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鼻咽癌组织中PIK3CA基因热点突变区的突变筛查

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癌症 2007年第1期26卷 15-20页

作者：刘鹏李大疆覃海德张如华陈丽珍曾益新华南肿瘤学国家重点实验室中山大学肿瘤防治中心实验研究部广东广州510060

背景与目的:近期研究发现磷脂酰肌醇激酶-3催化亚单位α基因(phosphatidylinositol3-kinasecatalyticalphapolypeptidegene,PIK3CA)在多种肿瘤中存在高频的体细胞突变,并且突变常发生在PIK3CA的第9外显子和20外显子两个热点突变区。对... 详细信息

背景与目的:近期研究发现磷脂酰肌醇激酶-3催化亚单位α基因(phosphatidylinositol3-kinasecatalyticalphapolypeptidegene,PIK3CA)在多种肿瘤中存在高频的体细胞突变,并且突变常发生在PIK3CA的第9外显子和20外显子两个热点突变区。对这两个热点突变的研究表明,这些突变能增强该酶的活性、有助于肿瘤细胞的侵袭、对抗凋亡等。因此提示PIK3CA基因是与多种肿瘤发生、发展相关的癌基因。本研究旨在检测鼻咽癌组织中PIK3CA两个热点突变区的突变,以及该基因的变异与鼻咽癌发病的关系。方法:在鼻咽癌组织及患者外周血中筛查PIK3CA的突变热点区第9外显子和第20外显子。对46例散发性鼻咽癌组织标本采用PCR产物克隆测序,对与之匹配的46例鼻咽癌患者外周血标本和3个鼻咽癌细胞系(CNE1,CNE2,SUNE1),则将PCR产物直接测序。结果:在46例鼻咽癌组织标本中在PIK3CA热点突变区第9号外显子检出2例突变(4.3%):1例为T1563G(521Asn→Lys);另1例为A1646G(549Asp→Gly)。在46例鼻咽癌标本第9外显子中18例检出A1634C-G1658C-del1659T“复合突变”,进一步研究表明该“复合突变”可能为22号染色体上同源区域的序列。在对PIK3CA另外一个突变热点区第20外显子的检测中,46例鼻咽癌组织标本中都没检测到突变。另外,在3个鼻咽癌细胞系和46例鼻咽癌匹配外周血DNA标本用PCR-直接测序法均未检测到第9外显子和第20外显子突变。结论:PIK3CA基因第9外显子与第20外显子鼻咽癌中较少发生突变;克隆测序检测体细胞突变具有更高的敏感性,通过该方法在第9外显子发现的“复合突变”可能是22q11.2的CatEyeSyndromeregion高度同源区域的序列而非PIK3CA基因座的变异。

关键词：鼻咽肿瘤 PIK3CA基因基因突变克隆测序

基质金属蛋白酶1在结肠癌组织中的表达及其意义

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中华医学杂志 2011年第41期91卷 2895-2898页

作者：卢震海方洧靖伍小军潘志忠万德森华南肿瘤学国家重点实验室中山大学肿瘤防治中心结直肠科广州510060 华南肿瘤学国家重点实验室中山大学肿瘤防治中心实验研究部广州510060

目的探讨基质金属蛋白酶1（MM-1）在结肠癌中的表达及其结合临床分期对预后的指导意义。方法通过免疫组织化学法对1995年1月至2003年5月中山大学肿瘤防治中心手术治疗的620例结肠癌患者的组织芯片进行MMP-1表达检测，并结合临床数据进... 详细信息

目的探讨基质金属蛋白酶1（MM-1）在结肠癌中的表达及其结合临床分期对预后的指导意义。方法通过免疫组织化学法对1995年1月至2003年5月中山大学肿瘤防治中心手术治疗的620例结肠癌患者的组织芯片进行MMP-1表达检测，并结合临床数据进行分析。结果组织芯片有效结果为581例，MMP-1在结肠癌组织中的表达较在正常组织中高[72．5％（421／581）比30．8％（179／581），P=0．0001]。组织MMP-1在Ⅰ、Ⅱ期阳性表达率高于在Ⅲ、Ⅳ期[77．6％（235／303）比66．9％（186／278），P=0．0040]，在Ⅰ、Ⅱ期中表达时患者预后较差，在Ⅲ、Ⅳ期中表达时患者预后较好。COX多因素分析结果显示肿瘤MMP-1表达[危险比（HR）：1．042，95％可信区间（CI）：0．770—1．410，P=0．0001]，肿瘤大体（HR：0．966，95％CI：0．571—1．633，P=0．0150），局部浸润（HR：0．576，95％CI：0．413～0．805，P=0．0010）和肠壁浸润（HR：0．337，95％CI：0．197～0．575，P=0．0001）是结肠癌的预后因素。结论MMP-1是结肠癌的独立预后因素，组织MMP-1在结肠癌不同分期的表达意义不同，其表达结合临床分期对结肠癌的预后起一定的指导意义。

关键词：结肠肿瘤基质金属蛋白酶1 肿瘤分期预后

三羧酸循环的代谢物与肿瘤发生相关性的研究进展

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中国肿瘤临床 2021年第21期48卷 1088-1092页

作者：魏晨徐瑞华鞠怀强中山大学肿瘤防治中心华南肿瘤学国家重点实验室

许多与生物能量或生物合成相关的代谢物都可以参与细胞的恶性转化,特别是线粒体三羧酸循环的中间产物,如琥珀酸、延胡索酸、D-2-羟基戊二酸、乙酰CoA和NADPH等,已被证实在肿瘤中发挥非代谢功能。本综述将对这些三羧酸循环中间代谢物与... 详细信息

许多与生物能量或生物合成相关的代谢物都可以参与细胞的恶性转化,特别是线粒体三羧酸循环的中间产物,如琥珀酸、延胡索酸、D-2-羟基戊二酸、乙酰CoA和NADPH等,已被证实在肿瘤中发挥非代谢功能。本综述将对这些三羧酸循环中间代谢物与肿瘤发生发展的研究进展进行总结。

关键词：三羧酸循环代谢物肿瘤

新基因hSSB1逆转录病毒载体的构建、鉴定和稳定株的筛选

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中山大学学报（自然科学版） 2012年第2期51卷 73-76,85页

作者：张如华徐双兵武远众康铁邦华南肿瘤学国家重点实验室∥中山大学肿瘤防治中心实验研究部广东广州510060

hSSB1(Human Single-strand DNA-binding protein)是参与细胞DNA损伤应答的一个重要信号分子。根据GenBank提供的hSSB1基因序列扩增其cDNA序列,插入到pBABE逆转录病毒载体中,连接后的质粒转化后经过双酶切,PCR扩增及测序来鉴定pBABE-hS... 详细信息

hSSB1(Human Single-strand DNA-binding protein)是参与细胞DNA损伤应答的一个重要信号分子。根据GenBank提供的hSSB1基因序列扩增其cDNA序列,插入到pBABE逆转录病毒载体中,连接后的质粒转化后经过双酶切,PCR扩增及测序来鉴定pBABE-hSSB1阳性克隆。将阳性表达的pBABE-hSSB1和包装质粒转染到HEK293T细胞中,产生病毒液。将包装好的病毒感染细胞并用嘌呤霉素(puromycin)筛选稳定表达hSSB1的细胞株。重组pBABE-hSSB1质粒经双酶切,PCR扩增鉴定及DNA测序分析等方法证实克隆成功。Western blotting检测发现转染重组质粒pBABE-hSSB1的细胞株中hSSB1蛋白的表达水平高于对照组。该研究成功构建了针对hSSB1基因的逆转录病毒载体(pBABE-hSSB1),并得到了稳定高表达hSSB1的细胞株,为深入研究其功能奠定了基础。

关键词： hSSB1 病毒载体稳定株

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鼻咽癌原发灶乏氧和动态的变化及临床意义

中华医学杂志 2007年第38期87卷 2698-2702页

作者：郑颖洁赵充樊卫刘慧崔念基陈福进华南肿瘤学国家重点实验室中山大学肿瘤防治中心

目的分析初治鼻咽癌治疗前原发灶乏氧和治疗中、治疗末的动态变化及其与肿瘤消退的关系。方法 62例患者分别于治疗前、中、末行头部^(99)Tc^m-4,9-二氮3,3,10,10-四甲基十二烷-2,22-二酮二肟(^(99)Tc^m-HL91)乏氧显像及 CT 模拟扫描。(1... 详细信息

目的分析初治鼻咽癌治疗前原发灶乏氧和治疗中、治疗末的动态变化及其与肿瘤消退的关系。方法 62例患者分别于治疗前、中、末行头部^(99)Tc^m-4,9-二氮3,3,10,10-四甲基十二烷-2,22-二酮二肟(^(99)Tc^m-HL91)乏氧显像及 CT 模拟扫描。(1)采用目测法和半定量法的放射性计数比(T^+/N)分析三个时段原发灶的乏氧状况及动态变化;(2)分析治疗前乏氧程度及治疗过程的动态变化与肿瘤消退的关系。结果目测法显示治疗前56例乏氧阳性,治疗中、末分别有8例和19例转为阴性;半定量法显示同一病例治疗前、中、末 T^+/N 值逐渐降低(F=109.073,P=0.000)。治疗前重度乏氧(T^+/N≥1.52)者治疗中、末肿瘤消退率均明显低于轻度乏氧(T^+/N肿瘤消退率呈正相关趋势(r=0.587,P=0.003和 r=0.655,P=0.001)。结论初治鼻咽癌原发灶乏氧随治疗的进程逐渐减轻或消失。治疗前乏氧程度及其在治疗中的变化与肿瘤的消退速度相关。

关键词：鼻咽肿瘤放射疗法放射性核素显像乏氧 ^99Tc^m-HL91

柯萨奇病毒-腺病毒受体在结肠癌组织中的表达及意义

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中国肿瘤临床 2007年第6期34卷 316-318,325页

作者：张念华宋立兵伍小军高艳芳彭瑞清丁娅李瑞平万德森张晓实中山大学肿瘤防治中心华南肿瘤学国家重点实验室

目的:柯萨奇病毒-腺病毒受体(coxsackie and adenovirus receptor,CAR)介导腺病毒与靶细胞之间的粘附,是腺病毒转染靶细胞的限速因子。本文分析CAR在瘤旁上皮组织、结肠肿瘤原发灶和淋巴结转移灶中的表达,为设计腺病毒载体基因治疗方案... 详细信息

目的:柯萨奇病毒-腺病毒受体(coxsackie and adenovirus receptor,CAR)介导腺病毒与靶细胞之间的粘附,是腺病毒转染靶细胞的限速因子。本文分析CAR在瘤旁上皮组织、结肠肿瘤原发灶和淋巴结转移灶中的表达,为设计腺病毒载体基因治疗方案提供依据。方法:采用免疫组织化学方法检测62例结肠癌组织中CAR的表达,分析CAR表达与临床病理特征的关系。结果:与瘤旁上皮组织相比,肿瘤组织普遍存在CAR表达下调,但CAR在原发灶和淋巴结转移灶的表达水平无明显差异。CAR的表达水平与患者年龄及肿瘤大小相关。结论:结肠癌组织中存在CAR表达下调,提示在设计腺病毒载体基因治疗方案时应充分考虑CAR表达变化对疗效的影响。

关键词：柯萨奇病毒-腺病毒受体结肠癌基因治疗

自噬相关蛋白Beclin-1在ⅢB期结肠癌的表达及其与预后关系

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中国肿瘤临床 2009年第3期36卷 146-149页

作者：李宝秀李春燕彭瑞清王海英伍小军万德森张晓实华南肿瘤学国家重点实验室中山大学肿瘤防治中心

目的：自噬是细胞利用溶酶体降解自身受损的细胞器和大分子物质的过程，是真核细胞的一种死亡形式。自噬在肿瘤发生发展中的作用尚不完全清楚。Beclin-1是一种双等位抑癌基因且是哺乳动物参与自噬的特异性基因。本研究观察肿瘤细胞自噬... 详细信息

目的：自噬是细胞利用溶酶体降解自身受损的细胞器和大分子物质的过程，是真核细胞的一种死亡形式。自噬在肿瘤发生发展中的作用尚不完全清楚。Beclin-1是一种双等位抑癌基因且是哺乳动物参与自噬的特异性基因。本研究观察肿瘤细胞自噬水平变化对ⅢB期结肠癌患者预后的影响。方法：收集我院1999年1月～2003年7月经过根治性手术治疗并有完整随访资料的115例ⅢB期结肠癌组织标本，用免疫组化方法观察自噬相关蛋白Beclin-1在癌组织与癌旁正常粘膜表达情况，分析beclin-1表达水平与患者临床病理参数关系及与患者预后的关系。结果：Beclin-1蛋白表达于肿瘤细胞膜、胞浆和（或）细胞核，正常粘膜缺乏Beclin—1表达。肿瘤组织Beclin—1阳性率达85．2％（98／115）；Beclin-1表达者的5年生存率较高（67.3％VS47．1％）。此外，Beclin-1表达与患者其它临床病理参数如年龄、性别、发病部位、病理类型、细胞分化程度及T分期无相关性。结论：局部晚期结肠癌细胞保留自噬功能没有提高肿瘤细胞的生存能力，而丧失自噬功能可能促进肿瘤进展。

关键词：自噬 Beclin-1 结肠癌预后

用原代细胞培养和人全基因表达谱芯片筛选鼻咽癌差异表达基因

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南方医科大学学报 2007年第8期27卷 1156-1160页

作者：李瑞平邵建永邓玲曾木圣宋立兵李满枝吴秋良华南肿瘤学国家重点实验室中山大学肿瘤防治中心病理科广东广州510060 华南肿瘤学国家重点实验室中山大学肿瘤防治中心实验研究部广东广州510060

目的利用细胞的原代培养技术及人全基因表达谱芯片技术初步筛选出鼻咽癌差异表达基因,以发现与鼻咽癌发生、发展相关的新的候选基因。方法分别用1例鼻咽癌细胞株C666及5例鼻咽癌培养出的原代细胞和3例鼻咽正常上皮的原代细胞,进行基因... 详细信息

目的利用细胞的原代培养技术及人全基因表达谱芯片技术初步筛选出鼻咽癌差异表达基因,以发现与鼻咽癌发生、发展相关的新的候选基因。方法分别用1例鼻咽癌细胞株C666及5例鼻咽癌培养出的原代细胞和3例鼻咽正常上皮的原代细胞,进行基因表达谱分析,并以荧光定量PCR及免疫组织化学验证芯片结果。结果原代培养的鼻咽癌细胞和鼻咽正常上皮细胞通过细胞角蛋白的免疫细胞化学染色、EBER1原位杂交和EBV-DNA荧光定量PCR证实;鼻咽癌原代细胞和鼻咽正常上皮原代细胞的基因表达谱有显著差异;4例以上共同表达的差异基因有493个,包括上调基因264个,下调基因229个。荧光定量PCR及免疫组织化学结果和芯片结果一致。结论用原代培养细胞及人类全基因组基因芯片构建基因表达谱能够准确、高效地筛选出鼻咽癌相关的差异表达基因,该基因表达谱的建立为研究鼻咽癌分子生物学机制、鼻咽癌的分子分型和分子诊断提供了重要的分子依据。

关键词：鼻咽肿瘤寡核苷酸芯片基因表达谱原代细胞培养荧光定量PCR

乳腺托架加发泡胶提升乳腺癌放疗体位固定精度的研究

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中华放射肿瘤学杂志 2022年第10期31卷 916-921页

作者：姚文燕刘镖水方键蓝方涌文肖亮杰王宇留林承光伍建华林焕新林楚燕许森奎华南肿瘤学国家重点实验室/中山大学肿瘤防治中心广州510060

目的比较乳腺托架联合发泡胶固定和单发泡胶固定在乳腺癌放疗体位固定精度上的差异,为临床选择更优固定方式提供参考。方法选取2021年3月至2021年7月在中山大学肿瘤防治中心进行放疗的乳腺癌患者50例,其中25例患者使用发泡胶固定(发泡胶... 详细信息

目的比较乳腺托架联合发泡胶固定和单发泡胶固定在乳腺癌放疗体位固定精度上的差异,为临床选择更优固定方式提供参考。方法选取2021年3月至2021年7月在中山大学肿瘤防治中心进行放疗的乳腺癌患者50例,其中25例患者使用发泡胶固定(发泡胶组),另外25例患者使用发泡胶联合乳腺托架固定(联合组)。所有患者予每周1次CBCT扫描,获得左右(LR)、头脚(SI)、腹背(AP)方向误差并进行t检验,应用公式M_(PTV)=2.5Σ+0.7σ分别计算出对应的PTV外扩边界。结果发泡胶组LR、SI、AP方向的摆位误差分别是(0.88±2.76)、(2.0±3.26)、(1.22±3.55)mm,俯仰(Rtn)、翻滚(Pitch)、旋转(Roll)角度误差分别为-0.24°±0.85°、0.16°±1.11°、-0.32°±1.05°,对应的外扩边界分别是6.75、8.46、8.73 mm;联合组LR、SI、AP方向的摆位误差分别是(0.62±2.74)、(1.0±3.01)、(1.82±3.21)mm,Rtn、Pitch、Roll角度上的误差分别为0.64°±0.59°、0.71°±1.22°、0.29°±0.73°,对应的外扩边界分别是6.35、7.47、7.61 mm。两组的误差比较,LR、SI、AP方向和Rtn、Pitch、Roll角度的t值分别为-4.304、-2.681、1.384、-9.457、-3.683、-5.323,其中在LR、SI、Rtn、Pitch以及Roll方向上差异具有统计学意义(P<0.05)。结论使用发泡胶联合乳腺托架固定方式比单纯使用发泡胶固定效果更好,计划外扩边界也更小,因此推荐临床上乳腺癌放疗使用发泡胶联合乳腺托架固定技术。

关键词：乳腺肿瘤放射疗法锥形束CT 摆位误差外扩边界