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人脐带间充质干细胞通过GDF-15/FOXO3a治疗小鼠卵巢功能不全的研究

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国际妇产科学杂志 2024年

作者：司潇洒王建波翁平史朋飞王长亮陈晨王勇南京大学医学院生命分析化学国家重点实验室(江苏省医学分子技术重点实验室) 江苏育瑞康生物科技有限公司

目的:探讨人脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs）改善卵巢功能不全（premature ovarian insufficiency,POI）小鼠的卵巢损伤及机制。方法:采用足底注射透明带3多肽（zona pellucida3 peptide,pZP3）方法构建POI小鼠模型,将小鼠分为对照组、佐剂对照组、pZP3组和hUC-MSCs组,每组10只。以阴道涂片监测动情周期、以酶联免疫吸附测定检测血清卵泡刺激素（follicle-stimulating hormone,FSH）和雌二醇（estradiol,E2）水平,以HE染色观察卵巢组织学,以蛋白质印迹（Western blotting）检测叉头框转录因子O3a （forkhead box O3a,FOXO3a）、p-FOXO3a、p53、胱天蛋白酶-3 （Caspase-3）、Bax表达水平,以实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitative polymerase chain re action,q RT-PCR）检测POI的标志物骨形态发生蛋白15（bone morp hogenetic protein 15,BMP15）、抗米勒管激素（anti-Müllerian hormone,AMH）、WNT、卵泡刺激素受体（follicle-stimulating hormone receptor,FSHR）以及促炎因子肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）和IL-1β的表达水平,以RNA-seq检测生长分化因子-15（growth differentiation factor-15,GDF-15）的表达水平。通过环磷酰胺（cyclophosphamide,Cy）构建体外模型。结果:（1）造模6周后,与对照组相比,pZP3组和hUC-MSCs组动情周期出现紊乱,且血清FSH水平升高,血清E2水平降低,表明模型构建成功。（2）相较于对照组,pZP3组闭锁卵泡增加,原始卵泡数目降低,hUC-MSCs干预后小鼠原始卵泡比例和数目均高于pZP3组（P学意义（P>0.05）。pZP3组炎症因子IL-1β、TNF-α表达上调,hUC-MSCs干预小鼠的IL-1β、TNF-α表达较pZP3组显著下调（均P<0.05）。（4）pZP3组体内Treg细胞数量降低（P<0.01）,hUC-MSCs干预后小鼠Treg细胞数量较pZP3组升高（P<0.000 1）。pZP3组卵巢组织中BMP15、AMH、WNT以及FSHR的mRNA表达水平较对照组降低,hUC-MSCs干预后小鼠的表达水平较pZP3组升高（均P<0.05）。（5）pZP3组FOXO3a磷酸化水平高于对照组（P<0.000 1）,hUC-MSCs干预后,FOXO3a磷酸化水平较pZP3组下降（P<0.000 1）。测序结果提示,pZP3组GDF-15表达上调,hUC-MSCs组中GDF-15表达较pZP3组下调。结论:POI小鼠体内GDF-15和p-FOXO3a表达上调,hUC-MSCs通过下调GDF-15的表达和降低FOXO3a的磷酸化水平,改善POI小鼠的卵巢组织形态,实现对POI小鼠的治疗作用。

关键词：人脐带间充质干细胞原发性卵巢功能不全生长分化因子15 叉头框转录因子O3 卵巢储备功能

RNA修饰在mRNA疫苗中的关键应用和前景

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科学通报 2024年

作者：刘聪彭金英张美玲向卉芬伊成器核糖核酸北京研究中心北京大学合成与功能分子生物中心北京大学生命科学学院蛋白质与植物基因研究国家重点实验室安徽医科大学第一附属医院妇产科国家卫生健康委配子及生殖道异常研究重点实验室北大-清华生命科学联合中心

RNA修饰是指发生在RNA分子碱基或核糖上的各种化学修饰基团.这些修饰广泛存在于多种天然RNA中,能够改变RNA分子的化学和物理性质,从而影响RNA在细胞内的功能和命运.近年来, mRNA疫苗因其高效、快速设计、成本效益高和相对安全的管理方式... 详细信息

RNA修饰是指发生在RNA分子碱基或核糖上的各种化学修饰基团.这些修饰广泛存在于多种天然RNA中,能够改变RNA分子的化学和物理性质,从而影响RNA在细胞内的功能和命运.近年来, mRNA疫苗因其高效、快速设计、成本效益高和相对安全的管理方式,逐渐成为传统疫苗可靠的替代方案.目前, mRNA疫苗的应用范围涵盖了传染病、癌症、免疫性疾病和罕见病治疗等多个领域,展示了mRNA疫苗在不同治疗领域的多功能性和潜力.除了脂质纳米粒子递送技术的进步, RNA修饰在mRNA疫苗的研发过程中也扮演着不可或缺的角色. RNA修饰,如Ψ、m1Ψ和m5C的应用不仅可以极大地降低m RNA疫苗的免疫原性,还有助于提高mRNA疫苗的稳定性和翻译效率. RNA修饰的mRNA疫苗在传染病如寨卡病毒、流感病毒和SARS-CoV-2等方面的重要应用,极大地推动了该领域疫苗的发展.同时, RNA修饰的mRNA疫苗在癌症免疫治疗中也发挥着关键作用.此外, RNA修饰和佐剂在mRNA疫苗中的联合应用在肿瘤mRNA疫苗的开发中显示出显著的效果,为开发既能激发充分免疫反应又具备安全性和有效性的mRNA疫苗提供了有前景的新途径.因此,本文重点分析和总结mRNA疫苗相关RNA修饰的发生、发展及重要性质,介绍它们在mRNA疫苗发展中的关键作用和重要应用,并阐述mRNA疫苗在传染病与癌症等疾病预防和治疗中的应用及最新进展.最后,我们针对RNA修饰的mRNA疫苗目前的研究和应用的局限性,及未来发展的前景与挑战展开详细的讨论.

关键词： RNA修饰 mRNA疫苗传染病癌症

牦牛STAG3基因克隆及其在不同年龄段牦牛睾丸中的表达定位

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农业生物技术学报 2024年第2期32卷 344-354页

作者：石军陈文丽白旭李建富袁宝赵兴绪张全伟甘肃农业大学生命科学技术学院甘肃省动物生殖生理及繁殖调控重点实验室甘肃农业大学动物医学院

基质抗原3(stromal antigen 3, STAG3)是黏连蛋白复合体的重要成分之一，在动物卵泡发育、卵巢早衰和癌症发生等生物学过程中发挥重要调节作用，其在牦牛(Bos grunniens)生殖和发育过程中的作用尚不明确。本研究以不同岁龄(2, 4, 6和8岁... 详细信息

基质抗原3(stromal antigen 3, STAG3)是黏连蛋白复合体的重要成分之一，在动物卵泡发育、卵巢早衰和癌症发生等生物学过程中发挥重要调节作用，其在牦牛(Bos grunniens)生殖和发育过程中的作用尚不明确。本研究以不同岁龄(2, 4, 6和8岁龄)牦牛睾丸组织为材料，通过反转录PCR(reverse transcription-PCR, RT-PCR)克隆STAG3基因编码区序列(CDS)，利用STRING蛋白质互作数据库(STRING:functional protein association networks)和基因本体(Gene Ontology, GO)预测分析STAG3互作蛋白及生物学功能；通过苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色观察不同年龄牦牛睾丸组织形态结构；免疫组织化学(immunohistochemistry, IHC)染色和qRT-PCR分析STAG3分布及表达规律。结果显示，牦牛STAG3基因CDS区全长3 679 bp，开放阅读框为1 659 bp，编码552个氨基酸，蛋白无跨膜结构区，可能参与第一次减数分裂、联会复合和染色体浓缩等生物学过程；STAG3蛋白在各年龄段牦牛睾丸组织中均有表达，主要定位于初级精母细胞和次级精母细胞；2岁龄牦牛睾丸组织STAG3表达最高，且随年龄增长表达逐渐降低。结果表明，STAG3在动物进化中较为保守，各年龄段牦牛睾丸组织均有表达，其可能在牦牛生殖过程中发挥重要作用。本研究为解析牦牛生殖过程中STAG3功能及调控机制提供了参考依据。

关键词：牦牛基质抗原3(STAG3) 基因克隆生物信息学分析

牦牛妊娠早、中期胎盘组织中STAB1的表达、分布及功能分析

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农业生物技术学报 2024年第4期32卷 785-794页

作者：魏倩倩张全伟张博皓白旭赵兴绪张勇甘肃农业大学生命科学技术学院甘肃省动物生殖生理及繁殖调控重点实验室甘肃农业大学动物医学院

哺乳动物胎盘发育对子宫内环境调节及妊娠维持至关重要。胎盘发育不良或异常可引发多种妊娠疾病。稳定素蛋白-1(stabilin-1, STAB1)参与调节动物多个器官发育，但在牦牛(Bos grunniens)胎盘中的作用及调节机制尚不完全清楚。本研究旨在... 详细信息

哺乳动物胎盘发育对子宫内环境调节及妊娠维持至关重要。胎盘发育不良或异常可引发多种妊娠疾病。稳定素蛋白-1(stabilin-1, STAB1)参与调节动物多个器官发育，但在牦牛(Bos grunniens)胎盘中的作用及调节机制尚不完全清楚。本研究旨在探究牦牛妊娠早、中期胎盘组织中STAB1分布、表达规律及其潜在功能。采集牦牛妊娠早、中期胎盘组织，通过苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色、免疫组织化学(immunohistochemistry, IHC)染色、免疫荧光(immunofluorescence, IF)染色、qRT-PCR和Western blot研究牦牛妊娠早、中期胎盘组织中STAB1表达特点及分布规律；利用数据非依赖性模式(dataindependent acquisition, DIA)蛋白质组学数据，预测分析牦牛胎盘中STAB1互作蛋白及潜在生物学功能。结果表明，STAB1蛋白主要定位于牦牛胎盘滋养层巨细胞和单核滋养层细胞胞质；与妊娠早期胎盘相比，牦牛妊娠中期胎盘组织中STAB1基因及蛋白表达显著下调(P生物信息学分析显示，STAB1可能通过细胞黏附、钙离子结合和质膜组成等途径调控牦牛妊娠早、中期胎盘动态发育。综上，STAB1通过调节牦牛胎盘滋养层细胞的功能参与妊娠早、中期胎盘发育和妊娠维持。本研究为STAB1在牦牛胎盘发育中的功能及机制提供参考。

关键词：胎盘稳定素蛋白-1(STAB1) DIA蛋白质组学生物信息学分析

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磁感应热疗系统研发进展

中国激光 2024年

作者：张建锋焦王博樊海明刘晓丽西北大学物理学院西北大学化学与材料科学学院合成与天然功能分子教育部重点实验室西北大学生命科学与医学部西部资源与生物技术教育部重点实验室西安交通大学第一附属医院精准外科与再生医学国家地方联合工程研究中心陕西省再生医学与外科工程研究中心陕西省磁性医学重点实验室西安交通大学第一附属医院Med-X研究院再生与重建医学研究所

磁感应热疗（简称：磁热疗）是一种新型的临床肿瘤物理疗法，利用磁性纳米材料在交变磁场下产热并引发一系列分子事件高效地杀伤肿瘤细胞。相较于传统的肿瘤治疗手段如化疗和放疗，磁热疗具有创伤小、远程可控、可多次治疗、激发抗肿瘤... 详细信息

磁感应热疗（简称：磁热疗）是一种新型的临床肿瘤物理疗法，利用磁性纳米材料在交变磁场下产热并引发一系列分子事件高效地杀伤肿瘤细胞。相较于传统的肿瘤治疗手段如化疗和放疗，磁热疗具有创伤小、远程可控、可多次治疗、激发抗肿瘤免疫等优势，并已经在临床肿瘤治疗中展现了巨大的应用潜力。为了进一步提升这项技术的效果和适用性，在过去的几十年里，交变磁场发生器不断地进行优化和升级。本文重点介绍了基于逆变技术和功率放大技术设计的交变磁场发生器，详细阐述了它们的工作原理、线圈类型以及针对提高磁场特征参数（如频率、场强和均匀性）的改进和优化措施。同时，文章还简要介绍了两种具有磁场聚焦和波形变换功能的磁热疗系统。文章还探讨了将激光共聚焦显微镜和光谱仪分别与磁热疗设备相结合构建的科研平台，这为在分子或细胞层面上深入研究磁热效应提供了新的工具。最后，文章回顾了已报道的临床磁热疗设备，并对未来临床应用中磁热疗设备的发展方向进行了展望。随着技术的不断进步和优化，磁热疗将在未来的癌症治疗中扮演越来越重要的角色，推动肿瘤物理治疗的疗效改善与预后提升。

关键词：交变磁场发生器励磁线圈磁场聚焦磁场波形临床抗肿瘤应用

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登革热病毒检测的生物传感技术

化学学报 2022年第1期80卷 69-79页

作者：师瑶夏乾峰何政清鞠熀先海南医学院热带医学与检验医学学院热带转化医学教育部重点实验室海口571199 南京大学化学化工学院生命分析化学国家重点实验室南京210023

登革热病毒是由伊蚊传播的单链RNA病毒,属于黄病毒科.目前暂无靶向抗病毒药物及有效疫苗能够及时防控.由于其临床检测的重要性,近年来,陆续出现了检测登革热病毒感染的新方法,试图早期发现并控制这种感染.本综述主要阐述登革热病毒诊断... 详细信息

登革热病毒是由伊蚊传播的单链RNA病毒,属于黄病毒科.目前暂无靶向抗病毒药物及有效疫苗能够及时防控.由于其临床检测的重要性,近年来,陆续出现了检测登革热病毒感染的新方法,试图早期发现并控制这种感染.本综述主要阐述登革热病毒诊断相关标志物检测的生物传感技术,包括光学、电化学、酶联免疫吸附试验等生物传感方法,对不同检测方法的灵敏度、准确性、检测范围、检测限和临床应用能力进行综合评价,以利于进一步提高这些技术的检测性能,促进该领域的发展,并为登革热病毒感染的早期诊断提供参考.

关键词：登革热病毒早期感染生物传感器检测技术早期诊断核酸检测

多腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂联合治疗在恶性肿瘤治疗中的研究进展

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肿瘤 2022年第9期42卷 646-657页

作者：李以姗王勇李茹恬南京大学医学院江苏南京210093 南京大学医学院生命分析化学国家重点实验室江苏南京210093 南京大学江苏省医学分子技术重点实验室江苏南京210093 南京大学医学院附属鼓楼医院肿瘤科南京大学临床肿瘤学研究所江苏南京210008

多腺苷二磷酸核糖聚合酶[poly(ADP-ribose)polymerase,PARP]在DNA损伤修复过程中发挥重要作用。近年来,有关PARP与肿瘤发生的关系及PARP抑制剂在联合治疗中通过“合成致死”效应增强抗肿瘤疗效的研究取得了显著成果。已报道的与PARP抑... 详细信息

多腺苷二磷酸核糖聚合酶[poly(ADP-ribose)polymerase,PARP]在DNA损伤修复过程中发挥重要作用。近年来,有关PARP与肿瘤发生的关系及PARP抑制剂在联合治疗中通过“合成致死”效应增强抗肿瘤疗效的研究取得了显著成果。已报道的与PARP抑制剂联合使用的治疗方式包括放疗、化疗、免疫检查点抑制剂、血管生成抑制剂及其他靶向药物治疗。本文就PARP抑制剂与这些抗肿瘤治疗手段联用在恶性肿瘤治疗中的作用机制、疗效及影响因素的研究进展进行了综述。

关键词：多腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂联合治疗合成致死

自阵列液滴适配体电化学传感器检测细胞因子干扰素-γ

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分析化学 2022年第11期50卷 1743-1749页

作者：王莹菲孟潇鞠熀先刘颖南京大学化学化工学院生命分析化学国家重点实验室南京大学化学和生物医药创新研究院

设计了一种基于核酸适配体检测人干扰素-γ(hIFN-γ)的液滴自阵列化电化学生物传感器。通过光刻技术在镀金玻片上加工形成三电极体系阵列，并利用光点击反应对三电极体系阵列进行亲疏水图案化修饰，形成亲水性的加样检测区和疏水性周边... 详细信息

设计了一种基于核酸适配体检测人干扰素-γ(hIFN-γ)的液滴自阵列化电化学生物传感器。通过光刻技术在镀金玻片上加工形成三电极体系阵列，并利用光点击反应对三电极体系阵列进行亲疏水图案化修饰，形成亲水性的加样检测区和疏水性周边以实现检测样品的液滴自阵列化。电活性物质亚甲基蓝(MB)标记的发卡型核酸适配体通过金硫键自组装于工作电极表面，初始状态时，MB和电极表面距离较近，显示电化学还原峰。核酸适配体对hIFN-γ有特异性结合能力，与hIFN-γ结合后，核酸适配体空间构象发生变化，使MB分子远离电极表面，引起其电化学信号显著减小。采用方波伏安法(SWV)进行检测，在hIFN-γ浓度10.0～125.0 ng/mL范围内，此传感器具有良好的线性响应，检出限(3σ)为7.5 ng/mL。此自阵列液滴适配体传感器可用于干扰素hIFN-γ的快速灵敏检测，对研究免疫细胞的受刺激响应与实现细胞因子释放相关疾病的即时检测具有重要意义。

关键词：细胞因子适配体传感器适配体亲水性疏水性

piRNA在小鼠雄性生殖系统中的起源与功能

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中华男科学杂志 2016年第8期22卷 746-750页

作者：张玲韩晓冬南京大学医学院免疫与生殖生物学实验室&生命分析化学国家重点实验室江苏南京210093 南京大学医学院江苏省医学分子技术重点实验室江苏南京210093

PIWI相互作用RNA（pi RNA）是2006年新发现的一种24-32个碱基长度的非编码小RNA。pi RNA与生殖特异的PIWI蛋白结合,在生殖系统的发育中起重要作用。雄性小鼠的生殖系统中,基因组中pi RNA簇和转座子区域转录出pi RNA前体,pi RNA前体出核... 详细信息

PIWI相互作用RNA（pi RNA）是2006年新发现的一种24-32个碱基长度的非编码小RNA。pi RNA与生殖特异的PIWI蛋白结合,在生殖系统的发育中起重要作用。雄性小鼠的生殖系统中,基因组中pi RNA簇和转座子区域转录出pi RNA前体,pi RNA前体出核后在初级生成途径和次级生成途径下生成成熟的pi RNA。成熟pi RNA首先能够沉默逆转座子转录出的RNA,降低转座子的活跃度,从而维持基因稳定,维持生殖细胞的正常发育。另外pi RNA还具有调节基因表达的功能,在转录水平和转录后水平上参与精子发生。

关键词： PIWI相互作用RNA PIWI蛋白初级生成途径次级生成途径雄性生殖系统小鼠