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基于Akt/mTOR信号通路探讨补肾活血方对去卵巢大鼠软骨细胞自噬的影响

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中国骨伤 2024年第2期37卷 196-206页

作者：陶帅姜宏周海燕南京中医药大学泰州附属医院江苏泰州225300 南京中医药大学苏州附属医院江苏苏州215009 南京中医药大学翰林学院江苏泰州225300

目的:研究补肾活血方是否可以通过调控Akt/mTOR信号通路促进去卵巢大鼠软骨细胞自噬反应来保护关节软骨。方法:选取30只SPF级12周龄雌性SD大鼠,体重(247.0±7.0)g,先随机选择6只为空白对照组,剩余大鼠采用卵巢切除术结合右膝关节腔注射... 详细信息

目的:研究补肾活血方是否可以通过调控Akt/mTOR信号通路促进去卵巢大鼠软骨细胞自噬反应来保护关节软骨。方法:选取30只SPF级12周龄雌性SD大鼠,体重(247.0±7.0)g,先随机选择6只为空白对照组,剩余大鼠采用卵巢切除术结合右膝关节腔注射碘乙酸钠(monosodium iodoacetate,MIA)建立绝经后膝骨关节炎模型,随机分为模型组、BSHXR-L组、BSHXR-M组、BSHXR-H组,每组6只。运用肉眼观察评分、番红O-固绿染色、免疫组化等方法明确补肾活血方对大鼠关节软骨损伤的保护作用,Western-blot检测自噬相关蛋白的表达,qPCR检测Akt、mTOR及下游自噬基因的相对表达。结果:造模后BSHXR(L、M、H)各组均可减轻软骨组织形态学损伤,免疫组化示Collagen-Ⅱ、Aggrecan表达逐渐升高,基质金属蛋白酶-13(matrix metallopriteinase-13,MMP-13)表达逐渐降低,其中BSHXR-M组和BSHXR-H组与模型组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。Western-blot结果示BSHXR(L、M、H)各组自噬通路蛋白p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR受到抑制,下游蛋白Beclin-1、LC3Ⅱ表达逐渐升高,而p62逐渐降低,呈剂量效应。qPCR结果示BSHXR(L、M、H)各组均可促进Beclin-1、LC3ⅡmRNA的相对表达,抑制p62、Akt、mTOR mRNA的相对表达,与模型组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:补肾活血方可以通过抑制Akt/mTOR信号通路增强软骨细胞自噬反应,进而发挥保护软骨的作用。

关键词：补肾活血方绝经膝骨关节炎软骨细胞自噬 Akt/mTOR信号通路

炎症性肠病患者食物素养与避免/限制性食物摄入障碍的相关性研究

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中国全科医学 2024年第12期27卷 1445-1451页

作者：尹婷婷徒文静张苏闽李伊婷徐桂华南京中医药大学护理学院江苏省南京市210023 南京中医药大学附属南京中医院肛肠科江苏省南京市210006

背景炎症性肠病(IBD)患者饮食过度限制现象普遍,严重者可导致避免/限制性食物摄入障碍(ARFID)。研究显示食物素养可在一定程度上影响患者的饮食行为,其能否直接影响IBD患者ARFID报道较少。目的了解IBD患者食物素养及ARFID现状,剖析两者... 详细信息

背景炎症性肠病(IBD)患者饮食过度限制现象普遍,严重者可导致避免/限制性食物摄入障碍(ARFID)。研究显示食物素养可在一定程度上影响患者的饮食行为,其能否直接影响IBD患者ARFID报道较少。目的了解IBD患者食物素养及ARFID现状,剖析两者的相关性。方法本研究为横断面研究,采用便利抽样法选取2022年10月—2023年6月在江苏省中医院(南京中医药大学附属医院)、南京市中医院(南京中医药大学附属南京中医院)、南京鼓楼医院、东南大学附属中大医院4家综合性医院的消化科和肛肠科门诊就诊或住院的IBD患者为研究对象。使用一般资料调查表、9条目避免/限制性食物摄入障碍筛查量表(NIAS)、食物素养量表对研究对象进行调查,比较不同特征的IBD患者NIAS和食物素养得分,采用Pearson相关分析探讨两者的关系。结果共发放问卷438份,回收有效问卷429份,有效回收率为97.95%。IBD患者NIAS得分为(20.82±8.65)分,ARFID发生率为18.41%(79/429),食物素养得分为(32.72±9.68)分。不同疾病类型、疾病活动度的患者NIAS得分比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,IBD患者食物素养得分、食物素养量表中的计划、管理维度以及制作态度得分与NIAS得分均呈负相关(P<0.05)。结论IBD患者食物素养水平有待提高,ARFID现象普遍(18.41%),食物素养与ARFID呈负相关。临床医护人员应定期评估患者的食物素养,监测其饮食行为,制订精准健康教育干预路径提升食物素养水平,降低ARFID发生率。

关键词：炎症性肠病饮食限制避免/限制性食物摄入障碍食物素养相关性

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浮针结合附子饼灸治疗寒凝血瘀型原发性痛经:随机对照试验

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中国针灸 2024年第8期44卷 905-909页

作者：施佳欢陈朝明南京中医药大学江苏南京210023 南京中医药大学附属南京中医院江苏南京210000

目的:观察浮针结合附子饼灸治疗寒凝血瘀型原发性痛经的临床疗效。方法:将60例寒凝血瘀型原发性痛经患者随机分为观察组(30例,脱落1例)和对照组(30例,脱落2例)。对照组于神阙、双侧子宫穴予附子饼灸治疗,观察组在对照组基础上行浮针治疗... 详细信息

目的:观察浮针结合附子饼灸治疗寒凝血瘀型原发性痛经的临床疗效。方法:将60例寒凝血瘀型原发性痛经患者随机分为观察组(30例,脱落1例)和对照组(30例,脱落2例)。对照组于神阙、双侧子宫穴予附子饼灸治疗,观察组在对照组基础上行浮针治疗,分别在患者腹直肌、腹斜肌、股内收肌上触诊检查,确定患肌,在患肌外5~10 cm处进针,同时配合再灌注活动。于月经周期痛经第1天开始治疗,每天1次,连续治疗3 d,治疗3个月经周期。分别于治疗前及治疗2、3个疗程后观察两组患者疼痛视觉模拟量表(VAS)评分、COX痛经症状量表(CMSS)评分、中医证候评分,检测两组患者治疗前及治疗3个疗程后血清前列腺素F2α(PGF2α)含量,并评定两组临床疗效。结果:治疗2、3个疗程后,两组患者VAS评分、CMSS评分、中医证候评分均较治疗前降低(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05)。治疗3个疗程后,观察组血清PGF2α含量降低(P<0.05),且低于对照组(P<0.05)。观察组总有效率为96.6%(28/29),高于对照组的64.3%(18/28,P<0.05)。结论:浮针结合附子饼灸可以有效减轻寒凝血瘀型原发性痛经患者的疼痛程度、改善痛经临床症状、降低PGF2α水平。

关键词：原发性痛经寒凝血瘀型浮针附子饼灸神阙穴子宫穴随机对照试验

仙鹤草-黄连通过调控分子伴侣介导自噬抑制结直肠癌的作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第18期30卷 61-71页

作者：何亚萍侯敏艳彭海燕南京中医药大学第一临床医学院南京210029 南京中医药大学附属医院南京210029

目的:观察仙鹤草-黄连药对(XHC-HL)对结直肠肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡及对自噬的影响,并探讨XHC-HL通过调控分子伴侣介导自噬(CMA)抑制结直肠癌的作用机制。方法:制备XHC-HL含药血清,培养人结直肠癌细胞株HT29和LOVO,分为空白组(... 详细信息

目的:观察仙鹤草-黄连药对(XHC-HL)对结直肠肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡及对自噬的影响,并探讨XHC-HL通过调控分子伴侣介导自噬(CMA)抑制结直肠癌的作用机制。方法:制备XHC-HL含药血清,培养人结直肠癌细胞株HT29和LOVO,分为空白组(20%空白血清),XHC-HL组(5%、10%、20%含药血清),5-氟尿嘧啶(5-FU)组。用细胞增殖与活性检测法(CCK-8)检测细胞活力;5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)染色法检测细胞增殖能力;划痕实验及Transwell迁移实验检测细胞迁移能力;Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力;流式细胞术检测细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测XHC-HL对自噬关键分子酵母Atg6同系物-1(Beclin-1)、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)及p62的影响;Western blot、实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测XHC-HL对CMA相关蛋白和mRNA影响。结果:与空白组比较,XHC-HL组和5-FU组均能抑制HT-29和LOVO细胞活力(P<0.01)。与空白组比较,XHC-HL组和5-FU组均能够明显抑制HT-29和LOVO细胞的增殖能力(P<0.05,P<0.01)。与空白组比较,XHC-HL组和5-FU组2种细胞迁移率均显著减弱(P<0.01),迁移到下室的数量均显著减少(P<0.01),细胞侵袭个数均降低(P<0.01),细胞凋亡增多(P<0.01)。Western blot结果显示,与空白组比较,XHC-HL组和5-FU组2种细胞中Beclin-1和LC3Ⅱ的表达明显增加(P<0.05,P<0.01),而p62的水平明显降低(P<0.05,P<0.01);与空白组比较,XHC-HL组和5-FU组2种细胞中溶酶体相关膜蛋白2A(LAMP2A)、热休克同源蛋白70(HSC70)、热休克蛋白90(HSP90)蛋白表达量均有不同程度的降低,甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)表达水平显著增高(P<0.01)。与空白组比较,XHC-HL组和5-FU组2种细胞中LAMP2A、HSC70、HSP90 mRNA水平均下调,GAPDH mRNA表达水平显著上调(P<0.01)。结论:XHC-HL可通过抑制CMA活性,从而抑制结直肠癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力,诱导其自噬,并促进细胞凋亡。

关键词：结直肠癌仙鹤草-黄连药对分子伴侣介导自噬中医药治疗

基于网络药理学和实验验证探究虫草菌丝调控Nrf2/HO-1/NF-κB通路改善小鼠心脏衰老和损伤的分子机制

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中国中药杂志 2024年

作者：刘思逸涂玥何伟明刘文杰温开智李成娟韩超梁馨宇南京中医药大学针灸推拿学院.养生康复学院江苏省中医药健康养生技术工程研究中心江苏省中医院肾内科南京中医药大学第一临床医学院

借助动物实验和网络药理学，探究虫草菌丝（Cordyceps sinensis，CS）在体内改善小鼠心脏衰老和损伤的作用和机制。实验研究采用D-半乳糖（D-galactose，D-gal）连续皮下注射建立心脏衰老小鼠模型，30只小鼠随机分成正常组、模型组、CS... 详细信息

借助动物实验和网络药理学，探究虫草菌丝（Cordyceps sinensis，CS）在体内改善小鼠心脏衰老和损伤的作用和机制。实验研究采用D-半乳糖（D-galactose，D-gal）连续皮下注射建立心脏衰老小鼠模型，30只小鼠随机分成正常组、模型组、CS低剂量（CS-low，CS-L）组、CS高剂量（CS-high，CS-H）组和维生素E（vitamin E，VE）组，在实验期间，每天经灌胃分别给予生理盐水、不同剂量CS混悬液或VE混悬液。在D-gal和不同药物联合干预60 d后，处死全部小鼠，收集血液及心脏组织，进而针对小鼠心脏衰老和损伤相关的各项指标进行检测和观察。实验结果显示，高、低剂量的CS和VE都能不同程度地改善模型小鼠衰老表型、心脏指数、心肌酶谱、细胞周期阻滞蛋白和衰老相关分泌表型（senescence-associated secretory phenotypes，SASP）蛋白表达水平、心脏组织纤维化水平和心脏组织病理学特征。进一步开展网络药理学分析，采用中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP），获取CS活性成分259个，根据GeneCards、OMIM数据库获取心脏衰老相关靶点2 568个，得出CS与心脏衰老交集靶点133个。通过靶点进行基因本体论（Gene Ontology，GO）功能和京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG）进一步分析，发现与心脏衰老相关的通路涉及氧化应激、凋亡、炎症相关信号通路等。故进一步实验验证发现，高、低剂量的CS和VE都能不同程度地改善模型小鼠心脏组织氧化应激和细胞凋亡程度。此外，CS-H和VE能激活模型鼠核因子E2相关因子（nuclear factor e2-related factor 2，Nrf2）/血红素加氧酶-1（heme oxygenase -1，HO-1）通路和抑制核因子κB（nuclear factor-κB，NF-κB）通路关键信号分子蛋白表达水平。总之，该研究基于网络药理学分析和实验证实，CS可能通过调控Nrf2/HO-1/NF-κB通路活性，减轻衰老小鼠心脏氧化应激、细胞凋亡和炎症反应水平，进而减轻心脏衰老和损伤。

关键词：虫草菌丝心脏衰老和损伤网络药理学氧化应激细胞凋亡 Nrf2/HO-1/NF-κB通路

大黄蛰虫丸通过PI3K/AKT/HIF-1α信号通路减轻心肌细胞凋亡而延缓心脏衰老的作用机制

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中国中药杂志 2024年

作者：刘文杰涂玥何伟明刘思逸潘刘云馨温开智李成娟韩超南京中医药大学针灸推拿学院·养生康复学院江苏省中医药健康养生技术工程研究中心江苏省中医院肾内科南京中医药大学第一临床医学院

研究大黄蛰虫丸（DHZCP）延缓心脏衰老（HA）的作用，并探讨其潜在的作用机制。采用网络药理学和分子对接，探究DHZCP延缓HA的靶点和潜在作用机制，并采用DHZCP含药血清对D-半乳糖（D-gal）诱导的衰老心肌细胞关键靶点和通路进行体外实... 详细信息

研究大黄蛰虫丸（DHZCP）延缓心脏衰老（HA）的作用，并探讨其潜在的作用机制。采用网络药理学和分子对接，探究DHZCP延缓HA的靶点和潜在作用机制，并采用DHZCP含药血清对D-半乳糖（D-gal）诱导的衰老心肌细胞关键靶点和通路进行体外实验验证。通过TCSMP数据库筛选DHZCP的活性成分，并预测起作用的相关靶点；通过GeneCards数据库、OMIM数据库和DisGeNET数据库筛选整合HA相关靶点；将DHZCP活性成分靶点与HA靶点取交集后，通过STRING 12.0数据库构建蛋白网络互作，并运用Cytoscape 3.9.1软件基于degree筛选核心靶点；通过Metaspace平台对核心靶点进行基因本体论（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析以预测作用机制；并通过AutoDock Vina平台进行分子对接验证。结果显示，共筛选DHZCP活性成分靶点774个，HA相关靶点4 521个，取交集后共得到交集靶点510个，其中核心靶点有B细胞淋巴瘤2基因（BCL-2）、丝氨酸/苏氨酸激酶1（AKT1）和缺氧诱导因子1亚基A（HIF1A）等。GO和KEGG富集分析提示DHZCP主要通过磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/AKT信号通路、HIF-1α信号通路、长寿信号通路和凋亡等发挥作用。结合GO和KEGG通路富集分析，选择PI3K/AKT/HIF-1α信号通路进行验证。CCK-8检测显示，D-gal能显著抑制H9c2细胞增殖，DHZCP含药血清能增加H9c2细胞活性；SA-β-gal染色检测显示，D-gal组蓝绿色阳性细胞数量显著增加，DHZCP含药血清可以减少蓝绿色阳性细胞数量；TUNEL染色检测显示，DHZCP含药血清可以减少凋亡细胞的数量；经DHZCP含药血清处理后，Klotho、BCL-2、p-PI3K/PI3K、p-AKT1/AKT1和HIF-1α蛋白表达上调，P21、P16、BCL-2相关X蛋白（Bax）和cleaved caspase-3蛋白表达受抑制。结果表明，DHZCP是通过多成分、多靶点和多途径发挥延缓HA的作用，其机制可能是通过激活PI3K/AKT/HIF-1α信号通路减少细胞凋亡而实现的。

关键词：大黄蛰虫丸心脏衰老网络药理学分子对接凋亡 PI3K/AKT/HIF-1α信号通路

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秦皮甲素和秦皮乙素的药理研究进展

中药新药与临床药理 2024年第2期35卷 291-298页

作者：储正达蔡彬南京中医药大学无锡附属医院江苏无锡214071

秦皮为一种传统中药,其毒性低、临床应用范围广,常被运用于治疗目赤肿痛、湿热泻痢、赤白带下、血崩不止等病症。药理研究发现香豆素类化合物是秦皮的主要活性成分,其中秦皮甲素和秦皮乙素最具代表性。众多的研究显示,秦皮甲素和秦皮乙... 详细信息

秦皮为一种传统中药,其毒性低、临床应用范围广,常被运用于治疗目赤肿痛、湿热泻痢、赤白带下、血崩不止等病症。药理研究发现香豆素类化合物是秦皮的主要活性成分,其中秦皮甲素和秦皮乙素最具代表性。众多的研究显示,秦皮甲素和秦皮乙素在抗菌、抗炎、抗肿瘤、抗氧化等方面展现出丰富的药理学活性,其潜在的开发利用价值日益受到关注。该文通过查阅国内外相关文献,对秦皮甲素和秦皮乙素的主要药理作用研究进行归纳,以期为秦皮的研发及临床运用提供参考依据。

关键词：秦皮秦皮甲素秦皮乙素香豆素研究进展

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长链非编码RNA与骨性关节炎

中国组织工程研究 2025年第11期29卷 2357-2367页

作者：郑善斌夏天卫孙家豪陈志远曹逊张超沈计荣南京中医药大学南京中医药大学附属医院南京中医药大学第一临床医学院江苏省南京市210000

背景:骨性关节炎作为中老年常见疾病,发病机制尚不清晰。长链非编码RNA通过多种途径参与骨性关节炎发病过程,如调控翻译、促进或者抑制mRNA表达、吸附miRNA等。目的:综述多种长链非编码RNA在骨性关节炎中的作用机制及研究进展。方法:检... 详细信息

背景:骨性关节炎作为中老年常见疾病,发病机制尚不清晰。长链非编码RNA通过多种途径参与骨性关节炎发病过程,如调控翻译、促进或者抑制mRNA表达、吸附miRNA等。目的:综述多种长链非编码RNA在骨性关节炎中的作用机制及研究进展。方法:检索中国知网、万方数据库、维普数据库、PubMed、Web of Science和Sciencedirect数据库,以“osteoarthritis,degenerative joint disease,degenerative arthritis,OA,LncRNA,long non-coding RNA,long noncoding RNA,long intergenic non-coding RNA”为英文检索词,以“骨性关节炎,骨关节炎,OA,长链非编码RNA,长链非编码核糖核酸,LncRNA”为中文检索词,检索1976年至2024年5月发表的所有相关文献,并对其进行筛选、归纳、分析、总结,最后纳入93篇文献进行综述。结果与结论:①收集了目前与骨性关节炎关系研究较多且较深入的25种长链非编码RNA;②长链非编码RNA可以充当miRNA的分子海绵,作为竞争性内源性RNA竞争性吸附miRNA,进而影响下游靶点;③长链非编码RNA可以调控软骨细胞的凋亡与增殖、软骨细胞外基质降解以及炎症反应等生理病理进程;④长链非编码RNA有望成为骨性关节炎临床诊断及治疗预后的生物标志物和潜在治疗靶点,未来可能会成为骨性关节炎临床治疗的新策略。

关键词：骨性关节炎软骨细胞长链非编码RNA 信号传导基因表达综述

基于脑-肠-菌群轴理论辨证施治阿尔茨海默病

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世界中医药 2024年第2期19卷 244-249,255页

作者：邵阅嘉张敬华南京中医药大学南京210029 南京中医药大学附属南京中医院南京210022

阿尔茨海默病(AD)是一种进行性的、无法治愈的神经退行性疾病,会影响记忆和其他认知功能,影响正常生活,其病理特征与β淀粉样蛋白(Aβ)斑块的沉积、神经纤维缠结的形成、海马和大脑皮质神经元的丢失密切相关。目前,人们逐渐认识到脑-肠... 详细信息

阿尔茨海默病(AD)是一种进行性的、无法治愈的神经退行性疾病,会影响记忆和其他认知功能,影响正常生活,其病理特征与β淀粉样蛋白(Aβ)斑块的沉积、神经纤维缠结的形成、海马和大脑皮质神经元的丢失密切相关。目前,人们逐渐认识到脑-肠-菌群相互联系的改变对神经系统疾病有着潜在影响。中医学传统理论藏象学说,经络学说等都有关于脑肠相互联系的观点。通过中医理论分析脑-肠-菌群轴的辨证思路,探讨目前中医药基于此理论治疗AD的研究进展,为中医药治疗AD未来发展提供新方向。

关键词：阿尔茨海默病中医药脑-肠轴肠道菌群辨证论治