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湖南:华智生物国际化人才引领种业创新实践

国际人才交流 2024年第5期 21-23页

作者：无华智生物技术有限公司

湖南是农业大省,习近平总书记考察湖南时强调,湖南要扛起维护国家粮食安全的重任,抓住种子和耕地两个要害,加快种业、农机关键核心技术攻关。种子是农业的“芯片”。要发展农业新质生产力,保障国家粮食安全,大力推进种业科技创新是必由... 详细信息

湖南是农业大省,习近平总书记考察湖南时强调,湖南要扛起维护国家粮食安全的重任,抓住种子和耕地两个要害,加快种业、农机关键核心技术攻关。种子是农业的“芯片”。要发展农业新质生产力,保障国家粮食安全,大力推进种业科技创新是必由之路。生物育种是现代种业创新的核心,发达国家和国际巨头企业纷纷布局大数据信息、人工智能、基因编辑等新型技术,已进入“种业4.0时代”,而国内仍处于向“种业3.0时代”过渡的阶段。

关键词：创新实践现代种业农业大省人工智能国家粮食安全生物育种基因编辑人才引领

1种布鲁菌抗体检测试纸条快速检测方法的建立

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中国兽医学报 2021年第7期41卷 1310-1314,1347页

作者：吴志强刘少蓉白民俊段晓珮高强黄素文段跃强内蒙古华希生物科技有限公司内蒙古呼和浩特010111 北京美联泰科生物技术有限公司北京100176

以光滑型布鲁菌脂多糖(smooth lipopolysaccharide,sLPS)抗原为检测抗原,葡萄球菌蛋白A(SPA)为胶体金标记物,制备胶体金免疫层析试纸条,用于检测布鲁菌抗体。通过敏感性和特异性试验检测试纸条性能。结果显示,试纸条最低可检测血清浓度... 详细信息

以光滑型布鲁菌脂多糖(smooth lipopolysaccharide,sLPS)抗原为检测抗原,葡萄球菌蛋白A(SPA)为胶体金标记物,制备胶体金免疫层析试纸条,用于检测布鲁菌抗体。通过敏感性和特异性试验检测试纸条性能。结果显示,试纸条最低可检测血清浓度为0.1 IU/mL。试纸条批内和批间可重复性为100%,不与其他非相关疾病感染血清反应。试纸条法与试管凝集试验对牛、羊血清检测的符合率分别为95.4%和97.2%。结果表明,该试纸条在保证检测特异性的基础上,提高了对样品检测的敏感性,具有敏感、特异、简便、快速的特点,更加适合在基层推广使用。

关键词：布鲁菌 sLPS 胶体金免疫层析

犬轮状病毒单克隆抗体制备及胶体金试纸条检测方法的建立

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中国畜牧兽医 2022年第11期49卷 4429-4437页

作者：赵少若黄甜郝丽影吴洪超汪志艳崔宁宁王亚玲邓均华田克恭洛阳普泰生物技术有限公司洛阳471000 国家兽用药品工程技术研究中心洛阳471000 北京金诺百泰生物技术有限公司北京101300

【目的】研发犬轮状病毒(Canine ratavirus,CRV)免疫学诊断试剂,制备并鉴定CRV特异性单克隆抗体,建立可用于检测CRV的胶体金免疫层析法。【方法】以CRV临床分离株SL006株为免疫原免疫BALB/c雌性小鼠,用杂交瘤细胞法进行细胞融合,通过间... 详细信息

【目的】研发犬轮状病毒(Canine ratavirus,CRV)免疫学诊断试剂,制备并鉴定CRV特异性单克隆抗体,建立可用于检测CRV的胶体金免疫层析法。【方法】以CRV临床分离株SL006株为免疫原免疫BALB/c雌性小鼠,用杂交瘤细胞法进行细胞融合,通过间接免疫荧光法(IFA)筛选可稳定分泌CRV单克隆抗体的杂交瘤细胞,并制备腹水,亲和层析法进行纯化获得单克隆抗体。对获得的单克隆抗体进行鉴定,经条件优化建立胶体金试纸条检测方法,对试纸条的灵敏度、特异性、重复性和应用情况进行评价。【结果】获得了4株杂交瘤细胞,分别命名为2C12、4A5、1H3、5F3,IFA效价分别为1∶6400、1∶12800、1∶1600和1∶3200;重链亚类分别为IgG2b、IgG2a、IgG1和IgG2a,轻链亚类均为kappa;制备的胶体金试纸条检测线包被单克隆抗体4A5,对照线包被羊抗鼠IgG,金标垫包被胶体金标记的单克隆抗体2C12,对CRV病毒液的检测灵敏度为10TCID/mL,检测犬源其他病毒犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)、犬副流感病毒(Canine parainfluenza virus,CPIV)、犬腺病毒Ⅰ型(Canine adenovirus-Ⅰ,CAV-Ⅰ)、CAV-Ⅱ、犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)病毒液及CRV阴性肛拭子和阴性粪便均为阴性;批内和批间重复性良好;利用制备的胶体金试纸条和RT-PCR方法对47份样品进行检测比较,两者符合率为93.6%。【结论】本研究建立的CRV胶体金试纸条检测方法具有良好的敏感性、特异性、重复性,与RT-PCR方法符合率较高,可为CRV的临床快速诊断提供有效的检测方法。

关键词：犬轮状病毒(CRV) 单克隆抗体胶体金试纸条

隔离器内残留过氧化氢去污剂对MSCs和NK两种细胞增殖及生物学特性的影响研究

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中国细胞生物学学报 2022年第5期44卷 777-785页

作者：李银花欧阳军赵振波刘子健俞佳孙巍群浙江泰林生物技术股份有限公司杭州311400

该文研究了特定过氧化氢去污剂残留量对间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)和自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)的增殖及生物学特性的影响。采用低浓度过氧化氢去污剂建立特定残留量进行MSCs和NK细胞培养,应用细胞计数法分... 详细信息

该文研究了特定过氧化氢去污剂残留量对间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)和自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)的增殖及生物学特性的影响。采用低浓度过氧化氢去污剂建立特定残留量进行MSCs和NK细胞培养,应用细胞计数法分析细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞表面标记,并采用诱导分化培养基定向诱导MSCs成骨、成脂、成软骨分化。结果显示,MSCs和NK细胞在3~5 mg/m~3浓度的过氧化氢环境下形态正常且增殖活跃。流式细胞仪检测结果显示,MSCs的CD73、CD105、CD90均呈高表达,CD45、CD34、CD14、CD79a、HLA-DR为阴性表达;NK细胞表达CD56~+和CD3~–的百分比超过70%。诱导后,MSCs具有成骨、成脂、成软骨分化的潜能。总之,MSCs和NK细胞在含有低浓度的残留过氧化氢去污剂的培养环境中生长良好,与未含有过氧化氢去污剂的培养环境比较,增殖能力和分化潜能均无显著差异。

关键词：过氧化氢去污 MSCs NK细胞过氧化氢残留隔离器

荧光免疫层析技术定量检测血清胎盘生长因子的建立和性能评价

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实验与检验医学 2023年第2期41卷 139-144页

作者：徐亚涛韩艳华胡文翔焦阁胡琛光北京华科泰生物技术股份有限公司北京101111

目的建立一种基于荧光免疫层析技术能够快速检测血清胎盘生长因子(Placental growth factor,PLGF)的方法,用于预测先兆子痫,并对试纸条性能进行评价。方法以双抗体夹心法为原理,采用免疫层析技术和荧光微球标记技术相结合的方法,制备PLG... 详细信息

目的建立一种基于荧光免疫层析技术能够快速检测血清胎盘生长因子(Placental growth factor,PLGF)的方法,用于预测先兆子痫,并对试纸条性能进行评价。方法以双抗体夹心法为原理,采用免疫层析技术和荧光微球标记技术相结合的方法,制备PLGF荧光微球免疫层析试纸条,并且从空白限、特异性、抗干扰性、精密度、回收率、稳定性以及与Roche Cobas e411检测平台在符合率等方面进行全面的方法学评价。结果试纸条空白限为8.68 pg/mL,具有较高的灵敏度;当样本中存在甘油三酯、血红蛋白、类风湿因子等干扰因素时,测试偏差可以控制在±15%以内;批间和批内变异系数均公司生产的PLGF电化学发光法检测试剂盒具有很好的相关性。结论PLGF荧光微球免疫层析试纸条能够实现灵敏、准确的定量检测,满足临床监测PLGF的需求。

关键词：胎盘生长因子荧光免疫层析法性能评价

CMAB008单抗阳离子交换层析介质寿命确认

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江苏农业科学 2022年第8期50卷 69-73页

作者：邵顺儒郭清城侯盛袁秀珍徐忠升范文强张蕙朱红帅邵景德江苏泰州迈博太科药业有限公司江苏泰州225300 上海迈泰君奥生物技术有限公司上海201200

建立CMAB008单抗阳离子交换层析介质寿命确认方案,采用实际生产的工艺参数进行缩小模型试验,以考察Nuvia S层析介质循环到100次后性能指标是否还满足层析需要。按试验方案对Nuvia S层析介质循环到100次,分别在使用前和循环使用20、40、5... 详细信息

建立CMAB008单抗阳离子交换层析介质寿命确认方案,采用实际生产的工艺参数进行缩小模型试验,以考察Nuvia S层析介质循环到100次后性能指标是否还满足层析需要。按试验方案对Nuvia S层析介质循环到100次,分别在使用前和循环使用20、40、50、70、90次后对层析柱进行柱效测试,以考察随循环次数的增加,层析介质对层析柱对称因子、理论塔板数的影响;对循环1、50、51、100次的层析柱进行动态载量测试,以考察洗脱峰的ProteinA残留、HCP残留、DNA残留、毛细管电泳纯度、SEC-HPLC纯度、活性、得率;以不同上样量20 g/L(循环8、48、88次)、40 g/L(循环9、49、89次)、80 g/L(循环61、62、63次),不同流速110 cm/h(循环10、50、92次)、149 cm/h(循环61、62、63次)、170 cm/h(循环11、59、93次)上样以考察阳离子交换层析洗脱峰SEC-HPLC纯度、得率。结果表明,使用前和循环使用20、40、50、70、90次后柱效测试中,所有对称因子、理论塔板数均在可接受的标准范围内;循环1、50、51、100次的层析柱动态载量测试结果均高于起始动态载量的80%,洗脱峰的ProteinA、HCP、DNA残留检测未有增高趋势,毛细管电泳纯度、SEC-HPLC纯度、活性以及得率未有下降趋势;上样测试结果显示,洗脱峰的SEC-HPLC纯度无明显变化趋势,均大于98%,得率均大于85%。这些试验结果均符合CMAB008原液纯化工艺要求。结果证明,Nuvia S层析介质在循环到100次时性能指标没有下降,可以保证纯化CMAB008单抗产品的质量。

关键词： CMAB008单抗层析介质寿命缩小模型性能指标

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DART-质谱及其在药物分析中的应用

药物分析杂志 2011年第10期31卷 2008-2012页

作者：廖杰刘娜刘春胜解放军总医院医学实验测试中心北京100853 华质泰科生物技术(北京)有限公司北京100102

介绍一种非表面接触型大气压解析/离子化质谱新技术—实时直接分析(DART)及其在药物定性、定量分析中的应用。在环境空气条件下,样品表面的化合物经中性或惰性气体(如氮气、氦气或氩气)放电产生的激发态原子瞬间脱附并离子化,以质谱或... 详细信息

介绍一种非表面接触型大气压解析/离子化质谱新技术—实时直接分析(DART)及其在药物定性、定量分析中的应用。在环境空气条件下,样品表面的化合物经中性或惰性气体(如氮气、氦气或氩气)放电产生的激发态原子瞬间脱附并离子化,以质谱或串联质谱检测。该技术无需样品预处理,或仅需要简单的样品前处理,具有抗基质干扰、无溶剂效应、分析周期短(2～3 s)、直接、原位、无损、快速和现场等特点。文中重点介绍了DART在药品鉴别、药物合成反应监测、药代动力学研究和滥用药物监测等方面的应用,并对该技术在药物分析领域中的应用前景进行了展望。

关键词：实时直接分析(DART) 大气压离子化质谱药物分析现场分析打假综述

猴血浆中抗腺相关病毒8中和抗体滴度检测方法的建立及初步确认

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中国新药杂志 2023年第16期32卷 1622-1628页

作者：陶泽萍曹艳容许波华周璐赵小平上海工程技术大学化学化工学院上海201620 上海益诺思生物技术股份有限公司上海201203 益诺思生物技术南通有限公司海门226133 上海天泽云泰生物医药有限公司上海201210

目的:建立一种基于细胞平台的高灵敏度、高效、稳定的猴血浆中抗腺相关病毒8(AAV8)中和抗体滴度的检测方法,并对该方法进行相关性能的初步确认。方法:在体外将等体积稀释后的猴血浆与AAV8-Luciferase孵育后,取混合液加入铺有HEK293细胞... 详细信息

目的:建立一种基于细胞平台的高灵敏度、高效、稳定的猴血浆中抗腺相关病毒8(AAV8)中和抗体滴度的检测方法,并对该方法进行相关性能的初步确认。方法:在体外将等体积稀释后的猴血浆与AAV8-Luciferase孵育后,取混合液加入铺有HEK293细胞的96孔板中,孵育过夜以感染HEK293细胞;细胞裂解后加入萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂,使用酶标仪检测荧光信号(RLU),以评估血浆中抗AAV8中和抗体含量,继而得到相应的抗体滴度。该研究对检测方法的检测灵敏度(LOD)及滴度实验重复性、精密度、方法稳健性和样品稳定性等性能进行初步确认。结果:建立了高灵敏度、高效、稳定的细胞水平检测猴血浆中抗AAV8中和抗体滴度的方法并完成初步确认。该方法LOD值为10.36 ng·mL^(-1),滴度实验重复性、精密度及方法稳健性良好,阳性对照样品室温放置24 h、2℃~8℃放置24 h、经-65℃~-90℃/室温冻融6次均保持稳定。结论:经初步确认,该方法可以用于猴血浆中抗AAV8中和抗体滴度的分析检测,利于掌握药物治疗进程,及时调整治疗方案,对AAV8血清型基因治疗药物的研发及个体化治疗有一定提示作用。

关键词： VGB-R04 中和抗体细胞水平方法学验证

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日粮中添加肠杆菌肽对蛋鸡产蛋性能的影响

饲料工业 2016年第13期37卷 28-30页

作者：孙何军张江刘成宏关静姝北京中农颍泰生物技术有限公司北京100193 中农颖泰林州生物科园有限公司北京456500

为了研究肠杆菌肽对蛋鸡产蛋性能的影响,选取300日龄产蛋率相近、体重均匀、健康的海兰褐蛋鸡5 000只,随机分成2组,即对照组和试验组,每组5个重复,每个重复500只鸡。对照组饲喂基础饲粮,试验组饲喂在基础饲粮的基础上添加肠杆菌肽100 mg... 详细信息

为了研究肠杆菌肽对蛋鸡产蛋性能的影响,选取300日龄产蛋率相近、体重均匀、健康的海兰褐蛋鸡5 000只,随机分成2组,即对照组和试验组,每组5个重复,每个重复500只鸡。对照组饲喂基础饲粮,试验组饲喂在基础饲粮的基础上添加肠杆菌肽100 mg/kg的日粮。结果表明:与对照组相比,试验组产蛋率提高3.88%(P0.05);死淘率降低40%,破蛋率降低14.63%,差异显著(P<0.05)。结果表明,添加肠杆菌肽具有提高蛋鸡生产性能的效果。

关键词：抗菌肽蛋鸡生产性能