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基于HPLC-Q-TOF-MS/MS、网络药理学及实验验证探讨西黄丸含药血清抗脑胶质瘤的潜在活性成分及作用机制

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药学学报 2024年第3期59卷 693-703页

作者：潘晶张其海樊昊雯王霞姚卫峰徐宏彬南京中医药大学第二附属医院江苏南京210017 江苏省苏北人民医院江苏扬州225001 南京中医药大学第二附属医院(江苏省第二中医院) 江苏南京210017 南京中医药大学药学院江苏南京210023 宁波大学附属第一医院药学部浙江宁波315010

基于高效液相色谱−四极杆飞行时间串联质谱(HPLC-Q-TOF-MS/MS)技术对西黄丸的入血成分进行定性分析,采用网络药理学对入血成分抗脑胶质瘤的潜在作用机制进行探究,并通过分子对接和实验验证其具体机制。大鼠灌胃给予西黄丸后收集血清,根... 详细信息

基于高效液相色谱−四极杆飞行时间串联质谱(HPLC-Q-TOF-MS/MS)技术对西黄丸的入血成分进行定性分析,采用网络药理学对入血成分抗脑胶质瘤的潜在作用机制进行探究,并通过分子对接和实验验证其具体机制。大鼠灌胃给予西黄丸后收集血清,根据色谱峰保留时间、精确分子质量、特征碎片离子,结合对照品及文献数据,鉴定西黄丸含药血清的化学成分;通过PharmMapper数据库和SwissTarget Prediction数据库获得成分靶点,通过GeneCards、OMIM、PharmGKB、TTD、DrugBank数据库获得脑胶质瘤疾病靶点,利用Cytoscape3.9.1软件构建“成分−靶点”网络关系图;以STRING数据库构建蛋白质互作(PPI)网络关系图并对靶点进行GO分析和KEGG分析;利用分子对接验证核心靶点与相对应的入血成分的结合能力;CCK-8、Western blot验证西黄丸含药血清中代表性成分11-羰基-β-乳香酸(KBA)抗脑胶质瘤的潜在作用机制。结果共鉴定出入血成分40个(原型成分28个,代谢产物12个)。网络药理学结果显示,β-榄香酮酸、3-乙酰基-β-乳香酸、KBA、α-乳香酸等9个成分可能是西黄丸含药血清抗脑胶质瘤的活性成分,其中谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase,GSR)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD)、ATP柠檬酸裂解酶(ATP-citrate lyase,ACLY)、醛酮还原酶1成员B1(AKR1B1)、谷氧还蛋白(glutaredoxin,GLRX)为关键靶点,涉及谷胱甘肽代谢(glutathione metabolism)通路、磷酸戊糖途径(pentose phosphate pathway)等。进一步细胞实验结果表明,KBA显著抑制T98G细胞增殖(IC50为30.96μmol·L^(-1)),KBA(30μmol·L^(-1))显著下调T98G细胞中GSR蛋白表达水平。综上所述,西黄丸含药血清可能通过调控谷胱甘肽代谢通路相关靶点GSR和G6PD抗脑胶质瘤。研究结果可进一步为西黄丸抗脑胶质瘤的作用机制研究提供一个有价值的依据。动物福利和实验过程获得南京中医药大学实验动物伦理委员会标准(批准号:ACU221001)。

关键词：西黄丸含药血清高效液相色谱−四极杆−飞行时间串联质谱入血成分脑胶质瘤

中医药材调节炎症反应治疗胃食管反流病的研究进展

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：姜正艳孙志广郑亮文卫江苏省第二中医院南京中医药大学

胃食管反流病（GERD）是一种慢性消化系统疾病，大约有20%的人群受到此病的困扰。除了反酸、烧心的常见症状以外，GERD可导致食管黏膜的长期炎症，增加患者发展为食管癌的风险。在治疗GERD方面，质子泵抑制剂（PPIs）因其能够有效抑制... 详细信息

胃食管反流病（GERD）是一种慢性消化系统疾病，大约有20%的人群受到此病的困扰。除了反酸、烧心的常见症状以外，GERD可导致食管黏膜的长期炎症，增加患者发展为食管癌的风险。在治疗GERD方面，质子泵抑制剂（PPIs）因其能够有效抑制胃酸分泌而成为一线治疗药物。然而，长期使用PPIs可能会引起一系列并发症，如营养素吸收不良、肠道感染风险增加、骨折风险上升等，这些问题使得患者和医生都在寻求更为安全和有效的治疗选择。近年来的研究发现，GERD的发病机制之一是食管上皮细胞受到刺激后引发的持续性炎症反应。这种炎症反应不仅加剧了食管黏膜的损伤，还可能导致病情的慢性化和复杂化。因此，开发新的抗炎治疗方案成为了当前的研究热点。中草药方因其独特的抗炎和抗氧化特性，为GERD的治疗提供了新的思路。中草药方通常由多种草药组成，这些草药在中医理论指导下配伍使用，旨在调和人体的气血阴阳，达到治疗疾病的目的。在众多治疗GERD的中草药方中，黄连、柴胡、吴茱萸、甘草和白术等药材被广泛使用，它们在抑制炎症反应、调节免疫功能和改善氧化应激方面显示出显著的疗效。尽管中草药方在治疗GERD方面展现出潜力，但是目前关于其确切的循证医学证据仍然不足。因此本文综述这些药方成分的抗炎机制与GERD的治疗前景，以展望中草药在GERD 治疗中的抗炎价值。

关键词：胃食管反流病中药药方中草药炎症反应肠道菌群

基于mTOR/HIF-1α/VEGF信号通路探讨麦粒灸“足三里”对高脂饮食大鼠血管损伤和氧化应激的影响

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中国针灸 2024年第4期44卷 433-440页

作者：许骞刘力源张荣贤余芝郝锋张建斌南京中医药大学第二附属医院/江苏省第二中医院针灸科南京210017 南京中医药大学针药结合教育部重点实验室南京中医药大学针灸推拿学院

目的:基于哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路探讨麦粒灸“足三里”改善高脂血症血管损伤及氧化应激的效应机制。方法:将40只健康SPF级雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组... 详细信息

目的:基于哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路探讨麦粒灸“足三里”改善高脂血症血管损伤及氧化应激的效应机制。方法:将40只健康SPF级雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组和抑制剂组,每组10只。模型组、艾灸组、抑制剂组大鼠采用高脂饲料喂养8周建立高脂血症模型。艾灸组与抑制剂组于双侧“足三里”行麦粒灸干预,每次每穴灸3壮,每日1次,共4周。抑制剂组在每次麦粒灸干预前腹腔注射雷帕霉素溶液(2.0 mg/kg)。分别于造模后及干预后采用ELISA法检测大鼠血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量。于干预后采用HE染色、油红O染色观察大鼠腹主动脉形态及周围脂质沉积;分别采用WST-1、TBA和微板法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量;Western blot法检测大鼠腹主动脉mTOR、HIF-1α、VEGF蛋白表达。结果:造模后,与正常组比较,模型组、艾灸组、抑制剂组大鼠血清TC、TG、LDL-C含量升高(P<0.01),HDL-C含量降低(P<0.01)。干预后,与正常组比较,模型组大鼠血清TC、TG、LDL-C、MDA含量升高(P<0.01),HDL-C含量、SOD活性及NO含量降低(P<0.01);腹主动脉组织细胞结构异常、周围脂质沉积较多;腹主动脉mTOR、HIF-1α、VEGF蛋白表达升高(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,艾灸组和抑制剂组大鼠血清TC、TG、LDL-C、MDA含量降低(P<0.01),HDL-C含量、SOD活性及NO含量升高(P<0.01,P<0.05);腹主动脉mTOR、HIF-1α、VEGF蛋白表达升高(P<0.01,P<0.05);艾灸组血管组织结构改善、脂质沉积减少,抑制剂组血管组织结构异常、脂质沉积减少。与抑制剂组比较,艾灸组大鼠血清SOD活性、NO含量升高(P<0.05),MDA含量降低(P<0.05);腹主动脉mTOR、HIF-1α、VEGF蛋白表达升高(P<0.01,P<0.05)。结论:麦粒灸“足三里”可通过改善氧化应激进而修复高脂饮食导致的血管损伤,其机制与调控m TOR/HIF-1α/VEGF信号通路有关。

关键词：高脂血症血管损伤麦粒灸足三里氧化应激 mTOR/HIF-1α/VEGF信号通路

化瘀腹膜汤治疗子宫内膜异位症的疗效及对Th17/Treg相关炎症因子的调节作用

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中药材 2024年 1011-1015页

作者：李雅静王旺毛洁左婧南京中医药大学第二附属医院/江苏省第二中医院

目的:探讨化瘀腹膜汤治疗子宫内膜异位症(EMs)的疗效及对辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)相关炎症因子的调节作用。方法:选取2020年2月-2023年2月于南京中医药大学第二附属医院就诊的EMs患者106例,随机分为对照组与观察组各53例... 详细信息

目的:探讨化瘀腹膜汤治疗子宫内膜异位症(EMs)的疗效及对辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)相关炎症因子的调节作用。方法:选取2020年2月-2023年2月于南京中医药大学第二附属医院就诊的EMs患者106例,随机分为对照组与观察组各53例,对照组给予西药治疗,观察组给予西药联合化瘀腹膜汤治疗,3个疗程(3个月)后评价疗效,并评价疼痛视觉模拟量表(VAS)、中医证候(TCM)与EMs患者生存质量调查表-30(EHP-30)核心问卷评分。治疗前后检测患者血清基础性激素(E2、LH、FSH、P)水平、CA125、Th17/Treg细胞及炎症因子(IL-6、IL-10、IL-17A、IL-22、TGF-β)水平。结果:与治疗前比较,两组患者疼痛VAS评分、中医证候积分、EHP-30评分及外周血Th17、Th17/Treg和血清E2、LH、FSH、P、CA125、IL-6、IL-17A、IL-22水平显著降低,外周血Treg及血清IL-10、TGF-β水平显著升高(P<0.05),且观察组各指标改善显著优于对照组(P<0.05)。观察组总有效率(96.23%)显著高于对照组(83.02%)(P<0.05)。结论:化瘀腹膜汤治疗EMs能有效缓解临床症状、调节性激素紊乱、提高疗效并改善患者的疾病相关生活质量,其机制可能与调节Th17/Treg平衡及相关炎症因子表达有关。

关键词：子宫内膜异位症化瘀腹膜汤辅助性T细胞17 调节性T细胞炎症

小鼠初级体感皮层后肢区神经元对“足三里”不同温度热刺激的响应规律

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针刺研究 2024年第4期49卷 341-348,375页

作者：朱海滨金传阳周航孙征许骞陆成轩周子秋熊嘉玮张建斌南京中医药大学第二附属医院/江苏省第二中医院南京210017 北京大学分子医学南京转化研究院南京211800

目的:研究不同温度热刺激“足三里”的中枢响应规律,分析中枢响应的温度差异性。方法:健康成年C57BL/6j小鼠6只,采用动物脑立体定位仪定位小鼠大脑左侧初级体感皮层后肢区(S1HL),注射0.3μL腺相关病毒,通过双光子显微镜观察其神经元钙... 详细信息

目的:研究不同温度热刺激“足三里”的中枢响应规律,分析中枢响应的温度差异性。方法:健康成年C57BL/6j小鼠6只,采用动物脑立体定位仪定位小鼠大脑左侧初级体感皮层后肢区(S1HL),注射0.3μL腺相关病毒,通过双光子显微镜观察其神经元钙活动荧光成像,以荧光强度显示神经元中的钙离子浓度。分别以43、45、47℃热刺激小鼠右侧“足三里”,使用双光子显微镜直接记录小鼠大脑左侧S1HL神经元活动,观察并比较S1HL神经元对3种温度热刺激“足三里”的响应差异性,包括热刺激后2 s内的即时最大钙尖峰值和即时钙尖峰频率,3.5 min内的短时最大钙尖峰值、短时钙尖峰频率和钙尖峰持续时间,以及3 min内的分时段最大钙尖峰值和分时段钙尖峰频率。结果:与常温比较,43、45、47℃热刺激“足三里”均可使小鼠左侧S1HL神经元的即时最大钙尖峰值、即时钙尖峰频率、短时最大钙尖峰值、短时钙尖峰频率和钙尖峰持续时间升高(P<0.001,P<0.01)。不同温度热刺激比较,从即时最大钙尖峰值来看,小鼠S1HL神经元对47℃热刺激响应程度最高(P<0.001);从即时钙尖峰频率来看,其对45℃热刺激响应最频繁(P<0.001)。从短时最大钙尖峰值来看,不同温度热刺激对其影响差异无统计学意义;从短时最大钙尖峰频率来看,小鼠S1HL神经元对45℃热刺激响应最频繁(P<0.001)。从钙尖峰持续时间来看,小鼠S1HL神经元对45℃热刺激响应更为明显(P<0.01)。从神经元响应分时段分析来看,在3 min内,43、45、47℃热刺激下,小鼠S1HL神经元最大钙尖峰值都在第2分钟达到最高(P<0.001);钙尖峰频率与热刺激时段无显著联系。结论:S1HL神经元对43、45、47℃热刺激“足三里”均有响应,且响应存在特定温度差异性,小鼠S1HL神经元对45℃热刺激“足三里”响应较为活跃。

关键词：初级体感皮层热刺激足三里神经元响应双光子技术

两样本孟德尔随机化分析循环炎症细胞因子与骨密度的因果关联

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中国组织工程研究 2025年第8期29卷 1556-1564页

作者：陈帅金杰韩化伟田宁晟李志伟南京中医药大学第二附属医院(江苏省第二中医院)骨伤科

背景：最近许多研究表明，炎症细胞因子与骨质疏松症和骨密度之间存在密切关系，然而炎症细胞因子与骨密度之间的因果关系尚未完全揭示。目的：采用两样本孟德尔随机化方法探究炎症细胞因子与骨密度之间潜在的因果关系。方法：从全基因... 详细信息

背景：最近许多研究表明，炎症细胞因子与骨质疏松症和骨密度之间存在密切关系，然而炎症细胞因子与骨密度之间的因果关系尚未完全揭示。目的：采用两样本孟德尔随机化方法探究炎症细胞因子与骨密度之间潜在的因果关系。方法：从全基因组关联研究(GWAS)公开数据库中筛选出与41种循环炎症细胞因子相关的单核苷酸多态性作为工具变量。骨密度的GWAS汇总数据来自骨质疏松症遗传因素联盟(GEFOS)，共涉及32 735名欧洲血统的个体。逆方差加权法作为主要的分析方法来评估因果效应，加权中位数法、MR Egger回归法、简单中位数法和加权中值方法用于补充说明。利用MR-Egger Intercept和MR-PRESSO分析方法进行多效性检验，采用Cochran’s Q检验结果是否存在异质性，同时使用留一法评估结果的稳定性。另外，为了更准确地评估因果关系，采用Bonferroni校正来确定与骨密度有强因果关系的炎症细胞因子。结果与结论：(1)逆方差加权法分析结果显示，白细胞介素8与腰椎骨密度之间呈正向因果关系(β=0.075,95%CI:0.033-0.117,P=0.000 5)，白细胞介素17与腰椎骨密度之间呈负向因果关系(β=-0.083,95%CI:-0.152至-0.014,P=0.018)，肿瘤坏死因子b与股骨颈骨密度之间可能存在负向因果效应(β=-0.053,95%CI:-0.088至-0.018,P=0.003)，碱性成纤维细胞生长因子与股骨颈骨密度之间可能存在正向因果关系(β=0.085,95%CI:0.016-0.154,P=0.015)，巨噬细胞炎症蛋白1a与全身骨密度之间可能存在负向因果效应(β=-0.056,95%CI:-0.105至-0.007,P=0.025)，白细胞介素5、基质衍生因子1a、肝细胞生长因子、白细胞介素4与足跟骨密度之间存在负向因果效应(β=-0.019,95%CI:-0.031至-0.006,P=0.004;β=-0.022,95%CI:-0.038至-0.005,P=0.010;β=-0.021,95%CI:-0.041至-0.002,P=0.030;β=-0.016,95%CI:-0.032至-0.001,P=0.034)，神经生长因子、粒细胞集落刺激因子与足跟骨密度之间存在正向因果关系(β=0.019,95%CI:0.002-0.036,P=0.033;β=0.011,95%CI:0.000-0.022,P=0.050)；经Bonferroni校正后发现，白细胞介素8与腰椎骨密度之间有强正向因果效应(P=0.000 5)。MR Egger法、加权中位数法、简单中位数法和加权中值法分析结果方向一致。(2)敏感性分析结果显示，循环炎症细胞因子对骨密度的因果效应没有异质性、多效性或异常值。

关键词：骨质疏松骨密度炎症细胞因子孟德尔随机化因果关系

MEP定位下头针联合经颅磁刺激对缺血性脑卒中偏瘫患者肢体运动能力的影响

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中国针灸 2024年第3期44卷 251-254页

作者：武士勇张建斌张费朱子龙傅博勋宿迁市中西医结合医院康复科江苏宿迁223800 南京中医药大学第二附属医院/江苏省第二中医院针灸科

目的:观察运动诱发电位(MEP)定位下头针联合经颅磁刺激对缺血性脑卒中偏瘫患者肢体运动能力的影响。方法:将60例缺血性脑卒中偏瘫患者随机分为观察组和对照组,各30例。两组均予内科药物治疗及偏瘫肢体综合训练。在此基础上,观察组患者接... 详细信息

目的:观察运动诱发电位(MEP)定位下头针联合经颅磁刺激对缺血性脑卒中偏瘫患者肢体运动能力的影响。方法:将60例缺血性脑卒中偏瘫患者随机分为观察组和对照组,各30例。两组均予内科药物治疗及偏瘫肢体综合训练。在此基础上,观察组患者接受MEP定位下取穴的头针联合经颅磁刺激治疗;对照组患者接受常规头针(双侧顶颞前斜线)联合经颅磁刺激治疗。两组治疗均每天1次,每周5 d,共4周。分别于治疗前后观察两组患者Fugl-Meyer运动功能评定量表(FMA)、改良Ashworth量表(MAS)及改良Barthel指数(MBI)评分。结果:治疗后,两组患者FMA、MBI评分均较治疗前升高(P中偏瘫患者肢体运动能力,提高其日常生活能力,减轻肢体痉挛。

关键词：缺血性脑卒中偏瘫头针经颅磁刺激运动诱发电位运动功能障碍随机对照试验

异域视角下对针刺麻醉的理解:以《针刺麻醉在中国》为例

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针刺研究 2024年第3期49卷 324-328,F0003页

作者：陶蒋佳许骞吴奂汐周子秋邵雯张建斌南京中医药大学第二附属医院/江苏省第二中医院南京210017 南京中医药大学第二临床医学院南京210023 澄江针灸学派传承工作室南京210023

《Acupuncture Anesthesia in the People’s Republic of China:A Trip Report of the American Acupuncture Anesthesia Study Group(针刺麻醉在中国:美国研究小组的考察报告)》(简称《报告》)是我国针刺麻醉史上第一份域外系统考察和评价报告,《报告》对外公布后,在国内并未引起很大的关注。在针刺麻醉拓展到围术期治疗的当下,通过回顾《报告》,可借鉴异域视角下对针刺麻醉的认知差异。《报告》内容主要涉及对针刺麻醉手术的临床观察,对影响针刺麻醉疗效因素及相关机制的分析,中外对针刺麻醉的认知在研究方法和关注点上的差异。结合针刺麻醉65年的发展及《报告》的结论,本文简要叙述了针刺麻醉的发展、完善过程,历史对《报告》部分结论的验证和现代针刺麻醉仍有待完善的方面,对未来针刺麻醉、针灸医学乃至生命科学的发展都具有一定的启发。

关键词：针刺麻醉异域视角《针刺麻醉在中国》书评

基于保留皮肤的“防火带”式引流术治疗肛周坏死性筋膜炎

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中华胃肠外科杂志 2024年第7期27卷 726-730页

作者：叶晓瑞金黑鹰王俊张春霞杨阳顾家博张心怡刘建磊沈彬艳南京中医药大学第二附属医院肛肠科南京210017

目的观察应用一种新型保留皮肤的“防火带”式引流术治疗肛周坏死性筋膜炎的临床疗效。方法本技术适用于就诊时未发生大面积皮肤发黑坏死、可耐受手术的肛周坏死性筋膜炎患者。手术步骤及要点:(1)根据影像学检查及术中探查,确定炎性组... 详细信息

目的观察应用一种新型保留皮肤的“防火带”式引流术治疗肛周坏死性筋膜炎的临床疗效。方法本技术适用于就诊时未发生大面积皮肤发黑坏死、可耐受手术的肛周坏死性筋膜炎患者。手术步骤及要点:(1)根据影像学检查及术中探查,确定炎性组织和正常组织的分界线;(2)沿脓肿波动感最明显的部位切开脓腔,长径3~4 cm,短径1~2 cm;(3)从主切口向感染外缘潜行分离清理坏死组织,每分离3~5 cm作一梭形切口,长径2~3 cm,短径约1 cm,潜行分离直至正常组织处,各相邻切口间挂软管对口引流;(4)各相邻边缘切口间均作潜行分离并挂软管引流,形成“防火带”;(5)反复冲洗创面;(6)如果感染侵及直肠,酌情行结肠造口。回顾性分析2019年7月至2023年2月南京中医药大学第二附属医院收治的11例肛周坏死性筋膜炎患者的病例资料,所有患者均采用保留皮肤的“防火带”式引流术进行了急诊手术清创治疗。结果11例全部治愈,治愈率100%。1例行多次手术。平均住院时间22(11~46)d,平均创面愈合时间43(28~75)d。除了1例外伤患者,其余患者术后均无明显肛门功能损伤,11例患者均痊愈出院,术后中位随访136(115~413)d,无复发。结论基于保留皮肤的“防火带”式引流术治疗肛周坏死性筋膜炎具有创伤小,恢复快等优势,且不造成明显肛门功能损伤。

关键词：肛周坏死性筋膜炎防火带保留皮肤临床疗效