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牛结节性皮肤病病毒ORF140依赖JUP激活Wnt信号通路影响病毒复制的研究

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畜牧与兽医 2025年第3期57卷 103-110页

作者：王敏温渊曹钰莹刘聪李超汤芳戴建君薛峰南京农业大学动物健康与食品安全国际合作联合实验室江苏南京210095 中国动物卫生与流行病学中心/农业农村部动物生物安全风险预警及防控重点实验室(南方)/青岛市动物生物安全重点实验室山东青岛266032 中国药科大学生命科学与技术学院江苏南京211199

旨在探索牛结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus, LSDV)ORF140在病毒感染宿主细胞中的作用。利用前期构建的LSDV ORF140缺失株,荧光定量分析缺失ORF140基因在LSDV感染宿主细胞后细胞因子转录水平的变化,同时选取LSDV保守基因ORF... 详细信息

旨在探索牛结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus, LSDV)ORF140在病毒感染宿主细胞中的作用。利用前期构建的LSDV ORF140缺失株,荧光定量分析缺失ORF140基因在LSDV感染宿主细胞后细胞因子转录水平的变化,同时选取LSDV保守基因ORF077建立检测LSDV ORF077的标准曲线,检测LSDV ORF140缺失株与野毒株在不同时间点的拷贝数变化,然后通过蛋白质谱技术和免疫共沉淀技术分析140蛋白与宿主细胞内存在相互作用的蛋白,最后敲低此蛋白的基因转录水平检测宿主细胞内细胞因子转录水平的变化。结果:LSDV ORF140缺失株会引起宿主细胞β-catenin基因转录水平显著下调(P研究证实LSDV 140蛋白能够与宿主细胞中的JUP蛋白结合,激活Wnt/β-catenin信号通路,从而抑制LSDV的复制,为揭示LSDV与宿主之间的相互作用及LSDV的致病机制提供参考。

关键词：牛结节性皮肤病病毒连接斑珠蛋白 Wnt/β-catenin信号通路病毒复制

非洲猪瘟病毒pK205R蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立

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畜牧与兽医 2025年第2期57卷 105-111页

作者：王燕邹艳丽何佳依刘珊苗雨润任炜杰王振忠白昀陈欢钱莺娟贾红吴晓东冯志新郑龙三南京农业大学动物医学院/教育部动物健康与食品安全国际合作联合实验室/农业农村部细菌学重点实验室江苏南京210095 江苏省农业科学院兽医研究所江苏南京210014 中国动物卫生与流行病学中心/国家非洲猪瘟参考实验室山东青岛266000 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193

旨在建立可以检测非洲猪瘟病毒(ASFV)非结构蛋白pK205R抗体的血清学检测方法。基于杆状病毒表达系统构建重组杆粒BacmidpK205R,以纯化的pK205R蛋白为包被抗原,优化各项反应条件,建立间接ELISA抗体检测方法,验证方法的特异性、灵敏性、... 详细信息

旨在建立可以检测非洲猪瘟病毒(ASFV)非结构蛋白pK205R抗体的血清学检测方法。基于杆状病毒表达系统构建重组杆粒BacmidpK205R,以纯化的pK205R蛋白为包被抗原,优化各项反应条件,建立间接ELISA抗体检测方法,验证方法的特异性、灵敏性、重复性,并对临床血清样品进行检测。结果显示:pK205R蛋白可以与ASFV阳性血清发生发应,ELISA方法的抗原包被浓度为50 ng/孔,4℃过夜包被,封闭液为2%牛血清白蛋白(BSA),37℃封闭1 h,待检血清以5%脱脂乳进行1∶200稀释,37℃孵育0.5 h;二抗工作浓度为1∶5000,37℃孵育0.5 h,37℃下显色10 min;该方法的阳性临界值为0.186(≥0.186为阳性,研究成功建立pK205R非洲猪瘟间接ELISA抗体检测方法,为进一步优化和研制非洲猪瘟抗体的快速检测试剂盒提供了参考。

关键词：非洲猪瘟病毒 pK205R蛋白间接ELISA 杆状病毒表达

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添加蓝莓发酵汁对法兰克福香肠抗氧化及感官品质的影响

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食品科学 2019年第19期40卷 69-76页

作者：周恒悦邓绍林周昌瑜庄昕波周光宏南京农业大学动物健康与食品安全国际联合实验室肉品加工与质量控制教育部重点实验室农业部肉品加工重点实验室肉类生产与加工质量安全控制协同创新中心国家肉品质量安全控制工程技术研究中心

研究蓝莓发酵汁(fermented blueberry juice,FBJ)对法兰克福香肠脂肪和蛋白氧化的抑制能力以及对其感官品质的影响。将不同质量分数的FBJ加入法兰克福香肠中,研究其对香肠贮藏过程中硫代巴比妥酸反应产物含量和羰基含量的影响,以及对香... 详细信息

研究蓝莓发酵汁(fermented blueberry juice,FBJ)对法兰克福香肠脂肪和蛋白氧化的抑制能力以及对其感官品质的影响。将不同质量分数的FBJ加入法兰克福香肠中,研究其对香肠贮藏过程中硫代巴比妥酸反应产物含量和羰基含量的影响,以及对香肠色泽、pH值、质构和感官评分的影响。结果表明:添加质量分数2%、4%、6%的FBJ均能够有效抑制法兰克福香肠在加工和贮藏期间脂肪和蛋白的氧化,并且在贮藏后期效果优于添加质量分数0.05%异抗坏血酸钠的香肠(P0.05);此外,电子鼻和感官实验中,各FBJ组与对照组的风味能明显区分开,其感官评价结果也显著优于对照组,尤其是添加质量分数4%FBJ的法兰克福香肠综合评分最高。本研究结果证明FBJ是较好的抗氧化剂,可以有效抑制法兰克福香肠加工和贮藏过程中的脂肪和蛋白质氧化,同时能够改善法兰克福香肠的感官品质。

关键词：蓝莓发酵汁法兰克福香肠脂肪氧化蛋白氧化感官评价

副溶血弧菌Ⅲ型分泌系统vscH基因生物学功能分析

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畜牧与兽医 2025年第1期57卷 57-65页

作者：田珅李婉君曹钰莹许立慧任建鸾汤芳戴建君薛峰南京农业大学动物健康与食品安全国际合作联合实验室江苏南京210095 中国药科大学生命科学与技术学院江苏南京210009

副溶血弧菌是一种重要的食源性病原菌。Ⅲ型分泌系统(type Ⅲ secretion system,T3SS)作为该菌的主要毒力因子之一,在致病过程中发挥重要作用。vscH位于T3SS1基因座中,功能未知。为探究vscH基因的生物学功能,通过同源重组的方法在副溶... 详细信息

副溶血弧菌是一种重要的食源性病原菌。Ⅲ型分泌系统(type Ⅲ secretion system,T3SS)作为该菌的主要毒力因子之一,在致病过程中发挥重要作用。vscH位于T3SS1基因座中,功能未知。为探究vscH基因的生物学功能,通过同源重组的方法在副溶血弧菌POR-1菌株的基础上构建vscH缺失株ΔvscH及回补株CΔvscH,比较各菌株在生物被膜形成、细胞毒性等生物学特性上的差异;应用Western blot检测T3SS1效应蛋白的分泌量及其在HeLa细胞中易位量;通过GST-Pull Down试验鉴定与VscH相互作用的T3SS1相关蛋白。结果:与POR-1菌株相比,缺失株ΔvscH在生长性能上无明显差异,但生物被膜形成能力下降,同时对HeLa细胞和CaCo-2细胞的毒性作用明显下降;vscH基因的缺失使效应蛋白VopR、VopS和胞外针结构蛋白VscI的分泌显著减少,同时使VopR和VopS在HeLa细胞内易位量显著下降;GST-Pull Down试验发现VscH与一种位于T3SS1的ATP酶VscN存在相互作用。本研究表明,vscH基因影响副溶血弧菌生物被膜形成,参与T3SS1介导的毒性作用,同时对T3SS1效应蛋白的分泌和易位发挥重要功能。

关键词：副溶血弧菌 Ⅲ型分泌系统 vscH 分泌易位

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压力水平及氯化钠浓度对兔肌球蛋白凝胶保水性及其胶凝过程中理化特性和结构变化的影响

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食品工业科技 2018年第9期39卷 57-65页

作者：钱畅薛思雯徐幸莲周光宏南京农业大学动物健康与食品安全国际实验室肉品加工与质量控制教育部重点实验室肉品加工农业部重点实验室肉类生产与加工质量安全控制协同创新中心国家肉品质量安全控制工程技术研究中心江苏南京210095

以含不同浓度的氯化钠(1.0%、1.5%、2.0%)的兔骨骼肌肌球蛋白为实验对象,在不同压力水平(100、200、300 MPa)下对其进行超高压处理(9 min,25℃)后加热制备凝胶。以未经高压处理的含2%氯化钠的蛋白作为对照组。根据凝胶保水性、水分分布... 详细信息

以含不同浓度的氯化钠(1.0%、1.5%、2.0%)的兔骨骼肌肌球蛋白为实验对象,在不同压力水平(100、200、300 MPa)下对其进行超高压处理(9 min,25℃)后加热制备凝胶。以未经高压处理的含2%氯化钠的蛋白作为对照组。根据凝胶保水性、水分分布、凝胶微观结构、蛋白在升温过程中的贮能模量、表面疏水性、活性巯基含量以及二级结构等指标的变化,研究压力水平及氯化钠浓度对经高压处理的肌球蛋白加热胶凝过程中的蛋白流变特性,二三级结构以及形成的热凝胶的水分特征的影响。结果显示:含1%氯化钠的兔肉肌球蛋白经100或200 MPa高压处理后,包埋的疏水基团和巯基在40~55℃间快速暴露,且蛋白中的α-螺旋结构的比例也显著下降(p研究结果可为利用超高压技术生产低盐功能性肉制品提供理论依据。

关键词：肌球蛋白高压处理二三级结构热凝胶保水性

纳米Fe^(3+)/TiO_2改性聚乙烯醇基紫胶复合膜对鸡蛋的保鲜效果

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农业工程学报 2014年第20期30卷 313-324页

作者：龙门马磊宋野顾凤兰黄明明章建浩国家肉品质量与安全控制工程技术研究中心农业部畜产品加工与质量控制重点开放实验室食品安全与营养协同创新中心南京农业大学食品科技学院南京210095 滁州学院生物与食品工程学院滁州239000

为了探究纳米Fe3+/TiO2改性聚乙烯醇基紫胶复合膜对清洁鸡蛋的保鲜效果,该文中将新鲜鸡蛋分组后涂上聚乙烯醇(polyvinyl alcohol)单膜和纳米Fe3+/TiO2改性聚乙烯醇基(polyvinyl alcohol)紫胶复合膜后,测定储藏过程中各组鸡蛋的感官品质... 详细信息

为了探究纳米Fe3+/TiO2改性聚乙烯醇基紫胶复合膜对清洁鸡蛋的保鲜效果,该文中将新鲜鸡蛋分组后涂上聚乙烯醇(polyvinyl alcohol)单膜和纳米Fe3+/TiO2改性聚乙烯醇基(polyvinyl alcohol)紫胶复合膜后,测定储藏过程中各组鸡蛋的感官品质、失重率、哈夫单位(haugh units,HU)、蛋黄指数、色差、pH值和菌落总数等,再对各项指标进行统计分析。结果表明:各组鸡蛋的品质指标在储藏过程中都有显著变化(P品质指标显著优于聚乙烯醇单膜组和未涂膜组(P研究结果为纳米改性复合涂膜材料在新鲜鸡蛋贮藏保鲜上的应用提供参考。

关键词：贮藏复合材料品质控制纳米Fe3+/TiO2 紫胶聚乙烯醇涂膜保鲜贮藏期

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不同涂膜材料对清洁鸡蛋的保鲜效果

农业工程学报 2015年第1期31卷 303-310页

作者：顾凤兰章建浩马磊龙门黄明明杨龙平国家肉品质量与安全控制工程技术研究中心农业部畜产品加工与质量控制重点开放实验室食品安全与营养协同创新中心南京农业大学食品科技学院南京210095 滁州学院生物与食品工程学院滁州239000

为对比几种涂膜材料对清洁鸡蛋的涂膜保鲜效果，该文采用聚偏二氯乙烯（polyvinylidene chloride, PVDC）、纳米α-Fe2O3功能改性聚乙烯醇基蜂蜡复合材料和纳米Fe3＋/TiO2功能改性聚乙烯醇基紫胶复合材料3种涂膜材料对清洁鸡蛋进行2次... 详细信息

为对比几种涂膜材料对清洁鸡蛋的涂膜保鲜效果，该文采用聚偏二氯乙烯（polyvinylidene chloride, PVDC）、纳米α-Fe2O3功能改性聚乙烯醇基蜂蜡复合材料和纳米Fe3＋/TiO2功能改性聚乙烯醇基紫胶复合材料3种涂膜材料对清洁鸡蛋进行2次浸涂风干涂膜处理，以未涂膜处理为对照组，在室温条件下（温度17～30℃，相对湿度45～88%）贮藏，检测分析鸡蛋失重率和理化指标。结果表明：在室温条件下，各组鸡蛋的储藏期分别为：对照组21 d， PVDC处理组28 d，纳米Fe3＋/TiO2功能改性聚乙烯醇基紫胶复合膜组35 d，而纳米α-Fe2O3功能改性聚乙烯醇基蜂蜡复合膜组42 d，表明涂膜对鸡蛋储藏期的延长效果显著（P〈0.05）优于对照组。贮藏42 d后，最优组（纳米α-Fe2O3功能改性聚乙烯醇基蜂蜡复合膜组）的鲜蛋率为100%，失重率3.05%，蛋黄指数0.32，哈夫单位值为60.788，pH值为9.2，菌落总数为1.9×10^3CFU/mL，各值都显著优于其余各组（P〈0.05），研究结果为鸡蛋涂膜保鲜技术提供参考。

关键词：贮藏复合材料品质控制聚乙烯醇纳米α-Fe2O3 清洁鸡蛋涂膜

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畜禽及产品可追溯技术研究进展及应用

食品工业科技 2010年第8期31卷 413-416页

作者：王虎虎徐幸莲南京农业大学国家肉品质量安全控制工程技术研究中心教育部肉品加工与质量控制重点实验室江苏南京210095

为了确保畜禽动物健康及其产品的质量安全,可追溯体系已被众多国家和企业应用到了畜禽动物及产品的全程供应链当中,而实现高效、精确地追溯需要不同技术的联合运用。本文在阐述可追溯基本信息的同时,重点介绍了畜禽追溯中所用的标识技... 详细信息

为了确保畜禽动物健康及其产品的质量安全,可追溯体系已被众多国家和企业应用到了畜禽动物及产品的全程供应链当中,而实现高效、精确地追溯需要不同技术的联合运用。本文在阐述可追溯基本信息的同时,重点介绍了畜禽追溯中所用的标识技术、编码技术、大型动物个体鉴别技术和产地溯源技术的原理和应用,最后对畜禽追溯技术的发展前景进行了展望。

关键词：畜禽可追溯技术应用

表达EGFP的重组LSDV的构建以及在高效筛选抗病毒药物中的应用

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中国兽医科学 2025年第2期 188-196页

作者：刘聪钱炳旭温渊汤芳戴建君薛峰南京农业大学动物健康与食品安全国际合作联合实验室中国药科大学南京农业大学三亚研究院

为实现抗牛结节性皮肤病病毒（LSDV）药物的高内涵筛选（HCS），选取LSDV复制非必需基因TK作为增强绿色荧光蛋白（EGFP）的插入区域，构建了表达EGFP的重组LSDV，该重组病毒rLSDV-ΔTKEGFP与野生型LSDV的生长特性无明显差异。基于rLSDV-... 详细信息

为实现抗牛结节性皮肤病病毒（LSDV）药物的高内涵筛选（HCS），选取LSDV复制非必需基因TK作为增强绿色荧光蛋白（EGFP）的插入区域，构建了表达EGFP的重组LSDV，该重组病毒rLSDV-ΔTKEGFP与野生型LSDV的生长特性无明显差异。基于rLSDV-ΔTK-EGFP，建立了抗LSDV药物的高内涵快速筛选方法，使用该方法对天然产物库中的1 036个化合物进行了筛选。结果显示，该方法筛选到5个具有抗LSDV活性的化合物。进一步检测LSDV117蛋白表达水平和LSDV043基因拷贝数，结果表明，在MDBK细胞上经过5种化合物处理后可以显著抑制LSDV，且化合物浓度为10μmol/L时，均无明显细胞毒性。上述结果表明，构建的表达EGFP的重组LSDV可以用于抗LSDV药物的高内涵筛选，具有较高的筛选效率，对于提高动物个体抗病毒能力，缓解牛结节性皮肤病症状，减少经济损失等方面具有重要意义。

关键词：牛结节性皮肤病病毒 EGFP 抗病毒药物高内涵筛选