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活细胞核浆粘滞系数的荧光相关谱研究

光谱学与光谱分析 2009年第2期29卷 459-462页

作者：梁丽芳邢达陈同生裴沂辉华南师范大学激光生命科学研究所激光生命科学教育部重点实验室广东广州510631

细胞核浆粘滞系数直接反映一定生理状态下核内微环境的特性,是判断病变细胞和研究核内分子功能机制的重要依据。为了实时、灵敏和无损地测定单个活细胞的核浆粘滞系数,提出了一种基于荧光相关谱(fluorescence correlation spectroscopy,... 详细信息

细胞核浆粘滞系数直接反映一定生理状态下核内微环境的特性,是判断病变细胞和研究核内分子功能机制的重要依据。为了实时、灵敏和无损地测定单个活细胞的核浆粘滞系数,提出了一种基于荧光相关谱(fluorescence correlation spectroscopy,FCS)技术的新型检测方法。研究中利用FCS技术测定绿荧光蛋白分子(EGFP)在细胞核内的扩散系数,并且根据Stokes-Einstein关系式计算出核浆粘滞系数,同时实现了对特定生理条件下核浆粘滞系数的跟踪测量。结果表明:在pH 7.4以及37℃的条件下,人肺腺癌细胞(ASTC-a-1)和人宫颈癌细胞(HeLa)的核浆粘滞系数分别是(2.55±0.61)cP和(2.04±0.49)cP,与传统方法的测量结果一致,并且发现核浆粘滞系数大于细胞质的粘滞系数。以上研究表明FCS技术可精确无损地检测单个活细胞内达飞升量级的微观环境,是探索细胞内生物分子动态行为的有力工具。

关键词：荧光相关谱(FCS) 细胞核浆细胞质粘滞系数

叶绿体延迟荧光中730nm成分产生机理的光谱学研究

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光谱学与光谱分析 2006年第1期26卷 6-10页

作者：王成龙邢达曾礼漳华南师范大学激光生命科学研究所暨激光生命科学教育部重点实验室广东广州510631

叶绿体685nm延迟荧光成分被认为源于PSⅡ作用中心的电荷复合。利用多种光谱学测量手段研究了叶绿体延迟荧光光谱中730nm峰的产生机制。不同浓度下叶绿体延迟荧光光谱实验结果表明:初始随浓度的增加,延迟荧光光谱中685和730nm成分强度均... 详细信息

叶绿体685nm延迟荧光成分被认为源于PSⅡ作用中心的电荷复合。利用多种光谱学测量手段研究了叶绿体延迟荧光光谱中730nm峰的产生机制。不同浓度下叶绿体延迟荧光光谱实验结果表明:初始随浓度的增加,延迟荧光光谱中685和730nm成分强度均增强;当浓度增加到7.8μg·mL-1时,685nm成分强度达最大,730nm成分强度继续上升;当浓度增加到31.2μg·mL-1时,延迟荧光光谱中730nm成分强度达最大,而685nm成分已明显下降。吸收光谱实验结果表明:A685A730在叶绿体浓度增加的过程中几乎不变。叶绿体730nm荧光成分的激发光谱实验结果表明:685nm光对730nm荧光有较高的激发效率。上述实验结果表明叶绿体延迟荧光光谱中730nm峰是由PSⅡ所发685nm成分激发PSⅠ所产生的荧光。同一浓度下叶绿体延迟荧光光谱波形随延迟时间(1～9s)的不变性进一步证明了这一结论。

关键词：叶绿体延迟荧光 PSⅡ PSⅠ 重吸收

利用FCLA特征荧光实现单态氧和超氧的高灵敏检测

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光谱学与光谱分析 2008年第11期28卷 2633-2635页

作者：魏言春罗世明徐未华南师范大学激光生命科学研究所暨激光生命科学教育部重点实验室广东广州510631

活性氧(ROS)的检测对生物学和医学研究很多领域方面具有重要意义,如光动力治疗肿瘤的治疗检测、植物应激反应检测、种子活力检测等。实现活性氧中的单态氧、超氧阴离子高灵敏度的检测,是人们追求的目标。研究发现单态氧、超氧的选择性... 详细信息

活性氧(ROS)的检测对生物学和医学研究很多领域方面具有重要意义,如光动力治疗肿瘤的治疗检测、植物应激反应检测、种子活力检测等。实现活性氧中的单态氧、超氧阴离子高灵敏度的检测,是人们追求的目标。研究发现单态氧、超氧的选择性化学发光探针FCLA(fluoresceinyl cypridina luciferin analog)氧化后,在515 nm处荧光会大大增强。利用这个性质并结合非常成熟的荧光检测方法,可以实现活性氧的高灵敏度检测。尤其在微观检测方面,如单细胞,FCLA的化学发光很微弱而难以检测到,但是却可以灵敏地检测到其荧光变化。FCLA荧光检测不仅灵敏度高而且选择性好,其无毒和易于透膜的性质更适于在细胞和生物体上应用。另外如果同时结合FCLA的化学发光,对单态氧和超氧阴离子的检测将更准确、更具实时性。

关键词： FCLA 单态氧超氧阴离子荧光

激光技术在聚合酶链式反应微流控芯片中的应用

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分析化学 2008年第2期36卷 259-265页

作者：章春笋邢达李彧媛华南师范大学激光生命科学教育部重点实验室暨激光生命科学研究所华南师范大学激光生命科学教育部重点实验室暨激光生命科学研究所广州510631

评述了激光技术在聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)微流控芯片领域中的应用进展,包括激光技术在PCR微流控芯片微加工、微流体物理参数测量、温度循环控制以及芯片上在线产物检测(包括荧光实时定量/终点和毛细管电泳检测)... 详细信息

评述了激光技术在聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)微流控芯片领域中的应用进展,包括激光技术在PCR微流控芯片微加工、微流体物理参数测量、温度循环控制以及芯片上在线产物检测(包括荧光实时定量/终点和毛细管电泳检测)中的应用。最后,展望了激光技术在未来基于PCR的微全分析系统(micro-total analysis system,μTAS)中的新应用。

关键词：激光技术聚合酶链式反应(PCR) 微流控芯片微细加工微流体物理参数测量与控制评述

溶胶-凝胶法制备毛细管硅胶整体柱的研究进展

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分析化学 2008年第6期36卷 853-859页

作者：陈雅顺贾丽华南师范大学激光生命科学教育部重点实验室激光生命科学研究所华南师范大学激光生命科学教育部重点实验室激光生命科学研究所广州510631

毛细管硅胶整体柱作为一种新型的分离介质,在色谱领域显示出了强大的生命力。本评述介绍了溶胶-凝胶法制备毛细管硅胶整体柱的方法,重点分析了溶胶-凝胶法制备毛细管硅胶整体柱的影响因素,总结了近几年毛细管硅胶整体柱在高效液相色谱... 详细信息

毛细管硅胶整体柱作为一种新型的分离介质,在色谱领域显示出了强大的生命力。本评述介绍了溶胶-凝胶法制备毛细管硅胶整体柱的方法,重点分析了溶胶-凝胶法制备毛细管硅胶整体柱的影响因素,总结了近几年毛细管硅胶整体柱在高效液相色谱和电色谱中的应用。

关键词：溶胶-凝胶法毛细管硅胶整体柱综述

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利用光诱导延迟荧光的植物盐胁迫生理监测

光子学报 2007年第12期36卷 2284-2289页

作者：张玲瑞邢达王俊生曾礼漳李强华南师范大学激光生命科学研究所暨激光生命科学教育部重点实验室广州510631

利用自制的便携式延迟荧光(Delayed Fluorescence,DF)探测系统,以早熟18号大豆品种为实验材料,研究了盐胁迫对植物叶绿体DF特性的影响.结果发现在单纯的盐胁迫和盐胁迫伤害程度被调控缓解时,绿色植物叶片光诱导DF强度的变化都能很好地... 详细信息

利用自制的便携式延迟荧光(Delayed Fluorescence,DF)探测系统,以早熟18号大豆品种为实验材料,研究了盐胁迫对植物叶绿体DF特性的影响.结果发现在单纯的盐胁迫和盐胁迫伤害程度被调控缓解时,绿色植物叶片光诱导DF强度的变化都能很好地反应植物叶片光合性能的变化.因此,可以用DF强度的变化来表征盐胁迫对植物的伤害程度.

关键词：延迟荧光光合速率盐胁迫缓解效应

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镉在夜蛾科昆虫—蠋蝽的传递特征及其影响

环境昆虫学报 2024年第5期46卷 1151-1160页

作者：吴凯旋陈瑾黄诗敏舒迎花农业农村部华南热带农业环境重点实验室广州510642 华南农业大学资源环境学院生态学系广州510642 贵州师范大学生命科学学院贵阳550025

土壤镉(Cd)污染不仅危害植物,还会通过植物吸收进入食物链进而影响植食性昆虫及其天敌。本研究使用含不同Cd浓度(0、4.06 mg/kg和40.6 mg/kg)的人工饲料饲喂斜纹夜蛾Spodoptera litura和草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda幼虫,发育至蛹,... 详细信息

土壤镉(Cd)污染不仅危害植物,还会通过植物吸收进入食物链进而影响植食性昆虫及其天敌。本研究使用含不同Cd浓度(0、4.06 mg/kg和40.6 mg/kg)的人工饲料饲喂斜纹夜蛾Spodoptera litura和草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda幼虫,发育至蛹,以蛹饲养其捕食性天敌蠋蝽Arma chinensis,研究了Cd在夜蛾科昆虫—蠋蝽的传递特征及其影响。结果表明:斜纹夜蛾和草地贪夜蛾对Cd的摄取量、排泄量和积累量,蠋蝽对Cd的摄取量和积累量均与人工饲料中Cd浓度呈剂量反应,即随着饲料中Cd浓度增加而增加。饲料—夜蛾科昆虫Cd的生物浓缩系数(BCF)大于1,这表明夜蛾科昆虫会生物放大Cd,而夜蛾科昆虫蛹—蠋蝽Cd的生物放大系数(BMF)小于1,这表示发生了Cd生物稀释作用。4.06 mg/kg Cd胁迫显著降低草地贪夜蛾幼虫相对生长率(RGR),而对斜纹夜蛾RGR没有影响,这与体内Cd积累量和BCF显著相关;40.6 mg/kg Cd胁迫显著改变夜蛾科昆虫的食物利用,抑制幼虫生长发育,降低取食斜纹夜蛾蛹的蠋蝽体重,但Cd胁迫对蠋蝽存活没有影响。因此,尽管Cd在植食性昆虫—捕食者没有生物放大作用,但仍然存在生物毒性效应。

关键词：重金属传递 Cd胁迫草地贪夜蛾斜纹夜蛾蠋蝽

电化学发光反转录聚合酶链式反应技术检测齿兰环斑病毒

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分析化学 2006年第8期34卷 1087-1090页

作者：唐亚兵邢达刘晋峰朱德斌华南师范大学激光生命科学研究所暨激光生命科学教育部重点实验室华南师范大学激光生命科学研究所暨激光生命科学教育部重点实验室广州510631

发展高效的病毒检测技术已成为当今生物学研究的热点之一。本研究将反转录聚合酶链式反应(PCR)技术与电化学发光分析方法结合起来,用于检测兰花中齿兰环斑病毒。检测过程中采用生物素标记的探针与PCR产物杂交,可起到筛选特异性产物的作... 详细信息

发展高效的病毒检测技术已成为当今生物学研究的热点之一。本研究将反转录聚合酶链式反应(PCR)技术与电化学发光分析方法结合起来,用于检测兰花中齿兰环斑病毒。检测过程中采用生物素标记的探针与PCR产物杂交,可起到筛选特异性产物的作用,从而避免假阳性结果的产生。三联吡啶钌标记探针与PCR产物杂交,既可以起到进一步筛选目的片段的作用,又可与分析液中的三丙胺反应,从而产生光信号,被电化学发光仪所检测到。在引物的5′端分别连接一段特异性核酸序列,既提高了钌探针与特异性产物的杂交几率,又增强了样品检测信号,从而提高了信躁比。实验结果表明:此方法灵敏度高、稳定性好、操作简单,可以从兰花样品中准确地检测到齿兰环斑病毒,有望发展成为一种高效的病毒检测方法。

关键词：电化学发光齿兰环斑病毒三联吡啶钌

基于高灵敏探针海萤荧光素类似物的化学发光法检测尿微量白蛋白

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分析化学 2008年第1期36卷 57-60页

作者：徐未魏言春邢达陈群华南师范大学激光生命科学研究所暨激光生命科学教育部重点实验室华南师范大学激光生命科学研究所暨激光生命科学教育部重点实验室广州510631

海萤荧光素类似物FCLA能检测1O2并产生532nm的化学发光,白蛋白(HSA)能强烈增强FCLA-1O2化学发光。基于此,建立了一种有效、高灵敏的检测HSA的化学发光(CL)检测技术。在选定的最佳实验条件下,HSA浓度与增强化学发光信号在0.34～5.5mg/L... 详细信息

海萤荧光素类似物FCLA能检测1O2并产生532nm的化学发光,白蛋白(HSA)能强烈增强FCLA-1O2化学发光。基于此,建立了一种有效、高灵敏的检测HSA的化学发光(CL)检测技术。在选定的最佳实验条件下,HSA浓度与增强化学发光信号在0.34～5.5mg/L之间呈良好的线性关系;检出限为0.017mg/L(3σ)。对比荧光光谱分析法、同步荧光扫描法及瑞利光散射法等传统方法,本方法成本低廉、灵敏度高。实际尿样检测与临床检测结果一致,同时还初步探讨了HSA增敏CL的机制。

关键词：化学发光白蛋白海萤荧光素类似物单态氧