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表达SFTSV Gn基因的重组5型腺病毒的构建与鉴定

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黑龙江畜牧兽医 2024年第9期 8-12,17页

作者：张璇王新宇刘宇婷涂影叶梁耀文易昌华殷国平南京中医药大学附属南京医院南京210003

为了构建出表达新布尼亚病毒(SFTSV)Gn基因的重组5型腺病毒,试验根据GenBank上发表的SFTSV Gn基因序列(登录号为ADZ04482.1)设计合成引物,采用特异性PCR方法在Gn基因前添加了KOZAK序列和tPA信号肽序列;然后通过酶切、连接等方法构建重... 详细信息

为了构建出表达新布尼亚病毒(SFTSV)Gn基因的重组5型腺病毒,试验根据GenBank上发表的SFTSV Gn基因序列(登录号为ADZ04482.1)设计合成引物,采用特异性PCR方法在Gn基因前添加了KOZAK序列和tPA信号肽序列;然后通过酶切、连接等方法构建重组穿梭质粒PGA-KOZAK-tPA-Gn,与腺病毒骨架质粒pAd5-ΔE1ΔE3-5E4在BJ5183感受态细胞中进行同源重组,得到重组腺病毒质粒rAd5-KOZAK-tPA-Gn,用PacⅠ酶酶切重组腺病毒质粒,并将线性化的质粒转染至HEK 293细胞中进行病毒包装、扩繁和纯化;采用PCR扩增、Western-blot等技术检测病毒基因的表达情况,并测定重组腺病毒效价。结果表明:通过PCR扩增获得了1 546 bp的KOZAK-tPA-Gn基因,并成功构建了重组穿梭质粒;SFTSV Gn基因在重组腺病毒传代过程中稳定存在;重组腺病毒在HEK 293细胞中表达出分子量约为61 ku的SFTSV Gn蛋白;测得重组腺病毒效价为1×10^(-7.63)/0.1 mL TCID_(50)。说明试验成功构建出表达SFTSV Gn基因的重组5型腺病毒。

关键词：新布尼亚病毒 Gn基因重组5型腺病毒质粒构建 HEK 293细胞

雷火灸对原发性骨质疏松症伴低肌肉质量女性患者平衡功能和肌骨代谢的影响

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中国针灸 2024年

作者：徐道明刘静张迪张鑫黄驰欢柏凌刘兰英王尊王胜李邗峻南京中医药大学附属医院针灸康复科南京中医药大学附属医院核医学科南京市秦淮区中医医院针灸科

目的：观察雷火灸对原发性骨质疏松症（POP）伴低肌肉质量女性患者平衡功能和肌骨代谢水平的影响。方法：将60例POP伴低肌肉质量女性患者随机分为对照组（30例，脱落2例）和观察组（30例，脱落5例）。对照组予钙尔奇D（1.5g碳酸钙＋125I... 详细信息

目的：观察雷火灸对原发性骨质疏松症（POP）伴低肌肉质量女性患者平衡功能和肌骨代谢水平的影响。方法：将60例POP伴低肌肉质量女性患者随机分为对照组（30例，脱落2例）和观察组（30例，脱落5例）。对照组予钙尔奇D（1.5g碳酸钙＋125IU维生素D3）口服，每次1片，每天1次，共治疗12周；观察组在对照组基础上予雷火灸治疗，穴取命门、腰阳关及双侧肝俞、肾俞、大肠俞，每穴艾灸30min，隔日１次，每周３次，共治疗12周。比较两组患者治疗前后平衡功能指标[足底压力中心（COP）95％置信椭圆面积、总位移、平均速度]及腰部疼痛视觉模拟量表（VAS）评分，检测两组患者治疗前后肌肉代谢因子[血清肌肉生长抑制素（MSTN）、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子-1α（PGC-1α）]和骨代谢因子[Ⅰ型胶原N端前肽（PINP）、Ⅰ型胶原C末端交联肽（CTX-Ⅰ）]水平。结果：治疗后，观察组患者COP 95％置信椭圆面积、总位移、平均速度均较治疗前降低（P＜0.01），且观察组低于对照组（P＜0.05）；两组患者腰部VAS评分均较治疗前降低（P＜0.01），且观察组低于对照组（P＜0.01）。治疗后，观察组患者血清MSTN、PINP、CTX-Ⅰ水平较治疗前降低（P＜0.01），血清PGC-1α水平较治疗前升高（P＜0.01），对照组患者血清MSTN水平降低（P＜0.05）；观察组患者血清MSTN、PINP水平低于对照组（P＜0.05），血清PGC-1α水平高于对照组（P＜0.01）。结论：雷火灸可有效缓解POP伴低肌肉质量女性患者腰部疼痛，改善平衡功能，并调节肌骨代谢水平。

关键词：原发性骨质疏松症低肌肉质量雷火灸平衡功能肌骨代谢

基于数据挖掘的沈洪教授治疗湿瘀互结型克罗恩病核心处方分析及临床疗效研究

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南京中医药大学学报 2024年第7期40卷 740-746页

作者：卢一葛畅畅沈洪朱磊南京中医药大学附属医院江苏南京210029 南京中医药大学南通附属医院江苏南通226000

目的运用数据挖掘方法分析沈洪教授治疗克罗恩病(Crohn’s disease,CD)的用药规律并形成核心处方,回顾性分析该核心处方联合乌司奴单克隆抗体(UST)治疗湿瘀互结型CD的临床疗效。方法收集沈洪教授诊治CD患者门诊记录,通过数据挖掘技术,... 详细信息

目的运用数据挖掘方法分析沈洪教授治疗克罗恩病(Crohn’s disease,CD)的用药规律并形成核心处方,回顾性分析该核心处方联合乌司奴单克隆抗体(UST)治疗湿瘀互结型CD的临床疗效。方法收集沈洪教授诊治CD患者门诊记录,通过数据挖掘技术,对药物性味归经、用药频次、复杂网络分析、聚类和关联规则等进行总结,梳理形成核心处方。纳入中医辨证为湿瘀互结证的回结肠型CD患者62例进行回顾性分析,其中观察组30例,对照组32例。对照组给予UST治疗,观察组在对照组治疗基础上加服核心处方,2组疗程均为8周,治疗前后观察2组患者中医证候积分变化情况并分析临床有效率,检测2组患者炎症指标[粪便钙卫蛋白(FC)、血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)]变化情况。结果综合药物频次、关联规则和聚类分析得到核心处方,药物组成包括黄芩、苦参、土茯苓、当归、白芷、白术、陈皮、白芍、防风、薏苡仁、山药、蜂房、徐长卿、木香、神曲和甘草,并由沈洪教授命名为清肠通络方。回顾性临床研究显示:治疗后,2组患者中医证候积分均显著降低(P中医证候总积分优于对照组(P中医临床疗效显愈率优于对照组(P<0.05);2组患者ESR、CRP、FC水平均显著降低(P<0.01),观察组优于对照组(P<0.05)。治疗期间2组患者均未见明显药物相关不良反应。结论沈洪教授辨治CD以清肠燥湿,通络止痛,健脾益气为要,核心处方联合UST治疗能够有效改善患者临床症状和炎症水平,可作为回结肠型辨证属湿瘀互结型CD的有效治疗手段,值得临床推广应用。

关键词：克罗恩病数据挖掘乌司奴单抗清肠通络方湿瘀互结证中西医结合疗效评价

电针对慢性炎性痛小鼠炎性反应和免疫细胞的影响

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针刺研究 2024年第1期49卷 30-36,46页

作者：杨嘉丽施珺菁马乃骐江敏娇彭柔陈栎遥于美玲卢圣锋南京中医药大学针药结合教育部重点实验室南京210023 南京中医药大学附属张家港医院江苏张家港215600 南京中医药大学养老服务与管理学院南京210023

目的:观察电针对完全弗氏佐剂(CFA)诱导的慢性炎性痛小鼠足掌局部炎性介质、巨噬细胞极化及脾脏中相关免疫细胞的影响,探究电针缓解慢性炎性痛小鼠疼痛及肿胀的免疫炎性调控机制。方法:C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、电针组,每组1... 详细信息

目的:观察电针对完全弗氏佐剂(CFA)诱导的慢性炎性痛小鼠足掌局部炎性介质、巨噬细胞极化及脾脏中相关免疫细胞的影响,探究电针缓解慢性炎性痛小鼠疼痛及肿胀的免疫炎性调控机制。方法:C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、电针组,每组10只。连续7 d左后足掌皮下注射20μL CFA溶液建立慢性炎性痛小鼠模型。造模后电针组给予双侧“足三里”电针治疗20 min(2 Hz/100 Hz,1 mA),每天1次,连续18 d。于造模前后、干预后分别测量各组小鼠机械痛阈值、热痛阈值和足掌厚度,Western blot法检测足掌组织肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)表达,免疫组织化学法检测足掌局部巨噬细胞M1型标记物iNOS、M2型标记物CD206的阳性表达,流式细胞术检测脾脏F4/80^(+)CD11b^(+)巨噬细胞、Ly6G^(+)CD11b^(+)中性粒细胞、CD25^(+)Foxp3^(+)调节性T细胞(Treg)占比。结果:与对照组相比,模型组小鼠机械痛阈值、热痛阈值明显降低(P<0.0001),左后足掌厚度,足掌局部IL-1β、TNF-α、NLRP3表达量,足掌局部iNOS阳性表达,脾脏中巨噬细胞、中性粒细胞占比明显升高(P<0.0001,P<0.001)。与模型组相比,电针组小鼠干预后机械痛阈值、热痛阈值,足掌CD206阳性表达,脾脏Treg占比显著升高(P<0.01),足掌厚度,足掌局部IL-1β、TNF-α、NLRP3蛋白表达量,足掌局部iNOS阳性表达,脾脏中巨噬细胞、中性粒细胞占比显著降低(P<0.001,P<0.01,P<0.05)。结论:电针可能通过调控脾脏巨噬细胞、中性粒细胞、Treg占比,并促进局部巨噬细胞向M2型极化,抑制促炎因子释放,从而缓解慢性炎性痛小鼠的疼痛及肿胀。

关键词：电针慢性炎性痛抗炎镇痛免疫细胞巨噬细胞极化

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当代针灸教育范式的构建与转化

北京中医药大学学报 2024年第2期47卷 168-174页

作者：张建斌南京中医药大学第二附属医院南京210017

教育范式是相对稳定的人才培养行动结构及其现实效果。当代针灸教育范式的构建是一个复杂的历史过程,既要遵循针灸学术发展的内在逻辑规律,又受到现代教育范式、医疗卫生行业发展的影响。现代针灸学科的建立,以1957年江苏省中医学校针... 详细信息

教育范式是相对稳定的人才培养行动结构及其现实效果。当代针灸教育范式的构建是一个复杂的历史过程,既要遵循针灸学术发展的内在逻辑规律,又受到现代教育范式、医疗卫生行业发展的影响。现代针灸学科的建立,以1957年江苏省中医学校针灸学科教研组编著的《针灸学》为标志,随后现代中医高等教育针灸专门人才培养模式逐渐形成,并在20世纪80年代固化为以院校专业教育模式为主。解构当代针灸教育范式中存在的问题,主要有内涵与结构、形成与发展、学科与专业、层次类型与功能之间的矛盾。可以从研究行业需求、修订培养目标,界定学科内涵、调整教学内容,借鉴先进理念、改变教学模式等途径,促进当代针灸教育范式的转化。

关键词：针灸针灸教育教育范式师承教育院校教育专业课程解构转化

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基于蛋白质组学研究驻景丸加减方治疗肝肾不足型年龄相关性黄斑变性的机制

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中药药理与临床 2024年第6期40卷 72-78页

作者：仲路张元钟惠沁怡熊彩建杨宁杭丽徐新荣江苏省中医院眼科南京210029 南京市中医院眼科南京210022 南京中医药大学南京210023

目的:基于血浆蛋白质组学探讨驻景丸加减方治疗肝肾不足型年龄相关性黄斑变性(Age-related macular degeneration,AMD)的机制。方法:采用TMT蛋白质组学技术,筛选正常人、肝肾不足AMD患者驻景丸加减方治疗前后血浆差异蛋白;对差异蛋白进... 详细信息

目的:基于血浆蛋白质组学探讨驻景丸加减方治疗肝肾不足型年龄相关性黄斑变性(Age-related macular degeneration,AMD)的机制。方法:采用TMT蛋白质组学技术,筛选正常人、肝肾不足AMD患者驻景丸加减方治疗前后血浆差异蛋白;对差异蛋白进行聚类分析、蛋白相互作用分析以及GO、Pathway功能注释和富集分析;选择蛋白相互作用分析度值最高的5个蛋白作为候选靶蛋白,ELISA法检测AMD患者血浆靶蛋白水平进行体内验证;选择Pathway富集分析主要信号通路,Western blot法检测驻景丸加减方含药血清干预ARPE-19细胞后相关通路蛋白表达水平进行体外验证。结果:筛选出主要候选靶蛋白5个,分别是CDH1、CDC42、PTPRK、CYCS和PTPRG,体内验证结果显示:与治疗前比较,治疗后血浆靶蛋白CDH1、PTPRK、CYCS升高(P<0.01),CDC42、PTPRG下降(P<0.01);Pathway富集分析获得主要信号通路是EMT和Wnt信号通路,体外验证结果显示驻景丸加减方能抑制EMT和Wnt信号通路。结论:驻景丸加减方治疗肝肾不足AMD的机制可能是调控EMT和Wnt信号通路。

关键词：驻景丸加减方年龄相关性黄斑变性肝肾不足证血浆蛋白质组学

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电针对慢性失眠症患者脑电特征信号的影响：随机对照试验

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针刺研究 2024年

作者：江静刘成勇方琴琴秦珊王晓秋徐亮万青云吴文忠江苏省南京中医药大学附属医院针灸康复科江苏省南京中医药大学附属医院治未病科江苏省南京中医药大学附属医院脑电图室

目的：观察电针对慢性失眠症（CI）患者睡眠质量及脑电图（EEG）信号的影响，并探讨其疗效机制。方法：将60例CI患者随机分为健康宣教组（30例，脱落3例）和电针组（30例，脱落3例）。健康宣教组予以睡眠卫生宣教，电针组在健康宣教组... 详细信息

目的：观察电针对慢性失眠症（CI）患者睡眠质量及脑电图（EEG）信号的影响，并探讨其疗效机制。方法：将60例CI患者随机分为健康宣教组（30例，脱落3例）和电针组（30例，脱落3例）。健康宣教组予以睡眠卫生宣教，电针组在健康宣教组的基础上予以电针治疗，穴取百会、印堂及双侧神门、三阴交，连续波，2 Hz，隔日1次，每周3次，针刺4周，共12次。比较两组患者治疗前后匹兹堡睡眠质量指数量表（PSQI）评分、汉密尔顿焦虑量表（HAMA）及患者健康问卷-9（PHQ-9）评分，采集脑电信号，比较治疗前后两组患者的脑电相对功率及熵值。结果：与本组治疗前比较，治疗后电针组PSQI、HAMA及PHQ-9评分，睁眼状态下F8、T3通道的β波、T4通道的α波相对功率及T3通道熵值，以及闭眼状态下F8通道γ波相对功率、熵值均下降（P<0.05），且均低于同时点的健康宣教组（P<0.05）；睁眼状态下T3通道的θ、δ波及T4、O2、Pz通道的θ波相对功率均增加（P<0.05），且均高于同时点的健康宣教组（P<0.05）。结论：针刺可有效治疗CI，调节脑电特征信号是其可能作用机制之一。

关键词：慢性失眠症电针睡眠质量脑电信号随机对照试验

内镜全层切除术治疗十二指肠非壶腹部神经内分泌肿瘤1例(含视频)

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中华消化内镜杂志 2024年第2期41卷 157-159页

作者：刘芳孙玉立陆友祝凌亭生南京中医药大学附属江苏省中医院消化内镜中心南京210029

长径≤10 mm且浸润深度局限在黏膜下层,影像学提示无局部淋巴结转移和远处转移征象的十二指肠非壶腹部神经内分泌肿瘤,首选内镜下切除。报道1例内镜全层切除术治疗十二指肠非壶腹部神经内分泌肿瘤,手术顺利,患者术后并发迟发性穿孔、腹... 详细信息

长径≤10 mm且浸润深度局限在黏膜下层,影像学提示无局部淋巴结转移和远处转移征象的十二指肠非壶腹部神经内分泌肿瘤,首选内镜下切除。报道1例内镜全层切除术治疗十二指肠非壶腹部神经内分泌肿瘤,手术顺利,患者术后并发迟发性穿孔、腹膜后感染、局限性腹膜炎,经内科保守治疗好转出院。

关键词：神经内分泌瘤十二指肠非壶腹部内镜全层切除术迟发性穿孔腹膜后感染腹膜炎

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手术矫正真性正负眼睑综合征1例

中华整形外科杂志 2024年第7期40卷 743-746页

作者：李欣欣刘育凤刘宁胡亮南京中医药大学附属南京医院(南京市第二医院)整形外科南京210003

真性正负眼睑综合征是一种罕见的疾病,主要临床表现为一侧上睑下垂,另一侧上睑非代偿性退缩。以往报道的病例均为获得性,而该文报道了1例非获得性真性正负眼综合征病例,患者为26岁女性,既往体健,无其他基础疾病、手术及外伤史,年幼时双... 详细信息

真性正负眼睑综合征是一种罕见的疾病,主要临床表现为一侧上睑下垂,另一侧上睑非代偿性退缩。以往报道的病例均为获得性,而该文报道了1例非获得性真性正负眼综合征病例,患者为26岁女性,既往体健,无其他基础疾病、手术及外伤史,年幼时双侧上睑即不对称:左侧上睑中度下垂,右侧上睑退缩,一直未予治疗。2022年3月患者就诊于南京中医药大学附属南京医院(南京市第二医院)整形外科,左侧行上睑提肌缩短前徙术,右侧行上睑提肌腱膜松解延长术,术后17个月复诊,双侧角膜暴露率基本对称,整体效果满意。同时,作者通过回顾文献探讨了真性及假性正负眼综合征的症状、体征、鉴别诊断,并对该例患者的发病机制进行了推断,有助于手术方式的选择。

关键词：眼睑正负眼睑综合征上睑提肌上睑下垂上睑退缩