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UHPLC-TOF-MS结合网络药理学及实验验证研究交泰丸治疗抑郁症的作用机制

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中国中药杂志 2024年第7期49卷 1896-1904页

作者：黄茜戴国梁杨欣怡曹阳居文政南京中医药大学附属医院临床药理科江苏南京210029

利用UHPLC-TOF-MS技术分析交泰丸在正常大鼠体内入血成分,通过网络药理学和动物实验研究交泰丸治疗抑郁症的作用机制。利用UHPLC-TOF-MS技术检测大鼠灌胃交泰丸后的入血成分,结合DisGeNET、SwissTargetPrediction等数据库筛选抑郁症与... 详细信息

利用UHPLC-TOF-MS技术分析交泰丸在正常大鼠体内入血成分,通过网络药理学和动物实验研究交泰丸治疗抑郁症的作用机制。利用UHPLC-TOF-MS技术检测大鼠灌胃交泰丸后的入血成分,结合DisGeNET、SwissTargetPrediction等数据库筛选抑郁症与交泰丸入血成分的交集靶点,构建蛋白-蛋白相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络。将关键靶点导入DAVID平台进行基因本体论(Gene Ontology,GO)分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路注释,结合成分、靶点和通路,利用Cytoscape 3.9.1软件构建“成分-靶点-通路”网络,预测交泰丸治疗抑郁症的关键靶点及通路。建立大鼠慢性不可预知性温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)抑郁模型,进行行为学实验,ELISA法检测大鼠血清炎症因子和脑内神经递质水平,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测大鼠海马组织中关键靶点表达。结果鉴定出交泰丸在正常大鼠体内入血成分共17个,10个为生物碱类化合物。入血成分与疾病共有交集靶点124个,根据PPI网络结果筛选出核心靶点52个,其中包括NLRP3和caspase-1等,KEGG富集结果显示主要涉及NOD样受体通路等15条典型通路。动物实验研究结果显示,交泰丸可显著改善CUMS抑郁模型大鼠的抑郁样行为,提高脑内神经递质5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、多巴胺(dopamine,DA)及去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)的水平,降低血清白细胞介素-1β(interlenkin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及白细胞介素-6(interlenkin-6,IL-6)水平,下调海马区NLRP3和caspase-1蛋白表达水平,抑制NLRP3介导的NOD样受体信号通路。综上所述,交泰丸可能通过抑制NLRP3炎症小体,抑制NLRP3介导的NOD样受体通路,发挥抗抑郁的作用。

关键词：交泰丸抑郁症网络药理学 UHPLC-TOF-MS 炎症

生物电效应材料在骨组织工程支架设计中的应用

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中国组织工程研究 2024年第22期28卷 3569-3575页

作者：席洪钟刘锌孙光权杜斌袁鑫玮黄艺轩郭铭滨麦健斌南京中医药大学附属医院江苏省南京市210029 南京中医药大学附属医院骨伤科江苏省南京市210029

背景:骨具有生物电效应,然而骨缺损的发生会导致骨骼内源性生物电的缺失。具有生物电效应的骨组织工程支架植入骨缺损处会补足缺失的电信号,加速骨缺损的修复。目的:文章介绍了骨组织的生物电效应,阐述了电刺激对骨缺损的修复作用,总结... 详细信息

背景:骨具有生物电效应,然而骨缺损的发生会导致骨骼内源性生物电的缺失。具有生物电效应的骨组织工程支架植入骨缺损处会补足缺失的电信号,加速骨缺损的修复。目的:文章介绍了骨组织的生物电效应,阐述了电刺激对骨缺损的修复作用,总结了生物电效应应用于骨组织工程的研究进展,以期为骨组织工程的研究提供新的思路。方法:以“bioelectrical effect,bioelectrical materials,electrical stimulation,bone tissue engineering,bone scaffold,bone defect,bone repair,osteogenesis”为英文检索词,以“生物电效应,生物电支架,电刺激,骨组织工程,骨支架,骨缺损,骨修复,骨再生”为中文检索词,在中国知网、万方、PubMed、Web of Science和ScienceDirect数据库检索与生物电效应骨组织工程支架相关的文献,最终纳入87篇进行系统归纳、总结和分析。结果与结论:①生物电效应结合体外电刺激设计骨组织工程支架是一种理想可行的方法,主要涉及的材料包括金属材料、石墨烯材料、天然生物衍生材料以及人工合成生物材料;目前运用最广泛的导电材料是石墨烯材料,得益于自身的超强导电性能、大比表面积、同细胞及骨骼的良好生物相容性以及优异的力学性能。②石墨烯材料主要是作为修饰材料引入支架以增强整体支架的电导率,同时其大表面积和丰富的官能团能够促进生物活性物质的装载和释放。③然而生物电效应的骨组织工程支架尚存一些重大挑战需要克服:满足导电性能的同时还需考虑支架的综合性能;缺乏统一、标准化的生物电效应骨组织工程支架的制备方式;体外电刺激干预系统尚不够成熟;缺乏个体化指导支架的选择以实现针对不同病理情况的患者选择并设计最适宜的支架。④研究者们在设计导电支架时,要深入考虑支架的综合效应,譬如生物相容性、力学性能以及生物降解性能等,而此种综合性能可以通过多种材料的复合来实现。⑤除此之外,临床转化应该是导电支架设计的最终考量,在评估出电刺激作用于人体且有利于骨缺损修复的安全电流阈值的基础之上,设计动物实验以及基础实验,然后应用于临床,从而在未来实现生物电效应骨组织工程支架应用于临床的终极目标。

关键词：生物电效应生物电支架内源性电信号电刺激骨组织工程骨支架骨缺损骨修复骨再生骨愈合

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黄芪-莪术药对通过调控缺氧诱导因子及肿瘤干细胞化抑制结肠癌进展并增强5-FU疗效的机制研究

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中国中药杂志 2024年第4期49卷 1044-1051页

作者：陶靖孙瑞倩顾茹辛孙程尹刚张硕唐德才谭喜莹南京中医药大学附属医院药学部江苏南京210029 中国药科大学江苏南京210009 南京中医药大学江苏南京210023 南京大学附属鼓楼医院江苏南京210008 南京中医药大学附属南通中医院江苏南通226007

该研究基于动物和细胞模型研究黄芪-莪术药对通过调控缺氧诱导因子及肿瘤干细胞化抑制结肠癌进展并增强5-氟尿嘧啶(5-FU)疗效的机制。建立裸鼠HCT116皮下移植瘤模型,将造模成功的24只裸鼠随机分为模型组、5-FU组、黄芪-莪术组和联合给药... 详细信息

该研究基于动物和细胞模型研究黄芪-莪术药对通过调控缺氧诱导因子及肿瘤干细胞化抑制结肠癌进展并增强5-氟尿嘧啶(5-FU)疗效的机制。建立裸鼠HCT116皮下移植瘤模型,将造模成功的24只裸鼠随机分为模型组、5-FU组、黄芪-莪术组和联合给药组,治疗后每2 d测量1次肿瘤体积,采用Western blot方法检测裸鼠HCT116皮下移植瘤组织缺氧核心区关键靶点表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、二氢嘧啶脱氢酶(dihydropyrimidine dehydrogenase,DPYD)、胸苷酸合酶(thymidylate synthase,TYMS)以及缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、缺氧诱导因子-2α(hypoxia-inducible factor-2α,HIF-2α)和肿瘤干细胞标志物CD133、SRY盒转录因子2(SRY-box transcription factor 2,SOX2)的蛋白表达情况。结果表明黄芪-莪术药对能减缓肿瘤生长速度,并显著提高5-FU的抑瘤率。黄芪-莪术药对明显降低肿瘤中EGFR和DPYD的蛋白表达,联合给药组中EGFR和TYMS的蛋白表达量显著降低。与模型组相比,黄芪-莪术药对可以显著抑制移植瘤组织缺氧核心区中HIF-1α、HIF-2α、SOX2、CD133的蛋白表达,与5-FU组相比,联合给药进一步抑制了HIF-1α、HIF-2α、SOX2的蛋白表达。在体外实验中,缺氧后HCT116细胞内HIF-1α、HIF-2α的蛋白表达量显著增加。与单独给予5-FU(1.38μmol·L^(-1))相比,单独使用黄芪-莪术(40 mg·mL^(-1))或5-FU联合黄芪-莪术均能更显著地抑制HIF-1α、HIF-2α、TYMS的蛋白表达。结果显示黄芪-莪术药对降低了结肠癌细胞中缺氧应答分子的表达,并减少了结肠癌的干细胞性质,从而起到了协同增强5-FU对结肠癌的治疗作用。

关键词：黄芪-莪术药对缺氧诱导因子肿瘤干细胞结肠癌

呼吸道合胞病毒感染诱导哮喘发病机制及中医药防治进展

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南京中医药大学学报 2024年第8期40卷 855-863页

作者：朱子钰赵霞纪建建吴嘉宝单祎文严花南京中医药大学附属医院江苏南京210029

呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)感染作为反复发作性喘息的潜在易感性因素,可通过免疫损伤、气道上皮屏障损伤、气道炎症浸润、气道高反应性、诱导易感基因高表达等途径影响哮喘的发生发展。中医学认为RSV感染所致哮... 详细信息

呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)感染作为反复发作性喘息的潜在易感性因素,可通过免疫损伤、气道上皮屏障损伤、气道炎症浸润、气道高反应性、诱导易感基因高表达等途径影响哮喘的发生发展。中医学认为RSV感染所致哮喘多因感邪后机体气机失调以及邪气留伏所致。通过梳理近年来RSV感染在哮喘发生发展中的作用机制及中医药干预研究,以期为未来应用中西医结合手段防治哮喘提供思路。

关键词：呼吸道合胞病毒哮喘发病机制气道中医药感染炎症复方

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儿童迁延性泄泻脾阳虚证的粪便代谢组学研究

南京中医药大学学报 2024年第6期40卷 633-639页

作者：张厦袁斌陈晓斌南京中医药大学附属医院江苏南京210029

目的从粪便代谢角度探寻儿童迁延性泄泻脾阳虚证的证候物质基础。方法选取20例脾阳虚证的迁延性泄泻患儿作为观察组,20例健康儿童作为对照组,采集各组的粪便样本后,采用气相色谱质谱联用仪器对样本进行代谢组学分析,比较2组代谢物的差... 详细信息

目的从粪便代谢角度探寻儿童迁延性泄泻脾阳虚证的证候物质基础。方法选取20例脾阳虚证的迁延性泄泻患儿作为观察组,20例健康儿童作为对照组,采集各组的粪便样本后,采用气相色谱质谱联用仪器对样本进行代谢组学分析,比较2组代谢物的差异。结果与儿童迁延性泄泻脾阳虚证相关的潜在生物标志物有25种,在迁延性泄泻脾阳虚证患儿的粪便中下调的有9种代谢物,分别为L-谷氨酰胺、L-谷氨酸、4-羟基苯甲醛、L-半胱氨酸、鸟氨酸、L-异亮氨酸、丁二酸、β-丙氨酸、富马酸,在泄泻脾阳虚证患儿的粪便中上调的有16种代谢物,包括丝氨酸、核糖酸、α-亚麻酸、苯甲酸、果糖、L-丙氨酸、焦谷氨酸、丙酮酸、次黄嘌呤、癸酸、L-天门冬氨酸等代谢物,涉及相关通路有7条,包括丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢、D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢、丙酮酸代谢、精氨酸和脯氨酸代谢、精氨酸生物合成、糖酵解/糖异生、柠檬酸循环(TCA循环)。结论迁延性泄泻脾阳虚证患儿与健康儿童相比,神经调节代谢发生紊乱,能量代谢发生异常,机体无氧酵解有所增强,相关差异代谢物的发现可能对儿童迁延性泄泻脾阳虚证的发病机制、诊断和治疗均奠定了一定的物质基础。

关键词：粪便代谢组学迁延性泄泻儿童脾阳虚证中医证候学

不同炮制白僵蚕中草酸铵和白僵菌素含量与外观性状的相关性研究

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蚕业科学 2024年第1期50卷 59-65页

作者：李臻阳封云铧顾潇商娟李雪娇胡雨邹建东许美娟南京中医药大学附属医院江苏省中医院南京210029 南京中医药大学南京210023

为探究不同炮制白僵蚕中草酸铵和白僵菌素含量与外观性状的相关性,采用HPLC-UV法分别测定不同批次白僵蚕与炒僵蚕中草酸铵和白僵菌素的含量,利用SPSS 26.0软件将白僵蚕和炒僵蚕的单体质量、长度、直径、丝腺环数与草酸铵和白僵菌素含量... 详细信息

为探究不同炮制白僵蚕中草酸铵和白僵菌素含量与外观性状的相关性,采用HPLC-UV法分别测定不同批次白僵蚕与炒僵蚕中草酸铵和白僵菌素的含量,利用SPSS 26.0软件将白僵蚕和炒僵蚕的单体质量、长度、直径、丝腺环数与草酸铵和白僵菌素含量进行相关性分析。结果表明,白僵蚕中草酸铵和白僵菌素含量呈显著正相关,且这两个成分含量与白僵蚕外观性状也均呈显著正相关;炒僵蚕中白僵菌素含量与外观性状呈显著正相关,而草酸铵含量与白僵菌素含量及各外观性状指标均无相关关系。该结果可为白僵蚕、炒僵蚕饮片质量评价提供参考,也可为炒僵蚕炮制工艺的规范提供线索。

关键词：白僵蚕草酸铵白僵菌素含量测定外观性状相关性分析

计算机辅助复方苦参注射液中抑制p21活化激酶1的活性成分预测及分子机制研究

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生物医学工程学杂志 2024年第2期41卷 313-320页

作者：林琳常静杰田耀洲陈姣南京中医药大学附属中西医结合医院南京210028 江苏省中医药研究院南京210028 广州中医药大学深圳医院(福田) 广东深圳518000

靶向p21活化激酶1(PAK1)是胰腺癌治疗的新策略。复方苦参注射液中含有多种抗胰腺癌成分,但具体作用靶点未知。本研究基于分子对接的虚拟筛选发现,复方苦参注射液中的14α-羟基苦参碱与PAK1的别构调节位点具有较高的结合自由能。分子动... 详细信息

靶向p21活化激酶1(PAK1)是胰腺癌治疗的新策略。复方苦参注射液中含有多种抗胰腺癌成分,但具体作用靶点未知。本研究基于分子对接的虚拟筛选发现,复方苦参注射液中的14α-羟基苦参碱与PAK1的别构调节位点具有较高的结合自由能。分子动力学模拟发现,14α-羟基苦参碱使PAK1的α1和α2螺旋向外延伸形成一个较深的别构调节口袋,同时诱导三磷酸腺苷(ATP)结合口袋处的β-折叠向内关闭,导致ATP结合口袋处于“半闭合”状态而失活。当去除14α-羟基苦参碱后,PAK1从失活构象向活性构象转变,因此推测,14α-羟基苦参碱可能是PAK1的可逆别构调节抑制剂。本研究采用现代技术方法对中药活性成分进行研究,为天然产物的开发利用及寻找新的胰腺癌治疗方案奠定基础。

关键词：复方苦参注射液 p21活化激酶1 14α-羟基苦参碱胰腺癌分子对接分子动力学模拟

宏基因组二代测序指导抗生素治疗人工全膝关节置换术后感染的疗效研究

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中国修复重建外科杂志 2024年第8期38卷 995-1000页

作者：朱家庆孙家豪马博闻张驰宇曹逊郑善斌陈志远张超沈计荣夏天卫南京中医药大学附属医院骨伤科南京210029

目的探讨宏基因组二代测序(metagenomic next-generation sequencing,mNGS)在人工全膝关节置换术(total knee arthroplasty,TKA)后假体周围感染(periprosthetic joint infection,PJI)诊治中的临床价值。方法2020年4月—2023年3月,收治10例TKA术后PJI患者。男3例,女7例;年龄44~83岁,平均69.9岁。置换术后8~35个月发生感染,平均19.5个月;感染病程16~128 d,平均37 d。术前红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)15~85 mm/1 h,平均50.2 mm/1 h;C反应蛋白(C reactive protein,CRP)4.4~410.0 mg/L,平均192.8 mg/L;白细胞计数(3.4~23.8)×10^(9)/L,平均12.3×10^(9)/L;中性粒细胞绝对值(1.1~22.5)×10^(9)/L,平均9.2×10^(9)/L。入院后抽取关节液行细菌培养及mNGS检测,根据检测结果调整敏感抗生素,并结合手术控制感染。结果细菌培养检测阳性7例(70%),共检出7种病原菌,最常见病原菌为停乳链球菌。mNGS检测阳性10例(100%),共检出11种病原菌,最常见病原菌为痤疮丙酸杆菌。两种方法检测阳性率差异有统计学意义(P=0.211)。7例细菌培养法和mNGS检测均为阳性患者中,3例病原菌类型结果完全一致,符合率42.86%(3/7)。细菌培养检测时间(送样本至出结果)为(4.95±2.14)d,mNGS检测为(1.60±0.52)d,差异有统计学意义(t=4.810,P<0.001)。根据细菌培养及mNGS检测培养结果采取敏感抗生素治疗。一期术后3 d CRP为6.8~48.2 mg/L,平均23.6 mg/L;ESR 17~53 mm/1 h,平均35.5 mm/1 h;白细胞计数(4.5~8.1)×10^(9)/L,平均6.1×10^(9)/L;中性粒细胞绝对值(2.3~5.7)×10^(9)/L,平均4.1×10~9/L。患者均获随访,随访时间12~39个月,平均23.5个月。1例术后6个月感染复发,其余9例均未出现感染征象,感染控制率为90%。结论与细菌培养相比,mNGS能更快速准确地检测TKA术后PJI病原菌,对指导抗生素联合手术治疗PJI具有重要意义。

关键词：宏基因组二代测序细菌培养假体周围感染人工全膝关节置换术诊断

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基于以“味”统方、苦辛平逆法的葶鹿益心饮治疗射血分数保留型心力衰竭合并糖尿病的临床疗效

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中国实验方剂学杂志 2024年第15期30卷 98-106页

作者：张蒙王新东上海中医药大学附属曙光医院上海201203 南京中医药大学附属中西医结合医院南京210028

目的:观察以“味”统方、苦辛平逆法指导下的葶鹿益心饮治疗射血分数保留型心力衰竭(HFp EF)合并糖尿病(证属气阴两虚、水瘀内停)患者的临床疗效及安全性。方法:选取南京中医药大学附属中西医结合医院2022年5月至2023年3月符合纳入标准... 详细信息

目的:观察以“味”统方、苦辛平逆法指导下的葶鹿益心饮治疗射血分数保留型心力衰竭(HFp EF)合并糖尿病(证属气阴两虚、水瘀内停)患者的临床疗效及安全性。方法:选取南京中医药大学附属中西医结合医院2022年5月至2023年3月符合纳入标准的HFp EF合并2型糖尿病气阴两虚,水瘀内停证患者108例,随机分为对照组、观察组(每组各54例)。两组均遵循指南推荐予以慢性心力衰竭及糖尿病西医常规基础治疗,观察组在此基础上予葶鹿益心饮加载治疗,治疗疗程为12周。观察患者治疗前后纽约心脏协会(NYHA)心功能分级、左室舒张末径(LVEDD)、左房内径(LAD)、左心室舒张早期二尖瓣血流最大速度(E)/舒张早期二尖瓣环峰值速度(e')比值(E/e')、N末端B型脑钠肽前体(NT-pro BNP)、糖化血红蛋白(Hb A1c)、运动耐量评价指标6 min步行试验距离、明尼苏达心力衰竭生活质量调查表、中医证候积分及其他安全性指标。结果:最终完成试验观察病例104例,其中对照组52例,观察组52例;对照组治疗后心功能分级改善显效及有效患者35例,总有效率为67.3%;观察组治疗后心功能分级改善显效及有效患者47例,总有效率为90.4%,观察组患者总有效率明显优于对照组(χ^(2)=2.754,P中医证候改善程度明显优于对照组(P中医证候积分。

关键词：射血分数保留型心力衰竭 2型糖尿病气阴两虚、水瘀内停葶鹿益心饮临床疗效