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柔肝健脾方对肝郁脾虚证溃疡性结肠炎小鼠铁死亡的影响

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中成药 2024年

作者：黄华孙薛亮季利江马俊杰魏巍郭天威南京中医药大学常熟附属医院肛肠科南京中医药大学附属苏州市中医医院肛肠科南京中医药大学中医学院南京中医药大学常熟附属医院脾胃病科南京中医药大学常熟附属医院病理科

目的探究柔肝健脾方对肝郁脾虚证溃疡性结肠炎（UC）小鼠的影响。方法采用慢性束缚应激+过度疲劳+饮食失节方法诱导C57BL/6J小鼠形成肝郁脾虚证，再予3% DSS诱导建立UC模型，将小鼠随机分为空白组、模型组、柔肝健脾方组（20g/kg）、美... 详细信息

目的探究柔肝健脾方对肝郁脾虚证溃疡性结肠炎（UC）小鼠的影响。方法采用慢性束缚应激+过度疲劳+饮食失节方法诱导C57BL/6J小鼠形成肝郁脾虚证，再予3% DSS诱导建立UC模型，将小鼠随机分为空白组、模型组、柔肝健脾方组（20g/kg）、美沙拉嗪组（200 mg/kg），每组6只，灌胃给予相应药物。观察小鼠体质量、粪便情况、疾病活动指数，HE染色观察小鼠结肠组织病理学比较，ELISA法检测血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平，采用试剂盒检测小鼠结肠组织铁负荷、GSH、MDA水平，RT-qPCR和Westernblot法检测小鼠结肠组织GPX4、FTH1、ACSL4mRNA和蛋白表达。利用TNF-α诱导NCM460结肠细胞炎症，加入柔肝健脾方含药血清和铁死亡诱导剂RSL3处理细胞，CCK-8法检测细胞存活率，ELISA法检测细胞上清液IL-1β、IL-6水平，分析细胞中铁负荷、GSH、MDA水平，以及GPX4、FTH1、ACSL4mRNA和蛋白表达。结果与模型组比较，柔肝健脾方组小鼠体质量增加（P<0.01），结肠长度延长（P<0.01），疾病活动指数、组织病理学评分、血清IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA水平、铁水平、ACSL4mRNA和蛋白表达降低（P<0.01），GSH水平、GPX4、FTH1mRNA和蛋白表达升高（P<0.01）。在NCM460细胞中，柔肝健脾方可抑制TNF-α诱导的细胞上清IL-1β、IL-6水平及铁死亡水平（P<0.01）。结论柔肝健脾方可有效改善DSS诱导的溃疡性结肠炎小鼠结肠炎症以及TNF-α诱导的结肠细胞炎症，其作用机制与调控细胞铁死亡有关。

关键词：柔肝健脾方溃疡性结肠炎氧化应激铁死亡

基于SIRT1和PI3K/Akt信号通路探讨黄芪甲苷对慢性难愈性创面大鼠模型修复愈合的影响及作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第6期30卷 101-108页

作者：崔梦迪高加巍朱吕群陈贵生陈奕粮南京中医药大学南京210023 南京中医药大学附属南京中医院南京210000 南京市第二医院南京210003

目的:探讨黄芪甲苷对慢性难愈性创面修复愈合的促进作用及其机制。方法:60只雄性SD大鼠背部构建全层皮肤缺损创面,除正常组外,其余大鼠构建难愈性创面模型,随机分为模型组、黄芪甲苷低、高剂量组、黄芪甲苷+LY294002[磷酸肌醇3-激酶(PI... 详细信息

目的:探讨黄芪甲苷对慢性难愈性创面修复愈合的促进作用及其机制。方法:60只雄性SD大鼠背部构建全层皮肤缺损创面,除正常组外,其余大鼠构建难愈性创面模型,随机分为模型组、黄芪甲苷低、高剂量组、黄芪甲苷+LY294002[磷酸肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂]组和黄芪甲苷+EX527[沉默调节蛋白1(SIRT1)抑制剂)]组。观察各组大鼠创面造模后第2、4、6、8天的伤口面积占比;免疫荧光检测创面组织Ⅰ型胶原α1(COL1A1)和α-肌动蛋白(α-SMA)表达;苏木素-伊红(HE)染色检测创面组织病理结构;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测创面炎症因子mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测创面SIRT1/核转录因子(NF)-κB和PI3K/蛋白激酶B(Akt)信号通路相关蛋白表达。结果:与模型组比较,黄芪甲苷低、高剂量组大鼠术后伤口面积占比均随时间逐渐降低,且黄芪甲苷高剂量组疗效更佳。与正常组比较,模型组创面组织COL1A1荧光强度降低而α-SMA表达升高;上皮组织破损严重,厚度增加,可见大量炎性细胞浸润;肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的mRNA表达升高;NF-κB p65、磷酸化(p)-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt蛋白表达升高,而SIRT1表达降低(P<0.05)。与模型组比较,黄芪甲苷治疗后COL1A1和α-SMA荧光强度增高;上皮细胞数量增多,厚度降低,炎性细胞减少,胶原数量增多;TNF-α、IL-1β、IL-6和iNOS的mRNA表达降低;NF-κB p65、p-PI3K/PI3K和pAkt/Akt蛋白表达降低,SIRT1升高,且高剂量组效果更佳(P<0.05)。与黄芪甲苷高剂量组比较,LY294002和EX527抑制PI3K/Akt和SIRT1通路可阻止黄芪甲苷对慢性难愈性创面的治疗效力。结论:黄芪甲苷外用对大鼠慢性难愈性创面愈合有明显促进作用,其机制可能与激活PI3K/Akt通路和SIRT1/NF-κB通路有关。

关键词：黄芪甲苷磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt) 沉默调节蛋白1(SIRT1) 慢性难愈性创面

骨关节炎关节内的神经图谱及神经免疫互作机制的研究进展

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中国医学科学院学报 2024年第5期 776-782页

作者：顾健蒋涛南京中医药大学研究生院常州市中医医院骨伤五科

关节内有丰富的感觉神经及交感神经纤维分布，这些神经将关节内的物理及化学性刺激转化为神经冲动传递给中枢神经系统，并参与诱发骨关节炎(OA)等炎症性关节病的痛觉超敏反应。本文总结了关节内神经的分布及功能特性，并重点介绍了“迷... 详细信息

关节内有丰富的感觉神经及交感神经纤维分布，这些神经将关节内的物理及化学性刺激转化为神经冲动传递给中枢神经系统，并参与诱发骨关节炎(OA)等炎症性关节病的痛觉超敏反应。本文总结了关节内神经的分布及功能特性，并重点介绍了“迷走神经-交感神经”自主神经环路调节OA关节内免疫微环境的相关机制。此外，关节内以肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6为代表的炎症因子也直接或间接诱发感觉神经动作电位，激活痛觉从关节局部向中枢神经系统的传导通路；而OA关节内的感觉神经也参与了免疫细胞及炎症因子的募集，这种神经免疫的互作模式不仅为OA治疗提供了多种创新靶点，还提示OA治疗应采用整体观念，综合考虑骨关节内的神经、免疫微环境及其相互之间的影响。

关键词：骨关节炎感觉神经自主神经炎症因子交互作用

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声发射技术在关节外科中的应用及价值

中国组织工程研究 2025年第15期29卷 3262-3270页

作者：徐祯张梦茹吕柯夏中玉张采薇徐建达南京中医药大学常州附属医院常州市中医医院骨科江苏省常州市213003

背景:声发射技术是无损检测中最可靠和完善的技术之一,被广泛用于机械、土木和水下声学等多个领域的损伤检测。近年来,声发射技术获得较大发展,在医学工程领域得到初步应用,特别是在人体关节的摩擦评估以及植入物监测方面具有优势。目的... 详细信息

背景:声发射技术是无损检测中最可靠和完善的技术之一,被广泛用于机械、土木和水下声学等多个领域的损伤检测。近年来,声发射技术获得较大发展,在医学工程领域得到初步应用,特别是在人体关节的摩擦评估以及植入物监测方面具有优势。目的:总结声发射技术在关节外科中的应用现状、存在问题及未来的发展方向。方法:检索1989年1月至2024年3月PubMed数据库、Web of Science数据库、中国知网、万方数据库发表的相关文献,中文检索词为“声学,髋关节置换术,髋关节假体,假体失效,膝关节骨关节炎,膝关节,监测,人工关节”;英文检索词为“acoustics,hip replacement arthroplasties,hip prosthesis,prosthesis failure,knee osteoarthritides,knee joint,monitoring,artificial joint”。初检得到文章2991篇,根据纳排标准,最终纳入80篇文章进行综述分析。结果与结论:①在关节外科领域中,声发射技术主要用于关节疾病早期的发现与诊断,以及关节置换术中骨裂和术后假体下沉、植入物磨损、无菌性松动、骨裂等的检测;②声发射技术的优势可以弥补传统检测方法的不足,提早发现关节炎,降低术中的损伤风险,监测并减少术后并发症,提高手术安全性和临床效果。

关键词：声发射技术声学髋关节置换髋关节假体假体失效膝关节骨关节炎膝关节监测人工关节

探讨益气温阳方抑制变应性鼻炎小鼠鼻黏膜细胞自噬及保护ZO-1及occludin的作用

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北京中医药大学学报 2024年第3期47卷 364-373页

作者：顾文哲史军严道南沈政洁张家港市中医医院张家港215600 南京中医药大学张家港附属医院南京中医药大学附属医院

目的观察益气温阳方(黄芪、党参、干姜、桂枝、麻黄、辛夷、五味子、地龙、甘草)对变应性鼻炎小鼠模型的治疗效果和对鼻黏膜细胞抑制自噬、保护紧密连接关键蛋白——闭锁连接蛋白1(ZO-1)及闭合蛋白(occludin)的影响。方法将30只C57BL/... 详细信息

目的观察益气温阳方(黄芪、党参、干姜、桂枝、麻黄、辛夷、五味子、地龙、甘草)对变应性鼻炎小鼠模型的治疗效果和对鼻黏膜细胞抑制自噬、保护紧密连接关键蛋白——闭锁连接蛋白1(ZO-1)及闭合蛋白(occludin)的影响。方法将30只C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为6组:空白组,模型组,益气温阳方低、中、高剂量组(7、14、28 g/kg)及西替利嗪组(1.667 mg/kg),每组5只。卵清蛋白腹腔注射加鼻部激发致敏造模,鼻部激发致敏前1 h灌胃给药,共7 d。对小鼠行为进行评分。采集小鼠鼻黏膜组织,HE染色观察鼻黏膜炎症反应,过碘酸希夫染色观察鼻黏膜杯状细胞增生情况,酶联免疫吸附测定法检测鼻腔灌洗液IgE含量,免疫组化法检测空白组、模型组、益气温阳方高剂量组鼻黏膜中ZO-1及occludin蛋白表达,蛋白质印迹法检测鼻黏膜中自噬微管相关蛋白轻链β3(LC3B)、P62及Beclin1蛋白表达。结果与空白组比较,模型组小鼠行为学总分升高(P<0.01),挠鼻、喷嚏、流涕各项评分增加。鼻黏膜上皮中断、被破坏,大量炎性细胞浸润,杯状细胞增生,黏液分泌增多,黏膜肿胀明显,鼻腔灌洗液中IgE含量增加(P<0.01)。鼻黏膜中ZO-1、occludin蛋白表达减少(P<0.05)。LC3BⅡ/Ⅰ、Beclin1蛋白表达增加(P<0.05),P62蛋白表达减少(P<0.05)。给药干预后,与模型组比较,益气温阳方高剂量组和西替利嗪组小鼠行为学总分降低(P<0.01),鼻黏膜肿胀减轻,炎性细胞浸润和杯状细胞数量减少,鼻腔灌洗液中IgE含量减少(P<0.01),鼻黏膜中ZO-1、occludin蛋白表达增加(P<0.05)。益气温阳方高剂量组小鼠LC3BⅡ/Ⅰ、Beclin1蛋白表达减少(P<0.05),P62蛋白表达增加(P<0.05)。结论益气温阳方对变应性鼻炎小鼠具有良好的治疗效果,该作用机制可能与其抑制鼻黏膜细胞自噬从而促进鼻黏膜修复相关。

关键词：益气温阳方变应性鼻炎自噬紧密连接闭锁连接蛋白1 闭合蛋白小鼠

2010-2021年上海市某三甲中医医院尿液临床分离菌的分布和耐药性分析

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中国感染与化疗杂志 2024年第3期24卷 318-325页

作者：裴凌燕谢国艳王江丽梁斌冯琪刘庆中上海中医药大学附属市中医医院检验科上海200071

目的了解上海市某三甲中医医院12年间尿液标本临床分离菌的分布及其耐药特点,为临床经验性用药提供依据。方法回顾性分析2010年1月-2021年12月尿路感染患者资料及其尿液标本临床分离菌的种类和耐药性。结果本组资料共收集非重复临床分离... 详细信息

目的了解上海市某三甲中医医院12年间尿液标本临床分离菌的分布及其耐药特点,为临床经验性用药提供依据。方法回顾性分析2010年1月-2021年12月尿路感染患者资料及其尿液标本临床分离菌的种类和耐药性。结果本组资料共收集非重复临床分离菌5231株,其中大肠埃希菌占52.8%,肠球菌属占19.1%,克雷伯菌属占11.1%。各年龄段患者尿液分离菌以60~89岁老年人最多见(76.0%),44岁以下的年轻人最少(3.1%);细菌多数分离自女性患者(75.8%),但铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌男性多于女性(55.3%对44.7%和67.7%对32.3%)。肾病科分离的菌株数较其他科室多见(占13.7%),其中大肠埃希菌在重症监护病房(ICU)的分布最低,而肠球菌属在ICU分布最高。肠杆菌目细菌对碳青霉烯类、头霉素类、阿米卡星、头孢吡肟、β内酰胺酶抑制剂复方制剂耐药率低,具有较高的敏感率;铜绿假单胞菌对碳青霉烯类、氨基糖苷类、β内酰胺酶抑制剂复方制剂的耐药率低,其敏感率均高于鲍曼不动杆菌(≥54.6%对≤39.8%)。革兰阳性球菌对糖肽类抗菌药物耐药率低,未发现万古霉素耐药的金黄色葡萄球菌和粪肠球菌,屎肠球菌对万古霉素的耐药率为2.7%。主要临床分离耐药菌株在60~89岁的老年患者中分布最高;ICU和急诊科分离出较多的耐药菌株。结论该中医医院相比综合性医院的特点是老年患者占比很高,在治疗尿路感染患者时需更加谨慎。尿液标本临床分离菌以大肠埃希菌、肠球菌属和肺炎克雷伯菌为主;经验性用药治疗应结合患者年龄、性别以及病原菌种类的分布特点进行综合考量,积极送检尿培养及药敏试验,根据药敏试验结果合理选用抗菌药物,并加强耐药性监测。

关键词：尿液标本抗菌药物细菌分布细菌耐药性

人结肠癌5-氟尿嘧啶耐药细胞模型的构建及筛选

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中国老年学杂志 2024年第18期 4559-4564页

作者：乐音子顾云慧王雅慧华晓东丁天雯颜帅南京中医药大学附属苏州市中医医院普外科南京中医药大学附属苏州市中医医院肛肠科

目的通过构建多种5-氟尿嘧啶(Fu)耐药的人结直肠癌(CRC)细胞株，探讨耐药的CRC细胞的生物学特性与耐药机制。方法采用持续接触浓度递增诱导法建立人CRC SW620、HT-29、HCT116和SW480的5-Fu耐药株，镜下摄片观察耐药的CRC细胞形态；CC... 详细信息

目的通过构建多种5-氟尿嘧啶(Fu)耐药的人结直肠癌(CRC)细胞株，探讨耐药的CRC细胞的生物学特性与耐药机制。方法采用持续接触浓度递增诱导法建立人CRC SW620、HT-29、HCT116和SW480的5-Fu耐药株，镜下摄片观察耐药的CRC细胞形态；CCK-8分析细胞活力及耐药指数；流式细胞术比较耐药的CRC细胞周期分布差异；实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测ATP结合盒转运蛋白(ABC)G2、多药耐药关联蛋白(MRP)1、P-糖蛋白(gp)、磷酸酶和紧张素同系物(PTEN)和蛋白激酶B(AKT)mRNA表达量；Western印迹检测测MRP1、ABCG2和P-gp蛋白表达量。结果与各自亲本细胞相比，实验所构建的SW620/5-Fu、HT-29/5-Fu、HCT116/5-Fu和SW480/5-Fu在48、72 h时5-Fu处理下，10、20、40和100 mg/ml浓度组细胞抑制率显著降低(P<0.05),72 h耐药指数分别为49.43、5.52、9.07和13.13。随着5-Fu处理浓度的升高，耐药细胞株G0/G1期细胞数量均明显增加(均P<0.05)。与各自的亲本细胞比较，耐药株SW620/5-Fu、HCT116/5-Fu、SW480/5-Fu的MRP1、ABCG2和P-gp mRNA和蛋白表达水平均有统计学差异(P<0.05)。结论采用持续接触浓度递增法成功构建成功建立人CRC细胞系的5-Fu耐药株，为CRC耐药机制和逆转肿瘤耐药研究奠定了基础。

关键词：结直肠癌 5-氟尿嘧啶耐药 P-糖蛋白

温阳益气方通过上调TMEM16A和c-kit表达改善小鼠慢传输型便秘的机制

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中国老年学杂志 2024年第17期 4164-4170页

作者：吴本升周青何宗琦孙薛亮杜骏王晓鹏南京中医药大学附属苏州市中医医院南京中医药大学附属医院

目的探讨温阳益气方对慢传输型便秘(STC)模型小鼠跨膜蛋白(TMEM)16A及干细胞因子受体(c-kit)表达的影响。方法采用随机数字表法将小鼠分为正常组和造模组。使用洛哌丁胺灌胃法复制小鼠便秘模型，造模成功后，随机分为模型组，温阳益... 详细信息

目的探讨温阳益气方对慢传输型便秘(STC)模型小鼠跨膜蛋白(TMEM)16A及干细胞因子受体(c-kit)表达的影响。方法采用随机数字表法将小鼠分为正常组和造模组。使用洛哌丁胺灌胃法复制小鼠便秘模型，造模成功后，随机分为模型组，温阳益气方低、中、高剂量组，普芦卡必利组。给药组给予相应的药物干预治疗1 w后，观察小鼠一般情况，检测肠道推进率、粪便含水量，评估组织学活动指数(HAI),检测小鼠结肠肌电及TMEM16A、c-kit mRNA和蛋白表达。结果与正常组比较，模型组出现大便干结伴明显减少，粪便含水量显著下降，肠道推进率降低，肠道黏膜腺体萎缩明显，结肠平滑肌电活动频率及振幅显著降低，结肠频率变异系数积及振幅变异系数显著增高，TMEM16A、c-kit mRNA及蛋白表达均显著下降(P<0.01)。与模型组相比，温阳益气方各剂量组均可增加粪便含水量、提高小鼠肠道推进率、降低HAI,提高结肠平滑肌电活动频率及振幅，降低结肠频率变异系数积及振幅变异系数，提高小鼠结肠组织内TMEM16A、c-kit mRNA及蛋白表达，差异显著，且呈剂量依赖性(P<0.05,P<0.01)。结论 TMEM16A与c-kit表达有一定相关性，而温阳益气方改善STC的作用机制可能与提高结肠组织内TMEM16A/c-kit表达，从而调控Cajal间质细胞(ICC)有关。

关键词：温阳益气方慢传输型便秘跨膜蛋白(TMEM)16A 干细胞因子受体(c-kit) Cajal间质细胞(ICC)

试论头针流派的共同性和头针方案统一的可能性

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中国针灸 2024年

作者：胡效萌孙畅李妍莫溪桐颜芃陈思璇范刚启南京中医药大学附属南京中医院脑病科

收集44个头针流派资料，分析各流派理论基础、针刺部位、针刺方法、适应病症等方面的共同性。整合并形成优化的统一头针方案，似已成为必然趋势。从头针流派理论统一、穴区穴线穴点关系、针刺针数等讨论头针方案统一的可能性，并探讨头... 详细信息

收集44个头针流派资料，分析各流派理论基础、针刺部位、针刺方法、适应病症等方面的共同性。整合并形成优化的统一头针方案，似已成为必然趋势。从头针流派理论统一、穴区穴线穴点关系、针刺针数等讨论头针方案统一的可能性，并探讨头针方案统一所面临的主要问题及对策，为头针方案的标准化和统一提供参考。

关键词：头针疗法流派穴穴线穴区针数颅脑解剖学头针共同性统一