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白藜芦醇通过Zn^(2+)促进自噬发挥心肌细胞保护作用

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中国药理学通报 2023年第6期39卷 1048-1054页

作者：王培马虎杨颖刘天宇郭佳宝胡友成贺永贵习瑾昆华北理工大学公共卫生学院河北唐山063210 华北理工大学体育部河北唐山063210 华北理工大学基础医学院河北唐山063210 华北理工大学附属医院河北唐山063210

目的探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)是否通过锌离子(Zinc,Zn^(2+))促进自噬,抑制内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS),发挥心肌细胞保护作用及可能的信号机制。方法常规培养H9c2细胞,2-脱氧葡萄糖(2-deoxyglucose,2-DG)建立ERS模型。随机分为Control组、2-DG组、Res+2-DG组、锌离子螯合剂TPEN+Res+2-DG组、自噬抑制剂3-MA+Res+2-DG组。MTT和CCK-8法检测细胞活性;Western blot法检测ERS分子伴侣蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、葡萄糖调节蛋白94(GRP94)和自噬蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、p62、p-AMPK的表达水平;免疫荧光检测LC3蛋白的表达;激光扫描共聚焦显微镜检测线粒体通透性转换孔(mitochondrial permeability transition pore,mPTP)和细胞内Zn^(2+)水平。结果与Control组相比,2-DG使细胞活性降低,Res抑制2-DG引起的变化,此作用被TPEN所逆转;2-DG使GRP78、GRP94表达明显增多,Res抑制2-DG引起的变化,此作用被TPEN逆转;2-DG使LC3Ⅱ/Ⅰ、p-AMPK表达增多,p62表达减少,Res促进2-DG引起的变化,此作用被TPEN逆转;2-DG使LC3的荧光强度升高,Res增强2-DG的作用,此作用被TPEN和3-MA所逆转;2-DG使线粒体TMRE红色荧光及细胞内Zn^(2+)的绿色荧光强度明显降低,Res抑制2-DG引起的荧光强度变化,这些作用同样被TPEN和3-MA所逆转。以上结果差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论Res通过增加细胞内Zn^(2+)促进自噬,抑制ERS进而阻止mPTP的开放,发挥心肌细胞保护作用。

关键词：白藜芦醇 2-脱氧葡萄糖锌离子自噬内质网应激心肌保护

3-溴丙酮酸对前列腺癌PC-3细胞增殖、迁移及侵袭的影响

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中华男科学杂志 2020年第1期26卷 17-23页

作者：李立坤张小军王立民胡锦洋曹凤宏华北理工大学附属医院泌尿外科河北唐山063000

目的:观察3-溴丙酮酸(3-BrPA)对前列腺癌细胞PC-3增殖、迁移和侵袭能力的影响,并初步探讨其内在机制。方法:体外培养PC-3细胞,倒置显微镜下观察不同浓度3-BrPA对PC-3细胞形态学的影响;应用MTT法、细胞划痕和Transwell法检测不同浓度3-B... 详细信息

目的:观察3-溴丙酮酸(3-BrPA)对前列腺癌细胞PC-3增殖、迁移和侵袭能力的影响,并初步探讨其内在机制。方法:体外培养PC-3细胞,倒置显微镜下观察不同浓度3-BrPA对PC-3细胞形态学的影响;应用MTT法、细胞划痕和Transwell法检测不同浓度3-BrPA在不同时间段(24、48、72 h)对前列腺癌PC-3细胞增殖、迁移和侵袭的影响;应用Western印迹检测3-BrPA作用后各组PC-3细胞葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)和基质金属蛋白酶14、9、2(MMP-14、MMP-9、MMP-2)蛋白表达的变化。结果:在一定浓度范围内,随着3-BrPA浓度的升高,细胞形态的改变愈明显。MTT结果表明,随着3-BrPA浓度的增加、作用时间延长PC-3细胞抑制率增大(P<0.01)。细胞划痕和Transwell细胞侵袭实验显示:与对照组相比,培养24 h后25、50、100μmol/L 3-BrPA浓度组细胞划痕迁移愈合率降低,细胞侵袭数目减少,且培养48 h与24 h相比,各组细胞迁移愈合率和侵袭细胞数目均降低,表明细胞体外迁移率和侵袭细胞数目与3-BrPA作用浓度、作用时间有关,具有剂量和时间依赖性(P<0.01)。Western印迹检测结果表明:与对照组相比,25、50、100μmol/L 3-BrPA浓度组中GLUT1、MMP-14、MMP-9、MMP-2蛋白表达量明显降低(P<0.01)。结论:糖酵解抑制剂3-BrPA降低PC-3增殖、迁移和侵袭能力,可能与下调GLUT1、MMP-14、MMP-9及MMP-2蛋白表达有关。

关键词： 3-溴丙酮酸前列腺癌 PC-3 迁移侵袭

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血友病关节软骨发病机制的研究进展

中国实验动物学报 2022年第7期30卷 996-1002页

作者：陈爽闫振宇华北理工大学河北唐山063000 华北理工大学附属医院河北唐山063000

本文就血友病关节软骨发病机制的研究进展做一综述,以期进一步理解血友病软骨损伤发生发展的独特机制,旨在为修复软骨新的治疗手段提供新思路。遴选PubMed、Web of Science、SpringerLink、Google Scholar等英文数据库和中国知网、维普... 详细信息

本文就血友病关节软骨发病机制的研究进展做一综述,以期进一步理解血友病软骨损伤发生发展的独特机制,旨在为修复软骨新的治疗手段提供新思路。遴选PubMed、Web of Science、SpringerLink、Google Scholar等英文数据库和中国知网、维普网、万方网等中文数据库,英文检索关键词为“hemophilic、Joint bleeding、cartilage、Pathogenesis、cytokine、immunocyte、iron、synovitis、blood、plasmin、signaling pathway”,中文检索关键词为“血友病、关节出血、软骨、发病机制、细胞因子、免疫细胞、铁、滑膜炎、血液、纤溶酶、信号通路”,根据入选标准及排除标准,检索自1981年1月~2022年3月血友病关节软骨病理生理学相关度较高的文献,排除内容陈旧或重复性文献,最终纳入相关文献60篇多种细胞因子、免疫细胞、铁离子沉积、慢性滑膜炎、血液、纤溶酶、信号通路等均会导致软骨细胞凋亡,从而导致血友病软骨损伤,其中铁离子沉积是造成血友病软骨损伤的关键;各个影响因素在发病之间相互联系,复杂交错,如何调控各个影响因素对关节软骨的损害,有望成为修复软骨的重要方法。

关键词：血友病关节出血软骨发病机制

脐带间充质干细胞对小胶质细胞活化表型的调节

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中国免疫学杂志 2019年第7期35卷 796-799页

作者：刘湄漪陈乃耀周葳崔亚欢刘竞冯会超华北理工大学附属医院血液内科唐山063000

目的:探讨脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)是否以外分泌的方式调节小胶质细胞M1/M2极化表型,并且探讨其机制。方法:提取原代脐带间充质干细胞,并制备含有hUC-MSCs分泌的全部营养因子的条件培养基(hUC-MSCs-CM)。实验分为:空白对照组,单纯LP... 详细信息

目的:探讨脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)是否以外分泌的方式调节小胶质细胞M1/M2极化表型,并且探讨其机制。方法:提取原代脐带间充质干细胞,并制备含有hUC-MSCs分泌的全部营养因子的条件培养基(hUC-MSCs-CM)。实验分为:空白对照组,单纯LPS刺激组,单纯hUC-MSCs-CM刺激组,LPS、hUC-MSCs-CM共刺激组,刺激24 h后收集上清和蛋白。ELISA方法检测上清中TNF-α、IL-6浓度,Western blot检测CD86、精氨酸酶1(Arg1)、PI3K的蛋白表达量。结果:①LPS诱导BV2细胞分泌TNF-α、IL-6因子增多,LPS、hUC-MSCs-CM共刺激组与LPS组相比,TNF-α、IL-6表达明显降低(P <0. 05);②LPS刺激组BV2细胞M1型标志物CD86表达明显增多,hUC-MSCs-CM共刺激组与LPS组相比CD86表达降低(P <0. 05)。LPS、hUC-MSCs-CM共刺激组M2型标志物Arg1表达增多(P <0. 05);③LPS、hUC-MSCs-CM共刺激组上调PI3K磷酸化水平(P <0. 05)。结论:①hUC-MSCs以外分泌的方式抑制小胶质细胞炎性因子的分泌;②hUC-MSCs促进活化的小胶质细胞由M1型向M2型转化,其机制可能与激活PI3K/AKT通路相关。

关键词：脐带间充质干细胞小胶质细胞表型 PI3K通路

仙灵骨葆胶囊对糖尿病骨质疏松大鼠β-catenin、Runx2、LRP5的影响

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中药新药与临床药理 2023年第2期34卷 156-162页

作者：焦颖华郭倩包凯然邢磊崔立华齐宁华北理工大学附属医院河北唐山063000 华北理工大学河北唐山063000

目的观察糖尿病大鼠在仙灵骨葆胶囊的干预下,骨保护作用的发挥及仙灵骨葆胶囊对Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的作用,探讨仙灵骨葆胶囊在防治糖尿病骨质疏松中可能的作用机制。方法雄性SD大鼠36只,左下腹腔注射链脲佐菌素(STZ,... 详细信息

目的观察糖尿病大鼠在仙灵骨葆胶囊的干预下,骨保护作用的发挥及仙灵骨葆胶囊对Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的作用,探讨仙灵骨葆胶囊在防治糖尿病骨质疏松中可能的作用机制。方法雄性SD大鼠36只,左下腹腔注射链脲佐菌素(STZ,60 mg·kg^(-1)),建立糖尿病大鼠模型,随机分为模型组、仙灵骨葆组(250 mg·kg^(-1))、阿仑膦酸钠组(1 mg·kg^(-1)),每组12只;同时设正常组12只。治疗12周后,检测生化指标:空腹血糖(FBG)、血钙(BC)、血磷(BP)、碱性磷酸酶(ALP);酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定骨碱性磷酸酶(BALP)、I型前胶原氨基末端前肽(PINP)、骨钙素(OCN)、骨保护蛋白(OPG)含量;检测大鼠骨密度(BMD)和股骨生物力学性能;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测大鼠骨组织β-catenin、Runt相关转录因子2(Runx2)、低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP5)mRNA的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠血清FBG、ALP、BALP、PINP、OPG水平升高(P病骨质疏松大鼠股骨生物力学性能(P病大鼠骨代谢,主要与调节Wnt/β-catenin信号转导通路有关,其中β-catenin、Runx2、LRP5 mRNA表达的增加对骨代谢有积极意义,在骨细胞分化方面有促进作用,具体表现在骨组织形态的改善及骨破坏减少,为糖尿病骨质疏松的防治提供了一条新思路。

关键词：仙灵骨葆胶囊糖尿病骨质疏松症 Wnt/β-catenin信号通路 β-catenin Runx2 LRP5 大鼠

钙网蛋白通过调节线粒体功能和线粒体合酶促进胃癌细胞转移

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中国病理生理杂志 2023年第11期39卷 1973-1983页

作者：李宁张美航孟爱国王沂刘海颖王彤华北理工大学附属医院检验科河北唐山063000 华北理工大学人事处河北唐山063000 华北理工大学研究生学院河北唐山063000

目的:探讨钙网蛋白(CALR)在胃癌组织中的表达水平及其调节AGS、HGC-27细胞转移的作用机制。方法:收集65例胃癌患者肿瘤组织样本和16例大网膜转移组织样本,采用免疫组织化学法检测胃癌及大网膜转移组织中CALR的表达水平;通过小干扰RNA(si... 详细信息

目的:探讨钙网蛋白(CALR)在胃癌组织中的表达水平及其调节AGS、HGC-27细胞转移的作用机制。方法:收集65例胃癌患者肿瘤组织样本和16例大网膜转移组织样本,采用免疫组织化学法检测胃癌及大网膜转移组织中CALR的表达水平;通过小干扰RNA(siRNA)下调AGS和HGC-27细胞中CALR的表达,通过慢病毒转染技术过表达AGS和HGC-27细胞中的CALR,采用Transwell实验和细胞划痕实验检测CALR表达对AGS、HGC-27细胞侵袭和迁移的影响;采用活性氧(ROS)和线粒体三磷酸腺苷(ATP)荧光探针检测AGS、HGC-27细胞ROS水平和ATP荧光强度;采用线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)检测AGS、HGC-27细胞线粒体膜电位水平;Western blot法检测CALR、肌浆/内质网Ca^(2+)转运ATP酶A2(ATP2A2)、ATP酶Na+/K+转运亚基Beta 3(ATP1B3)和ATP合酶-偶联因子6(ATP5J)的蛋白表达水平;建立胃癌裸鼠腹腔移植瘤模型,探究CALR在体内对HGC-27细胞增殖的影响。结果:与癌旁组织比较,CALR在胃癌组织和大网膜转移组织中显著过表达(P<0.01);CALR过表达显著促进AGS、HGC-27细胞侵袭和迁移,而siRNA CALR则抑制胃癌细胞的侵袭和迁移(P<0.01);pcDNA3.1-CALR组AGS、HGC-27细胞中ATP荧光强度、线粒体膜电位水平均显著升高,ROS水平则降低;而siRNA-CALR组ATP荧光强度、线粒体膜电位水平均显著降低,ROS水平则升高(P<0.01);此外,与阴性对照组比较,pcDNA3.1-CALR组AGS、HGC-27细胞中CALR、ATP2A2、ATP1B3和ATP5J蛋白表达水平均显著升高,而siRNA-CALR组CALR、ATP2A2、ATP1B3和ATP5J蛋白表达水平均显著降低(P<0.01);在裸鼠模型中,敲减CALR可显著抑制肿瘤组织的生长,降低肿瘤组织中ATP2A2、ATP1B3和ATP5J蛋白的表达水平。结论:CALR在人胃癌组织及大网膜转移组织中过表达,CALR可通过调节线粒体膜电位和ATP合酶介导线粒体功能,影响胃癌AGS和HGC-27细胞的转移。

关键词：胃癌侵袭迁移钙网蛋白线粒体功能障碍

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症状性心肌桥患者平板运动试验心电图与运动-静息核素心肌灌注显像的对比研究

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中南大学学报（医学版） 2016年第6期41卷 593-599页

作者：赵新斌傅昱董小波闫杰华北理工大学附属医院CT室唐山市第九医院CT室开滦总医院核医学科华北理工大学附属医院心内科河北唐山063000

目的：对比分析症状性心肌桥（myocardial bridge,MB）患者平板运动试验（treadmill exercise test,TET）心电图与运动-静息核素心肌灌注显像（myocardial perfusion imaging,MPI）的特点及差异。方法：回顾性分析具有心前区疼痛、不适... 详细信息

目的：对比分析症状性心肌桥（myocardial bridge,MB）患者平板运动试验（treadmill exercise test,TET）心电图与运动-静息核素心肌灌注显像（myocardial perfusion imaging,MPI）的特点及差异。方法：回顾性分析具有心前区疼痛、不适等典型心肌缺血症状经256层螺旋CT冠状动脉成像（CT coronary angiography,CTCA）确诊为单纯左前降支（left anterior descending artery,LAD）MB,1周内进行TET心电图及运动-静息核素MPI检查的97例（男59例,女38例）患者资料。依据MB形态分为不完全MB组（n=41）与完全MB组（n=56）;依据壁冠状动脉（mural coronary artery,MCA）收缩期狭窄程度行Noble分级,分为Noble 1级组（n=44）、2级组（n=31）、3级组（n=2）;另外,根据检测方法将异常的检出者分为TET异常组（n=21）和MPI异常组（n=31）。比较总的、不同MB类型及Noble分级中TET与MPI的差异,以及TET及MPI异常者中完全MB厚度、长度的差异。结果：总的MPI阳性率（39/97）高于TET（26/97）,差异有统计学意义（χ^2=8.048,P〈0.01）。不完全MB组TET（5/41）与MPI（8/41）阳性率差异无统计学意义（χ^2=1.000,P〉0.05）。完全MB组MPI阳性率（31/56）比TET（21/56）高,差异有统计学意义（χ^2=8.333,P〈0.01）。Noble 1级组TET（6/44）与MPI（12/44）,2级组TET（11/42）与MPI（18/42）的阳性率差异均有统计学意义（分别χ^2=4.500,P〈0.05;χ^2=5.444,P〈0.05）。3级组TET（9/11）与MPI（9/11）阳性率差异无统计学意义（P〉0.05）。TET与MPI异常中完全MB组厚度分别为（3.4±0.6）和（2.9±0.8）mm,差异有统计学意义（t=2.229,P〈0.05）;MB长度分别为（16.6±5.5）和（15.7±7.1）mm,差异无统计学意义（t=0.489,P〉0.05）。结论：在评价MB患者心肌缺血方面运动-静息核素MPI比TET更敏感,尤其对完全MB及MCA收缩期狭窄轻中度程度者。但两种检查方法对不完全MB患者心肌缺血检出阳性率均低,而对MCA收缩期重度狭窄者则均高度敏感。两种检查结果阳性中MB厚度有差异,而MB长度无明显差异。

关键词：心肌桥 CT冠状动脉成像平板运动试验心肌灌注显像

ZIF-8泡腾辅助分散固相萃取结合高效液相色谱-串联质谱法测定人尿液中苯二氮卓类药物

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分析测试学报 2024年第5期43卷 682-689页

作者：赵志栋夏磊赵俊暕崔传金封成玲王曼曼华北理工大学公共卫生学院河北唐山063210 华北理工大学电气工程学院河北唐山063210 华北理工大学附属医院河北唐山063000

发展了基于沸石咪唑酯骨架材料-8(ZIF-8)的泡腾辅助分散固相萃取(ET-DSPE)技术,结合高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)对人尿液中艾司唑仑、阿普唑仑、地西泮、三唑仑和劳拉西泮5种苯二氮卓类药物(BZDs)进行分析。采用傅里叶变换红... 详细信息

发展了基于沸石咪唑酯骨架材料-8(ZIF-8)的泡腾辅助分散固相萃取(ET-DSPE)技术,结合高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)对人尿液中艾司唑仑、阿普唑仑、地西泮、三唑仑和劳拉西泮5种苯二氮卓类药物(BZDs)进行分析。采用傅里叶变换红外光谱、X射线衍射仪、扫描电子显微镜和全自动比表面积及孔隙分析仪对ZIF-8进行表征,并考察了ZIF-8和Na_(2)CO_(3)用量、吸附时间、溶液pH值及离子强度、尿液稀释比例、洗脱溶剂、洗脱体积和时间对BZDs萃取效率的影响。在最佳条件下,艾司唑仑在0.002~100 ng/mL,其余4种BZDs在0.001~100 ng/mL范围内线性关系良好(r≥0.999),检出限和定量下限分别为0.0003~0.0006 ng/mL和0.001~0.002 ng/mL,3个加标水平下的回收率为81.6%~108%,日内和日间相对标准偏差分别为1.4%~5.6%和1.4%~9.9%。该方法不仅能够直接处理原始尿液,无需稀释和去蛋白操作,而且通过泡腾辅助分散,对BZDs的富集倍数达40.8~54.0倍,实现了尿液中5种BZDs的准确、简便和灵敏分析。

关键词：尿液苯二氮卓类药物泡腾辅助分散固相萃取高效液相色谱-串联质谱法

基于计划行为理论的干预对老年肌少症患者疾病认知、运动自我效能及日常生活能力的影响

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现代预防医学 2024年第14期51卷 2615-2619页

作者：杨雅楠于瑶邢凤梅蔡逢雨薛新宏王晓光张小丽华北理工大学护理与康复学院华北理工大学临床医学院华北理工大学附属医院

目的探讨基于计划行为理论的干预对老年肌少症患者疾病认知、运动自我效能以及日常生活能力的影响。方法采用便利抽样法，选取石家庄市丽水湾社区和书香苑社区的124例老年肌少症患者为研究对象。使用抛硬币法以居住社区为单位将丽水... 详细信息

目的探讨基于计划行为理论的干预对老年肌少症患者疾病认知、运动自我效能以及日常生活能力的影响。方法采用便利抽样法，选取石家庄市丽水湾社区和书香苑社区的124例老年肌少症患者为研究对象。使用抛硬币法以居住社区为单位将丽水湾社区的62例老年人纳入干预组，书香苑社区的62例老年人纳入对照组。干预组实施基于计划行为理论的干预，包含行为态度、重要他人支持、知觉行为控制、行为意向以及行为五个方面；对照组维持原来的生活方式，干预时长为12周。分别在干预前、12周后采用简易疾病认知问卷、运动自我效能量表和日常生活能力量表对两组患者进行效果评价。结果干预前，两组患者的疾病认知、运动自我效能及日常生活能力得分比较均无统计学差异(P>0.05);干预后，干预组老年患者疾病认知、运动自我效能及日常生活能力与对照组相比均有改善，差异有统计学意义(P病认知水平、运动自我效能，改善日常生活能力。

关键词：肌少症老年患者计划行为理论干预