检索结果-南通市图书馆

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

超声处理对鲜切西兰花的保鲜效果

食品科学 2024年第10期45卷 224-231页

作者：丁娇汤静董小盼金鹏郑永华南京农业大学食品科学技术学院江苏南京210095

为探究超声(ultrasound,US)处理对鲜切西兰花保鲜的作用,将鲜切西兰花用40 kHz不同功率(200、250、300、350W和400W)US处理10min,置于10℃贮藏96h,依据表观和微生物品质变化,确定US处理对西兰花保鲜的适宜条件,在此基础上研究了适宜US... 详细信息

为探究超声(ultrasound,US)处理对鲜切西兰花保鲜的作用,将鲜切西兰花用40 kHz不同功率(200、250、300、350W和400W)US处理10min,置于10℃贮藏96h,依据表观和微生物品质变化,确定US处理对西兰花保鲜的适宜条件,在此基础上研究了适宜US处理对鲜切西兰花叶绿素降解和活性成分变化的影响。结果表明,不同功率US处理能延缓鲜切西兰花黄化指数、L*值、霉菌、酵母和菌落总数的上升,抑制色调角H值下降,其中300WUS处理对维持鲜切西兰花表观和微生物品质的作用最佳。进一步研究表明,300WUS处理能明显抑制鲜切西兰花叶绿素酶和脱镁螯合酶的活力,保持较高的叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素含量。同时,300WUS处理还能保持较高的VC、总酚、总硫代葡萄糖苷和萝卜硫素等活性成分含量,提高1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基和羟自由基清除能力。这些结果表明超声处理不仅能有效延缓鲜切西兰花的黄化,还可维持较高的活性成分含量,从而起到保鲜作用。

关键词：鲜切西兰花超声叶绿素降解品质抗氧化

基于表达元件优化提高脱氧雪腐镰刀菌烯醇解毒酶DepB在枯草芽孢杆菌中的表达水平

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

食品科学 2024年第2期45卷 41-47页

作者：严茹雪李越牛家峰陆兆新孟凡强朱萍吕凤霞南京农业大学食品科学技术学院江苏南京210095

本研究实现了脱氧雪腐镰刀菌烯醇解毒酶DepB在枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)RIK 1285中的异源表达,但DepB较低的发酵水平限制了其在食品加工和饲料中的应用,可采用转录和翻译相结合的策略提高DepB在枯草芽孢杆菌中的表达水平。首先,... 详细信息

本研究实现了脱氧雪腐镰刀菌烯醇解毒酶DepB在枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)RIK 1285中的异源表达,但DepB较低的发酵水平限制了其在食品加工和饲料中的应用,可采用转录和翻译相结合的策略提高DepB在枯草芽孢杆菌中的表达水平。首先,选择9个单启动子替换原始启动子P43,其中单启动子P_(spoVG)介导的重组菌经发酵后酶活力最高,酶活力为29.59 U/mL。其次,选择4个具有较高DepB表达水平的启动子(P43、PsacB、P_(spoVG)和P_(aprE))构建16个双启动子系统,其中,DepB在双启动子P_(aprE^(-))P_(spoVG)的介导下活力达到最高,为48.87 U/mL。此外,通过对启动子P_(aprE^(-))P_(spoVG)的核心区域(-35和-10区)进行优化,Mutant-5酶活力高达69.17 U/mL,是原始菌株(14.45 U/mL)的4.79倍。在此基础上,通过优化启动子P_(spoVG)的核糖体结合位点序列,进一步提高了DepB的表达水平,RBS15酶活力为115.15 U/mL,是原始菌株的7.97倍。研究结果表明,转录和翻译相结合策略是提高重组蛋白发酵水平的有效手段。

关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇枯草芽孢杆菌表达元件启动子核糖体结合位点

基于定向进化技术提高呕吐毒素解毒酶DepA的催化活性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

南京农业大学学报 2024年第4期 750-759页

作者：李越池慧兵牛家峰马斌周慧敏朱萍吕凤霞南京农业大学食品科学技术学院

[目的]呕吐毒素（deoxynivalenol, DON）C3位羟基的异构化是生物脱毒的关键部位，其中DepA作为DON生物转化中第一步关键限速酶，存在催化活性低的问题，限制了其在食品及饲料加工领域中的应用。本文旨在通过定向进化技术对DepA进行分子... 详细信息

[目的]呕吐毒素（deoxynivalenol, DON）C3位羟基的异构化是生物脱毒的关键部位，其中DepA作为DON生物转化中第一步关键限速酶，存在催化活性低的问题，限制了其在食品及饲料加工领域中的应用。本文旨在通过定向进化技术对DepA进行分子改造，以期获得催化活性显著提高的突变酶，提高其工业化应用的潜力。[方法]通过易错PCR和DNA shuffling相结合的方法，构建突变文库，经高通量筛选后，对催化活性明显提高的突变体进行酶学性质表征。同时，采用分子动力学模拟和三维结构模拟分析，探究突变酶催化活性提高的分子机制。[结果]成功筛选到突变酶S2、S10和S12,与野生型相比，其比活力分别提高207%、293%和258%。动力学参数结果显示，突变酶S2、S10和S12的Km值分别为56.89、27.00和40.65μmol·L-1,是野生型的91.7%、43.5%和65.5%;kcat/Km值分别为327.30、576.67和380.07 L·mmol-1·s-1,是野生型的1.25、2.20和1.45倍，相比野生型，突变酶亲和力和催化效率均显著提高。此外，分子动力学模拟和三维结构模拟分析结果表明，柔性增加、底物DON的进攻距离缩短、氢键增加、疏水性增加和远端效应是导致其催化活性提高的主要原因。[结论]本研究通过易错PCR和DNA shuffling相结合的定向进化策略有效提高了呕吐毒素解毒酶DepA的催化活性，为其工业化应用提供试验依据。

关键词：呕吐毒素解毒酶定向进化催化活性分子动力学模拟

地衣芽胞杆菌JNBS001抗菌物质的鉴定及其抑菌机制研究

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

南京农业大学学报 2024年

作者：马渝童孟凡强陆兆新南京农业大学食品科学技术学院

[目的]本试验旨在鉴定一株从自然环境中筛选的地衣芽胞杆菌(Bacillus licheniformis)JNBS001发酵产物中的抗菌物质，及其对大肠杆菌(Escherichia coli)、单增李斯特菌(Listeria monocytogenes)的抑菌活性和机制，初步探索其作为一种抗... 详细信息

[目的]本试验旨在鉴定一株从自然环境中筛选的地衣芽胞杆菌(Bacillus licheniformis)JNBS001发酵产物中的抗菌物质，及其对大肠杆菌(Escherichia coli)、单增李斯特菌(Listeria monocytogenes)的抑菌活性和机制，初步探索其作为一种抗菌物质在食品防腐保鲜体系中的应用前景。[方法]对JNBS001进行全基因组测序，并预测次级代谢产物的合成基因簇，用LC-MS/MS进行非靶向鉴定；随后测定JNBS001发酵产物的抑菌活性和抑菌谱、发酵产物冻干粉对大肠杆菌和单增李斯特菌的最小抑菌浓度(MIC)，并通过测定K+和Ca2+泄漏、碱性磷酸酶(AKP)活力、细胞膜通透性以及细胞形态观察分析JNBS001发酵产物的抑菌机制。[结果]测序结果表明JNBS001基因组全长3 914 347 bp，GC含量46.59%，共编码3971个基因，预测出13种次级代谢产物的合成基因簇，其中完整的、相似性100%的基因簇有7个；结合LC-MS/MS非靶向鉴定数据，确认了macrolactin H和bacilysin为JNBS001发酵产物中的抗菌物质；JNBS001的发酵产物对大肠杆菌、沙门氏菌(Salmonella)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、单增李斯特菌、阪琦肠杆菌(Enterobacter sakazakii)和藤黄微球菌(Micrococcus luteus)均有抑菌活性；其抑菌机制分析结果表明JNBS001的发酵产物改变了大肠杆菌和单增李斯特菌的细胞形态，增加膜的通透性，并使细胞内容物大量外渗，从而使细菌死亡。[结论]JNBS001发酵产物中的抗菌物质包含macrolactin H和bacilysin，其发酵产物具有广谱抑菌特性，且通过破坏细菌细胞膜、细胞壁结构的完整性实现抑菌。

关键词：地衣芽胞杆菌全基因组测序 LC-MS/MS 抑菌机制

基于理性设计策略提高呕吐毒素解毒酶DepB的催化活性

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

南京农业大学学报 2024年

作者：周慧敏牛家峰池慧兵马斌朱萍陆兆新吕凤霞南京农业大学食品科学技术学院

[目的]呕吐毒素(DON)广泛存在于粮谷类原料及其制品中，对人和动物的健康都造成严重危害。然而，现有呕吐毒素解毒酶存在种类少、催化性能差等问题，限制了其在食品加工和饲料中的应用。本研究采用理性设计策略对呕吐毒素解毒酶DepB进... 详细信息

[目的]呕吐毒素(DON)广泛存在于粮谷类原料及其制品中，对人和动物的健康都造成严重危害。然而，现有呕吐毒素解毒酶存在种类少、催化性能差等问题，限制了其在食品加工和饲料中的应用。本研究采用理性设计策略对呕吐毒素解毒酶DepB进行分子改造，以提高DepB的催化活性。[方法]通过对底物10 ?范围内的氨基酸残基进行丙氨酸和甘氨酸扫描，确定突变“热点”氨基酸残基。随后，采用定点饱和突变和组合突变技术筛选得到催化活性显著提高的突变酶，并对其进行三维结构模拟和分子动力学模拟，分析其催化活性提高的分子机制。[结果]获得了催化活性显著提高的三点突变酶A289V/A227R/S54N，该酶比活力为335.77 U·mg-1，是野生型DepB的2.25倍。动力学参数显示，三点突变酶的Km值由95.11 μmol·L-1下降到58.33 μmol·L-1，kcat/Km比值由5.99 mmol-1·L·s-1提高至16.94 mmol-1·L·s-1，亲和力和催化效率均显著提高。通过三维结构模拟和分子动力学模拟分析，发现空间位阻减小、静电相互作用增强、酶-底物-辅酶结合自由能降低是其催化活性提高的分子机制。[结论]基于理性设计策略提高了DepB的催化活性，强化了DepB的适用性能，为呕吐毒素解毒酶的分子改造及其在食品加工和饲料中的应用提供依据。

关键词：呕吐毒素解毒酶 DepB 催化活性理性设计分子机制

源于细菌Dyella caseinilytica的新型N-糖酰胺酶的特性及其功能分析

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

食品与发酵工业 2024年

作者：武俊英王婷 JOSEF Voglmeir 刘丽南京农业大学食品科学技术学院

N-糖酰胺酶（PNGase）是一种糖苷水解酶，主要功能为释放糖肽或糖蛋白上的N-糖链，在食品、生物医药等领域中具有重要的应用价值。目前，商业化的PNGase在使用过程中具有一定的局限性，因此，开发性能优良的新型PNGase具有研究意义。该... 详细信息

N-糖酰胺酶（PNGase）是一种糖苷水解酶，主要功能为释放糖肽或糖蛋白上的N-糖链，在食品、生物医药等领域中具有重要的应用价值。目前，商业化的PNGase在使用过程中具有一定的局限性，因此，开发性能优良的新型PNGase具有研究意义。该研究在细菌Dyella caseinilytica中利用编码PNGase的基因，通过在大肠杆菌中进行重组表达，成功获得一种新型PNGase，命名为PNGase Dc，该酶分子质量为63.01 kDa。之后对其酶学特性、功能和应用潜力进行分析。酶学特性结果表明，PNGase Dc的最适pH和温度分别为2.0和37 ℃，酶促反应无金属离子依赖性；此外，该酶稳定性优良，在4 ℃下保存45 d仍能维持最高活性；分子对接结果表明，PNGase Dc与底物N’N-二乙酰壳二糖的相互作用力以氢键和范德华力为主；定点突变证明，Asp102和Glu236是影响重组PNGase Dc活性的关键氨基酸；PNGase Dc对标准糖蛋白辣根过氧化物酶和牛乳铁蛋白均具有良好的去糖基化效果；最后，以拟南芥和小鼠血浆作为底物评估PNGase Dc应用潜力，证实PNGase Dc在动植物源糖蛋白的研究中具有一定的应用潜力。综上所述，该研究为动植物源糖蛋白的研究提供了一个新的工具酶PNGase Dc，并为该酶的开发利用奠定理论基础。

关键词： PNGase Dc N-糖链 N-糖酰胺酶稳定性 Dyella caseinilytica

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

3D打印技术在食品中的研究进展

南京农业大学学报 2024年

作者：丁可盈金晶任玉金鹏郑永华吴正国南京农业大学食品科学技术学院

3D打印技术是一种新兴的制造技术，其可以利用数字模型实现精准制造。近年来，3D打印技术已经被广泛应用于各个领域，包括食品、生物医药等。3D食品打印的优势在于能够制作复杂的食品模型、设计独特的图案以及精准定制。3D食品打印技术... 详细信息

3D打印技术是一种新兴的制造技术，其可以利用数字模型实现精准制造。近年来，3D打印技术已经被广泛应用于各个领域，包括食品、生物医药等。3D食品打印的优势在于能够制作复杂的食品模型、设计独特的图案以及精准定制。3D食品打印技术由挤出式打印、黏结剂喷射和喷墨打印组成，其利用食品材料，基于逐层堆积的方式设计造型。本文重点介绍了3D打印技术在食品中的最新研究进展，深入总结了3D打印技术在不同类型食品应用中的特点和局限性。同时，通过介绍食品的精准营养递送、贮藏保鲜、食品加工、生物制造等方面，详细分析了3D打印在食品行业的应用现状。最后展望了未来食品3D打印技术的发展，以期为3D打印与食品产业的深度融合提供理论指导。

关键词： 3D打印食品加工精准营养食品包装

miR-34a通过激活lncRNA NORHA转录诱导猪卵巢颗粒细胞早期凋亡

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国农业科学 2024年第5期57卷 1000-1009页

作者：王思琪周春雪李玉琦杜星潘增祥李齐发南京农业大学动物科技学院

【目的】探索miR-34a诱导GCs凋亡的RNA激活机制，为揭示猪卵泡闭锁的分子机理、筛选调控母猪繁殖的小核酸调节物提供依据。【方法】利用生物信息学方法分析猪miR-34a特征及其与潜在靶基因lncRNA NORHA启动子的结合情况。利用核质分离技... 详细信息

【目的】探索miR-34a诱导GCs凋亡的RNA激活机制，为揭示猪卵泡闭锁的分子机理、筛选调控母猪繁殖的小核酸调节物提供依据。【方法】利用生物信息学方法分析猪miR-34a特征及其与潜在靶基因lncRNA NORHA启动子的结合情况。利用核质分离技术分析猪GCs中miR-34a的亚细胞定位。qPCR检测miR-34a对猪GCs中NORHA、凋亡标志基因BCL-2和BAX表达的影响。利用荧光素酶活性分析验证miR-34a对NORHA启动子转录活性的靶向调控关系。利用染色质免疫沉淀(ChIP)检测miR-34a对猪GCs中NORHA启动子miRNA反应元件(MRE)处AGO2和组蛋白修饰因子富集情况。利用western blot和流式细胞术分析miR-34a通过NORHA对下游因子FOXO1的表达和细胞凋亡的调控作用。【结果】猪miR-34a为基因间miRNA，其序列在哺乳动物中具有高度保守性。亚细胞定位分析显示，miR-34a在猪GCs中细胞核与细胞质均有分布。生物信息学分析显示miR-34a的MRE位于NORHA启动子-194 nt至-173 nt处，且两者结合自由能为-23.9 kcal·mol-1。qPCR结果表明miR-34a显著上调猪GCs中NORHA的表达。荧光素酶活性分析显示，miR-34a极显著上调NORHA启动子报告载体活性，而对MRE突变型启动子活性没有显著影响。ChIP试验显示，miR-34a可增加NORHA启动子MRE处RNA诱导转录激活(RITA)复合物核心成员AGO2和转录激活型组蛋白H3K4me3的富集，而减少转录抑制型组蛋白H3K9me3的富集。共转试验显示，敲减NORHA可显著或极显著逆转由miR-34a过表达引起的FOXO1蛋白水平和早期凋亡率的上调，以及BCL-2/BAX比值的下调。【结论】细胞核miR-34a是猪GCs中的内源性小激活RNA(saRNA)，通过靶向激活促凋亡lncRNA NORHA的转录，诱导猪GCs早期凋亡(细胞膜完整)，可能参与猪卵泡闭锁的启动。

关键词：猪GCs凋亡 miR-34a saRNA NORHA

不同发酵温度下Lactiplantibacillus plantarum JB1对发酵香肠的控胺效果

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

南京农业大学学报 2024年第3期47卷 539-550页

作者：秦善曾宪明石洁芮昕姜梅张秋勤南京农业大学三亚研究院海南三亚572025 南京农业大学食品科学技术学院江苏南京210095

[目的]Lactiplantibacillus plantarum JB1源自发酵香肠,具有降解生物胺的潜力,本试验旨在评价该菌株在发酵香肠中的实际应用效果。[方法]将L.plantarum JB1接种至香肠中,在不同的温度系统(20℃和35℃)中进行发酵,以不接种菌株自然发酵... 详细信息

[目的]Lactiplantibacillus plantarum JB1源自发酵香肠,具有降解生物胺的潜力,本试验旨在评价该菌株在发酵香肠中的实际应用效果。[方法]将L.plantarum JB1接种至香肠中,在不同的温度系统(20℃和35℃)中进行发酵,以不接种菌株自然发酵组为对照组,测定接种、发酵、干燥及贮藏阶段发酵香肠的理化指标、感官品质及生物胺含量。[结果]接种L.plantarum JB1能快速降低香肠pH值至4.60左右,有效抑制肠杆菌生长达10^(3)CFU·g^(-1)以上,促进蛋白质降解,增加小肽和氨基酸氮含量,有利于产品干燥后形成良好的质构。主发酵温度从20℃提高至35℃有利于发酵香肠蛋白降解与质构提升,但也增加了生物胺含量,对照组总胺含量在干燥和贮藏阶段分别增加14.45和57.01 mg·kg^(-1)。与对照组相比,接种L.plantarum JB1对香肠中8种生物胺含量均有抑制作用,生物胺总量最高降解98.26 mg·kg^(-1),降解率超过30%。[结论]L.plantarum JB1具有稳定持续的降胺能力,尤其在高温发酵时既能提升产品品质又能有效控制生物胺的含量,可应用于低胺食品的发酵与生产。

关键词：生物胺发酵香肠植物乳杆菌降解