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胃肠道毒性评价体外共培养模型研究进展

中国新药杂志 2024年第12期33卷 1250-1255页

作者：李英奇冯天意魏丽萍常艳益诺思生物技术南通有限公司南通226100 安徽中医药大学合肥230000 长三角药物高等研究院南通226000 上海益诺思生物技术股份有限公司上海201203

近年来体外替代实验在胃肠道毒性研究中愈发重要,传统的新药非临床研究主要以动物实验为主,但随着生物技术的发展和动物福利的要求,胃肠道模型已从体内实验逐渐转向体外,从单一的细胞类型过渡到更加接近体内环境的类器官共培养模型,甚... 详细信息

近年来体外替代实验在胃肠道毒性研究中愈发重要,传统的新药非临床研究主要以动物实验为主,但随着生物技术的发展和动物福利的要求,胃肠道模型已从体内实验逐渐转向体外,从单一的细胞类型过渡到更加接近体内环境的类器官共培养模型,甚至可以进行多器官融合培养和微流控培养等。这些培养体系通过模拟与体内一致的生理和病理环境,既可以用于胃肠道疾病建模,也可作为药物毒性筛选平台促进体外毒性评价研究进展。本文主要综述了常规体外胃肠道模型、胃肠道类器官模型和微流控芯片的研究进展,以期促进体外研究发展。

关键词：胃肠道毒性类器官体外培养共培养微流控芯片

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水稻类树状突变体lhd10的初步定位

分子植物育种 2024年

作者：胡伟程计华林秋云周玉杰龙开意贺治洲谢振宇中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所华智生物技术有限公司

叶片是植物生长和发育的重要器官，水稻叶片发育异常导致水稻生长和发育受阻，影响穗形成和发育，降低水稻产量。本研究通过EMS诱变获得了一个水稻类树状突变体(leafy head， lhd)，该突变体在整个生长周期表现为多叶，上部节间持续长... 详细信息

叶片是植物生长和发育的重要器官，水稻叶片发育异常导致水稻生长和发育受阻，影响穗形成和发育，降低水稻产量。本研究通过EMS诱变获得了一个水稻类树状突变体(leafy head， lhd)，该突变体在整个生长周期表现为多叶，上部节间持续长出新叶，但是不进行生殖转化，没有形成穗部组织和水稻种子，导致水稻绝收。此外，通过MutMap方法筛选到导致突变的候选位点，该位点位于第10染色体，命名为lhd10。通过候选区间的表达量鉴定，确定了候选基因。本研究为水稻叶发育异常的机制研究提供了新的突变，对于理解水稻叶-穗发育及营养生长向生殖生长转换过程的调控机制具有一定意义。

关键词：水稻类树状突变体初定位 MutMap

碳中和目标下黑龙江省林业产业低碳转型路径研究

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林产工业 2024年

作者：张琦高文博黑龙江八一农垦大学经济管理学院大庆华理生物技术股份有限公司

基于黑龙江省碳排放和碳吸收现状，剖析碳中和与林业产业转型关系，从碳足迹、碳排放、碳吸收和低碳化四个维度设计黑龙江省林业产业低碳转型路径。结果表明：2019年黑龙江省有15 210.54 万t二氧化碳剩余排放量。林业产业转型将成为实... 详细信息

基于黑龙江省碳排放和碳吸收现状，剖析碳中和与林业产业转型关系，从碳足迹、碳排放、碳吸收和低碳化四个维度设计黑龙江省林业产业低碳转型路径。结果表明：2019年黑龙江省有15 210.54 万t二氧化碳剩余排放量。林业产业转型将成为实现碳中和目标的有效手段之一，同时碳中和目标的实现也将进一步推动林业产业转型。因此，提出森林资源持续有效供给、林业产业转型项目节能评估、林业碳汇项目有效展开以及生物质能源开发四个角度设计黑龙江省林业产业低碳转型路径，以期在碳中和目标下推进黑龙江省林业产业低碳转型。

关键词：碳中和碳排放碳吸收林业产业低碳转型路径

平阳黄汤对小鼠高尿酸血症的影响及其作用机制

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浙江大学学报(农业与生命科学版) 2024年

作者：楼桢优周拥军钟维标陈韵扬屠幼英刘俊生何普明浙江大学农业与生物技术学院茶学系浙江子久文化股份有限公司

高尿酸血症会对人体造成严重危害，近年来发病率越来越高。本研究以平阳黄汤为研究对象，探究不同剂量的平阳黄汤对高尿酸血症小鼠血清尿酸水平的影响及其作用机制。结果表明：不同剂量的平阳黄汤均可降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平，... 详细信息

高尿酸血症会对人体造成严重危害，近年来发病率越来越高。本研究以平阳黄汤为研究对象，探究不同剂量的平阳黄汤对高尿酸血症小鼠血清尿酸水平的影响及其作用机制。结果表明：不同剂量的平阳黄汤均可降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平，但不同剂量间无显著性差异。通过对尿酸的生成和分解途径分析发现，不同剂量平阳黄汤处理组能显著抑制肝脏中的黄嘌呤氧化酶活性，从而减少尿酸生成。此外，平阳黄汤可有效改善高尿酸血症小鼠的肾小球、肾小管的病理结构，同时调节肠道菌群组成和结构等。推测平阳黄汤可通过保护肾脏及调节肠道菌群来促进尿酸排泄，从而降低血清尿酸浓度。本研究为黄茶的功效研究、产品开发和高尿酸血症的防治提供了一些参考。

关键词：平阳黄汤小鼠高尿酸血症血清尿酸肠道菌群

不同闷黄时间对平阳黄汤滋味成分和品质的影响

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中国食品学报 2024年第6期 297-307页

作者：楼桢优周拥军钟维标项圣翔屠幼英何普明浙江大学农业与生物技术学院茶学系浙江子久文化股份有限公司

为了解不同闷黄时间的平阳黄汤（一种黄茶）滋味成分和品质差异，通过感官评定、生化成分测定、化学计量学分析等研究闷黄时间对黄汤滋味品质及其主要成分的影响。结果表明：在一定闷黄时间范围内，平阳黄汤表现出不同的滋味特征，样品... 详细信息

为了解不同闷黄时间的平阳黄汤（一种黄茶）滋味成分和品质差异，通过感官评定、生化成分测定、化学计量学分析等研究闷黄时间对黄汤滋味品质及其主要成分的影响。结果表明：在一定闷黄时间范围内，平阳黄汤表现出不同的滋味特征，样品中的水浸出物含量和游离氨基酸总量先增加后减少，水浸出物质量比例在闷黄24 h时最高，达到54.88%，其茶汤更为鲜爽、甘醇。总儿茶素、酯型儿茶素和咖啡碱的含量随着闷黄时间增加均呈下降的趋势，而非酯型儿茶素和没食子酸有所增加。同时，基于主成分分析显示，各生化成分之间具有一定相关性，其中表没食子儿茶素没食子酸酯、表没食子儿茶素等、没食子儿茶素等，咖啡碱和茶氨酸等对黄茶滋味具有较大贡献作用，表明闷黄过程中滋味品质的变化是各种相关的化学组分共同表达的结果。根据最小偏二乘法分析模型获得标志性差异化合物没食子儿茶素、咖啡碱、没食子酸、表儿茶素和天冬酰胺等，可作为一定闷黄时间下定向加工优质平阳黄汤的指标物质。

关键词：平阳黄汤闷黄时间滋味品质主成分分析

猪等孢球虫顶膜抗原AMA1蛋白的生物信息学分析及原核表达

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华南农业大学学报 2024年

作者：叶欣欧璇黄仪娟陆肖翁亚彪林瑞庆华南农业大学兽医学院佛山市正典生物技术有限公司

【目的】预测分析猪等孢球虫AMA1蛋白的生物学特性、结构及功能，并构建AMA1基因的原核表达载体，表达、纯化AMA1蛋白。【方法】本研究从NCBI数据库中获得猪等孢球虫AMA1基因序列，使用相关生物信息学预测工具对AMA1基因编码的蛋白进行... 详细信息

【目的】预测分析猪等孢球虫AMA1蛋白的生物学特性、结构及功能，并构建AMA1基因的原核表达载体，表达、纯化AMA1蛋白。【方法】本研究从NCBI数据库中获得猪等孢球虫AMA1基因序列，使用相关生物信息学预测工具对AMA1基因编码的蛋白进行分析。构建原核表达载体pET23a-AMA1，将其转入至大肠埃希菌表达菌株BL21 (DE3)中，对诱导时间、温度及IPTG浓度进行优化，确定最佳诱导表达条件。采用镍柱亲和层析法进行蛋白纯化，获得AMA1重组蛋白并进行SDS-PAGE和Western blot鉴定分析。【结果】生物信息学预测显示，AMA1蛋白由317个氨基酸组成，蛋白分子式为C1512H2310N394O490S14，是不稳定的亲水性蛋白；其二级结构α螺旋占17.74%，β折叠占30.65%，转角占30.65%，无规则卷曲占20.96%；属于无信号肽的跨膜蛋白，具有多个B细胞抗原表位。同时，成功构建pET23a-AMA1重组表达质粒，经诱导表达条件优化后，确定最佳诱导表达条件为0.2 mmol/L IPTG浓度下28 ℃诱导12 h，主要以可溶性蛋白形式存在，蛋白大小约为25 800，纯化出蛋白质量浓度为0.25 mg/mL。【结论】本研究结果阐明了猪等孢球虫AMA1蛋白的结构特征以及通过原核诱导表达获得了重组蛋白，为建立猪等孢球虫病的免疫学诊断方法奠定了基础，为后续疫苗的研发提供了新的候选基因。

关键词：猪等孢球虫顶膜抗原 AMA1 原核表达生物信息学

硝唑尼特改善西方饮食诱导的ApoE小鼠脂肪肝作用的代谢组学研究

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药学学报 2024年

作者：朱胡太龙程晓范郭欣常乐赵银娣吴尚泽董德利中国药科大学药学院杭州联川生物技术股份有限公司

硝唑尼特（nitazoxanide）是一种临床抗原虫药物，本课题组前期研究发现口服途径给予硝唑尼特可改善西方饮食（Western diet， WD）诱导的ApoE-/-小鼠肝脏脂肪样变，尚待深入阐明其机制。本文通过非靶向代谢组学研究硝唑尼特对西... 详细信息

硝唑尼特（nitazoxanide）是一种临床抗原虫药物，本课题组前期研究发现口服途径给予硝唑尼特可改善西方饮食（Western diet， WD）诱导的ApoE-/-小鼠肝脏脂肪样变，尚待深入阐明其机制。本文通过非靶向代谢组学研究硝唑尼特对西方饮食诱导的ApoE-/-小鼠肝脏代谢谱的影响，进而通过细胞水平实验研究其潜在机制。采用UPLC-MS联用法对小鼠的肝脏组织代谢物进行非靶向代谢组学研究; 筛选差异代谢物，并对差异代谢物进行富集分析和通路分析; 采用硝唑尼特的体内代谢产物替唑尼特处理肝细胞，在代谢组学发现的基础上研究硝唑尼特改善肝脏脂代谢异常的潜在机制。硝唑尼特改善西方饮食诱导的ApoE-/-小鼠肝脏代谢紊乱，主要通过调控甘油磷脂代谢、D-谷氨酰胺和谷氨酸代谢、谷胱甘肽代谢和精氨酸生物合成。硝唑尼特的体内活性代谢产物替唑尼特（tizoxanide）增加HepG2细胞谷胱甘肽（glutathione， GSH）含量并促进谷氨酸半胱氨酸连接酶（glutamate-cysteine ligase catalytic subunit， Gcl-c）和谷胱甘肽还原酶（glutathione reductase， Gsr）的mRNA表达; 增加肝细胞胱硫醚β合酶（cystathionine β-synthase， CBS）和磷脂酰乙醇胺N-甲基转移酶（phosphatidylethanolamine N-methyltransferase， PEMT）蛋白水平，抑制游离脂肪酸（free fatty acid， FFA）诱导的肝细胞脂质蓄积; 替唑尼特可增加FFA刺激下HepG2细胞及小鼠原代肝细胞中S-腺苷同型半胱氨酸水解酶（S-adenosyl-L-homocysteine hydrolase， SAHH）蛋白表达; 替唑尼特提高HepG2细胞N-乙酰谷氨酸合酶（N-acetyl glutamate synthase， Nags）和氨基甲酰磷酸合成酶1 （carbamoylphosphate synthetase 1， Cps1） mRNA表达水平。综上所述，硝唑尼特改善西方饮食诱导的ApoE-/-小鼠肝脏脂肪样变的潜在机制包括增加CBS表达、提高肝细胞内谷胱甘肽含量，增加肝细胞PEMT蛋白水平，增加肝细胞NAGS和CPS1的表达。

关键词：硝唑尼特替唑尼特非酒精性脂肪肝代谢组学谷胱甘肽

基于生物反应器的猪流行性腹泻病毒(ZJ/15株)悬浮培养工艺研究

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黑龙江畜牧兽医 2024年第7期 11-17页

作者：查银河王芳何玉龙李肖梁舒建洪杭州洪晟生物技术股份有限公司杭州310002 浙江大学杭州310058

为了优化生物反应器全悬浮培养技术制备猪流行性腹泻病毒(ZJ/15株)的工艺,试验首先通过摇瓶培养对病毒接种时的细胞密度、胰酶浓度、接毒剂量和收毒时间等培养条件进行优化;之后按照摇瓶培养确认的工艺进行生物反应器全悬浮培养工艺验证... 详细信息

为了优化生物反应器全悬浮培养技术制备猪流行性腹泻病毒(ZJ/15株)的工艺,试验首先通过摇瓶培养对病毒接种时的细胞密度、胰酶浓度、接毒剂量和收毒时间等培养条件进行优化;之后按照摇瓶培养确认的工艺进行生物反应器全悬浮培养工艺验证,同时对pH值、溶氧值(DO)、转速等培养参数进行优化,以病毒含量(TCID_(50))为指标,最终筛选出在15L生物反应器中培养猪流行性腹泻病毒(ZJ/15株)的最优条件,并进一步在50L生物反应器中进行工艺验证,将病毒液灭活后稀释至1×10^(7).0TCID_(50)/mL免疫怀孕75~90d的健康易感初怀母猪,在分娩当日,采集母猪和仔猪血清,并对分娩的3日龄仔猪攻毒进行免疫原性试验。结果表明:猪流行性腹泻病毒(ZJ/15株)在摇瓶上的最适培养条件为当细胞密度达到6×10^(6)个/mL以上时,用含胰酶(终浓度为20μg/mL)的无血清培养基将细胞密度稀释至2×10^(6)个/mL,按感染复数(MOI)=0.1接毒,130 r/min摇床振荡培养36h可收获病毒液,病毒含量可稳定达到1×10^(7.5)TCID_(50)/mL以上;猪流行性腹泻病毒(ZJ/15株)在15L生物反应器上的最适培养条件为pH值7.0~7.2、DO值50%、转速80~100 r/min,培养36h收获的病毒液含量可稳定在1×10^(7.5)TCID_(50)/mL以上;在50L生物反应器上放大培养收获的病毒液含量为1×10^(7).8TCID_(50)/mL。母猪和仔猪中和抗体效价均≥1∶32,免疫保护力为100%。说明本试验条件下成功建立并优化了生物反应器全悬浮培养制备猪流行性腹泻病毒(ZJ/15株)的工艺,生产的猪流行性腹泻病毒(ZJ/15株)的免疫原性较好。

关键词：猪流行性腹泻病毒悬浮细胞培养生物反应器工艺放大免疫原性

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论计算机化系统和数据完整性

流程工业 2024年第2期 48-50页

作者：竺健明江苏瑞科生物技术股份有限公司

计算机化系统在制药行业的广泛应用,为生产、质量控制和合规性提供了重要支持。本文将探讨制药行业中计算机化系统与数据完整性的关系,相互之间的应用,如何基于系统功能、流程结合、配置和组态、数据流管理等方面的规划设计出符合数据... 详细信息

计算机化系统在制药行业的广泛应用,为生产、质量控制和合规性提供了重要支持。本文将探讨制药行业中计算机化系统与数据完整性的关系,相互之间的应用,如何基于系统功能、流程结合、配置和组态、数据流管理等方面的规划设计出符合数据完整性要求的计算机化系统。希望这能有助于避免行业内的教条式应用和学步邯郸。

关键词：计算机化系统数据完整性质量控制监管合规差距与规划设计

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