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孟河医派特色炮制辅料猪心血和猪血的蛋白质组学分析及其对丹参抗小胶质细胞炎症损伤的影响

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中国实验方剂学杂志 2023年第18期29卷 137-145页

作者：刘楠廉源沛尹春燕蔡佳丽王地均朱力刘产明黄玮颜晓静南京中医药大学附属常州市中医医院、常州市孟河医派人用经验研究与转化重点实验室江苏常州213003

目的:采用蛋白质组学考察猪心血(PCB)和猪血(PB)的蛋白差异,并比较二者对丹参(DS)抗小胶质细胞炎症损伤的影响。方法:采用纳升液相色谱-四极杆轨道阱质谱法(nLC-MS/MS)联合生物信息学比较PCB和PB模拟胃肠道消化的蛋白质组学差异,应用蛋... 详细信息

目的:采用蛋白质组学考察猪心血(PCB)和猪血(PB)的蛋白差异,并比较二者对丹参(DS)抗小胶质细胞炎症损伤的影响。方法:采用纳升液相色谱-四极杆轨道阱质谱法(nLC-MS/MS)联合生物信息学比较PCB和PB模拟胃肠道消化的蛋白质组学差异,应用蛋白质免疫印迹法(Western blot)验证二者部分共有蛋白和差异蛋白含量;应用皮质酮(CORT)联合脂多糖(LPS)构建BV2神经炎症模型,考察PCB和PB对DS抗炎症细胞中肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平的影响。结果:蛋白质组学结果显示,PCB和PB中共有蛋白69种、差异蛋白68种,其中共有蛋白中包括具有脑靶向作用的转铁蛋白(Tf),二者差异蛋白分别为41、27种。Western blot验证结果显示,二者共有Tf含量差异无统计学意义,差异蛋白肌酸激酶M及心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)含量差异则具有统计学意义(P实验研究发现,与同浓度DS组比较,除100 mg·L^(-1) PB拌DS(PB-DS)组外,PCB拌DS(PCB-DS)组和PB-DS组均能明显抑制BV2炎症细胞的TNF-α和IL-6水平(P孟河医派临方特色炮制辅料PCB和PB均能促进DS抑制神经炎症作用,且PCB促进DS抑制作用更显著,这可能是由于二者存在参与能量代谢相关差异蛋白所致,可为揭示PCB-DS及PB-DS的炮制科学内涵奠定基础。

关键词：孟河医派特色炮制辅料猪心血猪血液质联用技术蛋白质组学 BV2细胞

孟河医派特色炮制猪心血拌丹参及其他炮制品活性成分与抗脑缺血氧化损伤相关性分析

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中国实验方剂学杂志 2024年第15期30卷 162-171页

作者：曾珍廉源沛蔡佳丽尹春燕王地均朱力刘产明黄玮颜晓静南京中医药大学附属常州市中医医院常州市孟河医派人用经验研究与转化重点实验室江苏常州213003

目的:分析猪心血拌丹参及其他丹参炮制品中11个小分子活性成分及1个蛋白成分与抗脑缺血氧化损伤的相关性,明确猪心血拌丹参抗脑缺血氧化损伤的关键成分标志物。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)同时测定丹参、猪心血拌丹参、猪血拌丹参、... 详细信息

目的:分析猪心血拌丹参及其他丹参炮制品中11个小分子活性成分及1个蛋白成分与抗脑缺血氧化损伤的相关性,明确猪心血拌丹参抗脑缺血氧化损伤的关键成分标志物。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)同时测定丹参、猪心血拌丹参、猪血拌丹参、酒拌丹参、猪血清转铁蛋白(Tf)拌丹参5种饮片中11种活性成分含量;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测丹参不同炮制品中Tf的含量。构建斑马鱼缺血性脑卒中模型,考察丹参不同炮制品对脑缺血斑马鱼行为轨迹、转基因斑马鱼Tg(elavl3:eGFP)脑神经元损伤及脑组织中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平的影响;构建糖氧剥夺/复氧(OGD/R)诱导的小鼠海马神经细胞缺血缺氧模型,以乳酸脱氢酶(LDH)、活性氧(ROS)、MDA和SOD为评价指标,考察丹参不同炮制品对神经细胞氧化损伤的影响;通过主成分分析(PCA)、偏最小二乘判别法-判别分析(PLS-DA)及Spearman相关性分析对11个小分子活性成分及1个蛋白成分与药效指标进行分析,筛选猪心血拌丹参抗脑缺血氧化损伤的关键成分标志物。结果:与丹参比较,丹参各炮制品中水溶性、脂溶性成分含量均呈不同程度的升高,而丹酚酸A成分含量降低;与酒拌丹参比较,猪心血拌丹参、猪血拌丹参及Tf拌丹参中丹酚酸B、丹参素、迷迭香酸等成分含量均升高,而丹酚酸A含量降低。ELISA结果显示,猪心血拌丹参、猪血拌丹参及Tf拌丹参中均含有Tf蛋白,且三者含量差异无统计学意义。药效结果显示,丹参不同炮制品均能改善斑马鱼缺血性脑卒中后出现的行为缺陷、脑神经元损伤及氧化应激,且猪心血拌丹参组作用最明显。PCA结果显示,丹酚酸B、丹酚酸A、迷迭香酸、紫草酸、丹参素、咖啡酸、丹参酮Ⅱ_(A)、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ为丹参及其炮制品中的主要贡献成分。相关性分析结果显示,隐丹参酮、迷迭香酸、咖啡酸、二氢丹参酮Ⅰ、丹酚酸B、丹参酮Ⅱ_(A)、丹参酮Ⅰ与斑马鱼脑组织中MDA水平呈负相关,紫草酸、原儿茶醛、迷迭香酸、二氢丹参酮Ⅰ、丹酚酸B、Tf与SOD水平呈正相关,迷迭香酸、咖啡酸、二氢丹参酮Ⅰ、丹酚酸B、丹参酮Ⅱ_(A)、丹参酮Ⅰ、丹参素、Tf与斑马鱼脑神经元荧光强度呈正相关;紫草酸、原儿茶醛、迷迭香酸、二氢丹参酮Ⅰ、丹酚酸B、丹参素、Tf与HT22细胞中LDH、ROS、MDA水平呈负相关,与SOD水平呈正相关。结论:丹参及其不同炮制品抗脑缺血氧化损伤作用存在差异,其中以猪心血拌丹参改善氧化损伤作用最强,这可能与丹酚酸B、丹参素、迷迭香酸等成分的含量变化有关,可为明确该孟河医派特色炮制品抗脑缺血质量标志物及阐明其炮制机制提供依据。

关键词：孟河医派特色炮制猪心血拌丹参高效液相色谱法(HPLC) 定量分析脑缺血氧化损伤转铁蛋白(Tf)

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炮制辅料芝麻的历史沿革及研究进展

亚太传统医药 2024年第3期20卷 242-246页

作者：曹琰颜晓静承卡黄玮刘产明朱月琴南京中医药大学常州附属医院常州市孟河医派人用经验研究与转化重点实验室江苏常州213003

芝麻制法是中药特色炮制方法之一,但目前国内对芝麻作为炮制辅料的研究较少。梳理自汉代以来有关芝麻功效和炮制方法的记载,并对芝麻参与补骨脂、苍术、枸杞子等中药的炮制进行了整理总结。经文献考证,古代芝麻炮制方法种类较多,至现代... 详细信息

芝麻制法是中药特色炮制方法之一,但目前国内对芝麻作为炮制辅料的研究较少。梳理自汉代以来有关芝麻功效和炮制方法的记载,并对芝麻参与补骨脂、苍术、枸杞子等中药的炮制进行了整理总结。经文献考证,古代芝麻炮制方法种类较多,至现代则极大简化,《中华人民共和国药典》和各地炮制规范均只收录“生用”或“炒制”法。作为炮制辅料,芝麻制法包括芝麻焙、芝麻炒和芝麻拌蒸3种。芝麻制对饮片的作用可概括为以下两点:一是缓和药性,降低毒副作用,如补骨脂、苍术等;二是增强补肝肾作用,如枸杞子、桑叶。现代对于芝麻及芝麻制法的研究主要集中于炮制前后化学成分的变化和芝麻不同炮制品对药理作用的影响,但芝麻作为辅料在炮制中发挥作用的机理尚不明确。通过研究相关文献,以期为炮制辅料芝麻的后续研究提供参考。

关键词：芝麻炮制辅料历史沿革研究进展

基于网络药理学探讨加味血脉通2号颗粒抗动脉粥样硬化的分子机制

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甘肃中医药大学学报 2024年第2期41卷 61-69页

作者：张卫东赵权张琪廉源沛朱力颜晓静南京中医药大学附属常州市中医院药学部江苏常州213003 南京中医药大学附属常州市中医院心血管科江苏常州213003 南京中医药大学附属常州市中医院常州市孟河医派人用经验研究与转化重点实验室江苏常州213003

目的基于网络药理学方法分析加味血脉通2号颗粒抗动脉粥样硬化(AS)的作用靶点及信号通路,进而探讨其潜在作用机制。方法通过中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP),中医药研究整合数据库(TCMID)及Swiss Target Prediction数据库筛选加... 详细信息

目的基于网络药理学方法分析加味血脉通2号颗粒抗动脉粥样硬化(AS)的作用靶点及信号通路,进而探讨其潜在作用机制。方法通过中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP),中医药研究整合数据库(TCMID)及Swiss Target Prediction数据库筛选加味血脉通2号颗粒相关活性成分及靶点;通过Gene-Cards、在线人类孟德尔遗传(OMIM)数据库查找与AS相关的靶点,并将二者靶点通过基因标准化后进行映射;运用Cytoscape 3.7.1软件构建“化合物-靶点”网络图,利用STRING数据库绘制蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,利用功能注释生物信息学分析平台(DAVID)数据库进行基因本体(GO)功能、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果共筛选得到活性成分140个,成分相关靶点943个,AS疾病靶点2157个,药物-疾病的交集靶点389个;GO功能富集分析得到GO条目1291个,其中生物过程(BP)条目943个、细胞组成(CC)条目98个、分子功能(MF)条目250个,主要涉及炎症反应、细胞外基质分解、酶结合、类固醇激素受体活性等;KEGG通路富集分析得到信号通路149条,主要涉及Toll样受体信号通路、癌症、肿瘤坏死因子、缺氧诱导因子-1信号通路、磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路等。结论加味血脉通2号颗粒可能是熊果酸、谷甾醇等通过丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)1、MAPK3、MAPK8、白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9等多靶点调节炎症反应、细胞凋亡、氧化应激而治疗AS。

关键词：动脉粥样硬化加味血脉通2号颗粒网络药理学作用机制

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冠心病铁死亡发病机制及药物干预研究进展

中国现代医药杂志 2023年第7期25卷 91-98页

作者：刘洁罗立波颜晓静苏州大学附属第三医院心内科江苏常州213000 南京中医药大学常州附属医院心内科江苏常州213003 常州市孟河医派人用经验研究与转化重点实验室江苏常州213003

细胞死亡是生命现象的不可逆停止及生命的结束,是组织器官发育和机体维持稳态必须的生理过程。细胞死亡分为细胞凋亡、细胞坏死、细胞自噬三种类型,其中细胞死亡方式研究主要集中在细胞凋亡和细胞坏死。铁死亡(Ferroptosis)是继细胞凋... 详细信息

细胞死亡是生命现象的不可逆停止及生命的结束,是组织器官发育和机体维持稳态必须的生理过程。细胞死亡分为细胞凋亡、细胞坏死、细胞自噬三种类型,其中细胞死亡方式研究主要集中在细胞凋亡和细胞坏死。铁死亡(Ferroptosis)是继细胞凋亡之后又一伟大发现,是一种铁依赖性的,区别于细胞凋亡、细胞坏死、细胞自噬的新型细胞程序性死亡方式[1]。铁死亡主要是通过脂质过氧化驱动并依赖于铁的一种死亡过程,其调节代谢的途径包括氧化还原反应、铁代谢、脂质和糖类的代谢以及氨基酸的代谢[2]。

关键词：细胞自噬细胞坏死细胞程序性死亡细胞死亡死亡过程药物干预氧化还原反应细胞凋亡

冠心病合并抑郁症发病机制及其中西医治疗研究进展

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中国现代医药杂志 2024年第8期26卷 80-87页

作者：钱煜雯罗立波廉源沛申春悌颜晓静刘潘苏州大学附属第三医院研究生院江苏常州213000 南京中医药大学常州附属医院常州市孟河医派人用经验研究与转化重点实验室江苏常州213003 南京中医药大学常州附属医院心血管内科江苏常州213003 南京中医药大学常州附属医院肺病科江苏常州213003

抑郁症与心血管疾病的发病率和死亡率均有关联,严重影响冠心病合并抑郁症患者的预后。本文综述了冠心病合并抑郁症的发病机制、目前常用的现代医学治疗方法以及近几年针对这一合并症的中药方剂的研究进展,在现代常规药物的基础上,联合... 详细信息

抑郁症与心血管疾病的发病率和死亡率均有关联,严重影响冠心病合并抑郁症患者的预后。本文综述了冠心病合并抑郁症的发病机制、目前常用的现代医学治疗方法以及近几年针对这一合并症的中药方剂的研究进展,在现代常规药物的基础上,联合使用中药能显著增加疗效、改善患者病情、降低抑郁评分,并且相比于抗抑郁药,中药治疗具有不良反应更小、安全性更高的优势,是未来研究的重点和发展方向。

关键词：冠心病抑郁症发病机制中西医治疗研究进展

骨关节炎关节内的神经图谱及神经免疫互作机制的研究进展

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中国医学科学院学报 2024年第5期46卷 776-782页

作者：顾健蒋涛南京中医药大学研究生院南京210023 常州市中医医院骨伤五科江苏常州213000

关节内有丰富的感觉神经及交感神经纤维分布,这些神经将关节内的物理及化学性刺激转化为神经冲动传递给中枢神经系统,并参与诱发骨关节炎(OA)等炎症性关节病的痛觉超敏反应。本文总结了关节内神经的分布及功能特性,并重点介绍了“迷走神... 详细信息

关节内有丰富的感觉神经及交感神经纤维分布,这些神经将关节内的物理及化学性刺激转化为神经冲动传递给中枢神经系统,并参与诱发骨关节炎(OA)等炎症性关节病的痛觉超敏反应。本文总结了关节内神经的分布及功能特性,并重点介绍了“迷走神经-交感神经”自主神经环路调节OA关节内免疫微环境的相关机制。此外,关节内以肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6为代表的炎症因子也直接或间接诱发感觉神经动作电位,激活痛觉从关节局部向中枢神经系统的传导通路;而OA关节内的感觉神经也参与了免疫细胞及炎症因子的募集,这种神经免疫的互作模式不仅为OA治疗提供了多种创新靶点,还提示OA治疗应采用整体观念,综合考虑骨关节内的神经、免疫微环境及其相互之间的影响。

关键词：骨关节炎感觉神经自主神经炎症因子交互作用

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基于CNKI的中医药治疗干眼研究热点及趋势可视化分析

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国际中医中药杂志 2025年第02期47卷 244-249页

作者：李凌云李倩杨小艳南京医科大学第四附属医院京新门诊部南京

目的梳理中医药治疗干眼的相关文献, 宏观把握当前该领域的研究热点和发展趋势。方法检索中国知网(CNKI)2011年1月1日-2024年6月30日收录的中医药治疗干眼研究文献, 采用Excel 2019统计分析该领域年度发文量, 采用CiteSpace 6.2.2软件... 详细信息

目的梳理中医药治疗干眼的相关文献, 宏观把握当前该领域的研究热点和发展趋势。方法检索中国知网(CNKI)2011年1月1日-2024年6月30日收录的中医药治疗干眼研究文献, 采用Excel 2019统计分析该领域年度发文量, 采用CiteSpace 6.2.2软件对纳入文献进行作者、机构共现分析, 以及关键词的共现、聚类、时间线轴及突现分析。结果共纳入文献1 189篇, 整体发文量呈上升趋势。该领域研究核心力量主要分布在中医药类高校, 发文最多的机构为南京中医药大学, 发文最多的作者为湖南中医药大学的彭清华。关键词聚类分析得到17个聚类, 研究热点大致可概括为发病机制、中医证型、临床疗效、中医外治法、人工泪液、护理研究等。研究前沿为中药研究成果的转化及应用、眼表功能的改善机制、研究范式向数据挖掘和研究进展综述方面转变。结论中医药治疗干眼的治法研究以中药内服、中药熏蒸、针灸、穴位按摩为主, 临床研究始终为该领域的关注重点, 作用机制研究逐渐由眼表观察和周围神经递质水平转向中枢水平。中医药治疗干眼研究的方法学不断丰富, 基于数据挖掘总结名医经验及组方、治疗规律成为新兴热点。本领域作者及机构间的合作不足, 今后应建立跨区域、跨机构的多中心合作网络。

关键词：中医药疗法干眼 CiteSpace 文献计量学可视化分析研究热点

^(131)Ⅰ-大黄素和^(131)Ⅰ-大黄素酸的坏死靶向性及成像坏死心肌的研究

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中国药科大学学报 2016年第2期47卷 235-241页

作者：王琴张东建李进典徐梦丹廖红殷志琦张健南京中医药大学药学院南京210023 江苏省中医药研究院转化医学实验室南京210028 中国药科大学天然药物化学教研室南京210009 中国药科大学江苏省新药筛选重点实验室南京210009

探讨^(131)Ⅰ-大黄素和^(131)Ⅰ-大黄素酸的坏死靶向性及成像坏死心肌的潜能。用放射性^(131)Ⅰ标记大黄素、大黄素酸,在小鼠肌肉坏死和大鼠心肌梗死(MⅠ)模型上评估这两个示踪剂的坏死靶向性及成像潜能。分别在给药2、12和24 h后处死小... 详细信息

探讨^(131)Ⅰ-大黄素和^(131)Ⅰ-大黄素酸的坏死靶向性及成像坏死心肌的潜能。用放射性^(131)Ⅰ标记大黄素、大黄素酸,在小鼠肌肉坏死和大鼠心肌梗死(MⅠ)模型上评估这两个示踪剂的坏死靶向性及成像潜能。分别在给药2、12和24 h后处死小鼠,并用γ-计数器测量主要脏器、坏死肌肉的放射量。给药6 h后,SPECT/CT成像大鼠梗死心肌,测量组织分布,并对心脏切片进行病理学分析。小鼠分布数据表明^(131)Ⅰ-大黄素和^(131)Ⅰ-大黄素酸具有良好的坏死靶向性,同时从正常组织清除较快。SPECT/CT图像显示这两个化合物在MⅠ大鼠的心脏部位有高摄取("热点"成像),而在假手术大鼠的心脏区域没有明显的摄取。磷屏定量数据表明:^(131)Ⅰ-大黄素和^(131)Ⅰ-大黄素酸的坏死/正常心肌比分别为9.72和13.14。以上结果说明这两个示踪剂都具有坏死靶向性及成像坏死心肌的潜能。

关键词： (131)Ⅰ-大黄素 (131)Ⅰ-大黄素酸坏死靶向性心肌梗死成像