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高雄激素促进人胚胎干细胞向男性原始生殖细胞分化的研究

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中华男科学杂志 2020年第6期26卷 487-498页

作者：曹孟刘菡文宁松刘嘉茵覃莲菊崔毓桂南京医科大学第一附属医院临床生殖医学中心/生殖医学国家重点实验室江苏南京210029

目的:多囊卵巢综合征(PCOS)母亲孕早期的高雄激素可能影响其男性子代成年后的生育力。本研究利用人胚胎干细胞(hESCs)体外分化的实验模型,观察不同浓度睾酮对hESCs向早期雄性生殖细胞分化的影响,探讨孕早期高雄激素暴露对男性子代原始... 详细信息

目的:多囊卵巢综合征(PCOS)母亲孕早期的高雄激素可能影响其男性子代成年后的生育力。本研究利用人胚胎干细胞(hESCs)体外分化的实验模型,观察不同浓度睾酮对hESCs向早期雄性生殖细胞分化的影响,探讨孕早期高雄激素暴露对男性子代原始生殖细胞储备及成年后生育力的潜在影响。方法:2μmol/L视黄酸(RA)体外诱导hESCs(46,XY)向雄性生殖细胞分化,同时添加0 mol/L、3×10^-7 mol/L、5×10^-7 mol/L、15×10^-7 mol/L、45×10^-7 mol/L、135×10^-7 mol/L睾酮,在分化的第0、4、7、14天收集细胞样品,分析不同分化阶段雄性生殖细胞特异基因的表达,比较分化进程、分化效率。结果:不同浓度睾酮处理的hESCs,同一分化阶段细胞形态无差异。原始生殖细胞的标志基因DAZL的表达峰值出现在分化的第4天,15×10^-7 mol/L、45×10^-7 mol/L、135×10^-7 mol/L睾酮处理组的DAZL的表达量与3×10^-7 mol/L睾酮处理组对比明显增加(P﹤0.01)。减数分裂期早期生殖细胞特异基因SCP3的表达在分化的第4天开始上调,45×10^-7 mol/L睾酮处理组与3×10^-7 mol/L、5×10^-7 mol/L睾酮处理组比较,SCP3的表达均明显上调(P﹤0.01);SCP3的表达在分化的第7天达到峰值,15×10^-7 mol/L、45×10^-7 mol/L、135×10^-7 mol/L睾酮处理组与3×10^-7 mol/L睾酮处理组相比,SCP3明显高表达(P﹤0.01)。免疫荧光、流式细胞分析结果显示,各组间分化第4天DAZL、分化第7天SCP3及VASA的表达量随着睾酮浓度升高而有升高趋势。分化第4天,雄激素受体(AR)的表达开始升高,并且可维持至分化第14天;在相同分化阶段,睾酮较高浓度组hESCs的AR表达量高于睾酮较低浓度组(但P>0.05)。结论:hESCs向早期雄性生殖细胞分化过程中高雄激素处理,诱导雄激素受体的提前表达,使hESCs向早期雄性生殖细胞分化提前,可能导致PCOS患者男性子代雄性原始生殖细胞储备不足,进而影响其成年后的生育力。hESCs可作为体外模型研究PCOS患者宫内高雄激素暴露对其男性子代生育力影响研究的新工具,并有益于男性不育症病因机制的研究。

关键词：多囊卵巢综合征高雄激素人胚胎干细胞生殖细胞男性不育

特殊类型畸精子症行卵细胞胞质内单精子注射的治疗结局分析

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中华男科学杂志 2023年第1期29卷 43-48页

作者：孙军培房建正孙雪萍杨晓玉蚌埠医学院第一附属医院生殖医学中心安徽蚌埠233000 江苏省人民医院/南京医科大学第一附属医院生殖医学中心江苏南京210029

目的:特殊类型畸精子症是男性不育中罕见病和单基因遗传疾病,本文探讨其卵细胞胞质内单精子注射(ICSI)的治疗结局。方法:回顾性分析2011年1月至2021年1月于江苏省人民医院生殖医学中心实施ICSI治疗的特殊类型畸精子症患者,根据精子形态... 详细信息

目的:特殊类型畸精子症是男性不育中罕见病和单基因遗传疾病,本文探讨其卵细胞胞质内单精子注射(ICSI)的治疗结局。方法:回顾性分析2011年1月至2021年1月于江苏省人民医院生殖医学中心实施ICSI治疗的特殊类型畸精子症患者,根据精子形态分为三组(圆头精子症、无头精子症和精子鞭毛多发形态异常),三组患者基因检测均发现致病或可能致病的基因突变。比较三组患者间的临床和实验室数据(年龄、BMI、精子参数、成熟卵子数、受精率、优质胚胎率、临床妊娠率、活产率和自然流产率)差异。结果:三组共34对患者夫妇,三组患者间年龄,BMI,MII卵子数差别无统计学意义(P>0.05),圆头精子症的精子浓度和精子活力显著高于其他两组(P第一个胚胎移植周期中获得22例临床妊娠,最终活产20例,自然流产2例。无头精子症和精子鞭毛多发形态异常两组的临床妊娠率和活产率显著高于圆头精子症组(P0.05)。结论:圆头精子症患者实施人工卵母细胞激活依然有部分患者完全不受精或受精率低下。精子鞭毛多发形态异常和无头精子症患者可以通过ICSI取得相对较好的妊娠结局。

关键词：畸精子症圆头精子症无头精子症精子鞭毛多发形态异常卵细胞胞质内单精子注射

卵巢组织冻存与移植生育力保存的应用现状与研究进展

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中国细胞生物学学报 2024年第4期46卷 705-710页

作者：赵飞燕蒋春艳马翔南京医科大学生殖医学与子代健康全国重点实验室南京211166 南京医科大学第一附属医院生殖医学中心南京210029

年龄增长、疾病以及抗肿瘤治疗等均可能会造成女性生育力的下降甚至丧失。随着诊疗技术的发展,癌症死亡率逐渐下降,因此患者的生育力保存需求较前增加。胚胎冻存、卵母细胞冻存和卵巢组织冻存是目前常用的女性生育力保存方式。卵巢组织... 详细信息

年龄增长、疾病以及抗肿瘤治疗等均可能会造成女性生育力的下降甚至丧失。随着诊疗技术的发展,癌症死亡率逐渐下降,因此患者的生育力保存需求较前增加。胚胎冻存、卵母细胞冻存和卵巢组织冻存是目前常用的女性生育力保存方式。卵巢组织冻存与移植至今仅有20余年历史,现已成为临床上具备医学指征的生育力保存方式,有助于重建患者的内分泌和生育功能,已有超200多例患者通过此技术成功完成生育。为提高冻存卵巢组织再移植的安全性,现有研究将卵母细胞体外成熟技术、人工卵巢技术与之相结合,避免携癌风险高的冻存卵巢组织移植后的癌症复发风险。较多的研究均已证实了卵巢组织冻存与移植技术的有效性和安全性。尽管卵巢组织冻存与移植技术得到了快速发展,但是该技术仍面临如何通过减少卵泡储备损失进而延长卵巢组织移植后有效性等挑战,尚需要更多的基础和临床研究促进卵巢组织冻存和移植技术的进步与发展。

关键词：卵巢组织冻存卵巢组织移植卵母细胞体外成熟卵泡储备损失

精子DNA碎片对PGT囊胚染色体异常的影响

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中华男科学杂志 2021年第5期27卷 467-471页

作者：孟慧董娟马龙杨晓玉蔡令波刘嘉茵南京医科大学第一附属医院临床生殖医学中心/南京医科大学生殖医学国家重点实验室江苏南京210029

大约10%的家庭受到不孕不育的困扰,不孕症已是当前非常普遍的医学和社会问题,影响不孕的因素举不胜数,其中精子的DNA质量是胚胎DNA完整性的重要因素,也是与不孕不育息息相关的。目前对男性精液质量的评估主要在精子数量、活力、形态等方... 详细信息

大约10%的家庭受到不孕不育的困扰,不孕症已是当前非常普遍的医学和社会问题,影响不孕的因素举不胜数,其中精子的DNA质量是胚胎DNA完整性的重要因素,也是与不孕不育息息相关的。目前对男性精液质量的评估主要在精子数量、活力、形态等方面,精子DNA碎片也是精子比较常见的异常,是最近备受关注的一个不育因素。文献显示精子DNA碎片与男性不育及自然妊娠成功率下降密切相关,同时也影响着辅助生殖的成功率[1]。

关键词：精子DNA碎片 PGT囊胚染色体异常

枸橼酸氯米芬卵巢温和刺激方案中鲜胚移植策略的探讨

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中华医学杂志 2015年第47期95卷 3859-3861页

作者：孟艳钱易黄存吴畏刘嘉茵生殖医学国家重点实验室南京医科大学第一附属医院生殖医学科210000

目的探讨在体外受精促性腺激素联合枸橼酸氯米芬全程使用的卵巢温和刺激方案中鲜胚移植的策略.方法回顾性分析2013年1月1日至2015年6月30日在南京医科大学第一附属医院生殖医学科行体外受精治疗使用促性腺激素联合枸橼酸氯米芬全程使... 详细信息

目的探讨在体外受精促性腺激素联合枸橼酸氯米芬全程使用的卵巢温和刺激方案中鲜胚移植的策略.方法回顾性分析2013年1月1日至2015年6月30日在南京医科大学第一附属医院生殖医学科行体外受精治疗使用促性腺激素联合枸橼酸氯米芬全程使用的卵巢温和刺激方案并行鲜胚移植的临床资料,共286例.比较移植日不同子宫内膜厚度的各组临床成功率.结果使用促性腺激素联合枸橼酸氯米芬全程使用的卵巢温和刺激方案,随着移植日子宫内膜厚度的增加枸橼酸氯米芬影响减少,当移植日子宫内膜厚度达到9 mm以上,鲜胚移植成功率与常规方案相近从而可以考虑鲜胚移植策略.结论使用促性腺激素联合枸橼酸氯米芬全程使用的卵巢温和刺激方案的患者,当移植日子宫内膜厚度达到9 mm以上时可以考虑行鲜胚移植。

关键词：卵巢刺激枸橼酸氯米芬胚胎移植子宫内膜厚度

多囊卵巢综合征患者的体质量指数和脂代谢水平对促性腺激素释放激素拮抗剂方案妊娠结局的影响

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中华生殖与避孕杂志 2018年第12期38卷 969-975页

作者：黄晓燕吕红吴春香沈鉴东孟艳丁卫冒韵东王媁刘嘉茵刁飞扬南京医科大学第一附属医院生殖医学中心生殖医学国家重点实验室210029 南京医科大学公共卫生学院 211166

目的探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者体质量指数(BMI)和脂代谢水平对促性腺激素释放激素拮抗剂(GnRH-A)方案体外受精/卵胞质内单精子显微注射(IVF/ICSI)周期卵巢反应、胚胎质量及妊娠结局的影响。方法纳入以GnRH-A方案行第一个IVF/ICSI取... 详细信息

目的探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者体质量指数(BMI)和脂代谢水平对促性腺激素释放激素拮抗剂(GnRH-A)方案体外受精/卵胞质内单精子显微注射(IVF/ICSI)周期卵巢反应、胚胎质量及妊娠结局的影响。方法纳入以GnRH-A方案行第一个IVF/ICSI取卵周期的762例PCOS患者,对其新鲜胚胎移植周期及后继的冻融胚胎移植周期行回顾性分析。探讨BMI、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)水平与卵巢反应、胚胎质量和新鲜胚胎/冻融胚胎移植周期临床妊娠结局的关系。结果①BMI与TG、LDL呈正相关,与HDL呈负相关(P<0.05);②卵巢反应和胚胎质量相关指标与BMI、TG、LDL呈负相关(P<0.05),与HDL呈正相关(P<0.05);③多因素logistic回归分析结果显示BMI是冻融囊胚移植周期活产的危险因素;HDL是新鲜胚胎移植周期临床妊娠和活产的保护因素,也是卵裂期胚胎冻融胚胎移植周期活产的保护因素;LDL和TC是冻融胚胎移植周期临床妊娠的危险因素。结论对于PCOS患者而言,过高的BMI(BMI≥28 kg/m2)和异常的脂代谢水平对GnRH-A促排卵方案的卵巢反应、胚胎质量和临床妊娠结局均具有不良影响。

关键词：多囊卵巢综合征(PCOS) 促性腺激素释放激素拮抗剂(GnRH-A)脂代谢体质量指数 (BMI) 临床妊娠结局

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雄激素对颗粒细胞乳酸生成的抑制作用

南京医科大学学报（自然科学版） 2018年第7期38卷 962-965,1003页

作者：朱青刁飞扬马翔高超高莉崔毓桂刘嘉茵南京医科大学第一附属医院生殖医学科生殖医学国家重点实验室江苏南京210029

目的:观察雄激素对卵巢颗粒细胞乳酸生成的抑制作用,探讨多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)高雄激素状态下的颗粒细胞乳酸生成及其对卵泡发育的影响。方法:体外培养人卵巢癌颗粒细胞系KGN细胞,用不同浓度睾酮(0.1~1 000 n... 详细信息

目的:观察雄激素对卵巢颗粒细胞乳酸生成的抑制作用,探讨多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)高雄激素状态下的颗粒细胞乳酸生成及其对卵泡发育的影响。方法:体外培养人卵巢癌颗粒细胞系KGN细胞,用不同浓度睾酮(0.1~1 000 nmol/L)处理不同时间(0~48 h)。测定培养上清液中乳酸含量,采用实时聚合酶链反应(real-time PCR)以及蛋白质印迹法(Western blot)分别检测细胞内乳酸脱氢酶A(LDHA)和乳酸脱氢酶B(LDHB)的m RNA及蛋白质表达水平。结果:人卵巢颗粒细胞系KGN细胞经1 000、100、1 nmol/L睾酮处理24 h或者1、10 nmol/L睾酮处理24及36 h后,其乳酸生成量显著减少(P<0.05)。并且,在100、1 nmol/L睾酮处理24 h后,KGN细胞内LDHA、LDHB的m RNA及蛋白质表达水平显著降低(P<0.05)。结论:较高浓度雄激素通过抑制卵巢颗粒细胞内LDHA、LDHB的表达从而降低乳酸生成,可能与PCOS卵泡发育障碍相关。

关键词：多囊卵巢综合征高雄激素颗粒细胞乳酸乳酸脱氢酶

子宫内膜异位症微生态改变及其对生育力影响的研究进展

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中华生殖与避孕杂志 2023年第6期43卷 646-649页

作者：许艳红侯振冒韵东南京医科大学第一附属医院生殖医学中心、生殖医学国家重点实验室南京210029

子宫内膜异位症(endometriosis,EMS)是妇科常见疾病,常发生于育龄期妇女,主要表现为盆腔疼痛、不孕等,严重困扰女性的身心健康。人体各部位存在着种类众多、数量庞大的微生物群,通过微生物群落本身或代谢产物在生殖的各个阶段发挥重要... 详细信息

子宫内膜异位症(endometriosis,EMS)是妇科常见疾病,常发生于育龄期妇女,主要表现为盆腔疼痛、不孕等,严重困扰女性的身心健康。人体各部位存在着种类众多、数量庞大的微生物群,通过微生物群落本身或代谢产物在生殖的各个阶段发挥重要作用。近年研究显示,EMS患者各部位微生物群组成发生改变,EMS对女性生育力的影响与人体微生态环境失衡有着密不可分的关系。本文对女性微生物群落和EMS之间的相互作用,及微生态环境改变与EMS患者不良妊娠结局的关系进行综述。

关键词：子宫内膜异位症微生物群生育力

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蜡样透明带卵母细胞患者临床助孕结局分析

中华生殖与避孕杂志 2022年第7期42卷 729-733页

作者：孟慧董娟韩乐夏梦刘嘉茵蔡令波南京医科大学第一附属医院生殖医学中心生殖医学国家重点实验室南京210029

目的探讨蜡样透明带卵母细胞与正常形态卵母细胞临床助孕结局的差异。方法回顾性队列研究分析2015年1月至2019年12月期间在南京医科大学第一附属医院生殖医学中心行辅助生殖助孕的93个卵胞质内单精子注射(intracytoplasmic sperm inject... 详细信息

目的探讨蜡样透明带卵母细胞与正常形态卵母细胞临床助孕结局的差异。方法回顾性队列研究分析2015年1月至2019年12月期间在南京医科大学第一附属医院生殖医学中心行辅助生殖助孕的93个卵胞质内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)周期,根据卵母细胞的形态和授精方式分为三组:正常形态卵母细胞组(A组,n=52),蜡样透明带卵母细胞常规ICSI组(B组,n=30);蜡样透明带卵母细胞补救ICSI组(C组,n=11)。比较三组间的实验室和临床结局。结果三组的获卵率、正常受精率、临床妊娠率、种植率差异均没有统计学意义(均P>0.05)。A、B组的优质胚胎率[62.50%(250/400),59.07%(114/193)]均高于C组[40.85%(29/71)],差异有统计学意义(P=0.001,P=0.006)。A组的囊胚形成率[64.78%(160/247)]高于C组[37.14%(13/35)],差异有统计学意义(P=0.002)。另外,A组的流产率[2.44%(1/41)]低于B组和C组[21.05%(4/19),P=0.031;44.44%(4/9),P=0.002],累积妊娠率[82.69%(43/52)]高于B组和C组[56.67%(17/30),P=0.009;45.45%(5/11),P=0.014],差异有统计学意义。结论蜡样透明带样的卵母细胞采用常规ICSI授精可获得与正常形态卵母细胞相当的优质胚胎率和囊胚形成率,但总体的临床结局仍低于正常形态卵母细胞。建议蜡样透明带的异常卵母细胞直接采用ICSI授精方式,可以获得较为理想的临床结局。

关键词：精子注射,细胞质内胚胎发育蜡样透明带卵母细胞累积妊娠率