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miR-185对肝癌细胞生长增殖及侵袭迁移的影响

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第三军医大学学报 2016年第17期38卷 1918-1923页

作者：王密斯张荣花王琳孔艺璇冯雪研刘志勇甄永占章广玲华北理工大学基础医学院病原生物学与免疫学教研室河北唐山063000 华北理工大学附属医院胸心外科河北唐山063000 华北理工大学基础医学院组织学与胚胎学教研室河北唐山063000 华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病重点实验室唐山市慢性病临床基础研究重点实验室河北唐山063000

目的探讨miR-185对人肝癌细胞Hep G2和SMMC-7721生长增殖、侵袭迁移能力的影响。方法构建miR-185过表达载体、合成miR-185反义寡聚核苷酸(antisense oligonucleotide,ASO),经脂质体转染肝癌细胞Hep G2和SMMC-7721。利用CCK-8和Transwell小室实验检测细胞的增殖、侵袭和迁移能力;生物信息学数据库预测结合基因芯片结果确定miR-185的候选靶基因NR1D1;利用实时荧光定量PCR技术和Western blot检测miR-185对细胞中NR1D1基因表达水平的影响;荧光报告载体实验验证miR-185对靶基因的调控作用。结果 miR-185在人肝癌细胞中的mRNA表达水平显著低于正常肝细胞(P<0.01);过表达miR-185使人肝癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力降低,下调肝癌细胞中NR1D1基因的mRNA和蛋白的表达水平(P<0.01);荧光报告载体实验证明miR-185可以通过作用于NR1D1 mRNA的3'端非翻译区(untranslated region,UTR)下调其表达水平(P<0.05)。结论 miR-185能抑制肝癌细胞的增殖、侵袭迁移能力,NR1D1是miR-185的直接靶基因。

关键词： miR-185 肝癌细胞细胞增殖肿瘤浸润细胞运动

SiO_(2)NPs通过诱导氧化应激激活Fas/FasL通路促进TM4细胞凋亡

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生物化学与生物物理进展 2022年第10期49卷 2024-2033页

作者：王旭莹郭志义郝会宇孙凡丽张品正孟芳宇陈紫云李金泽尚璇华北理工大学公共卫生学院唐山063210 华北理工大学基础医学院唐山063210 河北省慢性疾病基础医学重点实验室唐山063210

目的探讨纳米二氧化硅(silicon dioxide nanoparticles,SiO_(2)NPs)对小鼠睾丸支持细胞(TM4)的毒性作用及其分子机制。方法将TM4细胞暴露于不同浓度的SiO_(2)NPs(0、1、10、100 mg/L)培养液24 h,处理结束后,采用光学显微镜和CCK-8法检... 详细信息

目的探讨纳米二氧化硅(silicon dioxide nanoparticles,SiO_(2)NPs)对小鼠睾丸支持细胞(TM4)的毒性作用及其分子机制。方法将TM4细胞暴露于不同浓度的SiO_(2)NPs(0、1、10、100 mg/L)培养液24 h,处理结束后,采用光学显微镜和CCK-8法检测小鼠睾丸支持细胞的形态和活性。利用荧光探针DCFH-DA检测细胞内活性氧(ROS)水平,MDA和SOD试剂盒检测细胞内的丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。利用Annexin V-FITC/PI凋亡试剂盒分析TM4细胞的凋亡水平,免疫印迹法检测Fas、FasL、Caspase-8、Caspase-3、Bax和Bcl-2等细胞凋亡信号分子的蛋白质表达水平。结果研究发现,SiO_(2)NPs呈剂量依赖性地抑制TM4细胞增殖,降低细胞存活率和数量,并影响细胞的形态结构。此外,SiO_(2)NPs诱导TM4细胞产生过量ROS,引起脂质过氧化产物MDA含量以及抗氧化酶SOD活性增加导致氧化应激。进一步研究显示,SiO_(2)NPs显著增加TM4细胞凋亡水平,并激活Fas/FasL死亡受体介导的细胞凋亡信号通路。有意思的是,抗氧化剂NAC可以通过降低氧化应激水平有效缓解SiO_(2)NPs引起的TM4细胞损伤和细胞凋亡。结论综上,SiO_(2)NPs通过诱导氧化应激激活Fas/FasL信号通路促进TM4细胞凋亡。

关键词：纳米二氧化硅(SiO_(2)NPs) 生殖毒性 TM4细胞氧化应激细胞凋亡

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CaMKⅡγ在破骨细胞分化中的表达规律

中南大学学报（医学版） 2018年第3期43卷 240-245页

作者：李瑛戚孟春董伟王会冯晓洁温黎明孙红华北理工大学口腔医学院口腔颌面外科教研室河北唐山063000 华北理工大学基础医学院病理学教研室河北唐山063000

目的:研究钙离子/钙调蛋白依赖性激酶γ(CaMKⅡγ)在破骨细胞分化中的表达规律,以揭示其作用。方法:用50 ng/m L核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导RAW264.7细胞向破骨细胞分化,于诱导后第0,1,3,5天收获细胞,用抗酒石酸酸性磷酸酶(T... 详细信息

目的:研究钙离子/钙调蛋白依赖性激酶γ(CaMKⅡγ)在破骨细胞分化中的表达规律,以揭示其作用。方法:用50 ng/m L核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导RAW264.7细胞向破骨细胞分化,于诱导后第0,1,3,5天收获细胞,用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色评价破骨细胞生成情况,并用RT-PCR、Western印迹、免疫荧光细胞化学法检测CaMKⅡγm RNA和蛋白表达。结果:多核破骨细胞在诱导后第3天开始出现,第5天达到最多。分化第0,1,3,5天,CaMKⅡγm RNA相对表达水平分别为(1.067±0.179),(1.840±0.070),(9.493±0.453)和(30.767±0.573);蛋白相对表达水平分别为(0.454±0.065),(0.613±0.021),(0.858±0.019)和(0.980±0.023);除第1天的蛋白相对水平外,其他时间点CaMKⅡγm RNA和蛋白表达差异均有统计学意义,且呈时间依赖性增强(P免疫荧光细胞化学法检测也显示CaMKⅡγ蛋白表达在破骨细胞分化过程中逐步增加。结论:CaMKⅡγ表达随破骨细胞分化呈时间依赖性增加,提示其在破骨细胞分化中可能发挥关键调控作用。

关键词：钙离子/钙调蛋白依赖性激酶γ 破骨细胞受体活化核因子-κB配体抗酒石酸酸性磷酸酶染色

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微小RNA在恶性肿瘤靶向治疗中的研究进展

基因组学与应用生物学 2018年第5期37卷 2272-2275页

作者：赵洪焕孔艺璇章广玲李玉凤韩素桂华北理工大学基础医学院病原生物学与免疫学教研室唐山063000 华北理工大学附属唐山市人民医院唐山063000 华北理工大学基础医学院、河北省慢性疾病重点实验室、唐山市慢性病临床基础研究重点实验室唐山063000

恶性肿瘤一直是当今世界最难攻克的顽疾之一,肿瘤靶向治疗以其高效低毒等特点为病人带来了新的希望,目前的靶向药物主要是单克隆抗体和小分子酪氨酸激酶抑制剂。微小RNA（micro RNA,mi RNA）是一类小的、进化保守的非编码RNA,负性调节... 详细信息

恶性肿瘤一直是当今世界最难攻克的顽疾之一,肿瘤靶向治疗以其高效低毒等特点为病人带来了新的希望,目前的靶向药物主要是单克隆抗体和小分子酪氨酸激酶抑制剂。微小RNA（micro RNA,mi RNA）是一类小的、进化保守的非编码RNA,负性调节编码基因以及非编码转录因子的表达,是各种细胞主要调控者,在肿瘤的发生、进展以及转移中发挥了重要的作用。研究显示,多种肿瘤均存在大量发挥癌基因或抑癌基因作用的mi RNA的表达失调,而这些表达异常的mi RNA已成为人们研制肿瘤靶向治疗的又一新工具。因此本研究就近年来mi RNA在肿瘤靶向治疗中的相关研究做一简要综述,以期为肿瘤的靶向治疗提供新的视角。

关键词：微小RNA 肿瘤靶向治疗

酵母双杂交技术在病原生物蛋白质研究中的应用

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中国病原生物学杂志 2018年第2期13卷 206-209,212页

作者：刘绍伟王洋田喜凤华北理工大学基础医学院病原生物学学科河北唐山063000

酵母双杂交技术在蛋白质的研究中有着重要的、不可替代的位置。在基因组蛋白质连锁图的建立、药物及其作用位点、抗原抗体反应、细菌、病毒、寄生虫等领域的研究也有广泛的应用。随着科学技术的发展,酵母双杂交技术的不断改进和完善,其... 详细信息

酵母双杂交技术在蛋白质的研究中有着重要的、不可替代的位置。在基因组蛋白质连锁图的建立、药物及其作用位点、抗原抗体反应、细菌、病毒、寄生虫等领域的研究也有广泛的应用。随着科学技术的发展,酵母双杂交技术的不断改进和完善,其应用必将大有前景。

关键词：酵母双杂交技术病原生物蛋白质综述

miR-615-3p是胃癌诊断和预后的潜在标志物

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基因组学与应用生物学 2018年第7期37卷 3143-3148页

作者：赵洪焕韩素桂刘艳坤刘晓辉李芳孔艺璇李玉凤章广玲华北理工大学基础医学院病原生物学与免疫学教研室唐山063000 华北理工大学附属唐山市人民医院唐山063000 石家庄市第四医院石家庄050000 华北理工大学基础医学院、河北省慢性疾病重点实验室、唐山市慢性病临床基础研究重点实验室唐山063000

miR-615-3p是miRNA家族的一员。为了探讨miR-615-3p在胃癌诊断和预后中的作用,我们应用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测了35例胃癌组织（13例低分化,22例中高分化）及良性胃病组织,以及此35例患者的治疗前血清及35例健康体检者血清中m... 详细信息

miR-615-3p是miRNA家族的一员。为了探讨miR-615-3p在胃癌诊断和预后中的作用,我们应用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测了35例胃癌组织（13例低分化,22例中高分化）及良性胃病组织,以及此35例患者的治疗前血清及35例健康体检者血清中miR-615-3p的相对表达情况,分析了其和胃癌的临床病理因素之间的关系,计算其用于区分胃癌和健康人群的灵敏度、特异度。检测数据显示,低分化胃癌组中miR-615-3p的水平显著高于良性病变组及中高分化胃癌组（p〈0.01）,而在中高分化胃癌组的表达水平与良性病变组比较差异无统计学意义（p〉0.05）。低分化和中高分化胃癌患者血清中miR-615-3p的水平均显著高于健康组（p〈0.01）,低分化胃癌患者血清中miR-615-3p的水平显著高于中高分化胃癌血清组（p〈0.01）。miR-615-3p的表达水平与胃癌患者的性别、年龄无关（p〉0.05）,与病理类型、TNM分期相关（p〈0.05）。miR-615-3p受试者的工作特征曲线下面积为0.803（95%CI（0.707,0.906））,与A=0.5比较,差异有统计学意义。以上结论表明,miR-615-3p的表达水平与胃癌组织的分化和分期呈正相关,检测组织和血清中miR-615-3p的水平对胃癌有较高的诊断价值。miR-615-3p可作为胃癌诊断、预后的潜在标志物。

关键词：胃癌 miR-615-3p 诊断预后

丰富环境联合褪黑素对SAMP8小鼠学习记忆功能及DNA氧化损伤的影响

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中华行为医学与脑科学杂志 2023年第11期32卷 968-975页

作者：屈海峰杜鹃李建民王一超王继成罗光新田子玉刘俊杰华北理工大学临床医学院唐山063000 华北理工大学基础医学院唐山063000 华北理工大学附属医院唐山063000 华北理工大学公共卫生学院唐山063000

目的探究丰富环境联合褪黑素对快速老化(SAMP8)小鼠学习记忆功能及DNA氧化损伤的影响。方法 6月龄SPF级健康雄性SAMP8小鼠24只,采用随机数字表法分为模型组、丰富环境组、褪黑素组和丰富环境+褪黑素组,每组6只;6只同源同月龄SAMR1小鼠... 详细信息

目的探究丰富环境联合褪黑素对快速老化(SAMP8)小鼠学习记忆功能及DNA氧化损伤的影响。方法 6月龄SPF级健康雄性SAMP8小鼠24只,采用随机数字表法分为模型组、丰富环境组、褪黑素组和丰富环境+褪黑素组,每组6只;6只同源同月龄SAMR1小鼠为对照组。丰富环境组和丰富环境+褪黑素组小鼠饲养于丰富环境,同时褪黑素组、丰富环境+褪黑素组小鼠皮下注射褪黑素8 mg/(kg·d),模型组、对照组、丰富环境组小鼠皮下注射等体积0.9%氯化钠溶液,1次/d,共28 d。采用老化度评分评估小鼠老化情况;Morris水迷宫与Y迷宫实验评估小鼠学习记忆能力;苏木精-伊红染色法观察小鼠海马区细胞形态,免疫组织化学染色法检测小鼠海马区Aβ1-42蛋白水平;Western blot法、酶联免疫吸附法检测小鼠海马区DNA损伤标志蛋白磷酸化组蛋白H2A家庭成员X(γ-H2AX)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的水平。采用SPSS 25.0统计软件处理数据,多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果 (1)5组小鼠干预后老化度评分差异有统计学意义(F=126.4,P学意义(F=70.38,48.83,均P学意义(F=291.328,113.482,均P免疫组织化学染色结果显示,与模型组比较,丰富环境组、褪黑素组、丰富环境+褪黑素组小鼠海马区细胞结构、形态有明显改善,Aβ1-42表达明显下调(均P学意义(F=78.09,117.20,均P学习记忆功能,两者联合效果更为显著,其机制可能与减少海马区DNA氧化损伤有关。

关键词：褪黑素丰富环境 SAMP8小鼠 DNA氧化损伤学习记忆功能

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抗生物膜感染的群体效应抑制剂

上海交通大学学报（医学版） 2016年第3期36卷 442-446页

作者：冯梦蝶洪愉毛普加许泽仰曾韦锟昆明理工大学基础医学院病原生物学与免疫学教研室昆明650500 成都军区昆明总医院核医学科昆明650032 昆明学院医学院临床检验教研室昆明650214

生物膜是微生物群落附着在基质或表面并被自身合成的胞外基质包裹形成的复合物。细菌生物膜为细菌提供保护层,阻止抗生素进入,使细菌表现出抗抗生素能力。据临床统计表明,80%病原菌感染与其群体效应(QS)介导的生物膜相关,因此,要根治病... 详细信息

生物膜是微生物群落附着在基质或表面并被自身合成的胞外基质包裹形成的复合物。细菌生物膜为细菌提供保护层,阻止抗生素进入,使细菌表现出抗抗生素能力。据临床统计表明,80%病原菌感染与其群体效应(QS)介导的生物膜相关,因此,要根治病原菌的感染,抑制生物膜的形成至关重要。QS分子参与生物膜形成,而QS抑制剂(QSI)能抑制生物膜形成。该文就QSI在抗生物膜方面的进展进行综述。

关键词：生物膜群体效应群体效应抑制剂

白藜芦醇通过Zn^(2+)促进自噬发挥心肌细胞保护作用

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中国药理学通报 2023年第6期39卷 1048-1054页

作者：王培马虎杨颖刘天宇郭佳宝胡友成贺永贵习瑾昆华北理工大学公共卫生学院河北唐山063210 华北理工大学体育部河北唐山063210 华北理工大学基础医学院河北唐山063210 华北理工大学附属医院河北唐山063210

目的探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)是否通过锌离子(Zinc,Zn^(2+))促进自噬,抑制内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS),发挥心肌细胞保护作用及可能的信号机制。方法常规培养H9c2细胞,2-脱氧葡萄糖(2-deoxyglucose,2-DG)建立ERS模型。随机分为Control组、2-DG组、Res+2-DG组、锌离子螯合剂TPEN+Res+2-DG组、自噬抑制剂3-MA+Res+2-DG组。MTT和CCK-8法检测细胞活性;Western blot法检测ERS分子伴侣蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、葡萄糖调节蛋白94(GRP94)和自噬蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、p62、p-AMPK的表达水平;免疫荧光检测LC3蛋白的表达;激光扫描共聚焦显微镜检测线粒体通透性转换孔(mitochondrial permeability transition pore,mPTP)和细胞内Zn^(2+)水平。结果与Control组相比,2-DG使细胞活性降低,Res抑制2-DG引起的变化,此作用被TPEN所逆转;2-DG使GRP78、GRP94表达明显增多,Res抑制2-DG引起的变化,此作用被TPEN逆转;2-DG使LC3Ⅱ/Ⅰ、p-AMPK表达增多,p62表达减少,Res促进2-DG引起的变化,此作用被TPEN逆转;2-DG使LC3的荧光强度升高,Res增强2-DG的作用,此作用被TPEN和3-MA所逆转;2-DG使线粒体TMRE红色荧光及细胞内Zn^(2+)的绿色荧光强度明显降低,Res抑制2-DG引起的荧光强度变化,这些作用同样被TPEN和3-MA所逆转。以上结果差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论Res通过增加细胞内Zn^(2+)促进自噬,抑制ERS进而阻止mPTP的开放,发挥心肌细胞保护作用。

关键词：白藜芦醇 2-脱氧葡萄糖锌离子自噬内质网应激心肌保护