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UHPLC-TOF-MS结合网络药理学及实验验证研究交泰丸治疗抑郁症的作用机制

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中国中药杂志 2024年第7期49卷 1896-1904页

作者：黄茜戴国梁杨欣怡曹阳居文政南京中医药大学附属医院临床药理科江苏南京210029

利用UHPLC-TOF-MS技术分析交泰丸在正常大鼠体内入血成分,通过网络药理学和动物实验研究交泰丸治疗抑郁症的作用机制。利用UHPLC-TOF-MS技术检测大鼠灌胃交泰丸后的入血成分,结合DisGeNET、SwissTargetPrediction等数据库筛选抑郁症与... 详细信息

利用UHPLC-TOF-MS技术分析交泰丸在正常大鼠体内入血成分,通过网络药理学和动物实验研究交泰丸治疗抑郁症的作用机制。利用UHPLC-TOF-MS技术检测大鼠灌胃交泰丸后的入血成分,结合DisGeNET、SwissTargetPrediction等数据库筛选抑郁症与交泰丸入血成分的交集靶点,构建蛋白-蛋白相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络。将关键靶点导入DAVID平台进行基因本体论(Gene Ontology,GO)分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路注释,结合成分、靶点和通路,利用Cytoscape 3.9.1软件构建“成分-靶点-通路”网络,预测交泰丸治疗抑郁症的关键靶点及通路。建立大鼠慢性不可预知性温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)抑郁模型,进行行为学实验,ELISA法检测大鼠血清炎症因子和脑内神经递质水平,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测大鼠海马组织中关键靶点表达。结果鉴定出交泰丸在正常大鼠体内入血成分共17个,10个为生物碱类化合物。入血成分与疾病共有交集靶点124个,根据PPI网络结果筛选出核心靶点52个,其中包括NLRP3和caspase-1等,KEGG富集结果显示主要涉及NOD样受体通路等15条典型通路。动物实验研究结果显示,交泰丸可显著改善CUMS抑郁模型大鼠的抑郁样行为,提高脑内神经递质5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、多巴胺(dopamine,DA)及去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)的水平,降低血清白细胞介素-1β(interlenkin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及白细胞介素-6(interlenkin-6,IL-6)水平,下调海马区NLRP3和caspase-1蛋白表达水平,抑制NLRP3介导的NOD样受体信号通路。综上所述,交泰丸可能通过抑制NLRP3炎症小体,抑制NLRP3介导的NOD样受体通路,发挥抗抑郁的作用。

关键词：交泰丸抑郁症网络药理学 UHPLC-TOF-MS 炎症

基于CTA/CTP评价协定方通脑饮改善急性脑梗死痰瘀阻络证患者脑血流动力学疗效

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中国实验方剂学杂志 2024年第12期30卷 105-111页

作者：季连红刘沛桉厉励李昀泽朱清唐晓刚蒋辉刘永康袁翠平李文磊朱元吴明华南京中医药大学附属医院/江苏省中医院南京210029

目的:基于头颈部计算机断层扫描(CT)血管成像(CTA)联合颅脑CT灌注成像(CTP)技术,探讨急性脑梗死患者服用中药通脑饮后脑血流灌注的变化。方法:选取江苏省中医院自2018年3月至2023年9月治疗的240例脑梗死痰瘀阻络证患者,随机分为对照组(9... 详细信息

目的:基于头颈部计算机断层扫描(CT)血管成像(CTA)联合颅脑CT灌注成像(CTP)技术,探讨急性脑梗死患者服用中药通脑饮后脑血流灌注的变化。方法:选取江苏省中医院自2018年3月至2023年9月治疗的240例脑梗死痰瘀阻络证患者,随机分为对照组(99例),通脑饮组(141例)。基于指南对照组采用抗聚、抗凝、降脂稳斑、脑保护及支持治疗等常规治疗方案;通脑饮组在对照组治疗基础上加用中药通脑饮200 mL,早晚温服。两组患者均于入院24 h内行CTA联合CTP检查,并于6个月时复查CTA和CTP。根据北美症状性颈动脉内膜切除试验(NASCET)法判断颅内动脉血管的狭窄程度,并对治疗前后病变区的相对脑血容量(rCBV)、相对脑血流量(rCBF)、平均通过时间(MTT)和达峰时间(TTP)进行比较,并比较两组患者出院6个月不良结局。结果:与本组治疗前比较,通脑饮组患者血管狭窄不同程度明显减轻,差异具有统计学意义(Z=105.369,P临床疗效。

关键词：急性脑梗死通脑饮计算机断层扫描(CT)血管成像(CTA) CT灌注成像(CTP) 血流动力学

清心滋肾汤治疗阴虚火旺型绝经综合征的临床疗效及调节KNDy的神经内分泌机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第6期30卷 119-125页

作者：周雨欣张镕晴卢苏许美娟陈赟南京中医药大学第一临床医学院南京210023 南京中医药大学附属医院江苏省中医院南京210029

目的:探究清心滋肾汤对绝经综合征阴虚火旺型患者治疗前后的综合疗效、症状评分、神经内分泌指标的影响及其调节KNDy神经元的作用机制。方法:选取60例于南京中医药大学附属江苏省中医院更年期专病门诊就诊且符合绝经综合征阴虚火旺诊断... 详细信息

目的:探究清心滋肾汤对绝经综合征阴虚火旺型患者治疗前后的综合疗效、症状评分、神经内分泌指标的影响及其调节KNDy神经元的作用机制。方法:选取60例于南京中医药大学附属江苏省中医院更年期专病门诊就诊且符合绝经综合征阴虚火旺诊断的患者,随机分为观察组(清心滋肾汤组)和对照组(芬吗通组)各30例,观察期为12周,比较两组治疗前后综合疗效、潮热汗出次数及程度、改良Kupperman评分、下丘脑神经元活性肽Kisspeptin、神经激肽B(NKB)、强啡肽(Dyn)、卵泡刺激素(FSH)和雌二醇(E2)在血清学水平的变化。结果:①临床综合疗效比较。治疗后,与对照组比较,两组患者综合疗效相当,差异无统计学意义。②潮热、汗出次数及程度比较。与本组治疗前比较,治疗后两组患者潮热、汗出次数及程度均明显降低(P临床证候群,其主要机制是作用于下丘脑KNDy神经元通路,下调Kisspeptin、NKB水平,上调Dyn水平,进一步缓解绝经综合征症状及改善患者血清性激素水平。该研究为中医药治疗绝经综合征潮热症状提供新思路。

关键词：绝经综合征清心滋肾汤 KNDy神经元作用机制

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运用“四舒法”论治胃心综合征探析

中华中医药杂志 2024年第3期39卷 1297-1299页

作者：赵宇栋单兆伟南京中医药大学附属医院江苏省中医院南京210046

胃心综合征主要由胃部疾病所引起的一系列消化系统症状与心前区疼痛症状,多无明显诱因可伴有胸闷气短,心脏检查多无异常,应用解痉止酸药物可获缓解。中医胃心同病是指胃部症状与心脏不适感同时出现,如胃痛引起心律失常,或心脏憋闷时出... 详细信息

胃心综合征主要由胃部疾病所引起的一系列消化系统症状与心前区疼痛症状,多无明显诱因可伴有胸闷气短,心脏检查多无异常,应用解痉止酸药物可获缓解。中医胃心同病是指胃部症状与心脏不适感同时出现,如胃痛引起心律失常,或心脏憋闷时出现胃脘不适等,皆可按胃心同病来治。其病虚实夹杂,情志异常或饮食不节引起气血逆行而发;或气机阻滞,气血不足,痰瘀内停,心络闭阻互为诱发甚至加重。单兆伟在继承和发扬孟河医学治疗特色基础上,提出“四舒法”:舒胃降气、舒痹止痛、舒心除烦、舒益宁神,收效甚佳,其在中医辨治胃心综合征的独到见解和丰富的临床经验值得学习和推广。

关键词：名医经验胃心同病四舒法胃心综合征

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五通法论治肠癌经验浅析

中华中医药杂志 2024年第2期39卷 799-802页

作者：赵宇栋李萍单兆伟南京中医药大学附属医院江苏省中医院南京210046

肠癌近年来发病率和患病率呈上升趋势,可因发病部位不同或病程阶段不同而临床表现各异。孟河医派传人单兆伟教授潜心脾胃病诊治研治50余年,结合其多年临证经验及“轻灵平和”的用药特点,根据脏腑及疾病的变化提出在六腑以通为用的基础... 详细信息

肠癌近年来发病率和患病率呈上升趋势,可因发病部位不同或病程阶段不同而临床表现各异。孟河医派传人单兆伟教授潜心脾胃病诊治研治50余年,结合其多年临证经验及“轻灵平和”的用药特点,根据脏腑及疾病的变化提出在六腑以通为用的基础上运用五通法:通瘀止痛温中阳、通降积滞清肠腑、通泄魄门主邪去、通郁理气养脾肺、通窍醒神畅机体治疗,其在辨治肠癌的独到见解和丰富的临床经验值得学习和推广。

关键词：孟河医派名医经验单兆伟肠癌五通法芪竹方

潜阳育阴颗粒调控NR3C2/ROS/ERK信号通路抑制醛固酮诱导足细胞损伤的机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第13期30卷 95-105页

作者：李茵袁方许骏尧宁澄王艺璇钱丽超李海涛李婕南京中医药大学附属医院南京210029 南京中医药大学药学院南京210023 南京中医药大学附属南京中医院南京210022

目的:探讨潜阳育阴颗粒对醛固酮干预的小鼠足细胞的保护机制。方法:将30只C57BL/6J小鼠随机分为5组:正常组、模型组、潜阳育阴颗粒低、高剂量组、螺内酯组,每组6只;除正常组外其余小鼠均植入微型渗透泵持续注入醛固酮(300μg·kg^(-1)·... 详细信息

目的:探讨潜阳育阴颗粒对醛固酮干预的小鼠足细胞的保护机制。方法:将30只C57BL/6J小鼠随机分为5组:正常组、模型组、潜阳育阴颗粒低、高剂量组、螺内酯组,每组6只;除正常组外其余小鼠均植入微型渗透泵持续注入醛固酮(300μg·kg^(-1)·d^(-1)),诱导小鼠肾损伤,造模后给药组分别给予潜阳育阴颗粒低剂量、高剂量(2.6、5.2 g·kg^(-1)·d^(-1)),螺内酯(18 mg·kg^(-1)·d^(-1))连续干预28 d。苏木素-伊红(HE)染色及马松(Masson)染色观察小鼠肾脏病理改变;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠肾脏组织足细胞裂孔膜结构蛋白Nephrin、足细胞丝结蛋白Desmin、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)、剪切的胱天蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)、核受体亚家族3C组成员2(NR3C2)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)的表达水平;原位末端标记法(TUNEL)染色观察小鼠肾脏组织的凋亡水平;检测小鼠肾脏组织超氧化物歧化酶(SOD)水平;体外研究分为5组:正常组、模型组(醛固酮浓度200 nmol·L^(-1))、潜阳育阴颗粒低、中、高质量浓度组(25、50、100 mg·L^(-1))。细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测不同浓度潜阳育阴颗粒对醛固酮诱导的足细胞相对活力的影响;Western blot检测足细胞中Nephrin、Desmin、Bax、Bcl-2、cleaved Caspase-3、NR3C2、p-ERK/ERK表达水平;流式细胞术结合异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙啶(PI)检测足细胞的凋亡水平;2,7-二氯二氢荧光素二乙酸酯荧光探针法(DCFH-DA)观察足细胞的活性氧(ROS)水平。结果:与正常组比较,模型组小鼠肾脏结构病变、出现纤维化情况,凋亡程度升高(P<0.01),SOD水平显著下降(P<0.01);醛固酮浓度在200 nmol·L^(-1)时足细胞活性明显下降(P<0.05),模型组足细胞形态病变、细胞间微丝结构排列错乱,凋亡水平升高(P<0.01),细胞内ROS水平显著升高(P<0.01),小鼠肾脏组织及足细胞中Nephrin、Bcl-2、p-ERK/ERK蛋白表达明显下降(P<0.05,P<0.01),Desmin、Bax、cleaved Caspase-3、NR3C2蛋白表达明显上升(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,潜阳育阴颗粒各剂量改善小鼠肾脏结构损伤和纤维化情况,减轻小鼠肾脏凋亡水平(P<0.05,P<0.01),提高肾脏SOD含量(P<0.05,P<0.001),改善足细胞活性(P<0.05,P<0.01),恢复足细胞足突结构,改善足细胞凋亡(P<0.01),下调足细胞ROS水平(P<0.01),上调小鼠肾脏组织和足细胞中Nephrin、Bcl-2、p-ERK/ERK蛋白表达(P<0.05,P<0.01),下调Desmin、Bax、cleaved Caspase-3、NR3C2蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论:潜阳育阴颗粒通过调节NR3C2/ROS/ERK信号通路改善醛固酮诱导的小鼠足细胞损伤。

关键词：潜阳育阴颗粒足细胞醛固酮肾损害

中药调控糖尿病肾脏疾病肾间质纤维化相关信号通路研究进展

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中国实验方剂学杂志 2024年第5期30卷 213-225页

作者：朱玲玲佘云余江毅严倩华南京中医药大学南京210023 南京中医药大学附属医院南京210029

糖尿病肾脏疾病(DKD)是糖尿病(DM)常见的一种微血管并发症,也是造成终末期肾病(ESRD)的主要病因。肾间质纤维化(RIF)是DKD进展到ESRD的主要病理基础,显著增加了DKD患者的死亡率,给患者和社会带来了沉重的负担,是临床上亟待解决的问题。... 详细信息

糖尿病肾脏疾病(DKD)是糖尿病(DM)常见的一种微血管并发症,也是造成终末期肾病(ESRD)的主要病因。肾间质纤维化(RIF)是DKD进展到ESRD的主要病理基础,显著增加了DKD患者的死亡率,给患者和社会带来了沉重的负担,是临床上亟待解决的问题。RIF的发病机制错综复杂,主要与细胞外基质(ECM)过度沉积、上皮细胞-间充质转化(EMT)、氧化应激、炎症反应、细胞自噬等相关。转化生长因子-β1/Smad(TGF-β1/Smad)、核转录因子-κB(NF-κB)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、分泌型糖蛋白/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、酪氨酸激酶/信号转导和转录激活因子(JAK/STAT)、神经源性位点缺口同源蛋白(Notch)、核因子E_(2)相关因子2(Nrf2)等多条信号通路介导了RIF的发生发展,是DKD治疗的新型靶点。由于其发病机制复杂,目前西医治疗以改善代谢的基础治疗为主,疗效欠佳,难以阻止DKD的病情进展,因此寻找新的治疗方法具有重要的临床意义。近年来,诸多研究证明中药可通过调控相关信号通路,从而减轻氧化应激、抑制炎症反应、调控细胞自噬等,达到治疗糖尿病肾脏疾病肾间质纤维化(DKD-RIF)的目的,具有多途径、多靶点、多环节、疗效显著的优势。但目前尚缺乏相关的总结性记载,基于此,笔者查阅了近年来国内外相关文献,综述了上述相关信号通路在DKD-RIF发生发展中的作用及中药调控相关信号通路治疗DKD-RIF的研究进展,以期为进一步的科学研究及临床实践提供新的思路与参考。

关键词：中药糖尿病肾脏疾病(DKD) 肾间质纤维化(RIF) 信号通路研究进展

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支气管哮喘疗效预测模型构建的研究

北京中医药大学学报 2024年第5期47卷 729-740页

作者：黄麒东李民玺李逸龙邵婉琪赵舒梅龚晓燕赵林度刘兰英南京中医药大学附属医院江苏省中医院南京210029 东南大学南京中医药大学针药结合教育部重点实验室

目的利用咳喘停穴位贴敷治疗支气管哮喘(简称“哮喘”)患者的数据,探讨中医药疗效预测模型构建方法及要点。方法在哮喘慢病管理科研平台上,选择2018—2021年的6—8月于江苏省中医院针灸康复科接受咳喘停穴位贴敷治疗6周的支气管哮喘... 详细信息

目的利用咳喘停穴位贴敷治疗支气管哮喘(简称“哮喘”)患者的数据,探讨中医药疗效预测模型构建方法及要点。方法在哮喘慢病管理科研平台上,选择2018—2021年的6—8月于江苏省中医院针灸康复科接受咳喘停穴位贴敷治疗6周的支气管哮喘患者的数据资料,共303例。统计分析使用Python 3.10软件,对影响因素进行初步筛选,将保留的影响因素采用Logistic回归、支持向量机、K-均值聚类算法、贝叶斯算法、随机森林法和轻量梯度提升机算法(LightGBM)分别构建模型,以哮喘控制测试评分(ACT)、第1秒用力呼气量(FEV1)及呼出气一氧化氮(FeNO)是否改善为结局指标,对各模型进行比较分析。然后,采用较优的模型,通过在训练集上建模、在验证集上验证,得到准确率,并筛选出重要的影响因素。结果 LightGBM模型被采用。通过LightGBM模型建立的咳喘停穴位贴敷治疗哮喘的疗效预测模型准确率均超过70%;最终筛选出烟酒嗜好、过敏病史、贴敷时间、治疗前ACT及治疗前FeNO共5个重要的影响因素。重要影响因素的分级分组与因变量关系的分析结果显示,咳喘停穴位贴敷对无过敏史、无烟酒嗜好和治疗前哮喘控制水平很差(ACT 5~15分)人群的ACT改善更明显(P50×10^(-9))的少数患者FeNO(P>0.05)起改善作用。结论穴位贴敷对哮喘控制水平的改善作用较明显,对气道炎症的改善作用有限;利用哮喘慢病管理科研平台的数据进行预测模型构建具有一定可行性;根据本研究的数据所建立的预测模型经过优化和测试后有可能为临床针对性治疗提供有效的测评工具。

关键词：支气管哮喘咳喘停穴位贴敷疗效预测轻度梯度提升机算法模型

膝痹宁Ⅱ联合脂肪干细胞外泌体调控线粒体自噬改善膝骨关节炎的机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第11期30卷 111-119页

作者：康俊峰揭立士伏厚宇廖太阳施蕾苏子珊于利凯魏义保刘德仁田地茆军王培民南京中医药大学附属医院南京210004 山西中医药大学附属医院太原030024 南京中医药大学第一临床医学院南京210023

目的:观察膝痹宁Ⅱ及脂肪干细胞外泌体(ADSC-Exos)单独及联合应用对软骨退变及线粒体自噬的影响,探讨其改善膝骨关节炎(KOA)的作用机制。方法:将40只SD大鼠分为假手术组、模型组、ADSC-Exos组(4×10^(8)个/周)、膝痹宁组(8 g·kg^(-1)·... 详细信息

目的:观察膝痹宁Ⅱ及脂肪干细胞外泌体(ADSC-Exos)单独及联合应用对软骨退变及线粒体自噬的影响,探讨其改善膝骨关节炎(KOA)的作用机制。方法:将40只SD大鼠分为假手术组、模型组、ADSC-Exos组(4×10^(8)个/周)、膝痹宁组(8 g·kg^(-1)·d^(-1))和ADSC-Exos(4×10^(8)个/周)+膝痹宁(8 g·kg^(-1)·d^(-1))组。采用用前交叉韧带切断术(ACLT)建立膝骨关节炎模型。评估大鼠痛敏状态、微计算机断层扫描技术(Micro-CT)及病理染色检测膝关节及软骨组织退变程度、免疫荧光观察p62和微管相关蛋白1轻链3(LC3)B表达情况、酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-15水平、蛋白免疫印迹法(Western blot)检测基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-13、含血小板结合蛋白基序的解聚素金属5(ADAMTS5)、Ⅱ型胶原(ColⅡ)、基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)、软骨蛋白聚糖抗体(ACAN)、PTEN诱导激酶1(PINK1)、帕金蛋白(Parkin)、p62、LC3A/B蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠冷刺激缩足阈值及机械痛敏阈值逐渐下降,软骨组织出现不同程度的磨损及缺失,软骨组织退变,血清IL-1β、IL-6、IL-15和TNF-α含量明显升高(P<0.01),软骨组织中MMP-3、MMP-13和ADAMTS5蛋白表达升高,ColⅡ、TIMP1和ACAN蛋白表达明显降低(P<0.01);与模型组比较,各治疗组大鼠冷刺激缩足阈值及机械痛敏阈值升高,软骨组织退变程度减轻,血清IL-1β、IL-6、IL-15和TNF-α含量降低(P<0.05,P<0.01),软骨组织中MMP-3、MMP-13和ADAMTS5蛋白表达降低,ColⅡ、TIMP1和ACAN蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01);且以Exos+膝痹宁组改变最为明显。结论:ADSCs-Exos及膝痹宁Ⅱ均可以通过促进PINK1/Parkin信号通路表达,提高软骨细胞线粒体自噬水平,延缓软骨组织退变,且二者联用可以增强疗效。

关键词：脂肪干细胞外泌体膝痹宁Ⅱ 线粒体自噬软骨退变膝骨关节炎