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科教导刊 2014年第7S期 221-221,227页

作者：刘明南京中医药大学第一临床医学院江苏南京210046

本文以南京中医药大学第一临床医学院学风建设的做法为例,从构建制度化管理监督体系、拓展多元化教育渠道、搭建系统化能力培养平台等三方面探讨了高等中医院校加强学风建设的措施与途径。

关键词：学风建设高等中医院校措施

PANoptosis:解析细胞死亡的新维度在相关疾病中的研究进展

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中国药理学通报 2024年

作者：邵钧连娜琦李育卞勉励南京中医药大学第一临床医学院南京中医药大学医学院

众所周知,程序性细胞死亡在宿主防御中起着重要作用,各种细胞死亡途径有其独特的调控机制。近年来随着对细胞死亡途径的进一步研究,发现各种途径之间存在串扰和协调,进而有研究提出一种新的细胞死亡途径:PANoptosis,认为PANoptosis是由P... 详细信息

众所周知,程序性细胞死亡在宿主防御中起着重要作用,各种细胞死亡途径有其独特的调控机制。近年来随着对细胞死亡途径的进一步研究,发现各种途径之间存在串扰和协调,进而有研究提出一种新的细胞死亡途径:PANoptosis,认为PANoptosis是由PANoptosome复合物调节的炎症性程序性细胞死亡途径,具有细胞焦亡、细胞凋亡和坏死性凋亡的关键特征,并不能被细胞焦亡、细胞凋亡、坏死性凋亡中任意一种死亡方式单独表征。PANoptosis参与了多种疾病,包括感染性疾病和肿瘤相关疾病等,其特定的触发因素可以诱导宿主以PANoptosis的途径死亡。对PANoptosis的深入研究有助于更好地理解细胞死亡的复杂调控网络,并有望为疾病的治疗提供新的靶点。本文对PANoptosis具体发生机制及其在肿瘤、感染性疾病、心血管等多种疾病中发挥的潜在作用进行综述。

关键词： PANoptosis 作用机制免疫炎症肿瘤临床应用

清心滋肾汤治疗阴虚火旺型绝经综合征的临床疗效及调节KNDy的神经内分泌机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第6期30卷 119-125页

作者：周雨欣张镕晴卢苏许美娟陈赟南京中医药大学第一临床医学院南京210023 南京中医药大学附属医院江苏省中医院南京210029

目的:探究清心滋肾汤对绝经综合征阴虚火旺型患者治疗前后的综合疗效、症状评分、神经内分泌指标的影响及其调节KNDy神经元的作用机制。方法:选取60例于南京中医药大学附属江苏省中医院更年期专病门诊就诊且符合绝经综合征阴虚火旺诊断... 详细信息

目的:探究清心滋肾汤对绝经综合征阴虚火旺型患者治疗前后的综合疗效、症状评分、神经内分泌指标的影响及其调节KNDy神经元的作用机制。方法:选取60例于南京中医药大学附属江苏省中医院更年期专病门诊就诊且符合绝经综合征阴虚火旺诊断的患者,随机分为观察组(清心滋肾汤组)和对照组(芬吗通组)各30例,观察期为12周,比较两组治疗前后综合疗效、潮热汗出次数及程度、改良Kupperman评分、下丘脑神经元活性肽Kisspeptin、神经激肽B(NKB)、强啡肽(Dyn)、卵泡刺激素(FSH)和雌二醇(E2)在血清学水平的变化。结果:①临床综合疗效比较。治疗后,与对照组比较,两组患者综合疗效相当,差异无统计学意义。②潮热、汗出次数及程度比较。与本组治疗前比较,治疗后两组患者潮热、汗出次数及程度均明显降低(P临床证候群,其主要机制是作用于下丘脑KNDy神经元通路,下调Kisspeptin、NKB水平,上调Dyn水平,进一步缓解绝经综合征症状及改善患者血清性激素水平。该研究为中医药治疗绝经综合征潮热症状提供新思路。

关键词：绝经综合征清心滋肾汤 KNDy神经元作用机制

固本防哮饮对IL-4联合IL-13诱导的人支气管上皮细胞中CGRP/ILC2及GABA表达的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：欧炜莹袁雪晶纪建建南京中医药大学附属医院南京中医药大学第一临床医学院

目的：观察固本防哮饮含药血清对白细胞介素-4（IL-4）和白细胞介素-13（IL-13）刺激的人支气管上皮细胞（BEAS-2B）中降钙素相关基因肽（CGRP）、γ-氨基丁酸（GABA）及Ⅱ型固有淋巴细胞（ILC2）相关转录因子、细胞因子的表达，探究其... 详细信息

目的：观察固本防哮饮含药血清对白细胞介素-4（IL-4）和白细胞介素-13（IL-13）刺激的人支气管上皮细胞（BEAS-2B）中降钙素相关基因肽（CGRP）、γ-氨基丁酸（GABA）及Ⅱ型固有淋巴细胞（ILC2）相关转录因子、细胞因子的表达，探究其改善支气管上皮细胞Ⅱ型炎症的可能机制。方法：用含有高（20%）、中（15%）、低（10%）剂量的固本防哮饮含药血清及孟鲁斯特钠（10%）含药血清对IL-4和IL-13联合刺激的BEAS-2B细胞进行干预，实时荧光定量PCR（Real-time qPCR）法检测各组细胞中CGRP、GABA、粘蛋白（MUC）5AC、胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP）、白细胞介素-25（IL-25）、白细胞介素-33（IL-33）、白细胞介素-5（IL-5）、GATA结合蛋白3（GATA3）、B细胞淋巴瘤/白血病11B （BCL11b）mRNA表达；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组细胞CGRP、MUC5AC蛋白相对表达；免疫荧光技术检测CGRP和GABA在细胞中的相对表达；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测培养基上清和细胞上清中IL-33、MUC5AC、IL-5的蛋白含量；过碘酸-雪夫反应染色法（PAS染色）检测黏蛋白的分泌情况。结果：IL-4联合IL-13刺激细胞后，与正常组比较，各给药组CGRP、GABA、MUC5AC、TSLP、IL-25、IL-33 mRNA的表达量显著上升（P<0.01）；与模型组比较，固本防哮饮含药血清各剂量组可显著降低造模后细胞中CGRP、GABA、MUC5AC、IL-5、GATA3、BCL11b mRNA表达(P<0.01)，并表现出剂量依赖性。与正常组比较，模型组CGRP、GABA、MUC5AC、IL-33和IL-5蛋白表达增加（P<0.05，P<0.01）；与模型组比较，固本防哮饮含药血清各剂量组细胞中CGRP、GABA、MUC5AC、IL-33和IL-5的蛋白表达显著降低(P<0.05，P<0.01)。与正常组比较，模型组CGRP和GABA的平均荧光强度明显升高（P<0.01）；与模型组比较，固本防哮饮含药血清各剂量组中CGRP和GABA的平均荧光强度显著降低（P<0.01）。与正常组比较，模型组中粘蛋白的分泌增多；与模型组比较，固本防哮饮含药血清各剂量组中黏蛋白的分泌减少。结论：固本防哮饮通过减轻Ⅱ型免疫性气道炎症和减少气道粘液分泌，达到防治支气管哮喘的目的，其可能的机制是固本防哮饮降低了CGRP、GABA、 MUC5AC及ILC2相关转录因子的表达。

关键词：支气管哮喘固本防哮饮降钙素相关基因肽 γ-氨基丁酸 Ⅱ型固有淋巴细胞

基于LAMP2A介导的自噬探讨仙鹤草-黄连含药血清对结直肠癌细胞的作用及机制研究

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中国中药杂志 2024年

作者：何亚萍侯敏艳沈鑫玲李智育徐敏陈轩张淑娟熊晗彭海燕南京中医药大学第一临床医学院南京中医药大学附属医院

探讨仙鹤草-黄连 (Agrimoniae Herba-Coptidis Rhizoma，XHC-HL) 含药血清通过溶酶体相关膜蛋白2A型(lysosome-associated membrane protein type 2A，LAMP2A) 介导的自噬对人结直肠癌HT29和HCT116细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响。通过生物信息学分析LAMP2A在结直肠癌的发生发展中的作用机制；蛋白免疫印迹（Western blot，WB）检测LAMP2A蛋白在结直肠癌细胞株中的表达；利用慢病毒转染技术构建LAMP2A干扰HT29及过表达HCT116结直肠癌细胞模型；实时荧光定量聚合酶链式反应（real-time PCR）实验检测转染效率；结直肠癌HT29和HCT116 细胞分别给予不同浓度的仙鹤草-黄连含药血清，采用cell counting kit-8 (CCK-8) 法检测细胞增殖，筛选含药血清最佳干预浓度及时间。将HT29细胞分为NC（空白对照）组、XHC-HL（仙鹤草-黄连药对处理）组、XHC-HL+shLAMP2A（仙鹤草-黄连药对处理+干扰LAMP2A）组；将HCT116细胞分为NC（空白对照）组、XHC-HL（仙鹤草-黄连药对处理）组、XHC-HL+LAMP2A（仙鹤草-黄连药对处理+过表达LAMP2A）组，CCK-8检测细胞活力；平板克隆实验检测细胞增殖能力；划痕实验及Transwell迁移实验检测细胞迁移能力；Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力；流式细胞术检测细胞凋亡率；Western blot 技术和real-time PCR技术检测仙鹤草-黄连药对对结直肠癌细胞LAMP2A、热休克蛋白70 (the heat shock protein 70， HSC70)、热休克蛋白90 (The heat shock protein 90， HSP90)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase， GAPDH）的蛋白表达水平及 mRNA 的影响。通过差异表达分析发现结直肠癌患者相对于正常对照样本的LAMP2A表达水平有显著升高，生存分析提示伴侣介导的自噬（chaperone-mediated autophagy，CMA）关键分子LAMP2A与结直肠癌的进展密切关联，通过基因集功能富集分析发现LAMP2A高表达患者显著上调了血管生成，免疫抑制等肿瘤进展相关信号通路，且免疫浸润分析发现LAMP2A高表达患者其肿瘤微环境会有更少的CD8T细胞的浸润。仙鹤草-黄连含药血清可以抑制HT29和HCT116细胞活力，最佳干预质量分数及时间为20%、48 h。与NC组相比，仙鹤草-黄连药对均可抑制HT29和HCT116细胞的增殖、迁移和侵袭，诱导细胞凋亡，药对处理干扰LAMP2A组均能进一步抑制肠癌细胞增殖、侵袭及迁移能力并促进凋亡，而过表达LAMP2A可逆转含药血清处理后结直肠癌细胞被抑制的增殖、迁移、侵袭能力，减少细胞凋亡率。仙鹤草-黄连药对含药血清对CMA具有抑制作用，通过LAMP2A介导的自噬，上调LAMP2A、 HSC70、HSP90蛋白和基因的表达，下调底物蛋白GAPDH的表达发挥抗CRC功能。综上，仙鹤草-黄连药对可通过下调CMA关键分子蛋白LAMP2A表达，抑制CMA活性，从而抑制结直肠癌细胞的增殖、迁移、侵袭，并诱导细胞凋亡。

关键词：仙鹤草-黄连药对结直肠癌 LAMP2A 分子伴侣介导自噬

膝痹宁Ⅱ联合脂肪干细胞外泌体调控线粒体自噬改善膝骨关节炎的机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第11期30卷 111-119页

作者：康俊峰揭立士伏厚宇廖太阳施蕾苏子珊于利凯魏义保刘德仁田地茆军王培民南京中医药大学附属医院南京210004 山西中医药大学附属医院太原030024 南京中医药大学第一临床医学院南京210023

目的:观察膝痹宁Ⅱ及脂肪干细胞外泌体(ADSC-Exos)单独及联合应用对软骨退变及线粒体自噬的影响,探讨其改善膝骨关节炎(KOA)的作用机制。方法:将40只SD大鼠分为假手术组、模型组、ADSC-Exos组(4×10^(8)个/周)、膝痹宁组(8 g·kg^(-1)·... 详细信息

目的:观察膝痹宁Ⅱ及脂肪干细胞外泌体(ADSC-Exos)单独及联合应用对软骨退变及线粒体自噬的影响,探讨其改善膝骨关节炎(KOA)的作用机制。方法:将40只SD大鼠分为假手术组、模型组、ADSC-Exos组(4×10^(8)个/周)、膝痹宁组(8 g·kg^(-1)·d^(-1))和ADSC-Exos(4×10^(8)个/周)+膝痹宁(8 g·kg^(-1)·d^(-1))组。采用用前交叉韧带切断术(ACLT)建立膝骨关节炎模型。评估大鼠痛敏状态、微计算机断层扫描技术(Micro-CT)及病理染色检测膝关节及软骨组织退变程度、免疫荧光观察p62和微管相关蛋白1轻链3(LC3)B表达情况、酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-15水平、蛋白免疫印迹法(Western blot)检测基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-13、含血小板结合蛋白基序的解聚素金属5(ADAMTS5)、Ⅱ型胶原(ColⅡ)、基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)、软骨蛋白聚糖抗体(ACAN)、PTEN诱导激酶1(PINK1)、帕金蛋白(Parkin)、p62、LC3A/B蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠冷刺激缩足阈值及机械痛敏阈值逐渐下降,软骨组织出现不同程度的磨损及缺失,软骨组织退变,血清IL-1β、IL-6、IL-15和TNF-α含量明显升高(P<0.01),软骨组织中MMP-3、MMP-13和ADAMTS5蛋白表达升高,ColⅡ、TIMP1和ACAN蛋白表达明显降低(P<0.01);与模型组比较,各治疗组大鼠冷刺激缩足阈值及机械痛敏阈值升高,软骨组织退变程度减轻,血清IL-1β、IL-6、IL-15和TNF-α含量降低(P<0.05,P<0.01),软骨组织中MMP-3、MMP-13和ADAMTS5蛋白表达降低,ColⅡ、TIMP1和ACAN蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01);且以Exos+膝痹宁组改变最为明显。结论:ADSCs-Exos及膝痹宁Ⅱ均可以通过促进PINK1/Parkin信号通路表达,提高软骨细胞线粒体自噬水平,延缓软骨组织退变,且二者联用可以增强疗效。

关键词：脂肪干细胞外泌体膝痹宁Ⅱ 线粒体自噬软骨退变膝骨关节炎

“异类相制”理论及其指导下的有毒中药应用策略

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中医杂志 2024年第5期65卷 449-454页

作者：周学平冯哲俞志超聂炜珏南京中医药大学第一临床医学院江苏省南京市210023 南京中医药大学中医学院

有毒中药功专效捷,其安全应用已成为临床亟待解决的难题,而配伍减毒是有毒中药临床合理应用、发挥其疗效优势的重要方法。“异类相制”理论形成于长期的临床实践认知,是临床经验的提炼升华,其含义为有毒中药通过与不同性味、不同功效中... 详细信息

有毒中药功专效捷,其安全应用已成为临床亟待解决的难题,而配伍减毒是有毒中药临床合理应用、发挥其疗效优势的重要方法。“异类相制”理论形成于长期的临床实践认知,是临床经验的提炼升华,其含义为有毒中药通过与不同性味、不同功效中药的合理配伍,以调其偏性、制其毒性。“异类相制”理论涵盖了性味相制、异效相制、扶正制毒的配伍减毒方式及交互相呈关系,各药物配伍所起的相反相成作用是其内涵的延伸,可从物质基础、效应机制两方面阐释其原理。在此理论指导下,能够优化有毒中药复方配伍方法,为临床有毒中药的配伍组方提供新策略,实现复方的减毒增效。

关键词：异类相制有毒中药配伍减毒组方策略

仙鹤草-黄连通过调控分子伴侣介导自噬抑制结直肠癌的作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第18期30卷 61-71页

作者：何亚萍侯敏艳彭海燕南京中医药大学第一临床医学院南京210029 南京中医药大学附属医院南京210029

目的:观察仙鹤草-黄连药对(XHC-HL)对结直肠肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡及对自噬的影响,并探讨XHC-HL通过调控分子伴侣介导自噬(CMA)抑制结直肠癌的作用机制。方法:制备XHC-HL含药血清,培养人结直肠癌细胞株HT29和LOVO,分为空白组(... 详细信息

目的:观察仙鹤草-黄连药对(XHC-HL)对结直肠肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡及对自噬的影响,并探讨XHC-HL通过调控分子伴侣介导自噬(CMA)抑制结直肠癌的作用机制。方法:制备XHC-HL含药血清,培养人结直肠癌细胞株HT29和LOVO,分为空白组(20%空白血清),XHC-HL组(5%、10%、20%含药血清),5-氟尿嘧啶(5-FU)组。用细胞增殖与活性检测法(CCK-8)检测细胞活力;5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)染色法检测细胞增殖能力;划痕实验及Transwell迁移实验检测细胞迁移能力;Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力;流式细胞术检测细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测XHC-HL对自噬关键分子酵母Atg6同系物-1(Beclin-1)、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)及p62的影响;Western blot、实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测XHC-HL对CMA相关蛋白和mRNA影响。结果:与空白组比较,XHC-HL组和5-FU组均能抑制HT-29和LOVO细胞活力(P<0.01)。与空白组比较,XHC-HL组和5-FU组均能够明显抑制HT-29和LOVO细胞的增殖能力(P<0.05,P<0.01)。与空白组比较,XHC-HL组和5-FU组2种细胞迁移率均显著减弱(P<0.01),迁移到下室的数量均显著减少(P<0.01),细胞侵袭个数均降低(P<0.01),细胞凋亡增多(P<0.01)。Western blot结果显示,与空白组比较,XHC-HL组和5-FU组2种细胞中Beclin-1和LC3Ⅱ的表达明显增加(P<0.05,P<0.01),而p62的水平明显降低(P<0.05,P<0.01);与空白组比较,XHC-HL组和5-FU组2种细胞中溶酶体相关膜蛋白2A(LAMP2A)、热休克同源蛋白70(HSC70)、热休克蛋白90(HSP90)蛋白表达量均有不同程度的降低,甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)表达水平显著增高(P<0.01)。与空白组比较,XHC-HL组和5-FU组2种细胞中LAMP2A、HSC70、HSP90 mRNA水平均下调,GAPDH mRNA表达水平显著上调(P<0.01)。结论:XHC-HL可通过抑制CMA活性,从而抑制结直肠癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力,诱导其自噬,并促进细胞凋亡。

关键词：结直肠癌仙鹤草-黄连药对分子伴侣介导自噬中医药治疗

瘤周围刺电针调控三阴性乳腺癌铜死亡增敏化疗疗效的作用研究

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针刺研究 2024年

作者：陈静徐森磊陶李蕙苹严如根林滢李晨陈世钰张宏如南京中医药大学医学院·整合医学学院南京中医药大学针灸推拿学院.养生康复学院南京中医药大学第一临床医学院南京中医药大学中医学院南京中医药大学淡安书院

目的：观察瘤周围刺联合阿霉素对三阴性乳腺癌（TNBC）荷瘤小鼠铜死亡的影响，探讨瘤周围刺增强阿霉素治疗TNBC敏感性的机制。方法：雌性Balb/c小鼠随机分为模型组、阿霉素组和电针-阿霉素组，每组6只。于小鼠乳腺脂肪垫注射4T1细胞，... 详细信息

目的：观察瘤周围刺联合阿霉素对三阴性乳腺癌（TNBC）荷瘤小鼠铜死亡的影响，探讨瘤周围刺增强阿霉素治疗TNBC敏感性的机制。方法：雌性Balb/c小鼠随机分为模型组、阿霉素组和电针-阿霉素组，每组6只。于小鼠乳腺脂肪垫注射4T1细胞，构建移植瘤模型。阿霉素组和电针-阿霉素组分别按照4 mg/kg的剂量通过腹腔注射阿霉素，每周1次，治疗4周；电针-阿霉素组在每次注射阿霉素后进行瘤周围刺电针治疗，每次3 min，每周1次，治疗4周。治疗期间，每隔2 d测量肿瘤体积，并在治疗结束后收集瘤体组织测定质量。免疫组织化学法检测小鼠瘤体组织中Ki67、增殖细胞核抗原（PCNA）的表达并分析肿瘤细胞增殖能力，Western blot法检测小鼠瘤体组织中铁氧化还原蛋白1（FDX1）、硫辛酰合酶（LIAS）、乌头酸酶2（ACO2）、NADH: 泛醌氧化还原酶核心亚基V1（NDUFV1）的蛋白表达水平，比色法检测肿瘤组织中的Cu2+、丙酮酸、α-酮戊二酸和琥珀酸含量，免疫荧光法检测小鼠瘤体组织中活性氧簇（ROS）相对荧光强度。结果：与同时点模型组相比，阿霉素组和电针-阿霉素组小鼠的肿瘤体积和质量均减小（P<0.05），瘤体中Ki67和PCNA的表达水平降低（P<0.01），而电针-阿霉素组较阿霉素组变化更显著（P<0.01，P<0.05）。与模型组和阿霉素组比较，电针-阿霉素组瘤体中ROS和Cu2+含量升高（P<0.01），丙酮酸和α-酮戊二酸的含量升高（P<0.05），琥珀酸含量降低（P<0.01），FDX1、LIAS、ACO2和NDUFV1蛋白表达降低（P<0.01）。结论：瘤周围刺联合阿霉素可有效控制肿瘤生长速度，可能是通过促进铜死亡的方式增强了阿霉素对TNBC的化疗疗效。

关键词：电针三阴性乳腺癌阿霉素铜死亡

从生物钟对卵巢功能的影响探析调周法的科学内涵

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南京中医药大学学报 2024年第10期40卷 1080-1086页

作者：谈勇陈婕张玉涵夏桂成南京中医药大学第一临床医学院江苏南京210023

国医大师夏桂成教授立足于中医学天人相应的观点,重视女性生殖节律中的阴阳消长转化,创立“调整月经周期节律法”。女性的特殊生理现象表现在周期节律上,生物钟是产生和调节生物体生理行为和规律的内在机制,生物钟基因广泛表达于卵巢颗... 详细信息

国医大师夏桂成教授立足于中医学天人相应的观点,重视女性生殖节律中的阴阳消长转化,创立“调整月经周期节律法”。女性的特殊生理现象表现在周期节律上,生物钟是产生和调节生物体生理行为和规律的内在机制,生物钟基因广泛表达于卵巢颗粒细胞、卵泡膜细胞及黄体细胞中,并且参与类固醇激素的合成、卵泡体细胞的分化、卵泡发育以及排卵等多个生理过程,在女性生殖内分泌中发挥重要作用。昼夜节律紊乱可导致女性月经失调、卵巢功能障碍、内分泌代谢紊乱等生殖疾病。中医时间医学与生物钟节律系统有共通之处,充分认识生物钟对女性卵巢功能的影响,揭示其科学的内涵,明确其调控方法和机制,对抵御生殖障碍性疾病,优化生育具有积极的促进作用。

关键词：调周法生物钟卵巢功能女性生殖