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干姜的资源化学评价与药材标准化研究

干姜的资源化学评价与药材标准化研究

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作者：李鹏辉南京中医药大学

学位级别：硕士

干姜来源于姜科植物姜Zingiber officinale Rosc.的干燥根茎,广泛分布于我国各地。干姜辛,热。归脾、胃、肾、心、肺经,具有温中散寒,回阳通脉,温肺化饮等功效。临床上常用于治疗脘腹冷痛,呕吐泄泻,肢冷脉微,寒饮喘咳等症。由于现行的... 详细信息

干姜来源于姜科植物姜Zingiber officinale Rosc.的干燥根茎,广泛分布于我国各地。干姜辛,热。归脾、胃、肾、心、肺经,具有温中散寒,回阳通脉,温肺化饮等功效。临床上常用于治疗脘腹冷痛,呕吐泄泻,肢冷脉微,寒饮喘咳等症。由于现行的药材质量标准对干姜的品质评价仍有一定的局限性,导致市场上的干姜质量参差不齐,药材品质得不到保障,限制了干姜的市场流通。为了使干姜药材更好的市场流通和药用,干姜标准化研究刻不容缓,品质评价研究也有待于深入开展。一、文献综述分别从本草考证、化学成分和质量评价三部分进行综述,总结了产地变迁和加工沿革,归纳了干姜中化学成分和质量评价方法。二、干姜标准化研究通过分析姜种外观性状与产量的相关性,建立姜种质量标准;统计干姜药材的外观性状,以单块重量和厚度为指标,利用ANOVA法分析不同等级干姜单块重量和厚度的差异,建立干姜的商品规格等级标准;系统比较了不同展开系统、不同展开比例、不同薄层板等条件下干姜薄层色谱的差异,优化了干姜的薄层鉴别方法,能够对硫熏干姜进行鉴别。利用HPLC建立了干姜中同时测定7种姜辣素类和2种挥发油类成分测定的方法,比较了不同产地、不同规格、不同加工炮制品及硫熏干姜含量的差异,发现同一产地干姜在PCA图中基本聚为一类,说明产地对干姜质量具有一定影响;姜皮、姜丝、姜片和姜块各成分含量存在一定差异;子姜中姜酚类成分均低于母姜,而姜烯酚类成分均高于母姜;生姜、干姜和姜炭中姜酚类成分依次减少,而姜烯酚类成分和姜酮依次增加;硫熏后干姜中6-姜烯酚含量显著降低;建立了干姜HPLC特征图谱,利用特征图谱对干姜进行质量评价。结果显示:硫熏干姜和无硫干姜指纹图谱存在显著差异,硫熏干姜中6-姜烯酚峰明显低于无硫干姜,而一些其它峰明显高于硫熏干姜;生姜、干姜和姜炭指纹图谱的差异具有一定规律性,6-姜酚、8-姜酚和10-姜酚峰均在生姜中最高,干姜次之,姜炭最低,而6-姜烯酚、8-姜烯酚和10-姜烯酚峰正好相反,推测姜酚类成分在加热过程中可能脱水转化为姜烯酚类成分;利用ICP-MS技术以Ge、In为内标测定了不同产地干姜中32种无机元素含量,共检测到27种无机元素,含量相对较高的元素有K、P、Mg、Mn、Na、Fe和Zn,其中以K、P含量最高;各产地元素含量差异较大,多产地样品中Hg和Cd元素的含量超过药典通用限量;利用GC-MS技术测定了干姜中73种农药残留,共检测到敌敌畏、二苯胺、毒死蜱、二甲戊灵、pp-DDT、联苯菊酯、甲氰菊酯和溴氰菊酯8种农药残留,其中二苯胺含量最高,有6批含量高于1.5μg/g,二甲戊灵和甲氰菊酯的含量和检出率均较低;对干姜中水分、总灰分、浸出物和二氧化硫含量进行测定,61批干姜药材水分全部符合中国药典要求,总灰分有4批不达标,浸出物有7批低于药典限量,硫熏干姜中二氧化硫超标严重,最高达617.8mg/kg。三、干姜采收加工研究以干姜中6种功效成分为指标,结合主成分分析和外观性状分析,比较了现代干燥方法(鼓风干燥、微波干燥和红外干燥)和传统加工方法对干姜质量的影响,最终筛选出以鼓风60℃干燥相对较优;同时对干姜干燥过程中的水分动力学进行分析,利用weibull函数模拟干姜干燥过程的水分变化,为干姜干燥加工与现代技术结合提供参考。对比了不同采收时间干姜中成分的含量,结合主成分分析,确定云南省罗平县干姜原料基地适宜采收时间为11月中下旬。四、基于UFLC-QTOF-MS技术的干姜代谢组学研究利用UFLC-QTOF-MS技术寻找干姜的硫熏标志物,共找出10个差异性成分,一种姜烯酚类成分,两种姜烯酚衍生物类成分,七种二苯基庚烷类成分;6-姜磺酸为干姜硫熏的标志性成分,推测由6-姜烯酚与水和二氧化硫反应生成;利用UFLC-Q-TOF-MS技术探讨生姜、干姜和姜炭的差异性成分,共找到7个生姜与干姜的差异性成分,8个干姜与姜炭的差异性成分;对比生姜、干姜和姜炭的数据,发现二苯基庚烷类成分在加工炮制过程中逐渐减少;姜酚类成分含量逐渐降低,姜烯酚类成分含量逐渐升高,姜酚类成分可能会转化生成姜烯酚类成分;姜酮在加工炮制过程中含量升高。五、近红外光谱法对干姜的定量定性研究以HPLC测定的姜酮、6-姜酚、8-姜酚、6-姜烯酚和10-姜酚的含量为参考值,利用NIR技术结合TQ Analist软件建立干姜中5种成分含量测定的模型,实现了成分的快速测定;利用NIR技术结合主成分分析等统计分析,实现了对硫熏干姜的快速鉴别。

关键词：干姜质量评价指纹图谱硫熏干燥加工

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徐氏抑肝健脾方联合穴位贴敷对IBS-D肝郁脾虚证的疗效观察及对生活质置的影响

徐氏抑肝健脾方联合穴位贴敷对IBS-D肝郁脾虚证的疗效观察及对生...

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作者：孙建羽南京中医药大学

学位级别：硕士

目的:观察徐氏抑肝健脾方联合穴位贴敷治疗腹泻型肠易激综合征（IBS-D）肝郁脾虚证的临床疗效及对生活质量的影响,以客观评价其临床应用的有效性与实用性。方法:选取2018.11-2020.01南京中医药大学附属医院的住院及门诊病人75例,实际入... 详细信息

目的:观察徐氏抑肝健脾方联合穴位贴敷治疗腹泻型肠易激综合征（IBS-D）肝郁脾虚证的临床疗效及对生活质量的影响,以客观评价其临床应用的有效性与实用性。方法:选取2018.11-2020.01南京中医药大学附属医院的住院及门诊病人75例,实际入组共患者74人,脱落1人。西医诊断为IBS-D,中医辨证分型为肝郁脾虚证。按就诊顺序遵随机数字表法随机分为三组:抑肝健脾方组（炒白术15克,炒白芍15克,炒陈皮10克,炒防风10克,党参15g,茯苓15克,乌梅10克,黄连3克,煨木香10克,蝉衣6克,炙甘草6克。每日一剂,水煎服,200ml早晚各一次）,穴位贴敷组（选穴下脘、神阙、气海、关元、双侧天枢）;药物组成（每次用量约5克）:吴茱萸10～20份、肉桂10～20份、丁香8～15份、白芷8～15份、细辛8～10份、川椒8～10份,以姜汁调和。每天1次,每次8h。),抑肝健脾方联合穴位贴敷组。观察疗程共为4周（28天）,治疗前后及治疗2周（14天）后为疗效评价点,疗程结束后4周以电话或门诊随访评价复发率。观察治疗前后患者临床症状积分、SSDPRO积分、IBS-QOL积分的变化情况结果:1.一般指标比较:三组患者治疗前如性别、年龄、病程及病情程度等均具有可比性,差异不具有统计学意义（P＞0.05）,可做比较。2.临床疗效比较:抑肝健脾方联合穴位贴敷组痊愈2例,显效9例,有效13例,无效1例,总有效率96.00%:抑肝健脾方组痊愈2例,显效2例,有效19例,总有效率95.83%;穴位贴敷组显效2例,有效18例,无效5例,总有效率80.00%。三组间两两比较,提示穴位贴敷组较其他两组有明显差异性（p＜0.05）,抑肝健脾方联合穴位贴敷组与抑肝健脾方组疗效无明显差异（p＞0.05）。3.临床症状比较:三组在治疗后均有不同程度改善,总体改善情况为抑肝健脾方联合穴位贴敷组＞抑肝健脾方组＞穴位贴敷组（p＜0.05）。主症方面,在腹痛/腹部不适、腹痛欲泻泻后痛减方面,抑肝健脾方组和抑肝健脾方联合穴位贴敷组疗效无统计学意义（p＞0.05）,但均优于穴位贴敷组（p＜0.05）;大便性状方面,抑肝健脾方联合穴位贴敷组与抑肝健脾方组、穴位贴敷组比较疗效最优,有统计学意义（p＜0.05）;大便次数改善方面,三组疗效接近（p＞0.05）;次症方面,在肠鸣矢气、情志异常方面,抑肝健脾方组、抑肝健脾方联合穴位贴敷组疗效比较无统计学意义（p＞0.05）,均优于穴位贴敷组（p＜0.05）;在食欲不振方面,抑肝健脾方联合穴位贴敷组疗效最好,其次为穴位贴敷组（p＜0.05）;在腹胀、倦怠乏力、排便不尽感方面三组疗效无统计学意义（p＞0.05）。***积分比较:抑肝健脾方联合穴位贴敷组在整体维度中均优于其他两组,尤其对于F2疼痛与不适、F3消化功能、F4大便情况、F6心理方面有明显改善（p＜0.05）;抑肝健脾方组在F2疼痛与不适、F7社会关系改善程度与抑肝健脾方联合穴位贴敷组无明显差异（p＞0.05）;穴位贴敷组在F8医疗方面优于抑肝健脾方组（p＜0.05）。***-QOL积分比较:抑肝健脾方联合穴位贴敷组在焦虑不安（DY）、行为障碍（IN）、挑食（FA）、社会功能（SR）四个维度改善情况最佳（p＜0.05）;抑肝健脾方组较穴位贴敷组在健康忧虑（HW）、人际关系（RL）两个维度更能改善患者生活质量;穴位贴敷组在躯体意象（BI）维度优于抑肝健脾方组（p＜0.05）。6.药物复发率比较:三组复发率:抑肝健脾方联合穴位贴敷组（16.0%）＜抑肝健脾方组（41.7%）＜穴位贴敷组（72.0%）7.药物安全性比较:穴位贴敷组中有2例患者发生不良反应,不良反应为贴敷局部出现皮肤瘙痒,不良反应发生率为8.0%;抑肝健脾方联合穴位贴敷组中有1例患者发生轻度不良反应,同为贴敷局部皮肤瘙痒,不良反应发生率为4.0%;3例均为轻度,患者经对症处理后症状消失,完成研究疗程。结论:徐氏抑肝健脾方联合穴位贴敷,可更有效改善腹痛、情志异常、大便不尽的临床症状,对于消化功能、心理健康、行为认知、人际交往主要方面能显著提高患者生活质量,具有安全性高,降低临床复发率的特点,值得推广临床应用。

关键词：腹泻型肠易激综合征肝郁脾虚证徐氏抑肝健脾方穴位贴敷临床研究

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基于胰高血糖素/AMPK途径研究青钱柳三萜酸干预糖异生的作用及机制

基于胰高血糖素/AMPK途径研究青钱柳三萜酸干预糖异生的作用及机制

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作者：曹静静南京中医药大学

学位级别：硕士

糖尿病是威胁人类健康的慢性非传染性疾病之一,其中90%以上为2型糖尿病(T2DM)。T2DM以慢性高血糖为主要特征,其发病机制之一是肝脏糖异生异常增强,因此,挖掘抑制肝糖异生发生的药物将可能为治疗糖尿病提供新的思路。青钱柳[Cyclocarya p... 详细信息

糖尿病是威胁人类健康的慢性非传染性疾病之一,其中90%以上为2型糖尿病(T2DM)。T2DM以慢性高血糖为主要特征,其发病机制之一是肝脏糖异生异常增强,因此,挖掘抑制肝糖异生发生的药物将可能为治疗糖尿病提供新的思路。青钱柳[Cyclocarya paliurus(Batalin)Iljinsk],为胡桃科青钱柳属植物,是我国特有资源,具有降糖、降脂等功效。研究表明青钱柳三萜酸(Cyclocarya paliurus triterpenic acids,CPT)可以有效降低糖尿病小鼠高血糖,但其对肝脏糖异生的影响尚不明确。因此,本论文研究了青钱柳三萜酸干预T2DM肝脏糖异生的效应及作用机理,并体外考察了从青钱柳三萜酸中分离得到的三萜化合物对糖异生的抑制作用。第1部分:体内评价青钱柳三萜酸改善T2DM小鼠糖脂代谢紊乱的作用及初步机制探究。高脂饲养联合小剂量链脲佐菌素(STZ)多次注射以构建T2DM小鼠模型,连续灌胃给予CPT(50、200mg/kg/天)和二甲双胍(150mg/kg/天)4周,监测小鼠进食量、体重以及糖脂代谢变化。H&E染色观察肝脏脂质沉积情况,ELISA检测组织中cAMP的含量,Real-time PCR检测调控肝脏糖异生的关键酶葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6Pase)和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)的mRNA表达,Western blotting测定AMP依赖的蛋白激酶(AMPK)磷酸化水平、肝糖异生和胰高血糖素信号通路相关蛋白的表达。结果显示CPT可显著降低空腹血糖、增强葡萄糖耐量、改善胰岛素抵抗,减少高脂喂养诱发的总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)含量升高。此外,CPT还可降低肝糖产生,从基因和蛋白水平抑制G6Pase和PEPCK的表达,增加肝脏AMPK磷酸化水平,增强PDE4B活性,减少cAMP含量,降低蛋白激酶A(PKA)和其下游关键蛋白环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)磷酸化水平。以上结果表明CPT可能通过抑制cAMP/PKA/CREB信号通路下调肝脏糖异生,从而发挥治疗T2DM作用。第2部分:采用胰高血糖素诱导小鼠原代肝细胞构建体外糖异生输出模型,探究青钱柳三萜酸调控肝脏糖异生的作用及机制。采用化学试剂盒测定细胞上清中glucose含量,ELISA检测细胞中cAMP的含量,Real-time PCR检测G6Pase和PEPCK mRNA表达,Western blotting检测磷酸化AMPK、肝糖异生和胰高血糖素信号通路相关蛋白的表达,并利用AMPK抑制剂明确CPT抑制肝糖异生的作用机制。实验结果显示,与模型组相比较,CPT孵育6h后显著抑制了肝细胞的糖异生,减少了 G6Pase和PEPCK的表达;进一步研究发现,CPT降低了 cAMP含量、PKA和CREB磷酸化水平。此外,CPT还可显著增加肝细胞中AMPK磷酸化水平和PDE4B活性。而给予AMPK抑制剂Compound C干预后,可逆转CPT对cAMP/PKA信号通路和糖异生的抑制作用。上述实验结果表明CPT抑制肝糖异生作用机制可能与促进AMPK磷酸化进而抑制cAMP/PKA/CREB信号通路有关。第3部分:采用体外糖异生输出模型,筛选青钱柳三萜酸调控肝糖异生的主要活性化合物。MTT法检测青钱柳三萜酸中化合物的细胞毒性,化学试剂盒法检测细胞上清中glucose的生成量。Real-time PCR和Western blotting检测小鼠原代肝细胞G6Pase和PEPCK mRNA和蛋白表达变化。实验结果显示,青钱柳三萜酸中rjunolic acid、3β,23-dihydroxy-12-ene-28-ursolic acid 和 2α,3α,23-trihydroxyurs-12-en-28-oic 可显著降低胰高血糖素诱导的肝糖生成(HGP),降低G6Pase和PEPCK基因和蛋白表达水平。上述结果提示rjunolic acid、3β,23-dihydroxy-12-ene-28-ursolic acid 和 2α,3α,23-trihydroxyurs-12-en-28-oic 是青钱柳三萜酸中抑制糖异生的主要活性成分。综上所述,本论文发现青钱柳三萜酸可以通过激活AMPK,减少cAMP生成,下调cAMP信号通路,从而抑制肝脏糖异生,改善T2DM。同时,体外筛选出青钱柳三萜酸抑制肝糖异生的活性成分。本研究进一步完善了青钱柳降糖药效物质基础,也为糖尿病治疗提供了新策略和科学理论依据。

关键词：青钱柳三萜酸 T2DM 糖异生 AMPK

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中药挥发油透皮促渗布洛芬的作用及其制剂适应性研究

中药挥发油透皮促渗布洛芬的作用及其制剂适应性研究

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作者：吴叶鸣南京中医药大学

学位级别：硕士

中药挥发油作为一种新型的透皮吸收促进剂,与化学促渗剂相比有三个优势:1.具备良好的促渗能力;2.对皮肤的毒性较低;3.自身具有一定的药理活性。本文通过体内外透皮吸收试验结合药效学评价,选择合适的中药挥发油作为布洛芬透皮吸收促进... 详细信息

中药挥发油作为一种新型的透皮吸收促进剂,与化学促渗剂相比有三个优势:1.具备良好的促渗能力;2.对皮肤的毒性较低;3.自身具有一定的药理活性。本文通过体内外透皮吸收试验结合药效学评价,选择合适的中药挥发油作为布洛芬透皮吸收促进剂治疗痛经,并确定适用中药挥发油透皮促渗的制剂形式,开展处方工艺研究与质量评价。采用水蒸气蒸馏法提取当归挥发油,通过测定其溶解度与稳定性选择合适的体外透皮接收液,测得藁本内酯单体和其在当归挥发油中的油水分配系数（lgP）分别为1.88和2.64,制备当归挥发油的四种不同制剂（当归挥发油包合物溶液、当归挥发油包合物凝胶、当归挥发油溶液、当归挥发油凝胶）,并比较这四种制剂中藁本内酯的体外透皮吸收行为,制备含布洛芬的上述四种不同制剂,进行体外透皮试验,发现包合技术不利于当归挥发油中藁本内酯经皮吸收,也不利于当归挥发油促渗布洛芬,因此采用游离挥发油凝胶剂开展透皮促渗研究。以布洛芬作为模型药物,氮酮为阳性对照,采用Franz扩散池法,以SD大鼠腹部皮肤为屏障,进行含中药挥发油的布洛芬凝胶的体外透皮吸收试验,比较了不同种中药挥发油对布洛芬的体外透皮促渗作用。结果显示,在（当归挥发油、川芎挥发油、肉桂挥发油、香附挥发油、丁香挥发油）这5种镇痛中药挥发油中,川芎挥发油对于布洛芬的体外促渗作用最佳,增渗倍数为3.58倍,累计透过率为不含促渗剂的对照组的1.72倍。为考察中药挥发油的促渗机制,应用ATR-FTIR（衰减全反射-傅立叶变换红外光谱）,测定经中药挥发油溶液处理后皮肤角质层中脂质特征峰的变化。采用HPLC分析测定了体外透皮吸收试验中各组皮肤内残留的药物含量,以及5种中药挥发油的角质层（SC）分配系数。结果显示,各中药挥发油溶液通过与脂质的相互作用,增加了脂质的流动性,对于皮肤角质层有一定的扰动作用。各组皮内含量和角质层分配系数呈一定的规律性,分配系数增大,有利于提高药物的累计透过率。5种中药挥发油对于HaCaT表皮细胞的IC50值在（53.26～109.03）μg·mL-1范围内,明显高于氮酮的21.13μg·mL-1,3%中药挥发油溶液给药后的皮肤毒性显著低于同等浓度氮酮,说明这中药挥发油透皮促渗安全性显著优于氮酮。在建立布洛芬血药浓度分析方法的基础上,考察了 5种中药挥发油的布洛芬凝胶经皮给药后在大鼠体内的药物动力学,并结合体外透皮试验的结果,运用反卷积法,评价中药挥发油体内外促渗布洛芬结果的相关性。结果显示,在5种中药挥发油中,川芎挥发油促渗布洛芬的血药峰浓度Cmax达到（45.97±1.54）mg·L-1,为不含促渗剂的对照组的2.11倍,与不含促渗剂的对照组相对生物利用度为161.87%,体内透皮促渗效果明显优于氮酮。含中药挥发油的布洛芬凝胶透皮吸收的体内外相关性良好,线性相关系数在0.976 8～0.999 8范围内,提示体外透皮吸收试验可用于评价或预测制剂经皮给药的体内过程。采用皮下注射苯甲酸雌二醇结合缩宫素的方法,建立雌性小鼠原发性痛经模型,以扭体次数及子宫中NO、Ca2+、PGF2α等因子浓度为指标,市售口服布洛芬混悬液为阳性对照组,考察不同中药挥发油布洛芬凝胶的痛经治疗效果,结果表明,川芎挥发油组的抗痛经效果最佳,镇痛抑制率为87.80%,能显著提高子宫中NO浓度、降低Ca2+水平,且作用较口服布洛芬组和氮酮组好。因此最终选择川芎挥发油作为布洛芬治疗痛经的外用制剂的促渗剂。应用微乳技术改善外用制剂中中药挥发油的稳定性。选择合适的乳化剂、助乳化剂,考察其不同组合和比例,绘制伪三元相图,以外观和粒径为指标,最终确定微乳处方为:布洛芬:川芎挥发油:混合表面活性剂（Cremophor RH40:Transcutol P（3:1））:水=1:3:7:25。通过调整处方中各辅料的用量,以外观均匀度为指标,确定微乳凝胶膏剂的处方比例（质量）为:卡波姆940:聚丙烯酸钠:甘羟铝:酒石酸:明胶:微乳:水=1:4:0.07:0.1:6:37.6:128,并确定制备工艺。采用Franz扩散池法进行体外透皮吸收试验,比较微乳凝胶膏剂、微乳凝胶、含药凝胶中布洛芬的经皮吸收效果。结果显示,微乳凝胶膏剂体外经皮吸收的效果最佳,增渗倍数达到3.96倍。采用HPLC法测定微乳凝胶膏剂在贮存过程中,布洛芬和藁本内酯的含量变化,评价其稳定性,并依据药典中凝胶膏剂项下的相关规定,考察了制剂的赋形性、含膏量、含量均匀度等指标。结果显示,川芎挥发油在制成微乳凝胶膏剂后稳定性有明显提高。布洛芬川芎挥发油微乳凝胶膏剂的质量经检查符合药典制剂通则要求。

关键词：中药挥发油布洛芬透皮吸收促进剂微乳凝胶膏剂痛经药动学

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无基质型甘草次酸/甘草酸口服纳米制剂的构建

无基质型甘草次酸/甘草酸口服纳米制剂的构建

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作者：黄容南京中医药大学

学位级别：硕士

甘草是应用最为广泛的传统中药之一。现代药理学认为甘草具有调节机体免疫功能、抗菌、抗炎、抗病毒之功效。其中甘草次酸(glycyrrhetinic acid,GA)、甘草酸(glycyrrhizic acid,GL)是甘草中的两个重要生物活性物质。GA与GL均属于齐墩果... 详细信息

甘草是应用最为广泛的传统中药之一。现代药理学认为甘草具有调节机体免疫功能、抗菌、抗炎、抗病毒之功效。其中甘草次酸(glycyrrhetinic acid,GA)、甘草酸(glycyrrhizic acid,GL)是甘草中的两个重要生物活性物质。GA与GL均属于齐墩果烷型五环三萜类皂苷,都具有抗炎,保肝等多种药理作用,因此被广泛研究。然而GA具有低溶解度,GL低渗透性导致肠道吸收差的缺陷,限制了两者的临床应用。本课题针对GA的难溶性、GL的低渗透,提出构建GA与GL的自组装纳米粒(GA/GL NPs),以期提高GA的溶解度的同时能够提高GL的渗透性,提高两者的生物利用度,同时避免了使用无药效的载体,使纳米制剂更易临床化。在本研究中,首先通过超声反溶剂法制备无基质型GA/GLNPs的纳米分散体系。通过单因素考察GA与GL的不同摩尔比、GA的浓度、超声功率和超声时间对粒径(nm)、多分散系数(PDI)、有效组装率的影响,得出最佳工艺制备的纳米粒的粒径为123.92±1.44 nm、PDI为0.16±0.02,zeta电位为-34mV,有效组装率大于95%,7天内放置稳定性好。透射电镜(TEM)观察GA/GLNPs为球状,分布较为均一。释放结果表明,GA在模拟肠液中释放总量与原料药相比有显著提高。其次研究GA/GLNPs中GA与GL之间的相互作用。红外光谱(FTIR)与核磁共振氢谱(1H-NMR)结果中的峰位移证明GA与GL之间存在一定的相互作用,且通过差示量热扫描(DSC)与X-射线衍射(XRPD),证明GA以无定型状态均匀与GL混合。分子动力学模拟(MD)结果得知GA与GL形成聚集体,并且两者之间存在较强的氢键相互作用,体系构建成功。采用Caco-2单层细胞模型进行细胞水平上的研究。MTT实验研究GA/GLNPs纳米粒的细胞毒性,筛选药物浓度;通过AP→BL侧的跨膜转运计算渗透系数(Papp),得出GA/GL NPs中GA的渗透性是原料药的1.5倍(P<0.05),制剂中GL的渗透性与原料药相比提高了 3.83倍(P<0.01),显著提高了 GL的跨膜吸收。GA/GLNPs组的Cmax、AUC0-∞与GA、GL原料药组相比有显著提高,表明GA与GL制备成GA/GLNPs后能显著提高GA和GL的生物利用度,结合释放实验及渗透性实验结果分析,表明具有一定的体内体外相关性。

关键词：甘草次酸甘草酸自组装释放渗透性生物利用度

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基于“筋骨调衡，以筋为先”理论手法治疗退行性腰椎失稳症的临床疗效观察

基于“筋骨调衡，以筋为先”理论手法治疗退行性腰椎失稳症的临床...

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作者：丁俊峰南京中医药大学

学位级别：硕士

目的:观察基于“筋骨调衡,以筋为先”手法治疗退行性腰椎失稳症临床疗效,为“筋骨调衡,以筋为先”理论对手法治疗的指导作用提供依据,提高手法治疗退行性腰椎失稳症的疗效。方法:将符合纳入标准和排除标准的75例退行性腰椎失稳症患者,... 详细信息

目的:观察基于“筋骨调衡,以筋为先”手法治疗退行性腰椎失稳症临床疗效,为“筋骨调衡,以筋为先”理论对手法治疗的指导作用提供依据,提高手法治疗退行性腰椎失稳症的疗效。方法:将符合纳入标准和排除标准的75例退行性腰椎失稳症患者,按照随机数字表法将75例退行性腰椎失稳症患者随机地分为3个不同的治疗组:A组25例,单纯采用腰背肌功能锻炼治疗;B组25例,采用口服塞来昔布胶囊联合腰背肌功能锻炼治疗;C组25例,采用手法联合腰背肌功能锻炼治疗。采用VAS评分、JOA评分、ODI评分和腰背部竖脊肌肌张力检测对疗效进行评估。结果:1.研究过程中因患者无法配合治疗或在治疗、随访期间采用其他治疗方法而脱落者共4例,A组脱落2例,B组脱落1例,C组脱落1例,最终完成治疗病获得随访的病例有A组23例,B组24例,C组24例,最终共有71名退行性腰椎失稳症患者顺利完成此项临床研究并获得随访。三组患者年龄、性别、病程时间经检验比较差异无明显统计学意义（P＞0.05）,表明这三组患者的基线资料具有可比性。***评分:①将三组患者治疗前的VAS评分互相进行比较,各组之间评分差异均无统计学意义。②三组数据组内治疗前后两两比较,A组治疗后即刻、治疗后1个月随访分别与治疗前相比,疼痛均有所缓解（P＜0.05）,治疗后1个月随访与治疗后即刻相比,疼痛亦有明显改善（P＜0.05）;B组治疗后即刻、治疗后1个月随访与治疗前相比,疼痛均有所缓解（P＜0.05）,治疗后1个月随访与治疗后即刻相比,疼痛亦有明显改善（P＜0.05）;C组治疗后即刻、治疗后1个月随访与治疗前相比,疼痛均有所缓解（P＜0.05）,治疗后1个月随访与治疗后即刻相比,疼痛亦有明显改善（P＜0.05）。③三组数据之间两两比较,在治疗前三组评分之间差异均无统计学意义（P＞0.05）;B组和C组在治疗后即刻评分与A组治疗后即刻评分相比均有明显改善,差异具有统计学意义（P＜0.05）;B组与C组在治疗后即刻相比评分差异无统计学意义（P＞0.05）;B组与C组治疗后1个月随访时相比评分差异无统计学意义（P＞0.05）。***评分:①三组患者治疗前的JOA评分互相进行比较,各组之间评分差异均无统计学意义。②三组数据组内治疗前后两两比较,A组治疗后即刻与治疗前评分相比,差异无统计学意义（P＞0.05）,治疗后1个月随访与治疗后即刻相比,疼痛有明显改善（P＜0.05）;B组治疗后即刻、治疗后1个月随访与治疗前相比,疼痛均有所缓解（P＜0.05）,治疗后1个月随访与治疗后即刻评分相比,差异无统计学意义（P＞0.05）;C组治疗后即刻、治疗后1个月随访与治疗前相比,疼痛均有所缓解（P＜0.05）,治疗后1个月随访与治疗后即刻评分相比,差异则无统计学意义（P＞0.05）。③三组数据之间两两比较,在治疗前三组评分之间差异均无统计学意义（P＞0.05）;B组、C组在治疗后即刻评分与A组治疗后即刻评分相比差异均无统计学意义（P＞0.05）;B组与C组在治疗后即刻相比评分差异亦无统计学意义（P＞0.05）;B组、C组治疗后1个月随访时与A组治疗后1个月随访时相比疼痛明显缓解（P＜0.05）;B组与C组治疗后1个月随访时相比疼痛改善明显（P＜0.05）。***评分:①对三组患者治疗前的ODI评分互相进行比较,各组之间评分差异均无统计学意义。②三组数据组内治疗前后两两比较,A组治疗后即刻、治疗后1个月随访分别与治疗前相比,腰部功能障碍均有所缓解（P＜0.05）,治疗后1个月随访与治疗后即刻相比,差异有统计学意义（P＜0.05）;B组治疗后即刻、治疗后1个月随访与治疗前相比,日常生活质量有所改善（P＜0.05）,治疗后1个月随访与治疗后即刻相比,差异无统计学意义（P＞0.05）;C组治疗后即刻、治疗后1个月随访与治疗前相比,差异具有统计学意义（P＜0.05）,治疗后1个月随访与治疗后即刻评分相比,腰部功能得到明显改善,差异具有统计学意义（P＜0.05）。③三组数据之间两两比较,在治疗前三组评分之间差异均无统计学意义（P＞0.05）;B组和C组在治疗后即刻评分与A组治疗后即刻评分相比均有明显改善,差异具有统计学意义（P＜0.05）;B组与C组在治疗后即刻相比评分差异无统计学意义（P＞0.05）;A组、B组治疗后1个月随访与C组治疗后1个月随访时相比评分差异具有统计学意义（P＜0.05）;B组治疗后1个月随访评分与A组治疗后1个月随访评分相比差异无统计学意义（P＞0.05）。5.双侧腰背部竖脊肌肌张力检测:①对三组患者治疗前的双侧腰部椎旁肌肉200g压力位（L200g）移值即腰背部肌张力互相进行比较,各组之间评分差异均无统计学意义。②三组数据组内治疗前后两两比较,A组治疗后即刻、治疗后1个月随访分别与治疗前相比,双侧肌张力改善均

关键词：退行性腰椎失稳症推拿手法以筋为先临床疗效

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针药联合治疗帕金森非运动症状改变的临床研究

针药联合治疗帕金森非运动症状改变的临床研究

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作者：相晨阳南京中医药大学

学位级别：硕士

目的:本研究通过运用针刺联合药物治疗帕金森病非运动症状,观察其对于帕金森病患者非运动症状的改变情况,并与常规西药治疗帕金森病非运动症状相比较,采用数据分析针药联合治疗对帕金森病非运动症状（Non-motor Symptoms,NMS）患者病情... 详细信息

目的:本研究通过运用针刺联合药物治疗帕金森病非运动症状,观察其对于帕金森病患者非运动症状的改变情况,并与常规西药治疗帕金森病非运动症状相比较,采用数据分析针药联合治疗对帕金森病非运动症状（Non-motor Symptoms,NMS）患者病情程度及生活质量的改善情况,明确针药联合治疗对NMS的临床疗效及其优越性,为临床治疗帕金森病非运动症状开辟一条新路径、新思路,为针药联合治疗NMS的进一步研究和临床推广提供相应的理论依据。方法:本研究将来自南京中医药大学附属苏州医院（苏州市中医医院）针灸科门诊、苏州工业园区星湖医院老年科门诊及住院患者,诊断为帕金森病的60例患者采用随机分组方式分成针药联合组30例和常规西药组30例。入组后由专业医护人员指导患者根据个体情况进行常规抗帕金森药物治疗,并达到有效维持剂量,若原有高血压病、冠心病、糖尿病等慢性基础疾病则维持原有用药。对照组使用单纯西药治疗,治疗组则在常规药物治疗基础上,同时加用针刺法,治疗时间连续8周,4周为1个疗程,共2个疗程。治疗前后分别运用非运动症状评价量表（Non-motor Symptoms Scale,NMSS）、统一帕金森病评定量表（Unified Parkinson’s Disease Rating Scale,UPDRS）、帕金森病生活质量问卷（Parkinson’s disease questionnaire,PDQ-39）评估患者的一般状态、运动神经功能、自主神经症状、感觉与精神状态、认知情况、并发症及生活质量等,对比临床疗效。结果:（1）治疗组与对照组治疗后NMSS量表评分均低于治疗前,治疗组治疗后NMSS评分较对照组有显著下降,且差异有显著统计学意义（P＜0.01）;（2）两组总有效率相比,治疗组高于对照组（P＜0.05）,说明针药联合治疗法对帕金森病非运动症状的改善作用比单纯的西药治疗更显著;（3）两组治疗后UPDRS量表总评分均较治疗前下降（P＜0.05）,说明经治疗后两组患者的帕金森严重程度较前减轻,针药联合治疗法对减轻帕金森病的严重程度优于单纯的西药治疗,且治疗组在改善精神、行为和情绪及治疗并发症方面胜于对照组;（4）两组治疗前后的PDQ-39差值变化具有显著统计学意义（P＜0.01）,说明针药联合治疗可以有效提高帕金森患者的生活质量。结论:从治疗后临床疗效观察,帕金森病非运动症状的严重程度可通过针药联合治疗来减轻,对比单纯使用西药治疗具有一定的优势。针刺结合常规药物的方法治疗帕金森非运动症状的效果及生活质量的改善程度,比单纯运用常规药物治疗更显著,针药结合治疗有协同作用,这对于临床上制定帕金森非运动症状患者的中西结合治疗方案具有实际的参考意义。

关键词：帕金森病非运动症状针药联合临床研究

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补肾活血法预防未破裂卵泡黄素化周期的临床研究及思考

补肾活血法预防未破裂卵泡黄素化周期的临床研究及思考

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作者：赖宇晶南京中医药大学

学位级别：硕士

未破裂卵泡黄素化综合征(LUFS)是与不孕密切相关的排卵障碍性疾病。导师施艳秋教授认为LUFS患者常反复发生未破裂卵泡黄素化周期(LUF周期)使患者受孕困难,临床上采取措施预防LUF周期的形成和复发非常重要。导师认为LUFS主要的病因病机... 详细信息

未破裂卵泡黄素化综合征(LUFS)是与不孕密切相关的排卵障碍性疾病。导师施艳秋教授认为LUFS患者常反复发生未破裂卵泡黄素化周期(LUF周期)使患者受孕困难,临床上采取措施预防LUF周期的形成和复发非常重要。导师认为LUFS主要的病因病机为肾虚血瘀,故以补肾活血为大法预防LUF周期。目的：运用补肾活血法预防LUF周期的形成和复发,观察该法的临床效果并探讨其作用机制,为中医药预防LUFS患者的LUF周期再现拓展思路。方法：选择符合纳入标准的LUFS患者30例,随机分为两组,中药组15例应用补肾活血法(具体为经后开始予补肾奠基汤口服,经间联合活血促排方浴足),西药组15例应用人绒毛膜促性腺激素(HCG)促排,连续观察三个疗程(一个月经周期为一个疗程),比较两组的排卵率、LUF周期复发率、妊娠率、基础体温(BBT)类型、高温相HPS评分等,观察患者中医症状的改善情况,患者的既往病史与LUF周期复发之间的相关性,中药组临床效果与不孕类型、病程等的相关性。探讨补肾活血法预防LUF周期的简要机理。结果：1.中药组排卵率高于西药组(P0.05);2.中药组患者肾虚血瘀的中医临床症状能得以明显改善,症状积分与西药组比较有显著性差异(P中医临床症状等方面有较好的效果。该方法体现了中医学“治未病”、“辨证论治”、“内病外治”等思想和特色,其机理可能为通过整体调节女性生殖轴,改善卵巢供血等有关。

关键词：未破裂卵泡黄素化综合征未破裂卵泡黄素化周期补肾活血治未病内病外治

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祛风止咳方治疗变应性咳嗽的临床研究

祛风止咳方治疗变应性咳嗽的临床研究

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作者：黄叶南京中医药大学

学位级别：硕士

目的：观察祛风止咳方治疗变应性咳嗽的临床疗效,并通过对血清IgE及Eos的观察,探讨祛风止咳方对变应性咳嗽的机制。方法：将60例变应性咳嗽患者随机分为两组,其中治疗组30例,予以祛风止咳方加味治疗;对照组30例,予以氯雷他定+喷托... 详细信息

目的：观察祛风止咳方治疗变应性咳嗽的临床疗效,并通过对血清IgE及Eos的观察,探讨祛风止咳方对变应性咳嗽的机制。方法：将60例变应性咳嗽患者随机分为两组,其中治疗组30例,予以祛风止咳方加味治疗;对照组30例,予以氯雷他定+喷托维林治疗,观察患者证候积分、血清IgE、Eos及主要症候积分等指标。结果：治疗组总有效率86.67%,对照组总有效率76.67%,差异有统计学意义;治疗组及对照组两组治疗前后症状积分及IgE均有改善,但治疗组较对照组比较症状积分及血清IgE改善明显,具有统计学差异;治疗组及对照组治疗前后Eos均有改善,但治疗组较对照组改善程度比较差异无统计学意义。结论：风咳是变应性咳嗽的主要症候类型,自拟方祛风止咳方能显著改善变应性咳嗽患者症状,可以显著降低变应性咳嗽患者的变态反应水平,显著改善患者咳嗽,咽痒等主要症状,提高了患者日常生活质量,从而提高临床疗效。

关键词：变应性咳嗽祛风止咳方氯雷他定喷托维林血清IgE

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慢性萎缩性胃炎患者的体质特点及与中医证候、焦虑抑郁状态的关系研究

慢性萎缩性胃炎患者的体质特点及与中医证候、焦虑抑郁状态的关系...

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作者：张杰南京中医药大学

学位级别：硕士

目的:研究慢性萎缩性胃炎患者的体质特点及与中医证候类型、焦虑抑郁状态的关系,为临床诊治本病提供理论依据。方法:收集符合本研究诊断及纳入标准的CAG患者,填写CAG调查问卷、中医体质分类判定表、证候调查表、焦虑及抑郁自评量表。记... 详细信息

目的:研究慢性萎缩性胃炎患者的体质特点及与中医证候类型、焦虑抑郁状态的关系,为临床诊治本病提供理论依据。方法:收集符合本研究诊断及纳入标准的CAG患者,填写CAG调查问卷、中医体质分类判定表、证候调查表、焦虑及抑郁自评量表。记录调查结果,运用SPSS25.0软件对录入的数据进行统计分析。结果:(1)收集的173例患者中,女性发病人数略高于男性,男女比例为1:1.19。年龄范围为28-82岁,平均年龄为56.62±10.34岁,发病人数以50-59岁年龄段多见,年龄分层以中年人多见。有明显发病诱因者占84.39%,吸烟者占27.17%,饮酒者占20.23%,有饮食偏好者占86.13%,饮食不规律中进食快占26.59%,从业人员中,59.30%的人反映工作强度及压力较大。(2)调查的CAG患者中,气虚质35例(20.23%),人数最多,阴虚质28例(16.18%),气郁质25例(14.45%),阳虚质及湿热质各23例(13.29%),痰湿质18例(10.40%),平和质10例(5.78%),血瘀质9例(5.20%),特禀质2例(1.16%)。其中偏颇体质与平和质比较有显著差异(P).05)。(3)CAG患者不同性别的体质分布有差异(P0.05)。(4)有无HP感染的患者体质分布存在差异(P中医证候分布存在差异(P<0.05)。气虚质多见脾胃虚弱证(60.0%),阳虚质多见脾胃虚弱证(52.2%),阴虚质多见胃阴不足证(42.9%),湿热质多见脾胃湿热证(60.9%),气郁质多见肝胃气滞证(44.0%)。(6)本研究中有159人填写SAS、SDS调查表,无焦虑抑郁者67人,焦虑者33人,抑郁者27人,存在焦虑抑郁者32人。CAG患者不同体质的焦虑状态差异有显著统计学意义(P<0.01),不同体质的抑郁状态差异有显著统计学意义(P<0.01),气郁质、湿热质患者易出现焦虑状态,气郁质、痰湿质患者易出现抑郁状态。结论:(1)CAG患者以气虚质、阴虚质、气郁质、阳虚质、湿热质为常见体质类型。(2)CAG患者体质分布与性别有关,男性以气虚质、痰湿质、湿热质多见,女性以阴虚质、气虚质、气郁质多见。(3)有无HP感染的患者体质分布存在差异,HP 阳性患者多见湿热质。(4)CAG患者各证候出现频数由高到低依次为脾胃虚弱证、脾胃湿热证、肝胃气滞证、胃阴不足证、肝胃郁热证、胃络瘀血证。(5)CAG患者体质分布与证候类型之间具有联系,气虚质、阳虚质多见脾胃虚弱证,阴虚质多见胃阴不足证,湿热质多见脾胃湿热证,气郁质多见肝胃气滞证。(6)CAG患者的体质分布与焦虑状态、抑郁状态存在关联性,气郁质、湿热质患者易出现焦虑状态;气郁质、痰湿质患者易出现抑郁状态。

关键词：慢性萎缩性胃炎中医体质证候类型焦虑抑郁状态

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