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基于功能纳米材料的灵敏生物传感策略

中国科学：化学 2011年第10期41卷 1658-1658页

作者：鞠熀先南京大学生命分析化学国家重点实验室南京大学化学化工学院南京210093

21世纪的第一个十年被称为"传感的十载".功能纳米材料为灵敏的生物传感器件(包括光学和电生物传感)的制备提供了优秀的平台.这方面的大多数工作主要聚焦于不同纳米材料的生物功能化,例如金属纳米粒子、半导体纳米粒子和碳纳米粒子,功能... 详细信息

21世纪的第一个十年被称为"传感的十载".功能纳米材料为灵敏的生物传感器件(包括光学和电生物传感)的制备提供了优秀的平台.这方面的大多数工作主要聚焦于不同纳米材料的生物功能化,例如金属纳米粒子、半导体纳米粒子和碳纳米粒子,功能化方式包括物理吸附、静电结合、特异性识别或共价键合.这些生物功能化纳米材料可以用作催化剂、电导体、光发射剂、载体或示踪剂,以获取被放大的检测信号、稳定的识别探针或生物传感界面.设计的信号放大策略已经极大地促进了不同领域中稳定、特异、具有选择性和灵敏的生物传感器的发展.本文介绍了基于功能纳米材料的一些生物传感新原理和检测新策略,也讨论了纳米材料的生物功能化方法和生物传感在蛋白质的免疫分析、DNA检测、糖分析和细胞传感中的应用.

关键词：纳米生物传感生物传感器纳米材料生物功能化信号放大生物分析生物识别

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细胞凋亡检测技术:进展及应用

药学学报 2023年第8期58卷 2059-2069页

作者：高梦月华子春南京大学生命科学学院医药生物技术国家重点实验室江苏南京210023 江苏省产业技术研究院医药生物技术研究所常州南京大学高新技术研究院江苏常州213164 南京吉芮康生物科技研究院江苏南京210044 南京大学深圳研究院广东深圳518057

细胞凋亡或程序性细胞死亡是一个涉及人类多种生理病理状况的普遍现象,它可能会导致神经系统功能衰退、缺血性损伤、自身免疫性疾病及癌症等疾病的发生。细胞的凋亡状态可以通过形态学、生物化学、分子生物学及免疫学等技术手段进行体... 详细信息

细胞凋亡或程序性细胞死亡是一个涉及人类多种生理病理状况的普遍现象,它可能会导致神经系统功能衰退、缺血性损伤、自身免疫性疾病及癌症等疾病的发生。细胞的凋亡状态可以通过形态学、生物化学、分子生物学及免疫学等技术手段进行体外检测。体内细胞凋亡检测探针也在不断发展,出现了多种新型的试剂和方法。但是,每一种检测方法或试剂都不是完美的,它们都有各自的优缺点及适用条件。随着细胞凋亡检测技术的应用日益广泛,如何选择一种合适的方法来检测细胞凋亡以及如何界定每种凋亡检测方法的适用范围常常使研究者感到困惑。因此,对现有的细胞凋亡检测方法的优缺点和适用条件进行比较是必要的。本文综述了凋亡细胞的形态特征、分子机制和特异性的生化变化,并且总结了基于这些特征变化而建立的体内外凋亡检测方法及其优缺点和适用范围。本综述还强调了现有的用于体内凋亡检测的示踪剂及其潜力和局限性,以及细胞凋亡成像在多种疾病领域的临床应用。

关键词：细胞凋亡检测生物化学免疫学适用范围体内示踪剂

半夏厚朴汤及其组成中药抗焦虑和抑郁研究进展

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世界科学技术-中医药现代化 2003年第4期5卷 16-21页

作者：王业民周建军孔令东南京大学生命科学学院/医药生物技术国家重点实验室南京210093

目的:综述半夏厚朴汤及其组成中药抗焦虑和抑郁研究进展。方法:查阅国内外近年来有关文献结合相关的研究成果,从半夏厚朴汤对动物焦虑和抑郁行为、神经生化机制、免疫系统功能、血脂代谢、机体氧化防御系统等层次进行阐述。结果与结论:... 详细信息

目的:综述半夏厚朴汤及其组成中药抗焦虑和抑郁研究进展。方法:查阅国内外近年来有关文献结合相关的研究成果,从半夏厚朴汤对动物焦虑和抑郁行为、神经生化机制、免疫系统功能、血脂代谢、机体氧化防御系统等层次进行阐述。结果与结论:半夏厚朴汤及其组成中药抗焦虑和抑郁具有一定的科学性。

关键词：半夏厚朴汤焦虑症抑郁症配伍血脂代谢中药化学成分药效精神障碍

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雷公藤甲素的肝损伤及减毒策略

中国实验方剂学杂志 2024年第6期30卷 196-204页

作者：王婷孙珂李静颐周雅丽李红梅北京中医药大学生命科学学院北京100029

传统中药雷公藤是临床上的常用药物,具有祛风湿、杀虫解毒、消肿止痛、活血通络的功效。现代药理学表明,雷公藤具有抗炎、抗肿瘤和免疫抑制等药理作用。现广泛用于自身免疫性疾病、肾脏性疾病和肿瘤等疾病的治疗。雷公藤具有多种化学成... 详细信息

传统中药雷公藤是临床上的常用药物,具有祛风湿、杀虫解毒、消肿止痛、活血通络的功效。现代药理学表明,雷公藤具有抗炎、抗肿瘤和免疫抑制等药理作用。现广泛用于自身免疫性疾病、肾脏性疾病和肿瘤等疾病的治疗。雷公藤具有多种化学成分,其中雷公藤甲素(TP)对人体消化、循环、生殖等系统均具有不同程度的损害,以肝损伤最常见,这极大的限制了TP在新药研发和产业化应用中的拓展空间。因此,笔者聚焦于TP致肝损伤这一研究热点,针对TP致肝损伤的临床表现、损伤机制及减毒策略进行国内外相关文献的检索和整理,这有助于为TP的临床用药安全性和科学用药监管提供科学依据。TP致肝损伤的临床表现多为氨基转移酶异常、食欲不振、恶心呕吐、纳差、皮肤和巩膜黄染、小便黄等。以上临床表现的机制涉及细胞凋亡、氧化应激、影响细胞色素P450超家族、巨噬细胞极化和生物钟基因Clock调控等几个方面。其中细胞凋亡与神经源性位点缺口同系物蛋白1(Notch1)、动力蛋白相关蛋白1(Drp1)-细胞色素C(Cyt C)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、肿瘤抑制蛋白53(p53)、FAS细胞表面死亡受体(Fas)/Caspase-8等信号通路有关;氧化应激与抑制核转录因子E2相关因子(NRF2)信号通路、促进细胞色素P4502E1(CYP2E1)表达引发活性氧(ROS)过度积累等有关;对细胞色素P450超家族的影响表现为:降低细胞色素P4503A(CYP3A)、细胞色素P4502C9(CYP2C9)、细胞色素P4502C19(CYP2C19)、细胞色素P4501A2(CYP1A2)等的底物亲和力、活性和表达;促进巨噬细胞向M1型转化与引发炎症因子分泌和内毒素积累有关;机体内在的生物钟基因Clock的节律性调控与影响细胞色素P4503A11(CYP3A11)代谢酶的表达有关。临床应用中的减毒策略包括炮制减毒和配伍减毒法,有助于减毒的中药及单体成分包括甘草、白芍、金钱草、绿豆、生地黄、藏红花素和芍药苷等。通过对上述内容进行综述和探讨,为TP的相关研究和临床应用提供更多参考。

关键词：雷公藤甲素肝损伤临床特征机制减毒策略

低叶绿素b水稻突变体类囊体膜的比较蛋白质组学

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生物化学与生物物理进展 2006年第7期33卷 653-659页

作者：陈熙崔香菊 YING-XIN ZHAO 张炜南京农业大学生命科学学院生物化学与分子生物学系南京农业大学．GEHealthcareBiosciences蛋白质组学合作示范实验室南京210095 Department of Chemistry University of Tennessee Knoxville TN37996 USA

采用蓝绿温和胶凝胶电泳(blue-nativepolyacrylamidegel-electrophoresis,BN-PAGE),以及改进的第二向SDS-PAGE分离了水稻低叶绿素b突变体ZH249-Y和野生型ZH249-W类囊体膜蛋白复合物,系统比较了突变体和野生型各复合物亚基的表达差异.结... 详细信息

采用蓝绿温和胶凝胶电泳(blue-nativepolyacrylamidegel-electrophoresis,BN-PAGE),以及改进的第二向SDS-PAGE分离了水稻低叶绿素b突变体ZH249-Y和野生型ZH249-W类囊体膜蛋白复合物,系统比较了突变体和野生型各复合物亚基的表达差异.结果显示,第一向BN-PAGE分离了PSⅠ-LHCⅠ、LHCⅠ缺失的PSⅠ、ATP合成酶、细胞色素b6f、CP43缺失的PSⅡ及LHCⅡ六种复合物.上述各复合物经第二相SDS-Urea-PAGE分离后,利用胶内酶解,高效液相层析分离肽段,电喷雾串联质谱鉴定了复合物的亚基.结合免疫印迹研究,证明和野生型相比,突变体光系统Ⅱ捕光天线复合体的表达量适度下降,但光系统Ⅰ捕光天线破坏严重,同时光系统Ⅱ核心蛋白和ATP合成酶的表达量上升.研究结果对揭示低叶绿素b水稻突变体较高光化学效率和光稳定性的分子基础提供了线索,同时也表明,改进的BN/SDS-PAGE双向电泳不仅可以有效地分离膜蛋白复合物及亚基,也可以进行不同生理条件下,或野生型和突变体之间膜蛋白质组的比较研究.

关键词：蓝绿温和胶凝胶电泳低叶绿素b突变体水稻(Oryza sativa L.) 类囊体膜比较蛋白质组学

人复制蛋白变体胶乳增强免疫检测试剂盒的研制

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药物生物技术 2015年第3期22卷 203-206页

作者：曹娅华子春徐根兴南京大学生命科学院医药生物技术国家重点实验室江苏南京210093 江苏省基因药物工程技术研究中心江苏苏州215128

初步建立了人复制蛋白变体（CIZ1-V）的胶乳增强免疫比浊检测方法,用于早期肺癌的检测。用制备的CIZ1-V多克隆抗体（兔抗）与0.13μm粒径的胶乳微球颗粒进行化学偶联,研制CIZ1-V试剂盒,并对试剂盒性能进行鉴定。结果表明,CIZ1-V试剂盒... 详细信息

初步建立了人复制蛋白变体（CIZ1-V）的胶乳增强免疫比浊检测方法,用于早期肺癌的检测。用制备的CIZ1-V多克隆抗体（兔抗）与0.13μm粒径的胶乳微球颗粒进行化学偶联,研制CIZ1-V试剂盒,并对试剂盒性能进行鉴定。结果表明,CIZ1-V试剂盒标准曲线呈线型,相关系数R2=0.998 8;检测范围为0.20~8.00μg/m L,灵敏度为0.11μg/m L,检测限为0.20μg/m L。试剂盒对表达纯化所得目的蛋白的回收率范围为98.92%~104.00%,平均100.91%;平均批内及批间变异系数均小于5%,符合国家检测试剂盒标准。试剂盒和Elisa方法对于表达纯化所得目的蛋白的回收率无显著差异（P〉0.05）,对1 L菌液的CIZ1-V表达量测定结果也无显著差异（P〉0.05）,为早期肺癌的血清检测做了充分准备。

关键词：肺癌复制蛋白变体多克隆抗体胶乳颗粒化学偶联试剂盒

基于感染力与免疫作用的新型冠状病毒肺炎疫情传播模型

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生物化学与生物物理进展 2022年第10期49卷 1874-1888页

作者：刘程芳梁雨朝周健左永春罗辽复内蒙古大学生命科学学院呼和浩特010070 内蒙古大学省部共建草原家畜生殖调控与繁育国家重点实验室呼和浩特010070 内蒙古大学物理科学与技术学院呼和浩特010021

目的严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)变体往往具有更强的感染力与免疫逃逸能力,目前出现的SARS-CoV-2变体种类繁多,疫情评估与防控形势严峻。本文希望通过建立模拟病毒传染的理论模型,对SARS-CoV-2及其变体引起的疫情进行追踪... 详细信息

目的严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)变体往往具有更强的感染力与免疫逃逸能力,目前出现的SARS-CoV-2变体种类繁多,疫情评估与防控形势严峻。本文希望通过建立模拟病毒传染的理论模型,对SARS-CoV-2及其变体引起的疫情进行追踪与预测,并对它们的综合传染性进行评估。方法根据方格传染病模型,对传染持续时间和群体免疫作用的相互关系进行推导,并在此基础上建立了新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情感染传播的普遍理论模型,提出感染力参数A和免疫作用参数B,将传染时间与感染人数的复杂关系公式化,用于预测感染日变曲线。还引入了突变株综合传染性参数A/B^(2/3),用以定量比较各突变株的综合传染能力,并对感染参数A和B不与地域因素相关的猜想进行了验证。结果通过COVID-19疫情传播的理论模型,对病毒步行次数与传染时间做出了较为精准的预测。通过对突变株感染能力与电性变化的分析,指出了突变株传染性和突变残基电性变化的内在联系。分析了突变株的参数变化,定量比较了各突变株的综合传染能力,得出了综合传染性排行。还验证了参数A和B只与病毒自身性质、病毒与人体共存的性质相关,而与地域无关的猜想,并对各爆发地域的防疫水平进行了评估与比较。结论本文建立了COVID-19疫情传播的理论模型,在预测疫情持续时间、每日新增感染人数与评估病毒感染力、免疫逃逸能力、综合传染性、地域防疫水平方面具有一定作用,还根据病毒变异可能导致的参数变化给出了防疫注意事项与相关对策的建议。

关键词：新型冠状病毒肺炎疫情感染因素与模型感染能力免疫作用病毒变异

2DE和MALDI-TOF/TOF-MS/MS研究A549细胞蛋白质组对外源镉刺激的动态响应

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番茄(Solanum lycopersicum)果胶酸裂解酶P56在大肠杆菌中的重组表达

第二十届全国色谱学术报告会及仪器展览会

作者：赵文杰张子今宋群郑伟娟茅力胡忻练鸿振生命分析国家重点实验室南京大学化学化工学院南京大学现代分析中心医药生物技术国家重点实验室南京大学生命科学学院现代毒理学教育部重点实验室南京医科大学公共卫生学院

镉及其化合物在环境中广泛分布,并因其具有稳定和不易消除的特点被认为是危害最大的一种致癌重金属元素[1]。镉与巯基有很强的亲和力,在人体内,Cd(II)被谷胱甘肽螯合并转移至金属硫蛋白(MT)上,而Cd-MT具有100年的半衰期,使得镉在肾脏等... 详细信息

镉及其化合物在环境中广泛分布,并因其具有稳定和不易消除的特点被认为是危害最大的一种致癌重金属元素[1]。镉与巯基有很强的亲和力,在人体内,Cd(II)被谷胱甘肽螯合并转移至金属硫蛋白(MT)上,而Cd-MT具有100年的半衰期,使得镉在肾脏等器官中不断积聚,因此,微量的镉进入人体即可引发肺、肾、骨、肝、免疫系统和生殖器官的损害[2,3]。研究镉的生物毒性和相关分子机制将有助于减少环境的镉污染和维护人类健康。虽然镉对人类健康有很大的危害,并且已有众多关于镉的毒性机制的研究,然而,镉的致病及损害细胞的机理至今并不是十分清晰。

关键词： A549细胞蛋白质组镉动态响应

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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武汉植物学研究 2007年第6期25卷 539-543页

作者：赵庆新王鑫张宇玲袁生南京师范大学生命科学学院微生物工程重点实验室

果胶酸裂解酶P56在番茄花粉管伸长过程中起着重要的作用,为了制备番茄P56蛋白的抗体,进行番茄花粉管萌发过程中P56蛋白的免疫组织化学研究,对P56基因在大肠杆菌系统的重组表达进行了研究。先采用Overlap-PCR的方法,从番茄基因组DNA中克... 详细信息

果胶酸裂解酶P56在番茄花粉管伸长过程中起着重要的作用,为了制备番茄P56蛋白的抗体,进行番茄花粉管萌发过程中P56蛋白的免疫组织化学研究,对P56基因在大肠杆菌系统的重组表达进行了研究。先采用Overlap-PCR的方法,从番茄基因组DNA中克隆了成熟P56蛋白的cDNA序列(LAT56),再构建重组表达质粒pET28a(+)-LAT56,转化大肠杆菌BL21-CodenPlus(DE3)-RIL,得到了重组表达工程菌pET-28a(+)-LAT56-BL21-Co-denPlus(DE3)-RIL。在0.5 mmol/L IPTG、15℃和180 r/min条件下,经过60 h的诱导培养,重组蛋白表达量为细胞总蛋白的30%左右,主要以包涵体形式存在,重组蛋白经Ni2+-nitrilotriacetate-agrose亲和柱层析,得到了SDS-PAGE显示为单一蛋白带的纯化蛋白。

关键词：番茄果胶酸裂解酶(P56) 大肠杆菌表达