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基于脑肠轴探讨益气活血化浊解毒方对脑缺血再灌注损伤大鼠的影响

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中国免疫学杂志 2024年第08期 1709-1717页

作者：孙亚萍石瑞孙玲玲谢占维崔怡娴田军彪河北中医学院研究生学院河北中医学院第一附属医院河北省中医院

目的：基于脑肠轴探讨益气活血化浊解毒方（YHHJP）对脑缺血再灌注损伤（CIRI）大鼠脑组织炎症因子、脑和结肠组织紧密连接、肠道菌群及其代谢产物的影响。方法：50只SPF级雄性SD大鼠随机分为假手术组（Sham）、模型组（MCAO）、YHHJP... 详细信息

目的：基于脑肠轴探讨益气活血化浊解毒方（YHHJP）对脑缺血再灌注损伤（CIRI）大鼠脑组织炎症因子、脑和结肠组织紧密连接、肠道菌群及其代谢产物的影响。方法：50只SPF级雄性SD大鼠随机分为假手术组（Sham）、模型组（MCAO）、YHHJP低、中、高剂量组（TCM-L/TCM-M/TCM-H）。采用Zea Longa线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞再灌注模型，治疗3 d后观察神经功能缺损评分，TTC染色计算脑梗死面积，尼氏染色观察脑组织病理形态改变，HE染色观察脑和结肠组织病理形态改变，ELISA检测脑组织IL-1β、IL-6、TNF-α和血清LPS含量，生物化学法检测血清D-乳酸（D-LA）含量，实时荧光定量PCR检测脑组织ZO-1、Claudin-5和结肠组织ZO-1、Claudin-1基因表达，16S rDNA高通量测序检测肠道菌群。结果：与假手术组相比，模型组大鼠脑和结肠组织病理损伤严重，肠道菌群微生态结构存在明显差异，神经功能损伤加重，脑梗死面积增加，脑组织IL-1β、IL-6、TNF-α和血清LPS、D-LA含量升高，脑组织ZO-1、Claudin-5及结肠组织ZO-1、Claudin-1基因表达降低（P<0.05）。与模型组相比，YHHJP低、中、高剂量组大鼠脑组织和结肠组织病理损伤减轻，肠道菌群微生态紊乱得到改善，神经功能损伤减轻，脑梗死面积明显缩小，脑组织IL-1β、IL-6、TNF-α含量显著降低，结肠组织ZO-1、Claudin-1基因表达显著升高（P<0.05）;YHHJP中、高剂量组大鼠血清LPS、D-LA含量明显降低，脑组织ZO-1、Claudin-5基因表达显著升高（P<0.05）。结论：YHHJP可改善CIRI，其机制可能与调节肠道菌群多样性，抑制肠道细菌代谢产物LPS、D-LA释放，增加紧密连接蛋白ZO-1、Claudin-5、Claudin-1基因表达，下调炎症因子分泌有关。

关键词：脑肠轴益气活血化浊解毒方脑缺血再灌注损伤炎症因子肠道菌群代谢产物紧密连接

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经典名方左归饮的历史沿革与关键信息考证

中国实验方剂学杂志 2024年

作者：冀迅孙晓霞时洋凯魏凯峰刘涛南京中医药大学中医学院

左归饮出自明代张介宾所著《景岳全书》，于2023年被收录于《古代经典名方目录（第二批）》。该研究遵循《古代经典名方关键信息考证原则》对古今文献中左归饮的方名源流、配伍组成、药物的基原、炮制、剂量、煎煮法、功效主治等关键信... 详细信息

左归饮出自明代张介宾所著《景岳全书》，于2023年被收录于《古代经典名方目录（第二批）》。该研究遵循《古代经典名方关键信息考证原则》对古今文献中左归饮的方名源流、配伍组成、药物的基原、炮制、剂量、煎煮法、功效主治等关键信息进行考证。研究发现左归饮古今配伍组成、药物剂量与炮制、煎煮服用方法等基本沿用原方。左归饮原方剂量换算成现代剂量为熟地黄41.03 g、山药7.46 g、枸杞子7.46 g、炙甘草3.73 g、茯苓5.595 g、山茱萸5.595 g；方中药物基原基本清晰，熟地黄选用玄参科植物地黄Rehmannia glutinosa 新鲜或干燥块根炮制加工而成；山药选用薯蓣科植物薯蓣Dioscorea opposita 的干燥根茎；枸杞子选用茄科植物宁夏枸杞Lycium barbarum 的干燥成熟果实；茯苓选用多孔菌科真菌茯苓Poria cocos的干燥菌核；山茱萸选用山茱萸科植物山茱萸Cornus officinalis 的干燥成熟果肉；炙甘草选用豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis 的干燥根和根茎。其服用方法为上诸药加水600 mL，煎至140 mL，空腹服用。左归饮功擅滋阴补肾，主治治肾阴不足、阴衰阳盛证，如腰酸遗泄，盗汗，口燥咽干，口渴欲饮，舌光红，脉细数等。古今多用于治疗多种以肾阴虚证为主的内、妇科以及神经、循环、生殖系统疾病。但现代文献对左归饮的现代应用研究及治疗机制研究不多，且市场未见规范化左归饮制剂，开发利用程度不高，仍有很大的研究空间。

关键词：经典名方左归饮功效主治煎服法文献考证基原肾阴虚临床应用

苓桂术甘汤促进星形胶质细胞内化降解β淀粉样蛋白机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第11期30卷 1-8页

作者：高敏陈晓婧田清蓉凌云周西彬周春祥南京中医药大学中医学院中西医结合学院南京210046

目的:通过观察苓桂术甘汤(LGZGT)含药血清对β淀粉样蛋白1-42(Aβ_(1-42))诱导大鼠原代星形胶质细胞(AS)阿尔茨海默病(AD)病理模型的影响,探讨LGZGT对Aβ的吞噬及降解作用。方法:以Aβ_(1-42)诱导AS建立AD模型,实验分为正常组、模型组、... 详细信息

目的:通过观察苓桂术甘汤(LGZGT)含药血清对β淀粉样蛋白1-42(Aβ_(1-42))诱导大鼠原代星形胶质细胞(AS)阿尔茨海默病(AD)病理模型的影响,探讨LGZGT对Aβ的吞噬及降解作用。方法:以Aβ_(1-42)诱导AS建立AD模型,实验分为正常组、模型组、LGZGT低、中、高剂量(LGZGT-L、LGZGT-M、LGZGT-H)含药血清组(1.2、2.4、4.8 g·kg^(-1))、盐酸多奈哌齐含药血清组(0.5 mg·kg^(-1)),模型组加入Aβ_(1-42),终浓度为10μmol·L-1,LGZGT-L、LGZGT-M、LGZGT-H含药血清组在模型组的基础上均加入10%的含药血清。通过细胞增殖活力检测(CCK-8)试剂盒检测各组细胞活力;乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测各组细胞LDH活力;用倒置显微镜观察各组细胞形态;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Aβ相关降解酶胰岛素降解酶(IDE)、组织蛋白酶D(CTSD)的表达;采用免疫荧光法测定组织蛋白酶B(CTSB)的荧光强度;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组细胞Aβ_(1-42)含量。结果:与空白组比较,各组AS活力下降,且不同浓度的Aβ_(1-42)对AS的增殖具有抑制作用;给药后,与正常组比较,模型组的细胞存活率明显降低(P<0.05);与模型组比较,LGZGT-H、盐酸多奈哌齐含药血清组细胞存活率明显增加(P<0.05,P<0.01);与正常组比较,模型组的细胞的LDH活力明显升高(P<0.05),且细胞胞体肥大肿胀,突起增多且延长,细胞相互聚集成团,提示细胞损伤较为明显;与模型组比较,盐酸多奈哌齐、LGZGT-L、LGZGT-M、LGZGT-H含药血清组细胞LDH活力显著降低(P<0.01);给药后,LGZGT-M组、LGZGT-H、盐酸多奈哌齐含药血清组细胞胞体肿胀有所改善,细胞突起短,细胞聚集结团减少;与正常组比较,模型组IDE、CTSD的表达明显降低(P<0.05);与模型组比较,LGZGT-M、LGZGT-H含药血清组能够明显上调IDE的表达(P<0.05);与模型组比较,LGZGT-L、LGZGT-M、LGZGT-H、盐酸多奈哌齐含药血清组均能明显上调CTSD的表达(P<0.01);与正常组比较,模型组的CTSB的平均荧光强度明显降低(P<0.05),与模型组比较,LGZGT-L、LGZGT-M、LGZGT-H、盐酸多奈哌齐含药血清组CTSB平均荧光强度增强(P<0.05,P<0.01);与正常组比较,模型组的细胞胞内Aβ_(1-42)含量升高(P<0.05);给药后,与模型组比较,LGZGT-L、LGZGT-M、LGZGT-H、盐酸多奈哌齐含药血清组细胞胞内Aβ_(1-42)含量显著降低(P<0.01),LGZGT含药血清以剂量依赖性的形式降低Aβ_(1-42)。结论:LGZGT对Aβ_(1-42)诱导的AS具有保护作用,还可促进Aβ的降解,其机制可能与减轻Aβ毒性,增强细胞活力,促进IDE、CTSD、CTSB的表达及恢复溶酶体的功能相关。

关键词：阿尔茨海默病(AD) 星形胶质细胞(AS) 苓桂术甘汤(LGZGT) β淀粉样蛋白(Aβ) 痰饮

基于Bcl-2/Bax/Caspase-3信号通路探究参红通络方对心肌缺血再灌注损伤大鼠细胞凋亡的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年第11期30卷 104-110页

作者：赖颖蓉赵倩琳姜丽红长春中医药大学中医学院长春130117 长春中医药大学附属医院长春130117

目的:探讨参红通络方加减对心肌缺血再灌注损伤(MI/RI)大鼠细胞凋亡的作用机制。方法:60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、参红通络方剂低、中、高剂量组和辛伐他汀组。除空白组外,采用线栓结扎冠状动脉左前降支方式制备心肌缺血再灌注... 详细信息

目的:探讨参红通络方加减对心肌缺血再灌注损伤(MI/RI)大鼠细胞凋亡的作用机制。方法:60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、参红通络方剂低、中、高剂量组和辛伐他汀组。除空白组外,采用线栓结扎冠状动脉左前降支方式制备心肌缺血再灌注损伤大鼠模型(MI/RI模型),造模成功后第1天起,空白组(生理盐水1.0 mL·kg^(-1))、模型组(生理盐水1.0 mL·kg^(-1))、参红通络方剂低、中、高剂量组(1.031、2.063、4.126 g·kg^(-1)参红通络方标准浓缩液)和辛伐他汀组(辛伐他汀0.71 mg·kg^(-1)),定时灌胃给药,每日1次,连续2周。苏木素-伊红(HE)染色法观察心肌细胞病理形态学变化;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平变化;原位末端转移酶标记技术(TUNEL)染色法检测大鼠心肌细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和胱天蛋白酶-3(Caspase-3)表达水平。结果:与空白组比较,模型组HE染色可见心肌细胞排列紊乱,纤维不完整,心肌细胞小灶性坏死,并伴有炎性细胞浸润;血清CK-MB、IL-6和TNF-α水平明显上升(P<0.05);心肌细胞凋亡率明显升高(P<0.05),Bax、Caspase-3蛋白表达水平则明显升高,Bcl-2明显下降(P<0.05);与模型组比较,参红通络方剂加减低、中、高剂量组可明显降低CK-MB、IL-6和TNF-α水平(P<0.05);明显下调心肌细胞凋亡率(P<0.05);Bax、Caspase-3蛋白显著降低,Bcl-2表达水平明显增加(P<0.05)。参红通络方剂加减组中Bax、Caspase-3蛋白随参红通络方给药剂量的增加而明显降低,Bcl-2表达水平随参红通络方给药剂量的增加而明显升高(P<0.05)。结论:参红通络方加减可通过减轻心肌组织病理损伤并降低心肌细胞凋亡,可能与抑制Caspase-3、Bax表达、促进Bcl-2水平表达有关。

关键词：参红通络方心肌缺血再灌注损伤细胞凋亡 B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2) Bcl-2相关X蛋白(Bax) 胱天蛋白酶-3(Caspase-3)

原发性失眠患者奖赏网络关键核团在静息态fMRI功能连接的改变

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海南医学院学报 2024年

作者：孙曌冉彬艳阚丽娜黄禄宇吴琼王乙翔康晓娜李丹丹王晓彤王小龙靳丹阳沈巍海南医学院中医学院海南医学院第一附属医院中山市中医院

目的：利用功能性磁共振成像（fMRI）技术观察原发性患者奖赏网络区域中脑腹侧被盖（Ventral ttegmental area，VTA）以及伏隔核（Nucleus accumbens，NAcc）脑功能连接的改变。方法：28例原发性失眠比较26例健康对照组脑功能成像的改... 详细信息

目的：利用功能性磁共振成像（fMRI）技术观察原发性患者奖赏网络区域中脑腹侧被盖（Ventral ttegmental area，VTA）以及伏隔核（Nucleus accumbens，NAcc）脑功能连接的改变。方法：28例原发性失眠比较26例健康对照组脑功能成像的改变，并分析中脑腹侧被盖以及伏隔核功能连接的改变与失眠的情绪障碍障碍之间的关系。结果：比较原发性失眠患者对比健康对照组，VTA与NAcc全脑的功能连接均降低，与VTA-l功能连接增降低的脑区为双侧前扣带回、左侧眶额回，与VTA-r功能连接增降低的脑区为双侧前扣带回、左侧眶额回、右侧中央前回，与NAcc-l功能连接降低的脑区为双侧丘脑、辅助运动区，与NAcc-r功能连接降低的脑区为双侧丘脑、小脑。结论：睡眠障碍会显著降低奖赏网络中VTA与NAcc的功能连接，说明长期睡眠障碍可能影响在原发性失眠患者奖赏处理能力，导致失眠患者情感功能发生障碍。

关键词：功能性磁共振成像广泛性焦虑障碍脑功能前扣带回前额叶

黄芪-莪术-重楼配伍激活PERK/eIF2α/ATF4信号通路介导抑制结直肠癌生长转移作用研究

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南京中医药大学学报 2024年第3期40卷 240-248页

作者：张慧兰郭文晖苏婷婷陈思余倩慧殷启航万林鹭王旭唐德才南京中医药大学中医学院江苏南京210023

目的探讨黄芪-莪术-重楼(芪-术-蚤)配伍通过激活PERK/eIF2α/ATF4信号通路介导内质网应激(ER stress)抗结直肠癌生长、转移相关作用。方法BALB/c雄性小鼠30只随机分为假手术组、模型组、5-氟尿嘧啶(5-FU)组(25 mg·kg^(-1))、芪-术-蚤... 详细信息

目的探讨黄芪-莪术-重楼(芪-术-蚤)配伍通过激活PERK/eIF2α/ATF4信号通路介导内质网应激(ER stress)抗结直肠癌生长、转移相关作用。方法BALB/c雄性小鼠30只随机分为假手术组、模型组、5-氟尿嘧啶(5-FU)组(25 mg·kg^(-1))、芪-术-蚤高剂量组(5.85 g·kg^(-1))、芪-术-蚤低剂量组(2.925 g·kg^(-1)),每组6只,构建结直肠癌原位移植瘤小鼠模型,给药15 d后,通过肿瘤体积大小变化评估芪-术-蚤配伍对肿瘤生长的干预效果;通过HE染色评估芪-术-蚤角药配伍干预后小鼠肝脏组织、肿瘤组织变化情况。采用ELISA法检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平变化;Western blot检测PERK/eIF2α/ATF4信号通路和上皮细胞-间充质转化(EMT)相关蛋白表达。结果与模型组相比,芪-术-蚤高剂量组肿瘤体积明显减小(P<0.0001)、肝脾转移灶较不明显,肝组织和肿瘤组织病理染色结果产生变化,下调氧化应激相关指标GSH-Px、SOD水平,上调MDA水平,上调ER stress相关蛋白磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶(p-PERK)、磷酸化真核启动因子2α(p-eIF2α)、转录激活因子4(ATF4)等的表达,上调上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、下调神经型钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、锌指转录因子(Snail)的蛋白表达水平,抑制EMT过程。结论芪-术-蚤角药配伍可能通过激活PERK/eIF2α/ATF4通路诱导持续的ER stress,影响结直肠癌EMT过程,从而抑制结直肠癌的生长转移。

关键词：芪-术-蚤角药内质网应激上皮细胞-间充质转化结直肠癌

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《金匮要略》上气证治探讨

南京中医药大学学报 2024年第1期40卷 6-12页

作者：刘明佳马勇南京中医药大学中医学院江苏南京210023

上气一词首见于《黄帝内经》,《金匮要略》对上气诊治作了系统的论述,但后世医家对上气的词义认识不够统一。通过疏理《黄帝内经》《金匮要略》相关条文,参考医学典籍,结合临床实际,认为《金匮要略》中的上气有病名及症状双重含义。作... 详细信息

上气一词首见于《黄帝内经》,《金匮要略》对上气诊治作了系统的论述,但后世医家对上气的词义认识不够统一。通过疏理《黄帝内经》《金匮要略》相关条文,参考医学典籍,结合临床实际,认为《金匮要略》中的上气有病名及症状双重含义。作为疾病,其病位在肺,症状特点为气上冲,常引起咳嗽,或与咳、喘伴随发生,病机有寒、热、虚、实之别,《金匮要略》针对上气分为寒饮郁肺、饮热郁肺、虚热犯肺、痰饮壅肺四证进行辨治,既重视病机,亦重视药证的对应。故对经方证治的认识和理解,应辨证与方证互参,方能贯通经方之理法方药。

关键词：金匮要略上气上气证治

化痰活血扶正方及拆方含药血清对大鼠肝星状细胞HSC-T6增殖凋亡的影响

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辽宁中医杂志 2024年

作者：郑保平罗耀玲喻道舫张婉晴黄青苏腾伟南昌医学院中医学院赣南医学院第一附属医院临床医学研究中心

目的化痰活血扶正方及拆方含药血清对大鼠肝星状细胞HSC-T6增殖凋亡的影响。方法通过制备化痰活血扶正方及其拆方含药血清和对照组血清。总方及拆方含药血清处理HSC-T6细胞24h后，采用MTT法检测细胞活力，Edu标记法检测细胞增殖能力，... 详细信息

目的化痰活血扶正方及拆方含药血清对大鼠肝星状细胞HSC-T6增殖凋亡的影响。方法通过制备化痰活血扶正方及其拆方含药血清和对照组血清。总方及拆方含药血清处理HSC-T6细胞24h后，采用MTT法检测细胞活力，Edu标记法检测细胞增殖能力，Annexin V/PI双染法及JC-10染色法检测细胞凋亡；Western Blot检测Bcl-2和Bax蛋白表达。结果 MTT结果显示10%的总方、活血化瘀方、化痰方含药血清对HSC-T6生长有明显抑制作用（P<0.05）。Edu标记实验结果表明总方和活血化瘀方与对照组相比细胞增殖数显著减少（P<0.05）。Annexin V/PI和JC-10检测结果显示化痰方、活血化瘀方和总方含药血清可显著促进细胞凋亡（P<0.01）。Western blot结果显示活血化瘀方和总方可降低Bcl-2蛋白表达（P<0.05），增加Bax蛋白表达（P<0.05）。结论化痰活血扶正方含药血清能够抑制大鼠肝星状细胞系HSC-T6增殖，并通过线粒体应激来诱导细胞凋亡。

关键词：化痰活血扶正方含药血清大鼠肝星状细胞HSC-T6 增殖凋亡