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鲍曼不动杆菌外膜蛋白OmpW保护性表位的预测与验证

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中华微生物学和免疫学杂志 2024年第4期44卷 330-335页

作者：杨宁朱成华邵明玥陈思锡周润露何宇聪杜兴冉冯旰珠南京医科大学第二附属医院呼吸与危重症医学科南京210011 南京医科大学附属江宁医院呼吸与危重症医学科南京211100 南京医科大学第二附属医院感染性疾病科南京210011

目的构建和筛选鲍曼不动杆菌外膜蛋白OmpW的B细胞和T细胞表位。方法运用生物信息学软件预测OmpW的小鼠B细胞及T细胞表位并合成相应肽段;构建重组质粒pET28a-ompW并原核表达、纯化获得OmpW蛋白;以OmpW蛋白皮下免疫BALB/c小鼠,2周免疫1次,... 详细信息

目的构建和筛选鲍曼不动杆菌外膜蛋白OmpW的B细胞和T细胞表位。方法运用生物信息学软件预测OmpW的小鼠B细胞及T细胞表位并合成相应肽段;构建重组质粒pET28a-ompW并原核表达、纯化获得OmpW蛋白;以OmpW蛋白皮下免疫BALB/c小鼠,2周免疫1次,共3次。第3次免疫后1周,收集小鼠血清、分离小鼠脾细胞培养。分别用OmpW蛋白及不同的T细胞表位肽刺激脾细胞,72 h后收集脾细胞上清。间接ELISA法检测小鼠血清中的特异性IgG抗体水平,双抗夹心ELISA法检测脾细胞上清液中IFN-γ浓度。结果筛选并构建了5个B细胞表位及4个T细胞表位,B细胞表位分别是OmpW B1、OmpW B2、OmpW B3、OmpW B4、OmpW B5,T细胞表位分别是OmpW T1、OmpW T2、OmpW T3、OmpW T4;间接ELISA法检测结果显示,OmpW B1和OmpW B5能够与OmpW全长蛋白质免疫小鼠的血清发生抗原抗体反应,其A450值与对照组相比显著升高(P<0.001);双抗夹心ELISA法结果显示OmpW T4表位刺激的脾细胞上清中的IFN-γ浓度最高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.001)。结论成功构建并筛选出OmpW蛋白的两个B细胞表位OmpW B1及OmpW B5和一个T细胞表位OmpW T4。

关键词：鲍曼不动杆菌 OmpW 表位生物信息学

连续性全尿道保留技术在单孔腹腔镜根治性前列腺切除术中的应用研究

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中华外科杂志 2024年第2期62卷 162-166页

作者：朱清毅林建中沈百欣魏勇沈露明朱建国何雪胡海斌顾民南京医科大学第二附属医院泌尿外科南京210011 南京医科大学第二附属医院放射科南京210011 南京医科大学第二附属医院病理科南京210011

目的初步探讨连续性全尿道保留技术在单孔腹腔镜根治性前列腺切除术中的可行性和效果。方法本研究为前瞻性病例系列研究。前瞻性收集2022年3—12月南京医科大学第二附属医院收治的符合入组条件(病理学分期≤pT2c期,Gleason评分≤7分,前... 详细信息

目的初步探讨连续性全尿道保留技术在单孔腹腔镜根治性前列腺切除术中的可行性和效果。方法本研究为前瞻性病例系列研究。前瞻性收集2022年3—12月南京医科大学第二附属医院收治的符合入组条件(病理学分期≤pT2c期,Gleason评分≤7分,前列腺特异性抗原<20μg/L,MRI检查结果提示尿道和前壁无肿瘤侵犯,既往无尿道严重外伤史),术前充分沟通后明确接受此术式的25例前列腺癌患者的资料。患者年龄(67.2±7.6)岁(范围:61~76岁)。手术由熟练开展单孔根治性前列腺切除术的医师实施。术后定期随访患者的尿控、肿瘤控制和手术并发症等;日尿垫用量0~1片为恢复尿控,拔除导尿管后24 h内尿垫用量0~1片为即刻尿控。结果所有病例顺利完成手术,无中转开放手术。手术时间(128.4±22.4)min(范围:100~145 min),术中出血量(68.2±13.7)ml(范围:50~120 ml),4例发生尿道损伤并进行缝合修补。术后24 h、1周、4周和7周尿控恢复率分别为80.0%、84.0%、92.0%和100%。术后大切片病理学检查结果提示1例前列腺基底部切缘阳性,所有患者尿道周围腺体切缘阴性。术后并发症包括泌尿系感染3例、尿痛2例、急性尿潴留1例。术后3个月MRI随访结果提示膀胱和尿道形态基本正常。术后3个月和6个月前列腺特异性抗原值均<0.1μg/L。结论连续性全尿道保留技术在单孔腹腔镜根治性前列腺切除术中可行,患者术后早期尿控和肿瘤学效果达到预期。

关键词：前列腺肿瘤腹腔镜检查全尿道保留尿控

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恶性胸膜间皮瘤靶向治疗的研究进展

中国肺癌杂志 2024年第5期27卷 391-398页

作者：傅芬张扬沈红南京医科大学第二附属医院呼吸与危重症医学科南京210011

恶性胸膜间皮瘤(malignant pleural mesothelioma, MPM)是侵袭性极强的罕见胸膜表面恶性肿瘤,危险因素包括吸入石棉、遗传因素、基因突变等。现有的化疗、抗血管生成治疗、免疫治疗的效果均不佳,患者的生存期极短。亟需寻找治疗MPM的潜... 详细信息

恶性胸膜间皮瘤(malignant pleural mesothelioma, MPM)是侵袭性极强的罕见胸膜表面恶性肿瘤,危险因素包括吸入石棉、遗传因素、基因突变等。现有的化疗、抗血管生成治疗、免疫治疗的效果均不佳,患者的生存期极短。亟需寻找治疗MPM的潜在靶点,目前发现有基因突变靶点如BRCA1相关蛋白1(BRCA associated protein1, BAP1)和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2A(cyclin-dependent kinase 2A, CDKN2A)等;表观遗传靶点如组蛋白赖氨酸去甲基酶4A[lysine (K)-specific demethylase 4A, KDM4A]和赖氨酸特异性去甲基酶1(lysine-specific demethylase1, LSD1)等;信号蛋白靶点如葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78, GRP78)及信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3, STAT3)等。迄今为止,可查询的临床试验有组蛋白甲基转移酶抑制剂Tazemetostat、多聚ADP-核糖聚合酶[poly (ADP-ribose) polymerase, PARP]抑制剂Rucaparib和细胞周期蛋白依赖性激酶4/6(cyclin-dependent kinases 4 and 6, CDK4/6)抑制剂Abemaciclib的II期临床试验,以及靶向间皮素的嵌合抗原受体T细胞免疫疗法(chimeric antigen receptor T-cell immunotherapy, CAR-T)细胞胸腔注射、TEA结构域家族成员(TEA domain family member, TEAD)抑制剂VT3989和IK-930的I期临床试验,显示出一定的临床疗效。

关键词：恶性胸膜间皮瘤基因突变表观遗传信号蛋白靶向治疗

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粪菌移植在感染性疾病中的应用研究进展

中国感染控制杂志 2024年第3期23卷 377-384页

作者：李晶莹陆高辰张发明江南大学附属中心医院消化内科江苏无锡214000 南京医科大学第二附属医院微生态医学科江苏南京210011

肠道菌群在机体抵御感染性疾病过程中发挥了重要作用。粪菌移植作为重建肠道菌群的重要方法,主要包括洗涤菌群移植、经内镜肠道植管术和孢子群移植。中国国家标准化管理委员会于2022年发布《关于洗涤粪菌质量控制和粪菌样本分级》的技... 详细信息

肠道菌群在机体抵御感染性疾病过程中发挥了重要作用。粪菌移植作为重建肠道菌群的重要方法,主要包括洗涤菌群移植、经内镜肠道植管术和孢子群移植。中国国家标准化管理委员会于2022年发布《关于洗涤粪菌质量控制和粪菌样本分级》的技术标准,旨在减少与粪菌移植相关的不良事件,提高患者及医技人员对粪菌移植的接受度。粪菌移植在治疗艰难梭菌复发感染领域取得成功后,在其他感染性疾病治疗的应用也成为全球研究热点。本文就粪菌移植的发展现状及其在各类感染性疾病应用的研究进展进行综述。

关键词：粪菌移植艰难梭菌艰难梭菌感染感染性疾病洗涤粪菌质量控制经内镜肠道植管术

胰岛素Icodec治疗2型糖尿病的疗效及安全性的Meta分析

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中华糖尿病杂志 2024年第2期16卷 226-232页

作者：崔智程凤心雨鲁一兵王雅芸南京医科大学第二附属医院内分泌科南京210011 南京医科大学第二附属医院神经内科南京210011

目的系统评价胰岛素Icodec治疗2型糖尿病(T2DM)的疗效和安全性,为临床合理用药提供循证依据。方法计算机检索美国国立医学图书馆数据库(PubMed)、荷兰医学文摘数据库(Embase)、循证医学数据库(the Cochrane Library)、科学引文数据库(We... 详细信息

目的系统评价胰岛素Icodec治疗2型糖尿病(T2DM)的疗效和安全性,为临床合理用药提供循证依据。方法计算机检索美国国立医学图书馆数据库(PubMed)、荷兰医学文摘数据库(Embase)、循证医学数据库(the Cochrane Library)、科学引文数据库(Web of Science)、中国生物医学文献数据库(Sinomed)、中国知网(CNKI)、万方数据库和维普数据库,收集比较胰岛素Icodec(试验组)和安慰剂或其他降糖药物(对照组)治疗2型糖尿病疗效与安全性的随机对照试验(RCT),检索时限均为从建库至2023年8月。疗效指标包括:糖化血红蛋白(HbA_(1c))水平、HbA_(1c)达标(HbA_(1c)<7%)率、空腹血浆血糖(FPG)水平、体重、葡萄糖在目标范围内时间(TIR)百分比;安全性指标包括:低血糖事件发生率、注射部位反应发生率、药物过敏反应事件发生率、严重不良反应事件发生率。由两位评价员独立筛选文献,并从文献中提取资料和评价被纳入研究的偏倚风险后,采用RevMan 5.4软件对数据进行Meta分析。结果共纳入7项研究,3286例患者。Meta分析结果显示,疗效方面,与对照组相比,胰岛素Icodec在降低HbA_(1c)(WMD=-0.16%,95%CI-0.26%~-0.07%,P<0.01)、提高HbA_(1c)达标率(OR=1.50,95%CI 1.29~1.74,P<0.01)中更有优势,但在降低FPG水平方面两组差异无统计学意义(WMD=-0.05 mmol/L,95%CI-0.29~0.20 mmol/L,P=0.71),且会增加患者体重水平(WMD=0.52 kg,95%CI 0.22~0.82 kg,P<0.01),但是可以提高患者TIR百分比(WMD=5.86%,95%CI 2.02%~9.70%,P=0.003);安全性方面,与对照组相比,胰岛素Icodec组的低血糖事件发生率增加(OR=1.37,95%CI 1.17~1.61,P<0.01),而过敏反应发生率(OR=0.91,95%CI 0.64~1.31,P=0.62)、注射部位反应发生率(OR=1.03,95%CI 0.63~1.66,P=0.92)以及严重不良反应事件发生率(OR=0.97,95%CI 0.75~1.24,P=0.79)差异无统计学意义。结论胰岛素Icodec能降低患者HbA_(1c)水平,提高患者HbA_(1c)达标率,且不增加注射部位反应事件、过敏事件以及严重不良反应事件的发生率。

关键词：糖尿病,2型疗效安全性 Meta分析胰岛素Icodec

原位肝移植后发生早期急性肾损伤危险因素及预后分析

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中华消化外科杂志 2024年第7期23卷 952-960页

作者：陈怡宁张慧康俊伟郑智滢刘新阳潘熊熊南京医科大学第一附属医院麻醉与围术期医学科南京210029 南京医科大学第一附属医院肝胆中心南京210029

目的分析原位肝移植后发生早期急性肾损伤(AKI)的危险因素和预后。方法采用回顾性研究方法。收集2016年1月至2020年1月南京医科大学第一附属医院收治的340对行原位肝移植供者及受者的临床病理资料;供者男262例,女78例;受者男268例,女72... 详细信息

目的分析原位肝移植后发生早期急性肾损伤(AKI)的危险因素和预后。方法采用回顾性研究方法。收集2016年1月至2020年1月南京医科大学第一附属医院收治的340对行原位肝移植供者及受者的临床病理资料;供者男262例,女78例;受者男268例,女72例,年龄为(51±11)岁。340例受者中,217例术后未发生早期AKI设为非AKI组,123例术后发生早期AKI设为AKI组。正态分布的计量资料以x±s表示,组间比较采用独立样本t检验。偏态分布的计量资料以M(IQR)表示,组间比较采用Mann‑Whitney U检验。计数资料以绝对数或百分比表示,组间比较采用χ^(2)检验。等级资料比较采用非参数检验。多因素分析采用二元Logistic回归模型前进法。采用R软件及其RMS软件包(R3.6.1)构建列线图预测模型。采用受试者工作特征曲线的曲线下面积(AUC)验证预测模型的效能,Bootstrap法对预测模型进行内部验证。采用Kaplan‑Meier法绘制生存曲线,Log‑rank检验进行生存分析。结果(1)非AKI组和AKI组供者及受者术前临床特征比较。非AKI组和AKI组供者超重比较,差异有统计学意义(P0.05);良性肝病受者中,非AKI组和AKI组术后6个月生存率分别为89.8%和78.0%,两者比较,差异有统计学意义(χ^(2)=6.401,P<0.05),总生存率分别为81.4%和68.0%,两者比较,差异有统计学意义(χ^(2)=4.452,P<0.05)。结论供者超重,受者术前高血压、非病毒性肝炎、术前血小板重度减少、术中尿量、灌注后严重低血压、灌注后血清钾峰值高、术中输注血浆过多是原位肝移植受者术后发生早期AKI的独立危险因素;其列线图预测模型有较好临床应用价值。良性肝病受者中,非AKI组受者术后6个月生存率和总生存率均优于AKI组。

关键词：原位肝移植急性肾损伤危险因素列线图预测

右美托咪定对原位肝移植受者术中及术后早期并发症的影响

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中华外科杂志 2024年第2期62卷 155-161页

作者：康俊伟张慧陈怡宁郑智滢刘新阳潘熊熊南京医科大学第一附属医院麻醉与围术期医学科南京210029 南京医科大学第一附属医院肝胆中心南京210029

目的探讨右美托咪定对原位肝移植受者术中及术后早期并发症的影响。方法本研究为回顾性队列研究。回顾性收集2016年1月至2020年9月于南京医科大学第一附属医院进行原位肝移植手术的399例受者的临床资料。男性319例,女性80例,年龄(50.9±... 详细信息

目的探讨右美托咪定对原位肝移植受者术中及术后早期并发症的影响。方法本研究为回顾性队列研究。回顾性收集2016年1月至2020年9月于南京医科大学第一附属医院进行原位肝移植手术的399例受者的临床资料。男性319例,女性80例,年龄(50.9±10.2)岁(范围:10~73岁)。根据术中是否持续静脉泵注右美托咪定至手术结束分为对照组(369例)和右美托咪定组(30例)。将两组受者术前和术中各指标作为协变量,采用1∶2倾向性评分匹配法进行匹配,卡钳值为0.2。结局指标包括术中再灌注综合征、术后7 d内急性肾损伤和肺部并发症发生情况、术后总住院时间、术后ICU停留时间、辅助机械通气时间、再次气管插管情况、术后6个月和1年生存情况及无复发生存情况。分别采用独立样本t检验、Mann-WhitneyU检验、χ^(2)检验或Fisher确切概率法对两组受者的资料进行统计分析;采用Kaplan-Meier法绘制总体生存曲线和无复发生存曲线,总体生存率和无复发生存率的比较采用Log-rank检验。结果经倾向性评分匹配后,共纳入78例受者,其中右美托咪定组26例,对照组52例。右美托咪定组受者术后7 d内急性肾损伤发生率为0(0/26),低于对照组的21.2%(11/52)(校正χ^(2)=4.776,P=0.029)。两组受者术中再灌注后综合征发生率、术后7 d内肺部并发症发生率、术后总住院时间、术后ICU停留时间、辅助机械通气时间、再次气管插管率及术后6个月和1年总体生存率及无复发生存率的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。结论术中持续静脉泵注右美托咪定可能有利于降低原位肝移植受者术后7 d内急性肾损伤的发生率。

关键词：肝移植麻醉右美托咪定手术中并发症手术后并发症

碘海醇血浆清除率测定法评估肾小球滤过率在慢性肾脏病中的临床应用

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中华肾脏病杂志 2024年第5期40卷 358-366页

作者：刘静王璐璐江蕾杨俊伟曹红娣南京医科大学第二附属医院肾脏科南京210003

目的探讨碘海醇血浆清除率测定法评估肾小球滤过率(glomerular filtration rate,GFR)在慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)人群的临床应用价值,筛选临床上可替代同位素99m Tc‑二乙烯三胺五乙酸肾动态显像(Gates)法测定GFR(99m Tc‑m... 详细信息

目的探讨碘海醇血浆清除率测定法评估肾小球滤过率(glomerular filtration rate,GFR)在慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)人群的临床应用价值,筛选临床上可替代同位素99m Tc‑二乙烯三胺五乙酸肾动态显像(Gates)法测定GFR(99m Tc‑mGFR)的较优方案。方法该研究为横断面研究。入选2022年10月至2023年9月在南京医科大学第二附属医院肾脏科住院的CKD患者为研究对象。碘海醇血浆清除率测定方法:分别在5 ml碘海醇静脉推注后2 h和4 h采血,采用高效液相色谱法检测血浆碘海醇浓度,并采用Bröchner‑Mortensen公式和Jacobsson公式计算双血浆及单血浆碘海醇清除率。血肌酐测定的估算肾小球滤过率(estimated glomerular filtration rate,eGFR)采用CKD流行病学协作公式计算。以99m Tc‑mGFR为金标准,应用Pearson相关分析法比较碘海醇双血浆清除率法测定的GFR(Iohexol‑DS‑mGFR)、碘海醇单血浆4 h清除率法测定的GFR(Iohexol‑SS4h‑mGFR)、碘海醇单血浆2 h清除率法测定的GFR(Iohexol‑SS2h‑mGFR)及eGFR与99m Tc‑mGFR的相关性;应用Bland‑Altman分析、95%一致性区间(95%limits of agreement,95%LoA)、组内相关系数等方法比较Iohexol‑DS‑mGFR、Iohexol‑SS4h‑mGFR、Iohexol‑SS2h‑mGFR及eGFR与99m Tc‑mGFR的诊断一致性。结果共计64例CKD患者入选该研究,年龄(58.91±13.08)岁,男性38例,女性26例。依据99m Tc‑mGFR分期,CKD 1期12例(18.8%),CKD 2期14例(21.9%),CKD 3期26例(40.6%),CKD 4期10例(15.6%),CKD 5期2例(3.1%)。Pearson相关分析结果显示,Iohexol‑DS‑mGFR、Iohexol‑SS4h‑mGFR、Iohexol‑SS2h‑mGFR及eGFR与99m Tc‑mGFR的相关系数分别为0.925、0.867、0.820、0.894(均P<0.001),在总研究人群中Iohexol‑DS‑mGFR、Iohexol‑SS4h‑mGFR、Iohexol‑SS2h‑mGFR和eGFR中位偏差绝对值分别为6.66、9.63、11.47和9.59 ml·min^(-1)·(1.73 m^(2))^(-1),P10(位于金标准GFR±10%区间的比例)分别为35.9%、29.7%、26.6%、29.7%,P30(位于金标准GFR±30%区间的比例)分别为87.5%、68.8%、60.9%、73.4%。结论碘海醇双血浆清除率与99m Tc‑mGFR具有较好的相关性和一致性,操作简便且安全,临床上可作为替代99m Tc‑mGFR的较优检测方案。

关键词：肾功能不全,慢性肾小球滤过率碘海醇血浆清除率高效液相色谱法

18α甘草次酸对葡聚糖硫酸钠诱导小鼠急性溃疡性结肠炎的保护作用及机制研究

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中国医师杂志 2024年第2期26卷 234-239页

作者：张娟周萍穆先敏南京医科大学第二附属医院临床试验中心南京210011 南京医科大学第二附属医院老年医学科南京210011 南京医科大学第二附属医院生物治疗科南京210011

目的探究18α甘草次酸(18α-GA)对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导小鼠急性溃疡性结肠炎(UC)的保护作用,为18α-GA的临床应用提供理论依据和实验基础。方法将40只雄性C57BL/6J小鼠随机分为5组:DSS模型组,阳性药对照组,18α-GA高、中、低剂量组,每... 详细信息

目的探究18α甘草次酸(18α-GA)对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导小鼠急性溃疡性结肠炎(UC)的保护作用,为18α-GA的临床应用提供理论依据和实验基础。方法将40只雄性C57BL/6J小鼠随机分为5组:DSS模型组,阳性药对照组,18α-GA高、中、低剂量组,每组8只,5组小鼠均采用3%DSS溶液连续喂养7 d建立急性UC动物模型,同时各组分别每天腹腔注射100 mg/kg生理盐水、100 mg/kg柳氮磺吡啶、40 mg/kg 18α-GA、20 mg/kg 18α-GA、10 mg/kg 18α-GA。每天测量并记录小鼠的体重,评估小鼠疾病活动指数(DAI)。第8天处死小鼠,取小鼠结肠测量其长度;切片观察结肠黏膜并进行病理学评分;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测结肠组织中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体通路相关蛋白表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定结肠组织中IL-1β含量。结果与DSS模型组比较,18α-GA高、中剂量组第7天时的体重减轻幅度明显更小(均P<0.05);结肠长度更长(均P<0.05),结肠黏膜病理学评分明显更低(均P<0.05);结肠组织中GSDMD、cleaved-caspase1及IL-1β的表达显著更低(均P<0.05);18α-GA高剂量组DAI评分更低(P<0.05);结肠组织中NLRP3表达更低(P<0.05)。结论18α-GA可通过抑制NLRP3炎症小体通路的激活,改善DSS诱导的小鼠急性溃疡性结肠炎。

关键词：结肠炎,溃疡性 18α-甘草次酸 NLRP3蛋白白细胞介素1β 炎性肠疾病