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计算机辅助复方苦参注射液中抑制p21活化激酶1的活性成分预测及分子机制研究

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生物医学工程学杂志 2024年第2期41卷 313-320页

作者：林琳常静杰田耀洲陈姣南京中医药大学附属中西医结合医院南京210028 江苏省中医药研究院南京210028 广州中医药大学深圳医院(福田) 广东深圳518000

靶向p21活化激酶1(PAK1)是胰腺癌治疗的新策略。复方苦参注射液中含有多种抗胰腺癌成分,但具体作用靶点未知。本研究基于分子对接的虚拟筛选发现,复方苦参注射液中的14α-羟基苦参碱与PAK1的别构调节位点具有较高的结合自由能。分子动... 详细信息

靶向p21活化激酶1(PAK1)是胰腺癌治疗的新策略。复方苦参注射液中含有多种抗胰腺癌成分,但具体作用靶点未知。本研究基于分子对接的虚拟筛选发现,复方苦参注射液中的14α-羟基苦参碱与PAK1的别构调节位点具有较高的结合自由能。分子动力学模拟发现,14α-羟基苦参碱使PAK1的α1和α2螺旋向外延伸形成一个较深的别构调节口袋,同时诱导三磷酸腺苷(ATP)结合口袋处的β-折叠向内关闭,导致ATP结合口袋处于“半闭合”状态而失活。当去除14α-羟基苦参碱后,PAK1从失活构象向活性构象转变,因此推测,14α-羟基苦参碱可能是PAK1的可逆别构调节抑制剂。本研究采用现代技术方法对中药活性成分进行研究,为天然产物的开发利用及寻找新的胰腺癌治疗方案奠定基础。

关键词：复方苦参注射液 p21活化激酶1 14α-羟基苦参碱胰腺癌分子对接分子动力学模拟

基于以“味”统方、苦辛平逆法的葶鹿益心饮治疗射血分数保留型心力衰竭合并糖尿病的临床疗效

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中国实验方剂学杂志 2024年第15期30卷 98-106页

作者：张蒙王新东上海中医药大学附属曙光医院上海201203 南京中医药大学附属中西医结合医院南京210028

目的:观察以“味”统方、苦辛平逆法指导下的葶鹿益心饮治疗射血分数保留型心力衰竭(HFp EF)合并糖尿病(证属气阴两虚、水瘀内停)患者的临床疗效及安全性。方法:选取南京中医药大学附属中西医结合医院2022年5月至2023年3月符合纳入标准... 详细信息

目的:观察以“味”统方、苦辛平逆法指导下的葶鹿益心饮治疗射血分数保留型心力衰竭(HFp EF)合并糖尿病(证属气阴两虚、水瘀内停)患者的临床疗效及安全性。方法:选取南京中医药大学附属中西医结合医院2022年5月至2023年3月符合纳入标准的HFp EF合并2型糖尿病气阴两虚,水瘀内停证患者108例,随机分为对照组、观察组(每组各54例)。两组均遵循指南推荐予以慢性心力衰竭及糖尿病西医常规基础治疗,观察组在此基础上予葶鹿益心饮加载治疗,治疗疗程为12周。观察患者治疗前后纽约心脏协会(NYHA)心功能分级、左室舒张末径(LVEDD)、左房内径(LAD)、左心室舒张早期二尖瓣血流最大速度(E)/舒张早期二尖瓣环峰值速度(e')比值(E/e')、N末端B型脑钠肽前体(NT-pro BNP)、糖化血红蛋白(Hb A1c)、运动耐量评价指标6 min步行试验距离、明尼苏达心力衰竭生活质量调查表、中医证候积分及其他安全性指标。结果:最终完成试验观察病例104例,其中对照组52例,观察组52例;对照组治疗后心功能分级改善显效及有效患者35例,总有效率为67.3%;观察组治疗后心功能分级改善显效及有效患者47例,总有效率为90.4%,观察组患者总有效率明显优于对照组(χ^(2)=2.754,P中医证候改善程度明显优于对照组(P中医证候积分。

关键词：射血分数保留型心力衰竭 2型糖尿病气阴两虚、水瘀内停葶鹿益心饮临床疗效

复方五凤草液负压滴灌治疗Ⅲ-Ⅳ期压力性损伤的疗效及其作用机制

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解放军医学杂志 2024年第4期49卷 396-407页

作者：曹丽敏黄子慧王裕玲钱佳燕高贝贝陈思琪翁嘉晨南京中医药大学附属南京市中西医结合医院瘰疬科江苏南京210014

目的观察复方五凤草液负压滴灌治疗(NPWTi)Ⅲ-Ⅳ期压力性损伤(PI)的临床疗效,并初步探索其作用机制。方法(1)临床研究:选取2019年1月-2022年10月于南京市中西医结合医院瘰疬科病区及伤口护理门诊就诊的60例PI患者,随机分为生理盐水NPWT... 详细信息

目的观察复方五凤草液负压滴灌治疗(NPWTi)Ⅲ-Ⅳ期压力性损伤(PI)的临床疗效,并初步探索其作用机制。方法(1)临床研究:选取2019年1月-2022年10月于南京市中西医结合医院瘰疬科病区及伤口护理门诊就诊的60例PI患者,随机分为生理盐水NPWTi组与复方五凤草液NPWTi组,每组30例。两组均在全身基础治疗的前提下进行NPWTi,分别于治疗前及治疗第1、2、3周拆除负压装置后统计PI愈合计分量表(PUSH)评分、创面细菌培养检出率及创面愈合时间,并用ELISA法检测创面组织血管内皮生长因子(VEGF)的含量。(2)动物实验:24只SD大鼠随机分为空白组、模型组、生理盐水NPWTi组与复方五凤草液NPWTi组,每组6只,通过局部组织缺血/再灌注损伤法建立PI大鼠模型,每天治疗结束后将负压装置拆除。分别于治疗前及治疗3、7、10 d观察各组大鼠创面形态,HE染色观察创面组织病理情况,免疫组化检测创面组织CD34阳性细胞百分比,并用ELISA法及RT-qPCR分别检测各组大鼠血液、创面组织中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、核因子-κB p65(NF-κB p65)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、精氨酸酶-1(Arg-1)、转化生长因子-β(TGF-β)的表达水平。结果(1)临床研究:两组均能有效降低PUSH评分和创面细菌培养检出率,缩短创面愈合时间,促进创面组织VEGF表达,复方五凤草液NPWTi组优于生理盐水NPWTi组(P<0.05)。(2)动物实验:与空白组相比,模型组大鼠创面炎症反应及组织损伤明显,CD34阳性细胞百分比,以及血液和创面组织p38 MAPK、NF-κB p65、iNOS、TNF-α水平明显升高,Arg-1、TGF-β水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,生理盐水NPWTi组与复方五凤草液NPWTi组治疗7 d后创面形态评分明显降低,组织病理学形态明显改善,CD34阳性细胞百分比明显升高,血液及创面组织p38 MAPK、NF-κB p65、iNOS、TNF-α水平明显降低,Arg-1、TGF-β水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05),且复方五凤草液NPWTi组优于生理盐水NPWTi组(P<0.05)。结论复方五凤草液NPWTi可有效促进PI创面的愈合,其作用机制可能是通过抑制p38 MAPK/NF-κB信号通路的活化及表达,进而调节M1/M2巨噬细胞极化平衡。

关键词：压力性损伤负压滴灌治疗复方五凤草液巨噬细胞极化 p38 MAPK/NF-κB信号通路

微波消融与射频消融治疗实性或实性为主良性甲状腺结节的一项随机对照临床试验

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中华内科杂志 2024年第1期63卷 74-80页

作者：张雅韩雪任虞洁孙洪平谢绍锋褚晓秋陈国芳刘超徐书杭南京中医药大学附属中西医结合医院内分泌科南京210028 淮安八十二医院中医科淮安223001

目的比较微波消融(MWA)与射频消融(RFA)治疗良性甲状腺结节(BTN)的短期疗效和安全性。方法前瞻性随机对照试验。收集2019年12月至2021年9月南京分中心(南京中医药大学附属中西医结合医院)符合纳入标准并提供书面知情同意书的36例实性或... 详细信息

目的比较微波消融(MWA)与射频消融(RFA)治疗良性甲状腺结节(BTN)的短期疗效和安全性。方法前瞻性随机对照试验。收集2019年12月至2021年9月南京分中心(南京中医药大学附属中西医结合医院)符合纳入标准并提供书面知情同意书的36例实性或实性为主的BTN患者,采用区组随机化设计,并用随机信封法进行分组隐匿,以1∶1的比例分配到MWA组或RFA组(每组18例患者)。采用独立样本t检验及χ2检验比较两组治疗后1、3、6个月的结节体积缩小率(VRR)、有效率(VRR≥50%)、美观评分及不良事件发生率。结果两组患者临床特征均具有可比性。消融术后,两组的结节体积均较术前明显缩小。术后1、3、6个月两组间结节体积差异均无统计学意义(均P>0.05)。术后3个月,RFA组结节VRR高于MWA组(62.08%±12.46%比46.90%±23.16%;t=-2.45,P=0.021);但在术后1、6个月,两组间结节VRR差异无统计学意义(均P>0.05)。末次随访时两组的有效率差异无统计学意义(14/18比18/18;P=0.104)。RFA组的结节美观评分低于MWA组[(1.78±0.43)分比(2.17±0.51)分;t=-2.47,P=0.019]。两组的不良事件发生率差异无统计学意义(均P>0.05)。结论MWA和RFA都是治疗BTN有效并安全的方法,其短期疗效和安全性无明显差别;在外观改善方面,RFA稍优于MWA。

关键词：甲状腺结节随机对照试验微波消融射频消融实性

基于IFNγ-STAT1、IL-4-STAT6信号通路探究复方五凤草液治疗结核性溃疡的作用机制

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中药药理与临床 2024年

作者：黄子慧钱佳燕洪练青郭丹丹马朝群南京中医药大学南京中医药大学附属南京市中西医结合医院南京中医药大学附属医院

目的：观察复方五凤草液治疗结核性溃疡的临床疗效，并基于干扰素-γ（interferon-γ，INF-γ）/信号转导和转录激活因子1(signal transducer and activator of transcription 1，STAT1)、白细胞介素-4(interleukin-4，IL-4)/信号转导和转录激活因子6(signal transducer and activator of transcription 6，STAT6)信号通路和卡介苗（Bacillus Calmette Guerin，BCG）诱导巨噬细胞极化模型探讨其作用机制。方法：（1）临床试验：将135 例结核性溃疡患者分为观察组、中医对照组和西医对照组。在规范抗结核治疗基础上，观察组予复方五凤草液，中医对照组予康复新液，西医对照组予异烟肼液局部外用治疗，观察周期28 d。分别观察三组患者观察安全性指标、创面愈合总有效率、创面组织病理学形态及创面组织、血液中IFN-γ、IL-4、STAT1、STAT6的表达水平，填写中医评分量表(Traditional Chinese Medicine Syndrome Score Scale， TCMSSS）病例报告表(Case Report Form， CRF)。（2）细胞实验：建立BCG诱导THP-1巨噬细胞模型，分别予不同药物处理后分为BCG组、BCG+康复新液组、BCG+异烟肼液组、BCG+复方五凤草液组。镜下观察各组BCG菌落情况，收集细胞上清液并离心，蛋白质印迹（Western Blot）、实时荧光定量(Real Time Quantitative PCR，RT-qPCR）技术检测IFN-γ、IL-4、STAT1、STAT6的表达水平，流式细胞术检测药物对CD11b、CD86、CD163、CD206表达的影响。结果：（1）临床试验：治疗期间，3组患者安全性指标无明显差异；观察组总有效率（95.56%）高于中医对照组（82.22%）、西医对照组（75.56%）；治疗28 d后，与中、西医对照组比较，观察组创面组织病理学形态改善更为明显，观察组患者IFN-γ、STAT1的表达低于中、西医对照组，IL-4、STAT6的表达高于中、西医对照组；与中、西医对照组比较，观察组中医证候积分显著降低。（2）细胞实验：THP-1巨噬细胞在感染BCG后吞噬泡明显增多，自噬小体增多；各组药物干预后胞内结核分枝杆菌的存活率降低。Western blotting、RT-qPCR、流式实验结果显示与对照组相比，BCG组M1型巨噬细胞所占比例较多，另3组M2型巨噬细胞所占比例较多。其中，BCG+复方五凤草液组中M2巨噬细胞占比显著，高于其他3组。BCG+复方五凤草液组IFN-γ、STAT1表达降低，IL-4、STAT6表达增高，CD86表达明显下调，CD206的表达显著上调。结论：复方五凤草液治疗结核性溃疡临床疗效显著，其作用机制可能与抑制病原菌，干预IFN-γ/STAT1、IL-4/STAT6信号通路以介导M1/M2巨噬细胞极化平衡有关。

关键词：复方五凤草液结核性溃疡 IFN-γ/STAT1 IL-4/STAT6 BCG 巨噬细胞极化

以“味”统方、苦辛平逆法葶鹿益心饮辨治射血分数保留型心力衰竭合并糖尿病的临床疗效

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：张蒙王新东南京中医药大学附属中西医结合医院上海中医药大学附属曙光医院

目的：观察以“味”统方、苦辛平逆法指导下的葶鹿益心饮治疗射血分数保留型心力衰竭(HFpEF)合并糖尿病(证属气阴两虚、水瘀内停)患者的临床疗效及安全性。方法：选取南京中医药大学附属中西医结合医院2022年5月至2023年3月符合纳入标准... 详细信息

目的：观察以“味”统方、苦辛平逆法指导下的葶鹿益心饮治疗射血分数保留型心力衰竭(HFpEF)合并糖尿病(证属气阴两虚、水瘀内停)患者的临床疗效及安全性。方法：选取南京中医药大学附属中西医结合医院2022年5月至2023年3月符合纳入标准的HFpEF合并2型糖尿病气阴两虚，水瘀内停证患者108例，随机分为对照组、观察组(每组各54例)。两组均遵循指南推荐予以慢性心力衰竭及糖尿病西医常规基础治疗，观察组在此基础上予葶鹿益心饮加载治疗，治疗疗程为12周。观察患者治疗前后纽约心脏协会(NYHA)心功能分级、左室舒张末径(LVEDD)、左房内径(LAD)、左心室舒张早期二尖瓣血流最大速度/舒张早期二尖瓣环峰值速度(E/e’)、N末端B型脑钠肽前体(NT-proBNP)、糖化血红蛋白(HbA1c)、运动耐量评价指标6 min步行试验距离、明尼苏达心力衰竭生活质量调查表、中医证候积分及其他安全性指标。结果：最终完成试验观察病例104例，其中对照组52例，观察组52例；对照组治疗后心功能分级改善显效及有效患者35例，总有效率为67.3%；观察组治疗后心功能分级改善显效及有效患者47例，总有效率为90.4%，观察组患者总有效率明显优于对照组(χ2=2.754，P中医证候改善程度明显优于对照组(P中医证候积分。

关键词：射血分数保留型心力衰竭 2型糖尿病气阴两虚、水瘀内停葶鹿益心饮临床疗效

膝痹宁Ⅱ方内服治疗寒湿痹阻型膝骨关节炎临床疗效的回顾性队列研究

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中国实验方剂学杂志 2024年第14期30卷 122-129页

作者：曹子丰梅伟张立潘文迪李晓辰茆军李国军王培民南京中医药大学附属医院南京210004 东台梅氏中西医结合医院江苏盐城224200

目的:回顾性分析膝痹宁Ⅱ方在内服药物治疗寒湿痹阻型膝骨关节炎中的临床疗效,探索终点事件的影响因素。方法:采用真实世界回顾性队列设计,收集江苏省中医院骨科门诊内服药物治疗寒湿痹阻型膝骨关节炎病案资料。所有患者接受西医常规治... 详细信息

目的:回顾性分析膝痹宁Ⅱ方在内服药物治疗寒湿痹阻型膝骨关节炎中的临床疗效,探索终点事件的影响因素。方法:采用真实世界回顾性队列设计,收集江苏省中医院骨科门诊内服药物治疗寒湿痹阻型膝骨关节炎病案资料。所有患者接受西医常规治疗,根据是否服用膝痹宁Ⅱ方治疗分为非暴露组(573例)和暴露组(427例),应用IBM SPSS 27.0对筛选出的1000例基线资料进行描述性分析。依据病案基线资料,采用倾向性评分匹配法匹配出334对,两组共668例病案,比较两组治疗前,治疗2、6、12周后视觉模拟评分法(VAS)、西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数(WOMAC)总评分、日本膝骨关节炎功能评估量表(JKOM)评分、中医证候积分的变化,不良反应发生情况。根据治疗前后WOMAC总分改善率判定的临床治愈作为终点事件进行多因素logistic回归分析,分析终点事件的影响因素。结果:治疗12周后,与治疗前比较,两组患者VAS、WOMAC总评分、JKOM评分、中医证候积分均显著降低(P中医证候积分显著降低(P中医症状积分显著降低(P中医症状积分明显降低(P中医症状积分,其中远期疗效差异更明显,不良反应发生率低。

关键词：真实世界研究回顾性队列研究膝痹宁Ⅱ 膝骨关节炎临床疗效

益气养阴解毒方对Lewis肺癌小鼠的免疫调节及抗肿瘤作用

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南京中医药大学学报 2024年

作者：刘莲芳卢子涵胡霞周勤峰秦垠梅宇波南京中医药大学附属张家港医院南京中医药大学中西医结合学院

目的探索益气养阴解毒方对Lewis肺癌小鼠的抗肿瘤作用及其对免疫调节的影响。方法腋下皮下注射Lewis肺癌细胞构建Lewis肺癌小鼠模型,分为模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,并计算肿瘤体积、抑瘤率和生存率。分别使用HE染色,TUNE... 详细信息

目的探索益气养阴解毒方对Lewis肺癌小鼠的抗肿瘤作用及其对免疫调节的影响。方法腋下皮下注射Lewis肺癌细胞构建Lewis肺癌小鼠模型,分为模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,并计算肿瘤体积、抑瘤率和生存率。分别使用HE染色,TUNEL试验和彗星实验检测肿瘤细胞凋亡和DNA损伤。ELISA法检测IFN-γ、IL-2、TNF-α的表达水平。免疫荧光、流式细胞术检测CD8+、CD4+/CD8+、PD-1+、IFN-γ+、CD28+细胞占比。Western Blot法检测PD-1、CD69、CD28的蛋白水平。结果益气养阴解毒方具有抗肿瘤,延长生存期的作用,还可促进肿瘤细胞凋亡并加剧肿瘤细胞DNA损伤。药物处理促进了IFN-γ、IL-2、TNF-α的表达,提高了CD8+、CD4+/CD8+、IFN-γ+、CD28+细胞占比,并抑制了PD-1+细胞占比和蛋白表达,CD69,CD28的蛋白水平显著上升。结论益气养阴解毒方可以抑制肿瘤发展,其对免疫功能的调节是其抗肿瘤作用的潜在作用机制。

关键词：益气养阴解毒方非小细胞肺癌免疫调节

膝痹宁Ⅱ内服治疗寒湿痹阻型膝骨关节炎临床疗效的回顾性队列研究

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：曹子丰梅伟张立潘文迪李晓辰峁军李国军王培民东台梅氏中西医结合医院南京中医药大学附属医院

目的：回顾性分析膝痹宁Ⅱ在内服药物治疗寒湿痹阻型膝骨关节炎中的临床疗效，探索终点事件的影响因素。方法：采用真实世界回顾性队列设计，收集江苏省中医院骨科门诊内服药物治疗寒湿痹阻型膝骨关节炎病案资料。所有患者接受西医常规... 详细信息

目的：回顾性分析膝痹宁Ⅱ在内服药物治疗寒湿痹阻型膝骨关节炎中的临床疗效，探索终点事件的影响因素。方法：采用真实世界回顾性队列设计，收集江苏省中医院骨科门诊内服药物治疗寒湿痹阻型膝骨关节炎病案资料。所有患者接受西医常规治疗，根据是否服用膝痹宁Ⅱ治疗分为非暴露组（573例）和暴露组（427例），应用IBM SPSS 27.0对筛选出的1 000例基线资料进行描述性分析。依据病案基线资料，采用倾向性评分匹配法匹配出334对，两组共668例病案，比较两组治疗前，治疗2、6、12周后视觉模拟评分法（VAS）、西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数（WOMAC）总评分、日本膝骨关节炎功能评估量表（JKOM）评分、中医证候积分的变化，不良反应发生情况。根据治疗前后WOMAC总分改善率判定的临床治愈作为终点事件进行多因素logistic回归分析，分析终点事件的影响因素。结果：治疗12周后，与治疗前比较，两组患者VAS、WOMAC总评分、JKOM评分、中医证候积分均显著降低（P中医证候积分降低（P中医症状积分显著降低（P中医症状积分显著降低（P中医症状积分，其中远期疗效差异更明显，不良反应发生率低。

关键词：真实世界研究回顾性队列研究膝痹宁Ⅱ 膝骨关节炎临床疗效