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一种用于研究骨骼肌缺血/再灌注损伤的细胞模型

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中国应用生理学杂志 2005年第3期21卷 356-358,i0005页

作者：李宏杰章广玲张连元董淑云门秀丽华北煤炭医学院基础部病理生理教研室河北唐山063000

目的:复制L-6TG大鼠肌母细胞缺血/再灌注损伤的细胞模型。方法:将培养的L-6TG大鼠肌母细胞随机分为2组:①正常对照组(C组),②缺血/再灌注组(I/R组),观测了培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)、细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、黄嘌呤氧化酶(XOD)、C... 详细信息

目的:复制L-6TG大鼠肌母细胞缺血/再灌注损伤的细胞模型。方法:将培养的L-6TG大鼠肌母细胞随机分为2组:①正常对照组(C组),②缺血/再灌注组(I/R组),观测了培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)、细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、黄嘌呤氧化酶(XOD)、Ca2+含量的变化;采用MTT法检测线粒体的功能;在光镜下观察细胞的形态学改变。结果:与对照组相比,L-6TG大鼠肌母细胞IR4h后培养上清中LDH、细胞内XOD、Ca2+含量明显增加,细胞内SOD及线粒体呼吸功能明显降低,细胞严重受损,明显圆缩,并有脱落现象。结论:应用模拟缺血液和再灌液可成功复制L-6TG大鼠肌母细胞缺血/再灌注损伤的细胞模型。

关键词：缺血/再灌注细胞培养

牛磺酸对肢体缺血/再灌注后肝损伤大鼠TNF-α、NF-κB表达的影响

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中国应用生理学杂志 2009年第1期25卷 18-21页

作者：张娜张连元王银环董淑云孔小燕赵利军华北煤炭医学院基础部病理生理教研室河北唐山063000

目的:探讨给予牛磺酸预处理对肢体缺血/再灌注(limb ischemia-reperfusion,LI/R)后大鼠肝脏损伤及TNFα、NF-κB表达的影响及意义。方法:采用Wistar大鼠建立LI/R损伤模型,随机分为4组(n=10):对照(C)组,缺血/再灌注(I/R)组,牛磺酸(T)组... 详细信息

目的:探讨给予牛磺酸预处理对肢体缺血/再灌注(limb ischemia-reperfusion,LI/R)后大鼠肝脏损伤及TNFα、NF-κB表达的影响及意义。方法:采用Wistar大鼠建立LI/R损伤模型,随机分为4组(n=10):对照(C)组,缺血/再灌注(I/R)组,牛磺酸(T)组和牛磺酸+缺血/再灌注(TR)组。比色法测定动物血浆ALT、AST、MDA,肝组织MDA、MPO、DNA裂解率和钙含量,放免法检测血浆及肝组织TNF-α水平;HE染色观察肝脏组织形态改变;免疫组化法观察NF-κB蛋白表达。结果:与C组比较,I/R和TR组各损伤性指标、TNF-α水平均升高,NF-κB蛋白表达增高(P<0.01);但TR组上述各项指标较I/R组显著降低。结论:牛磺酸预处理可减轻大鼠LI/R所致肝脏损伤,降低TNF-α、NF-κB表达。

关键词：牛磺酸再灌注损伤肝脏损伤肿瘤坏死因子-α(TNF-α) 核转录因子(NB-κB)

牛磺酸对大鼠肢体缺血/再灌注后肺组织损伤的保护作用

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中国应用生理学杂志 2004年第3期20卷 229-231页

作者：门秀丽张连元孙树勋董淑云张一兵华北煤炭医学院基础部病理生理教研室河北唐山063000

目的 :观察大鼠肢体缺血再灌注 (LIR)后肺组织形态学的变化及牛磺酸对其影响。方法 :Wistar大鼠随机分为 3组 ,对照组 (control)、缺血 /再灌注组 (LIR)、牛磺酸 +缺血 /再灌注组 (Tau +LIR) ,各组动物通过大体、光镜和透射电镜观察肺... 详细信息

目的 :观察大鼠肢体缺血再灌注 (LIR)后肺组织形态学的变化及牛磺酸对其影响。方法 :Wistar大鼠随机分为 3组 ,对照组 (control)、缺血 /再灌注组 (LIR)、牛磺酸 +缺血 /再灌注组 (Tau +LIR) ,各组动物通过大体、光镜和透射电镜观察肺组织形态学变化 ,并测定肺系数和肺通透指数及肺组织活性氧和MDA含量。结果 :大鼠LIR后肺组织出现以肺泡毛细血管膜通透性增加为特征的组织细胞损伤 ,光镜下显示毛细血管扩张充血、血管周围间隙增大、肺泡腔中有大量蛋白渗出物 ,电镜下可见肺泡上皮细胞之间、毛细血管内皮之间的紧密连接松解 ;肺系数和肺通透指数升高 ;肺组织活性氧及MDA含量增加。提前给予外源性牛磺酸可使肺组织损伤变化减轻。结论 :牛磺酸对大鼠LIR后肺损伤有保护作用 ,其保护机理之一与其抗氧化。

关键词：缺血/再灌注损伤肢体牛磺酸肺损伤

NO对大鼠肢体缺血/再灌注后肾脏P-选择素表达的影响及意义

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中国应用生理学杂志 2007年第4期23卷 456-461页

作者：段国贤赵利军张连元董淑云周洪霞张娜王银环门秀丽李宏杰华北煤炭医学院病理生理教研室河北唐山063000

目的:探讨一氧化氮(NO)对大鼠LI/R后肾脏P-选择素表达的影响及意义。方法:采用本室常规方法复制大鼠LI/R模型。将大鼠随机分为四组:对照组,LI/R组,L-Arg组和L-NAME组。观察肢体缺血4h再灌注4h后各组动物血浆NO及肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)... 详细信息

目的:探讨一氧化氮(NO)对大鼠LI/R后肾脏P-选择素表达的影响及意义。方法:采用本室常规方法复制大鼠LI/R模型。将大鼠随机分为四组:对照组,LI/R组,L-Arg组和L-NAME组。观察肢体缺血4h再灌注4h后各组动物血浆NO及肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)的变化;观察肾组织NO、髓过氧化物酶(MPO)、总一氧化氮合酶(tNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、结构型一氧化氮合酶(cNOS)的改变;测定尿蛋白含量、利用聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测尿蛋白性质;免疫组织化学方法检测肾组织P-选择素(P-selectin)的蛋白表达,结合自动图象分析系统对其结果进行定量分析;肾组织切片经六氨银染色在光镜下观察其形态学改变。结果:与control组比较,LI/R组大鼠血浆NO、BUN、Cr均明显升高;肾组织MPO、NO、tNOS、iNOS均明显增加,而cNOS明显下降;尿蛋白含量增多,电泳显示,有大分子量蛋白排出;光镜下可见肾小管上皮细胞水肿,有炎细胞浸润;免疫组化结果显示:P-selectin蛋白表达明显较control组增强。与LI/R组相比,L-Arg组各项损伤指标明显减轻;肾组织P-selectin蛋白表达明显减弱;L-NAME组血浆和肾组织各项损伤指标明显加重;肾组织P-selectin蛋白表达明显增加。结论:大鼠LI/R后急性肾损伤的发生可能与P-selectin的表达有关;NO可能通过减弱P-selectin的表达及中性粒细胞的浸润,减轻LI/R后肾脏组织形态学及肾功能的损伤性变化。

关键词：一氧化氮 L-精氨酸 P-选择素 N^ω-硝基-L-精氨酸甲酯缺血佴灌注损伤

一氧化氮在大鼠肢体缺血再灌注后肺损伤中的作用

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生理学报 2002年第3期54卷 234-238页

作者：杨秀红张连元孙树勋董淑云门秀丽景有伶张一兵华北煤炭医学院病理生理教研室唐山063000

在大鼠肢体缺血再灌注 (LIR)损伤模型上 ,观察应用一氧化氮合酶 (NOS)抑制剂氨基胍 (AG)及一氧化氮(NO)合成前体物质L 精氨酸 (L Arg)对大鼠骨骼肌和肺组织的NOS活性、NO含量、丙二醛 (MDA)、髓过氧化物酶(MPO)和湿 /干重 (W/D)值的影... 详细信息

在大鼠肢体缺血再灌注 (LIR)损伤模型上 ,观察应用一氧化氮合酶 (NOS)抑制剂氨基胍 (AG)及一氧化氮(NO)合成前体物质L 精氨酸 (L Arg)对大鼠骨骼肌和肺组织的NOS活性、NO含量、丙二醛 (MDA)、髓过氧化物酶(MPO)和湿 /干重 (W/D)值的影响以及肺磷脂酰胆碱 (PC)的改变 ,并观察了肺组织在光镜下形态学的变化。结果显示 ,与对照组比较 ,LIR组骨骼肌和肺组织NOS活性均增强 ,MDA值、MPO活性增加 ,W/D值增大 ,肺PC含量降低 ;光镜下 ,肺间质多形核粒细胞 (PMN)聚集和浸润 ,肺间隔面密度值增加。给予AG后 ,与LIR组相比NOS活性降低 ,NO产生下降 ,而MPO活性、W/D比值增加 ,肺PC含量进一步降低 ;镜下PMN聚集和浸润增加 ,肺间隔面密度值增大。而给予L Arg后能减轻LIR引起的上述变化。上述结果提示 ,LIR后 2h时 ,骨骼肌和肺组织NOS活性增加 ,NO产生增多 ;内源性NO可能在LIR所诱发的早期急性肺损伤中起保护作用。

关键词：一氧化氮肢体缺血再灌注成人呼吸窘迫综合症

一氧化氮、内皮素-1对大鼠肢体缺血/再灌注后脑损伤的影响

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中国应用生理学杂志 2005年第1期21卷 30-33页

作者：胡永奇张连元李宏杰彭军董淑云门秀丽杨全会周红霞华北煤炭医学院病理生理教研室河北唐山063000

目的 :研究一氧化氮 (NO)和内皮素 1(ET 1)在大鼠肢体缺血 /再灌注 (LI/R)后脑损伤中的作用 ,探讨NO/ET 1平衡关系的变化对脑损伤的影响。方法 :在大鼠LI/R损伤模型上 ,应用NO合成前体物质L 精氨酸 (L Arg)、一氧化氮合酶 (NOS)抑制剂... 详细信息

目的 :研究一氧化氮 (NO)和内皮素 1(ET 1)在大鼠肢体缺血 /再灌注 (LI/R)后脑损伤中的作用 ,探讨NO/ET 1平衡关系的变化对脑损伤的影响。方法 :在大鼠LI/R损伤模型上 ,应用NO合成前体物质L 精氨酸 (L Arg)、一氧化氮合酶 (NOS)抑制剂氨基胍 (AG)、ETA 受体阻断剂BQl2 3进行干预 ,观察血浆NO、ET 1、MDA、XOD、SOD、LDH及脑组织tNOS、iNOS、cNOS、NO、ET 1、MDA、XOD、MPO、SOD的变化。结果 :与对照组比较 ,I/R组血浆MDA、XOD、LDH及脑组织MDA、XOD、MPO升高 ,SOD活性降低 (P <0 .0 1) ,脑组织tNOS和iNOS明显升高 ,而cNOS明显降低 (P <0 .0 1) ,I/R组血浆及脑组织NO、ET 1增加 ,NO/ET 1比值降低 ,脑损伤加重。应用L Arg及BQ12 3后 ,血浆及脑组织NO/ET 1比值较I/R组升高 ,脑损伤减轻 ,应用AG后 ,NO/ET 1比值降低 ,脑损伤进一步加重。结论 :肢体缺血 /再灌注后 ,一氧化氮与内皮素 l的比值降低时脑损伤加重。

关键词：后肢再灌注损伤脑损伤一氧化氮内皮素-1

大鼠肢体缺血/再灌注后肺损伤及一氧化氮合酶的变化与意义

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中国应用生理学杂志 2006年第4期22卷 484-487页

作者：张一兵张连元门秀丽董淑云杨全会要瑞莉华北煤炭医学院病理生理教研室河北唐山063000

目的:研究大鼠肢体缺血/再灌注后急性肺损伤时,内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(i-NOS)的表达及其在急性肺损伤发生中的作用。方法:雄性Wistar大鼠于后肢根部阻断血流后松解(4h/4h),分别给予L-Arg和氨基胍(AG)预先干预,分... 详细信息

目的:研究大鼠肢体缺血/再灌注后急性肺损伤时,内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(i-NOS)的表达及其在急性肺损伤发生中的作用。方法:雄性Wistar大鼠于后肢根部阻断血流后松解(4h/4h),分别给予L-Arg和氨基胍(AG)预先干预,分为control、IR、L-Arg和AG组,免疫组织化学方法检测肺组织中iNOS和eNOS的表达,同时检测肺组织中MDA、MPO、W/D和NO2-/NO3-值,肺组织形态学观察以评价肺损伤的程度。结果:与control组比较,I/R组eNOS表达降低,iNOS表达增强,MDA、MPO、W/D和NO2-/NO3-值增加,肺组织充血、炎细胞浸润,肺泡腔渗液;与I/R组比较,L-Arg组eNOS、iNOS表达无明显变化,NO2-/NO3-增加,MDA、MPO、W/D降低,肺组织损伤有减轻趋势,AG组eNOS表达无明显变化,iNOS活性降低,NO2-/NO3-减少,MDA、MPO、W/D增加,肺组织损伤有加重趋势。结论:肢体缺血/再灌注急性肺损伤过程中,iNOS表达增加,NO生成增多,在肺损伤发生中有一定的保护作用。

关键词：一氧化氮一氧化氮合酶缺血/再灌注急性肺损伤

缺血预处理对肢体缺血/再灌注大鼠胃粘膜损伤的保护效应

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中国应用生理学杂志 2006年第1期22卷 22-24页

作者：要瑞莉张连元门秀丽董淑云杨全会华北煤炭医学院病理生理教研室河北唐山063000

目的:观察肢体缺血再灌注(LI/R)对胃粘膜的损伤作用及缺血预处理对其影响,探讨胃粘膜损伤的机制及缺血预处理(IPC)的作用机理。方法:观察并测定肢体缺血4h再灌注4h后以及应用肢体缺血预处理干预后各组胃粘膜损伤指数,胃结合粘液量;检测... 详细信息

目的:观察肢体缺血再灌注(LI/R)对胃粘膜的损伤作用及缺血预处理对其影响,探讨胃粘膜损伤的机制及缺血预处理(IPC)的作用机理。方法:观察并测定肢体缺血4h再灌注4h后以及应用肢体缺血预处理干预后各组胃粘膜损伤指数,胃结合粘液量;检测胃粘膜中髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、黄嘌呤氧化酶(XOD)含量的变化以及血浆中乳酸脱氢酶(LDH)的含量变化。结果:大鼠LI/R后胃粘膜损伤指数增加;胃结合粘液量较对照组显著下降;胃粘膜中MPO、MDA、XOD的值均较对照组增加,血浆中LDH的含量亦较对照组显著增加,胃粘膜组织中SOD的酶活力下降;IPC组与LIR组对比,胃结合粘液量较LIR组显著增加;胃粘膜损伤指数、胃粘膜中MPO的含量、以及胃粘膜中MDA、XOD、LDH均较LI/R组明显降低;胃粘膜中SOD酶活力增强。结论:LI/R作为应激原可引起胃粘膜损伤,导致应激性溃疡的发生;自由基在肢体缺血再/灌注后继发胃粘膜损伤过程中发挥作用。缺血预处理可减轻肢体缺血再灌注后的胃粘膜损伤,其作用机制可能是通过减少自由基的产生而发挥其保护作用。

关键词：缺血/再灌注损伤缺血预处理胃粘膜自由基肢体大鼠

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牛磺酸对Ⅱ型糖尿病大鼠血液流变学的影响

中国应用生理学杂志 2010年第4期26卷 474-476页

作者：张菲菲张艳敏门秀丽赵利军孔小燕董淑云华北煤炭医学院病理生理教研室华北煤炭医学院附属医院河北唐山063000

目的：探讨牛磺酸（taurine）对Ⅱ型糖尿病（diabetes mellitus,DM）大鼠血液流变学及氧化应激的影响。方法：将40只Wistar大鼠随机取10只为正常对照组（control组）、其余30只大鼠中取20只符合模型标准的大鼠随机分为糖尿病组（DM组）... 详细信息

目的：探讨牛磺酸（taurine）对Ⅱ型糖尿病（diabetes mellitus,DM）大鼠血液流变学及氧化应激的影响。方法：将40只Wistar大鼠随机取10只为正常对照组（control组）、其余30只大鼠中取20只符合模型标准的大鼠随机分为糖尿病组（DM组）和牛磺酸治疗组（Tau组,采用20g/L牛磺酸生理盐水溶液治疗,200mg/kgbw）,前两组注射等体积的生理盐水溶液。8周后,测3组大鼠血浆葡萄糖、糖化血红蛋白、超氧化物岐化酶（SOD）、丙二醛（MDA）及血液流变学指标。结果：与对照组相比,糖尿病大鼠血糖、MDA及糖化血红蛋白明显升高,SOD活性降低,全血粘度、红细胞聚集指数、红细胞压积明显增大,红细胞变形指数减小;牛磺酸能明显降低糖尿病大鼠的血糖、MDA和糖化血红蛋白（P〈0.05或P〈0.01）,显著升高造模大鼠SOD（P〈0.01）;并且明显降低大鼠全血黏度（P〈0.05）、降低红细胞聚集指数（P〈0.05）,提高红细胞变性指数（P〈0.05）。结论：牛磺酸改善糖尿病大鼠的血液流变性可能与其提高大鼠的抗氧化能力有关,对防治糖尿病血管并发症有较好作用。

关键词：牛磺酸大鼠糖尿病血液流变学