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基于化学成分和药理效应的荆芥传统分段加工与一体化加工工艺比较

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中国中药杂志 2016年第11期41卷 2081-2086页

作者：钱岩于生单鸣秋姚卫峰张丽南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏南京210023

测定荆芥经饮片一体化加工与传统分段加工后所得产品中挥发油的含量,并采用GC-MS测定挥发油中8个代表性化合物(薄荷酮、胡薄荷酮、1-辛烯-3-酮、d-柠檬烯、β-石竹烯、β-香叶烯、薄荷呋喃、3-辛酮)的含量,通过二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型... 详细信息

测定荆芥经饮片一体化加工与传统分段加工后所得产品中挥发油的含量,并采用GC-MS测定挥发油中8个代表性化合物(薄荷酮、胡薄荷酮、1-辛烯-3-酮、d-柠檬烯、β-石竹烯、β-香叶烯、薄荷呋喃、3-辛酮)的含量,通过二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型,考察荆芥2种加工方法抗炎作用的差异。通过对荆芥不同加工产品挥发性成分含量与功效的比较,阐述荆芥药材、饮片一体化加工工艺的合理性。结果显示,荆芥一体化工艺加工产品8个化合物含量均高于传统工艺产品;2种加工方法均能降低小鼠耳廓肿胀度、降低致炎小鼠血清中TNF-α,IL-1β和IL-6的含量,产生抗炎作用。经过同剂量间比较,一体化加工工艺的抗炎作用整体上优于传统加工工艺。相比传统分段加工工艺,一体化加工在保证饮片质量的同时,提高了效率、节约时间及人工成本,具有合理性。

关键词：荆芥一体化化学成分抗炎

二至丸及不同极性部位含药血清对H2O2诱导的肝细胞衰老的保护作用及物质基础研究

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药学学报 2021年第4期56卷 1137-1146页

作者：冯丽王乙妃高梦婷李鑫姚卫峰张丽南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏南京210023

利用H_(2)O_(2)诱导的大鼠肝细胞(BRL)衰老模型探究二至丸及其不同极性部位(石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水和环烯醚萜苷类富集部位)含药血清的抗衰老作用。通过MTT法检测细胞增殖,β-半乳糖苷酶染色实验评估细胞衰老程度,流式细胞术检... 详细信息

利用H_(2)O_(2)诱导的大鼠肝细胞(BRL)衰老模型探究二至丸及其不同极性部位(石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水和环烯醚萜苷类富集部位)含药血清的抗衰老作用。通过MTT法检测细胞增殖,β-半乳糖苷酶染色实验评估细胞衰老程度,流式细胞术检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的改变。采用快速液相系统-飞行时间质谱(ultra-fast liquid chromatography coupled with quadrupole-time of flight-mass spectrometry,UFLC-Q/TOF-MS)对二至丸及各部位化学成分进行分析,并结合分子对接技术筛选二至丸中可能的抗衰老活性成分。结果显示,600μmol·L^(-1)的H_(2)O_(2)处理细胞72 h后可显著诱导细胞衰老,引起细胞增殖抑制、细胞内β-半乳糖苷酶活力和ROS水平的升高。细胞在诱导衰老前预先用二至丸含药血清处理可有效抵抗增殖抑制。除环烯醚萜苷类,二至丸及其他部位含药血清均可降低细胞内β-半乳糖苷酶活力和ROS水平。利用液质联用技术从二至丸中共鉴定出了49个化学成分并对各部位中的成分进行了比较。通过分子对接筛选出二至丸中14个可能的抗衰老活性组分。结合细胞实验、成分鉴定及分子对接结果,本实验初步推断二至丸抗衰老的有效成分为三萜类、黄酮类和苯乙醇类,为阐明二至丸抗衰老药效物质基础及作用机制提供了参考。

关键词：二至丸不同极性部位肝细胞衰老化学成分分子对接

中药配伍禁忌复杂毒效物质相互作用研究思路与方法

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中国药理学与毒理学杂志 2015年第6期29卷 954-959页

作者：唐于平沈娟陶伟伟尚尔鑫华永庆郭建明宿树兰钱大玮范欣生段金廒南京中医药大学江苏省方剂高技术研究重点实验室江苏省中药资源产业化过程协同创新中心中药资源产业与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏南京210023

随着人类社会对健康需求的日益提高和科学认知水平的不断深入,中药的合理应用以及安全性和有效性问题受到社会的广泛关注。随着以"十八反"为代表的中药配伍禁忌研究逐渐深入,对中药配伍禁忌物质基础的认知达到新的水平。本文基于中医配... 详细信息

随着人类社会对健康需求的日益提高和科学认知水平的不断深入,中药的合理应用以及安全性和有效性问题受到社会的广泛关注。随着以"十八反"为代表的中药配伍禁忌研究逐渐深入,对中药配伍禁忌物质基础的认知达到新的水平。本文基于中医配伍理论体系中的代表性禁忌配伍药组为研究对象,通过构建毒效生物学评价相关联、配伍毒性效应物质相兼顾、体外-体内药物相互作用评价相结合和药味配伍-成分协同分层次递进研究等中药配伍禁忌复杂毒效物质相互作用的适宜研究方法和技术体系,形成了以反药组合-毒效物质-量毒效关系-体内外转化与代谢特征相互关联的中药配伍禁忌复杂毒效物质研究思路,为中药配伍禁忌现代研究提供了有益的参考和借鉴。

关键词：中草药药物配伍禁忌十八反毒效物质药物相互作用

基于多元功效成分的当归药材产地现代干燥加工方法研究

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中国中药杂志 2017年第2期42卷 264-273页

作者：朱邵晴郭盛钱大玮沙秀秀鲁学军严辉朱振华蒋颖段金廒南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏南京210023

为建立当归药材产地现代干燥加工方法体系,该研究以3种酚酸(酯)类、6种苯酞类及多糖类化学成分的组成及含量为评价指标,利用主成分分析法,结合干燥后样品外观性状等指标,对经不同干燥加工方法所得当归药材样品品质进行综合评价,并在此... 详细信息

为建立当归药材产地现代干燥加工方法体系,该研究以3种酚酸(酯)类、6种苯酞类及多糖类化学成分的组成及含量为评价指标,利用主成分分析法,结合干燥后样品外观性状等指标,对经不同干燥加工方法所得当归药材样品品质进行综合评价,并在此基础上对其工艺参数进行了优化。结果显示,经控温控湿、中短波红外及微波真空干燥法加工后的当归药材所含绿原酸、阿魏酸显著高于新鲜样品及产地传统干燥方法加工样品;多元统计方法分析结果显示,采用控温控湿干燥法加工样品,其整体化学特征与产地传统干燥方法加工样品较为近似,可作为当归药材产地现代干燥加工的适宜方法。以产地传统干燥加工方法所得当归药材样品为参照,采用正交试验设计法对当归药材控温控湿干燥工艺参数进行了优化,综合考虑能耗、干燥时间等其他参数,最终确定当归药材产地现代干燥加工适宜工艺为:采用控温控湿干燥法,第一阶段干燥温度40~45℃,相对湿度25%以下,干燥目标水分50%,缓苏时间12~24 h,第二阶段干燥温度60~65℃,相对湿度20%以下,风速35~40 Hz。该研究为当归药材产地现代干燥加工方法的选择以及工艺参数优化提供了支撑,也为根及根茎类药材产地加工共性技术的形成提供了有益探索和实践。

关键词：当归干燥方法加工工艺酚酸类苯酞类多糖类综合评价

不同干燥方法及其影响因子对玄参药材初加工过程品质形成的影响

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中国中药杂志 2015年第22期40卷 4417-4423页

作者：李会伟刘培钱大玮鲁学军郭盛朱振华段金廒南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏南京210023

以玄参为代表,探讨现代干燥方法及影响因子对其品质的影响,优选适宜的玄参现代干燥工艺,为根类中药材的干燥加工提供示范。采用控温控湿干燥、真空干燥、微波真空干燥、中短红外干燥等不同的干燥方式和设备,设置与干燥密切相关的条件因... 详细信息

以玄参为代表,探讨现代干燥方法及影响因子对其品质的影响,优选适宜的玄参现代干燥工艺,为根类中药材的干燥加工提供示范。采用控温控湿干燥、真空干燥、微波真空干燥、中短红外干燥等不同的干燥方式和设备,设置与干燥密切相关的条件因子进行干燥加工,得到分析用玄参样品;采用UPLC-MS/MS测定玄参中与中医功效密切相关的环烯醚萜类主要化学成分、苯丙素类主要化学成分的含量;采用紫外-可见分光光度法对玄参中多糖类成分进行测定。控温控湿干燥、中短红外干燥方法得到的药材性状符合2015年版《中国药典》标准,微波真空干燥及真空干燥方法所得药材性状与药典玄参性状项下描述有一定的差异。与新鲜玄参相比,干燥加工品中环烯醚萜苷类成分含量均有降低,苯丙素类安格洛苷-C的含量无明显变化,毛蕊花糖苷的含量呈现增加趋势。优化干燥主要因子为控温（70℃）、控湿（15%~10%）,干燥耗时较短,环烯醚萜苷类、苯丙素类和多糖类资源性化学成分含量稳定在较高水平区间。采用控温、控湿干燥条件加工的玄参药材外观性状与主要功效物质的含量符合2015年版《中国药典》规定,品质较为优良。该方法为玄参等根类中药材的适宜干燥技术规范的研究制定提供了借鉴。

关键词：玄参药材初加工干燥技术品质评价

醋甘遂活性部位各成分群对斑马鱼胚胎的急性毒性比较研究

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中国中药杂志 2017年第18期42卷 3516-3522页

作者：楼坚伟曹亮亮张桥张丽丁安伟南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏南京210023

采用模式生物斑马鱼的胚胎评价醋甘遂活性部位各成分群急性毒性,同时采用UFLC-Q-TOF-MS对各成分群的化学成分进行定性研究。以24 h健康斑马鱼胚胎为研究对象,各成分群设9个浓度和1个空白对照组,考察给药后96 h其对斑马鱼胚胎存活率的影... 详细信息

采用模式生物斑马鱼的胚胎评价醋甘遂活性部位各成分群急性毒性,同时采用UFLC-Q-TOF-MS对各成分群的化学成分进行定性研究。以24 h健康斑马鱼胚胎为研究对象,各成分群设9个浓度和1个空白对照组,考察给药后96 h其对斑马鱼胚胎存活率的影响,计算不同样品对斑马鱼胚胎的半数致死浓度(LC_(50))。结果显示,各成分群对斑马鱼胚胎的急性毒性大小依次为B>C>A>D,成分群D的毒性不明显。UFLC-Q-TOF-MS分析结果显示成分群B主要检测到巨大戟烷型二萜类成分,成分群C主要检测到假白榄烷型二萜类成分。关联毒性研究结果,推测假白榄烷型二萜类成分可能为醋甘遂中更为低毒的活性成分,可为进一步深入探究醋甘遂"有故无殒"的物质基础提供依据。

关键词：醋甘遂成分群 UFLC-Q-TOF-MS 斑马鱼胚胎急性毒性

基于主成分分析和多指标综合指数法的当归-红花不同配比活血化瘀作用比较

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药学学报 2014年第9期49卷 1304-1309页

作者：李淑娇李伟霞唐于平沈娟尚尔鑫郭建明段金廒 f南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏省方剂高技术研究重点实验室江苏南京210023

比较评价当归-红花(GH)不同配比对急性血瘀大鼠血液流变学和凝血功能的影响,优选当归-红花配伍活血作用的最佳配比。采用皮下注射盐酸肾上腺素和冰水游泳共同复制急性血瘀大鼠模型,通过测定全血黏度(WBV)、血浆黏度(PV)、全血高切相对指... 详细信息

比较评价当归-红花(GH)不同配比对急性血瘀大鼠血液流变学和凝血功能的影响,优选当归-红花配伍活血作用的最佳配比。采用皮下注射盐酸肾上腺素和冰水游泳共同复制急性血瘀大鼠模型,通过测定全血黏度(WBV)、血浆黏度(PV)、全血高切相对指数(HSWBRI)、全血低切相对指数(LSWBRI)、红细胞聚集指数(EAI),观察当归-红花配伍对血瘀大鼠血液流变学的影响;通过测定凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、血浆纤维蛋白原(FIB)含量及血小板最大聚集率(ADP),观察当归-红花配伍对血瘀大鼠凝血功能及血小板聚集的影响。然后采用主成分分析法和多指标综合指数法综合评价当归-红花配伍的总活血化瘀效应。结果显示,与正常组比较,模型组各血液流变学指标和凝血功能指标均有显著性差异;与模型组比较,当归-红花不同配比(1∶0、4∶1、2∶1、3∶2、1∶1、2∶3、1∶2、1∶4和0∶1)组均能较好改善急性血瘀大鼠的血液流变学各指标,对凝血功能多个指标也有较好的调节作用。主成分分析法和多指标综合指数法综合评价得出当归-红花配比1∶1和3∶2的活血化瘀作用最好,其中1∶1的活血化瘀作用更优于3∶2。以上结果说明,当归-红花配伍能明显改善血瘀大鼠的血液流变学及凝血功能异常,且当归-红花活血化瘀作用的最佳配比与临床中医方剂中使用当归-红花1∶1频次最高的结论相一致,为临床更有效应用当归-红花配伍提供了科学依据。

关键词：当归红花配伍活血化瘀主成分分析多指标综合指数法

基于网络药理学及斑马鱼模型的瓜蒌薤白半夏汤干预慢性阻塞性肺疾病的作用机制研究

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中草药 2021年第17期52卷 5233-5243页

作者：谈晓莹李丹刘培冯伟萌武文星刘嘉庆宿树兰郭盛尚尔鑫张黄琴段金廒南京中医药大学江苏省方剂高技术研究重点实验室江苏省方剂研究重点实验室江苏省中药资源产业化过程协同创新中心中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏南京210023

目的基于网络药理学方法和斑马鱼模型探讨瓜蒌薤白半夏汤干预慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmoriary disease,COPD)的潜在作用机制。方法运用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、中医药百科全书数据库(ETCM)、中医药综... 详细信息

目的基于网络药理学方法和斑马鱼模型探讨瓜蒌薤白半夏汤干预慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmoriary disease,COPD)的潜在作用机制。方法运用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、中医药百科全书数据库(ETCM)、中医药综合数据库(TCMID)以及国内外相关文献检索瓜蒌薤白半夏汤的主要活性成分,通过TCMSP和SwissTargetPrediction数据库预测靶点;通过GeneCards数据库、在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)和TCMSP数据库获取COPD相关靶点,并采用交集法筛选出与瓜蒌薤白半夏汤活性成分作用的共同靶点。运用Cytoscape 3.7.1软件构建“中药-活性成分-靶点”网络,通过String数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络;通过DAVID数据库对共有基因进行基因本体(gene ontology,GO)功能富集分析及京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析;借助斑马鱼炎症模型对筛选的靶点进行实验验证。结果瓜蒌薤白半夏汤共筛选出成分955个,潜在活性成分106个,核心活性成分如芹菜素、茴香酸、美迪紫檀素、金圣草黄素、香叶木素等74个,对应靶点1134个;PPI网络分析获得瓜蒌薤白半夏汤干预COPD的关键作用靶点408个,包括碳酸酐酶9(carbonic anhydrase 9,CA9)、前列腺素内过氧化物合酶1(prostaglandin-endoperoxide synthase 1,PTGS1)、胰岛素(insulin,INS)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(serine/threonine protein kinase 1,AKT1)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)、丝裂原活化蛋白激酶1(mitogen-activated protein kinase 1,MAPK1)、MAPK3、血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)等;GO功能及KEGG通路富集分析得出与瓜蒌半夏薤白汤干预COPD作用相关的生物过程1096个,如炎症反应、细胞溶质、酶结合等;相关信号通路125条,如癌症通路、TNF信号通路、前列腺癌、缺氧诱导因子1信号通路、神经活性配体-受体相互作用等。斑马鱼炎症模型实验结果显示,瓜蒌薤白半夏汤显著降低IL-6、B淋巴细胞2(B-cell lymphoma 2,BCL2)和EGFR mRNA表达水平(P<0.05),降低半胱氨酸蛋白酶8(Caspases 8,CASP8)mRNA表达水平。结论瓜蒌薤白半夏汤可能通过作用于EGFR、IL-6、BCL2、CASP8等靶点,调节多条信号通路,从而发挥对COPD的治疗作用。

关键词：瓜蒌薤白半夏汤慢性阻塞性肺疾病网络药理学斑马鱼模型 EGFR IL-6 BCL2 CASP8

荆芥柠檬烯-3-羟化酶基因克隆及生物信息学分析

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中国实验方剂学杂志 2021年第2期27卷 130-137页

作者：尹梦娇戴仕林周佩娜林谷音刘莉成刘潺潺吴啟南南京中医药大学药学院江苏省中药资源产业化过程协同创新中心中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心南京210023

目的:克隆荆芥(Schizonepeta tenuifolia)中的柠檬烯-3-羟化酶基因(limonene-3-hydroxylase,StL3OH),并对该基因的cDNA序列进行生物信息学分析。方法:根据荆芥转录组数据库设计特异性引物,通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术克隆StL... 详细信息

目的:克隆荆芥(Schizonepeta tenuifolia)中的柠檬烯-3-羟化酶基因(limonene-3-hydroxylase,StL3OH),并对该基因的cDNA序列进行生物信息学分析。方法:根据荆芥转录组数据库设计特异性引物,通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术克隆StL3OH基因的cDNA序列,并进行生物信息学分析。结果:荆芥StL3OH基因的cDNA序列长为1 598 bp,包含1个长度为1 497 bp的完整开放阅读框,编码498个的氨基酸,其StL3OH蛋白理论相对分子质量为56.40 kDa,为亲水性不稳定蛋白。生物信息学分析表明,StL3OH蛋白无信号肽,具有1个跨膜区,可能定位于内质网膜上。多重序列比对和聚类分析表明,荆芥StL3OH蛋白与植物留兰香柠檬烯-3-羟化酶蛋白(MsL3OH)的氨基酸序列高度相似,均含有细胞色素P450血红素结合区,属于细胞色素CYP71家族中的D亚家族。密码子偏性分析表明,该基因偏好使用以鸟嘌呤/胞嘧啶(G/C)结尾的密码子,具有27个偏性密码子,烟草为该基因最适合的外源表达宿主。结论:首次从荆芥中克隆得到StL3OH基因的cDNA序列,为下一步研究StL3OH蛋白的结构与功能和该基因在荆芥单萜类成分的累积与生物合成的调控机制提供依据。

关键词：荆芥柠檬烯-3-羟化酶单萜基因克隆生物信息学分析