抗突变的能力大小等都密切相关。文章综述了重复基因的产生机制、保留机制、选择作用、分化途径以及重复基因进化速率等方面的相关研究,揭示了基因重复对生物进化的重要性,以引起大家对该领域的关注。

关键词：基因重复重复基因不等交换逆转录转座全基因组重复

Cell Cycle Kinetic Analysis in the Cortical Regions of the Lentil Primary Root During Germination

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Acta Botanica Sinica 2002年第7期44卷 764-770页

作者：喻富根庞延军赵剑春王强南京大学生命科学学院生物科学与技术系南京210093

Cell cycle kinetic activity in the cortical cells of the lentil (Lens culinaris Me-die. cv. Verte du Puy) primary root during germination was examined both temporally and spatially. Immunohistochemical and cytological evidence indicated that DNA replication and cell division started in the cortical cells of tire lentil primary root after around 13 and 17 h of imbibition, respectively. The first cells in DNA synthesis and the First mitotic figures all appeared in the cortical cells about I mm front the root-cap junction, but these divided cells had synthesized their DNA during the maturity of seed instead of during germination. The kinetic pattern of activity of the first cell cycle showed that these cells were not activated synchronously, but re-entered the cell cycle in turn depending on their places in the root tip, However, the adjacent cells partially synchronously proceeded their cell cycle.

关键词： cell cycle primary root germination immunohistochemistry Lens culinaris

新型重组纤维蛋白原受体拮抗剂的表达、纯化及活性研究

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中国药科大学学报 2005年第2期36卷 173-178页

作者：姚佳杨坤杨建波华子春杨洁南京大学生命科学院医药生物技术国家重点实验室南京210093

目的:构建两个预期能够成为纤维蛋白原受体拮抗剂的重组融合蛋白。方法:人工合成北美水蛭素Decorsin的基因序列,利用基因工程的方法构建两个重组蛋白,分别是AnnV D39:AnnexinV加上Decorsin全序列和AnnV- D2 7:AnnexinV加上Decorsin的羧... 详细信息

目的:构建两个预期能够成为纤维蛋白原受体拮抗剂的重组融合蛋白。方法:人工合成北美水蛭素Decorsin的基因序列,利用基因工程的方法构建两个重组蛋白,分别是AnnV D39:AnnexinV加上Decorsin全序列和AnnV- D2 7:AnnexinV加上Decorsin的羧基端2 7个氨基酸序列。在AnnV D39的AnnexinV和Decorsin序列之间加入了由10个氨基酸组成的连接肽GGGGSGGGGS。利用质粒pET -2 8(a +)作为载体,将上述融合蛋白在大肠杆菌E coliBL2 1(DE3)中以包涵体的形式进行高效表达,纯化后,进行抗血小板聚集活性测试。结果:基因表达的产物在变性条件下用DEAE -Cellulose5 2和SepharoseCL -4B层析纯化。随后进行的血小板聚集分析表明,An nV D39具有良好的抗血小板凝集活性,而AnnV D2 7没有显示相似活性。结论:AnnV- D39作为一种新的纤维蛋白原受体抑制剂显示了良好的活性,而Annv- D2 7需要进行进一步的修饰。

关键词：纤维蛋白原受体拮抗剂融合蛋白抗血小板聚集活性