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基于“瘀热”理论探讨桃仁承气汤治疗脓毒症ARDS有效性的临床研究

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辽宁中医杂志 2024年

作者：王娟朱佳许飚王谦南京中医药大学附属南京中医院重症医学科江苏省中医院

目的：探讨桃仁承气汤治疗脓毒症急性呼吸窘迫综合征（ARDS）的临床疗效。方法：纳入脓毒症ARDS（毒瘀营血证）患者46例，随机分为对照组（23例）和中药治疗组（23例），对照组给予常规西医治疗，中药组在常规西医治疗的基础上加用桃仁... 详细信息

目的：探讨桃仁承气汤治疗脓毒症急性呼吸窘迫综合征（ARDS）的临床疗效。方法：纳入脓毒症ARDS（毒瘀营血证）患者46例，随机分为对照组（23例）和中药治疗组（23例），对照组给予常规西医治疗，中药组在常规西医治疗的基础上加用桃仁承气汤，观察7天。观察指标：1）主要指标：治疗有效率。2）次要指标：中医证候评分、急性生理和慢性健康评分（APACHE II评分）、脓毒症相关器官功能衰竭评分（SOFA评分）、氧合指数、C-反应蛋白（CRP）、降钙素原（PCT）、白介素-6（IL-6）、凝血常规、组织因子（TF）、纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）、血液流变学。结果：中药治疗组患者治疗有效率明显高于对照组（P中医证候评分、APACHE II评分和SOFA评分低于对照组（P临床症状、氧合状况、减轻患者全身炎症反应、改善患者血液高凝状态、改善器官功能、减轻病情严重程度。

关键词：桃仁承气汤脓毒症 ARDS 炎症凝血

电针调节外泌体miR-210对脑缺血后HIF-1α/VEGF/Notch信号通路的影响

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中华中医药学刊 2024年

作者：袁之鹏吕鹤群曾春利冯瑶婷彭拥军南京中医药大学附属医院

目的：观察电针对缺血性脑卒中大鼠分泌外泌体miR-210调控缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）/血管内皮生长因子（VEGF）/Notch信号通路的机制。方法：前期实验将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组，每组6只。后期实验将SD大鼠随机分为... 详细信息

目的：观察电针对缺血性脑卒中大鼠分泌外泌体miR-210调控缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）/血管内皮生长因子（VEGF）/Notch信号通路的机制。方法：前期实验将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组，每组6只。后期实验将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、外泌体组（造模后注射电针治疗后提取的血浆外泌体组），miR-210siRNA组（造模后注射电针治疗后提取的血浆外泌体和miR-210siRNA组），HIF-1α抑制剂组（造模后注射电针治疗后提取的血浆外泌体和HIF-1α抑制剂组），每组20只。前期实验建立改良后MCAO大鼠模型，缺血1h后进行再灌注，电针组进行电针治疗，取穴“水沟”、“百会”，电针30min，共治疗3天，提取电针组大鼠血浆外泌体用于后期实验外泌体组、miR-210siRNA组、HIF-1α抑制剂组注射。完成实验后进行取材。神经功能缺损评分评估大鼠实验前后神经功能，BCA法测定外泌体浓度及透射电镜观察外泌体形态大小，Western blot法检测外泌体标志性蛋白CD63，CD9，CD81表达，TTC染色法显示脑梗死灶分布并检查脑梗死体积，HE染色发观察大鼠脑缺血组织病理形态，透射电镜观察大鼠脑缺血侧纹状体区超微形态学变化实时荧光定量PCR法检测前期实验大鼠各组外泌体中miR-210mRNA表达和后期实验大鼠各组纹状体脑组织miR-210mRNA、CD34、HIF-1α、VEGF、Notch mRNA表达。结果：前期实验中电针组大鼠在干预后神经功能缺损评分显著降低（P＜0.001）。在干预后，与模型组相比较，电针组大鼠神经功能缺损评分显著降低（P＜0.005）。与假手术组相比，模型组、电针组外泌体浓度升高（P＜0.001），外泌体标志性蛋白CD63，CD9，CD81存在属实，即前期实验中提取电针血浆中存在外泌体。后期实验中与模型组相比较，外泌体组、miR-210siRNA组、HIF-1α抑制剂组大鼠脑梗死体积百分比降低（P＜0.001），外泌体组神经元肿胀、胞核萎缩、染色质红染情况均得到改善，外泌体组、miR-210siRNA组、HIF-1α抑制剂组miR-210mRNA、CD34、HIF-1α、VEGF、Notch mRNA表达均升高（P＜0.05）；与外泌体组相比较，miR-210siRNA组、HIF-1α抑制剂组大鼠脑梗死体积百分比升高（P＜0.001），miR-210siRNA组和HIF-1α抑制剂组大鼠脑组织病理损伤都有所加重，HIF-1α抑制剂组相比miR-210siRNA组，其神经细胞排列更加紊乱，致密质块数量更多且胞核皱缩情况也更加严重，miR-210siRNA组、HIF-1α抑制剂组miR-210mRNA、CD34、HIF-1α、VEGF、Notch mRNA表达均降低（P＜0.05）结论：电针可以减轻大鼠神经功能损伤同时促进外泌体miR-210的生成并调控HIF-1α/VEGF/Notch信号通路，促进脑缺血后血管新生，继而减轻了脑缺血再灌注损伤。

关键词：缺血性脑卒中外泌体 miR-210 HIF-1α VEGF Notch

联合液相色谱-质谱分析和网络药理学探讨益肾清利方治疗特发性膜性肾病的作用机制

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世界科学技术-中医药现代化 2024年第3期26卷 797-807页

作者：包能于翔顾鸣佳王锦顾鑫俞娅芬孔薇江南大学附属医院无锡214000 南京中医药大学附属南京中医院南京210000 南京中医药大学附属常熟中医院常熟215500

目的联合液相色谱-质谱(Liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)分析和网络药理学探讨益肾清利方治疗特发性膜性肾病(idiopathic membranous nephropathy,IMN)的潜在靶点。方法通过BATMAN-TCM数据库和LC-MS定性分析确定益肾清利方药物活性成分,通过网络药理学的方法预测益肾清利方治疗特发性膜性肾病的生物过程及机制通路,并对筛选出的核心靶点进行分子对接及体外实验验证。结果益肾清利方共筛选出15个活性成分,其作用靶点与特发性膜性肾病疾病靶点取交集后得到72个核心基因。GO富集分析结果显示包含凋亡信号通路的调控、白细胞迁移、肽基酪氨酸磷酸化等的参与;KEGG通路富集分析结果显示益肾清利方治疗特发性膜性肾病涉及TNF、PI3K/AKT、MAPK等细胞凋亡相关信号通路。体外实验表明,益肾清利方可通过调控PI3K/AKT通路减少足细胞凋亡。结论益肾清利方通过多靶点、多通路治疗特发性膜性肾病,对C5b-9诱导的足细胞亚溶破模型有抗凋亡作用,其作用机制可能与TNF、PI3K/AKT、MAPK信号通路有关。

关键词：益肾清利方特发性膜性肾病液相色谱-质谱分析网络药理学分子对接

通脑饮治疗急性脑梗死的临床疗效及作用机制研究:基于网络药理学和分子对接技术

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中国全科医学 2024年第23期27卷 2904-2912页

作者：张林高锦吴明华王广梅南京中医药大学附属南京市中西医结合医院神经内科江苏省南京市210000 南京中医药大学江苏省南京市210000 南京中医药大学附属医院江苏省中医院神经内科江苏省南京市210000 南京中医药大学附属南京市中西医结合医院药剂科江苏省南京市210000

背景脑梗死是由各种原因引起的局部脑组织区域供血障碍,通脑饮为江苏省中医院治疗脑梗死的协定方,但具体作用机制尚不清楚。目的本研究旨在通过网络药理学和临床试验,解释通脑饮治疗脑梗死的机制。方法选取2019年1月—2020年6月江苏省... 详细信息

背景脑梗死是由各种原因引起的局部脑组织区域供血障碍,通脑饮为江苏省中医院治疗脑梗死的协定方,但具体作用机制尚不清楚。目的本研究旨在通过网络药理学和临床试验,解释通脑饮治疗脑梗死的机制。方法选取2019年1月—2020年6月江苏省中医院收治的199例脑梗死患者。根据随机数字表法,将患者分为对照组(97例)和试验组(102例)。两组均接受稳定型脑梗死的标准化治疗,试验组加用通脑饮治疗。治疗前和治疗2周时,两组均采用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评估卒中引起的功能损害程度,采用改良Rankin量表(mRS)评估神经功能的恢复情况。从TCMSP和文献中筛选通脑饮的化学成分,选择生物利用度(OB)≥30%和药物相似性(DL)≥0.18要求的成分寻找该处方的有效成分。利用OMIM和GeneCards数据库分析通脑饮治疗脑梗死的分子靶点。在筛选出共同靶点后,用Cytoscape软件、String数据库分别绘制化合物和靶蛋白的网络图、构建蛋白相互作用(PPI)网络和基因本体论(GO)功能及京都基因和基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析。最后,进行分子对接实验,确定通脑饮治疗脑梗死的主要活性成分。结果治疗后,试验组NIHSS、mRS评分均低于对照组(P<0.05)。最终得到通脑饮活性成分60个,潜在靶点147个,疾病相关靶点5167个,药物与疾病的交集靶点121个。KEGG信号通路富集分析获得前列腺癌症、神经活性配体-受体相互作用、白介素(IL)-17信号通路、催乳素信号通路、PI3K-Akt信号通路、钙信号通路等。分子对接显示,通脑饮治疗脑卒中的主要活性成分β谷甾醇、山柰酚和胡萝卜素与核心蛋白雄激素受体(AR)有较好的结合性。结论通脑饮可能通过激活AR来治疗脑梗死。IL-17信号通路、PI3K-Akt信号通路和催乳素信号通路也是潜在的机制。

关键词：脑梗死通脑饮网络药理学炎症分子对接

固本防哮饮对支气管哮喘缓解期模型小鼠肺组织氧化应激与AMPK/Nrf2/HO-1通路的影响

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中医杂志 2024年第2期65卷 205-212页

作者：代晓寒赵霞严花单祎文南京中医药大学附属医院江苏省南京市210029 南京中医药大学中医儿科学研究所/江苏省儿童呼吸疾病(中医药)重点实验室

目的探讨固本防哮饮防治支气管哮喘缓解期慢性气道炎症的可能作用机制。方法36只雌性Balb/c小鼠随机分为正常组,模型组,固本防哮饮低、中、高剂量组,孟鲁司特钠组,每组6只。除正常组外,其余各组小鼠采用卵白蛋白联合呼吸道合胞病毒诱导... 详细信息

目的探讨固本防哮饮防治支气管哮喘缓解期慢性气道炎症的可能作用机制。方法36只雌性Balb/c小鼠随机分为正常组,模型组,固本防哮饮低、中、高剂量组,孟鲁司特钠组,每组6只。除正常组外,其余各组小鼠采用卵白蛋白联合呼吸道合胞病毒诱导建立支气管哮喘缓解期小鼠模型。造模后固本防哮饮低、中、高剂量组分别给予固本防哮饮12、24、36 g/(kg·d)灌胃,孟鲁司特钠组给予孟鲁司特钠颗粒2.6 mg/(kg·d)灌胃,正常组、模型组小鼠给予双蒸水20 ml/(kg·d)灌胃,均每天1次,共28天。检测小鼠肺组织白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素5(IL-5)水平;HE染色观察肺组织病理并进行炎症评分;DHE染色观察肺组织活性氧(ROS)水平;检测肺组织线粒体呼吸链复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ活性;检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)及三磷酸腺苷(ATP)水平;Western blot法检测小鼠肺组织中磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)及cAMP应答元件结合蛋白(CREB)蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组小鼠肺组织病理结果显示气道周围炎症细胞增多,炎症评分升高;DHE染色显示ROS水平升高,肺组织IL-4、IL-5水平升高;血清SOD、CAT及ATP水平降低,MDA水平升高;肺组织线粒体呼吸链复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ活性降低,p-AMPK、Nrf2、CREB蛋白表达降低(P<0.05)。与模型组比较,固本防哮饮各剂量组及孟鲁司特钠组小鼠肺组织炎症细胞减少,炎症评分降低;肺组织ROS及IL-4、IL-5水平降低;血清CAT及ATP水平升高,MDA水平降低;肺组织线粒体呼吸链复合物Ⅰ、Ⅱ活性及CREB蛋白表达升高(P<0.05)。与固本防哮饮高剂量组比较,固本防哮饮中剂量组MDA水平降低(P<0.05)。固本防哮饮中剂量组肺组织线粒体呼吸链复合物Ⅴ活性较孟鲁司特钠组升高,固本防哮饮中、高剂量组肺组织线粒体呼吸链复合物Ⅳ活性较固本防哮饮低剂量组升高(P<0.05)。结论固本防哮饮能够抑制支气管哮喘缓解期模型小鼠肺组织氧化应激,改善线粒体功能,缓解慢性气道炎症,其作用机制可能与激活肺组织AMPK/Nrf2/HO-1信号通路有关。

关键词：支气管哮喘缓解期固本防哮饮氧化应激线粒体功能腺苷单磷酸活化蛋白激酶核因子E2相关因子2 血红素加氧酶1

基于蛋白质组学研究驻景丸加减方治疗肝肾不足型年龄相关性黄斑变性的机制

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中药药理与临床 2024年第6期40卷 72-78页

作者：仲路张元钟惠沁怡熊彩建杨宁杭丽徐新荣江苏省中医院眼科南京210029 南京市中医院眼科南京210022 南京中医药大学南京210023

目的:基于血浆蛋白质组学探讨驻景丸加减方治疗肝肾不足型年龄相关性黄斑变性(Age-related macular degeneration,AMD)的机制。方法:采用TMT蛋白质组学技术,筛选正常人、肝肾不足AMD患者驻景丸加减方治疗前后血浆差异蛋白;对差异蛋白进... 详细信息

目的:基于血浆蛋白质组学探讨驻景丸加减方治疗肝肾不足型年龄相关性黄斑变性(Age-related macular degeneration,AMD)的机制。方法:采用TMT蛋白质组学技术,筛选正常人、肝肾不足AMD患者驻景丸加减方治疗前后血浆差异蛋白;对差异蛋白进行聚类分析、蛋白相互作用分析以及GO、Pathway功能注释和富集分析;选择蛋白相互作用分析度值最高的5个蛋白作为候选靶蛋白,ELISA法检测AMD患者血浆靶蛋白水平进行体内验证;选择Pathway富集分析主要信号通路,Western blot法检测驻景丸加减方含药血清干预ARPE-19细胞后相关通路蛋白表达水平进行体外验证。结果:筛选出主要候选靶蛋白5个,分别是CDH1、CDC42、PTPRK、CYCS和PTPRG,体内验证结果显示:与治疗前比较,治疗后血浆靶蛋白CDH1、PTPRK、CYCS升高(P<0.01),CDC42、PTPRG下降(P<0.01);Pathway富集分析获得主要信号通路是EMT和Wnt信号通路,体外验证结果显示驻景丸加减方能抑制EMT和Wnt信号通路。结论:驻景丸加减方治疗肝肾不足AMD的机制可能是调控EMT和Wnt信号通路。

关键词：驻景丸加减方年龄相关性黄斑变性肝肾不足证血浆蛋白质组学

二冬消渴方治疗阴虚热盛型2型糖尿病性干眼的临床疗效及对血清IL-17、IL-1β的影响

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南京中医药大学学报 2024年第3期40卷 302-308页

作者：孙心怡姬慧杰石李沈乎醒余江毅董莹莹南京中医药大学附属医院江苏南京210029 南京中医药大学第一临床医学院江苏南京210023

目的观察二冬消渴方治疗阴虚热盛型2型糖尿病性干眼的临床疗效及对血清白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-1β(IL-1β)的影响,探讨二冬消渴方疗效机制。方法纳入江苏省中医院阴虚热盛证2型糖尿病性干眼患者110例,随机分为治疗组及对照组... 详细信息

目的观察二冬消渴方治疗阴虚热盛型2型糖尿病性干眼的临床疗效及对血清白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-1β(IL-1β)的影响,探讨二冬消渴方疗效机制。方法纳入江苏省中医院阴虚热盛证2型糖尿病性干眼患者110例,随机分为治疗组及对照组各55例,治疗组脱落5例,对照组脱落4例。对照组予基本降糖方案联合玻璃酸钠滴眼液外用治疗,治疗组在对照组治疗基础上加服二冬消渴方,2组疗程均为4周。治疗前后观察2组患者中医证候积分变化情况并评估中医临床疗效,检测血糖及胰岛功能相关指标[空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、空腹C肽(FCP)、餐后2 h血糖(PBG)、胰岛素分泌功能指数(HOMA-β)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)]、眼表指标[泪膜破裂时间(BUT)、角膜荧光素钠染色(FL)、SchirmerⅠ试验(SⅠT)]及炎症相关指标(IL-17、IL-1β)的变化情况,治疗期间观察2组患者不良反应发生情况。结果治疗后,2组患者中医证候总积分均明显减少(P中医临床总有效率高于对照组(P0.05)。治疗期间,2组患者均未见明显不良反应。结论二冬消渴方可改善糖尿病性干眼患者SⅠT、BUT、FL及眼部症状,有效治疗糖尿病干眼,减轻眼表炎症,其机制可能与降低血清炎症因子IL-17、IL-1β有关。

关键词：干眼糖尿病二冬消渴方炎症 IL-17 IL-1β

基于转录组测序探讨湿热蕴结证结直肠腺瘤癌变的生物学基础及参白解毒方作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第19期30卷 48-54页

作者：陶玉泉程海波范旻旻余成涛李柳张烨倪明欣沈梦南京中医药大学第一临床医学院江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心南京210023 南京中医药大学附属医院南京210029

目的:探讨结直肠腺瘤湿热蕴结证的生物学基础及临床有效方药参白解毒方可能的抗肿瘤作用机制。方法:临床获取2019年2月至2020年12月江苏省中医院招募的符合纳入标准的结直肠腺瘤湿热蕴结证患者8例、非湿热蕴结证者11例和结直肠癌患者10... 详细信息

目的:探讨结直肠腺瘤湿热蕴结证的生物学基础及临床有效方药参白解毒方可能的抗肿瘤作用机制。方法:临床获取2019年2月至2020年12月江苏省中医院招募的符合纳入标准的结直肠腺瘤湿热蕴结证患者8例、非湿热蕴结证者11例和结直肠癌患者10例,对3组患者组织进行转录组测序,筛选证候间及疾病间差异表达基因,并对证候和疾病间差异基因取交集,进一步筛选在非湿热蕴结证、湿热蕴结证和结直肠癌患者中依次递增或依次递减的差异基因,进行功能富集分析和信号通路富集分析。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测参白解毒方对上述关键差异基因表达的影响。结果:湿热蕴结证和非湿热蕴结证对比,筛选出差异表达基因共384个,其中表达上调基因203个,表达下调基因181个;结直肠癌与湿热蕴结证结直肠腺瘤比较,筛选出差异表达基因共2965个,其中表达上调基因2460个,表达下调基因505个;将2组差异基因取交集,并筛选同向变化的差异基因共58个;基因本体功能主要富集在UDP-半乳糖:β-N-乙酰葡萄糖胺β-1,3-半乳糖基转移酶活性、N-乙酰乳糖胺β-1,3-N-乙酰葡糖胺转移酶活性和聚N-乙酰乳糖胺生物合成过程;京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路主要富集在鞘糖脂生物合成-珠蛋白和等珠蛋白系列、鞘糖脂生物合成-乳酸和新乳酸系列和白细胞介素(IL)-17信号通路。参白解毒方可明显抑制FOSB和B3GALT5等参与富集的关键基因的表达(P<0.05),且具有浓度依赖性。结论:糖脂代谢可能是结直肠腺瘤湿热蕴结证的生物学基础,参白解毒方可能通过下调FOSB和B3GALT5的表达抑制结直肠癌的发生。

关键词：参白解毒方结直肠腺瘤癌变湿热蕴结证转录组测序证侯生物学基础

基于mTOR/HIF-1α/VEGF信号通路探讨麦粒灸“足三里”对高脂饮食大鼠血管损伤和氧化应激的影响

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中国针灸 2024年第4期44卷 433-440页

作者：许骞刘力源张荣贤余芝郝锋张建斌南京中医药大学第二附属医院/江苏省第二中医院针灸科南京210017 南京中医药大学针药结合教育部重点实验室南京中医药大学针灸推拿学院

目的:基于哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路探讨麦粒灸“足三里”改善高脂血症血管损伤及氧化应激的效应机制。方法:将40只健康SPF级雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组... 详细信息

目的:基于哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路探讨麦粒灸“足三里”改善高脂血症血管损伤及氧化应激的效应机制。方法:将40只健康SPF级雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组和抑制剂组,每组10只。模型组、艾灸组、抑制剂组大鼠采用高脂饲料喂养8周建立高脂血症模型。艾灸组与抑制剂组于双侧“足三里”行麦粒灸干预,每次每穴灸3壮,每日1次,共4周。抑制剂组在每次麦粒灸干预前腹腔注射雷帕霉素溶液(2.0 mg/kg)。分别于造模后及干预后采用ELISA法检测大鼠血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量。于干预后采用HE染色、油红O染色观察大鼠腹主动脉形态及周围脂质沉积;分别采用WST-1、TBA和微板法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量;Western blot法检测大鼠腹主动脉mTOR、HIF-1α、VEGF蛋白表达。结果:造模后,与正常组比较,模型组、艾灸组、抑制剂组大鼠血清TC、TG、LDL-C含量升高(P<0.01),HDL-C含量降低(P<0.01)。干预后,与正常组比较,模型组大鼠血清TC、TG、LDL-C、MDA含量升高(P<0.01),HDL-C含量、SOD活性及NO含量降低(P<0.01);腹主动脉组织细胞结构异常、周围脂质沉积较多;腹主动脉mTOR、HIF-1α、VEGF蛋白表达升高(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,艾灸组和抑制剂组大鼠血清TC、TG、LDL-C、MDA含量降低(P<0.01),HDL-C含量、SOD活性及NO含量升高(P<0.01,P<0.05);腹主动脉mTOR、HIF-1α、VEGF蛋白表达升高(P<0.01,P<0.05);艾灸组血管组织结构改善、脂质沉积减少,抑制剂组血管组织结构异常、脂质沉积减少。与抑制剂组比较,艾灸组大鼠血清SOD活性、NO含量升高(P<0.05),MDA含量降低(P<0.05);腹主动脉mTOR、HIF-1α、VEGF蛋白表达升高(P<0.01,P<0.05)。结论:麦粒灸“足三里”可通过改善氧化应激进而修复高脂饮食导致的血管损伤,其机制与调控m TOR/HIF-1α/VEGF信号通路有关。

关键词：高脂血症血管损伤麦粒灸足三里氧化应激 mTOR/HIF-1α/VEGF信号通路